专利名称：含利培酮的缓释微球及其制备方法
技术领域：
本发明涉及抗精神病药物利培酮(risperidone)的緩释微球及 其制备方法。
背景技术：
利培酮是一种具有独特性质的选择性单胺拮抗剂，它与5-HT2(5 -羟色胺)受体和多巴胺D2受体有很高的亲和力。利培酮也能与otl -肾上腺素受体结合，并且以较低的亲和力与Hl-组胺受体和ot2-肾上腺素受体结合。利培酮不与胆碱能受体结合。利培酮是强有力的 D2拮抗剂，可以改善精神分裂症的阳性症状，但它引起的运动功能抑 制以及强直性昏厥都要比经典的抗精神病药少。对中枢系统的5-羟
色胺和多巴胺拮抗作用的平衡可以减少发生锥体外系副作用的可能， 并将其治疗作用扩展到精神分裂症的阴性症状和情感症状.
利培酮在体内部分代谢成9-羟基利培酮，后者与利培酮有相似 的药理作用。该药的消除半衰期为3小时左右，9-羟基利培酮的消除 半衰期为24小时。目前国内市场上的片剂、胶嚢均需一天服用两次， 不能解决精神病人需要长期服药而且依从性差的问题。因此，研究既 能长期緩释利培酮制剂具有重要意义。其中，微球作为一种制剂新技 术，具备了緩释或控释药物以及靶向给药等优点。制备微球所用的载 体材料可分为天然、半合成和合成的高分子材料。近年来，合成高分 子材料因其生物相容性良好，可生物降解吸收，在体内较稳定，降解 期可调控等优点而受到广泛重视，是一种理想的微球制备材料。其中， 可生物降解的合成高分子材料乳酸/羟基乙酸共聚物 (poly
lactic-co-glycolic acid， PLGA)受到普遍的重视并得到广泛的应 用。英国于2003年上市的利培酮长效注射液，采用LA/GA比例为"J5的PLGA，緩释2周，价格将近90英镑，比较昂贵。而且通过实 验发现，利培酮经"Co照射灭菌后容易变色，然而，微球制剂不耐高 温，目前的灭菌方法只有两种， 一种是全过程实行无菌操作，另一种 是，o照射。前者的成本很高，而且在国内尚很难实现。
所以本发明通过篩选了多种稳定剂，并篩选了 ，o照射的剂量， 即达到了微球的灭菌效果，而且成功地解决了单纯的利培酮的PLGA 微球经"Co照射后容易变色的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种以PLGA为基质材料，表面光滑圆整， 颗粒规则无粘连，微球的平均粒径在30,以下可控，载药量和包封 率高，緩释期在4周以上，且利培酮经"Co照射后稳定的利培酮緩释 微球及其制备方法。
本发明第一方面涉及一种緩释微球制剂，其包括利培酮，PLGA及 稳定剂和/或附加剂。
本发明另 一方面涉及制备緩释微球制剂的方法，它采用乳化-溶剂 挥发法制备的，其特征在于将活性药物利培酮和可生物降解的药用高 分子辅料以及附加剂溶于有机溶剂配制成有机相，所述有机溶剂选自 二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、曱醇、苯甲醇、丙酮或二者混合液；另 外配制连续水相，将非离子型乳化剂溶于水中，它们在水相中的重量 百分数为0.1-12%,所述非离子型乳化剂选自聚乙烯醇、聚乙烯吡咯 烷酮、羧曱基纤维素钠、聚丙烯酸钠或聚曱基丙烯酸钠、明胶、西黄 芪胶。单乳法制备微球的步骤是高分子辅料和/或其它附加剂等加入 到二氯甲烷或混合溶剂中，待完全溶解并匀化后加入到以每分钟 400-5000转(rpm)搅拌的适宜浓度的连续相溶液中，形成乳液后，适 当稀释连续相溶液，继续以较低的速度搅拌约4小时，挥发有机溶剂。 然后，以4000-15000rpm离心、洗涤收集微球，进行真空干燥或冷冻 干燥即得微球干粉。复乳法制备微球的步骤是将高分子辅料加入到 一种或一种以上的有机溶剂中，待完全溶解并匀化后作为油相，将药物溶解或混悬于水性溶液中作为内水相，将内水相加入到油相中后高
速搅拌形成初乳，然后加入到以每分钟400-5000转搅拌的适宜浓度的 连续相溶液(加盐)中，继续搅拌形成乳液后，将连续相溶液稀释至 一定倍数，以较低的速度搅拌约4小时，挥发有机溶剂。然后，离心、 洗涤收集微球，进行真空干燥或冷冻干燥即得微球干粉，经辐射灭菌。 本发明微球基质材料选用PLGA，其分子量为4. 0xl03-6 xio4， PLA: PGA质量百分比为10:90-90: 10,有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、 乙酸乙酯、乙醇、甲醇、苯曱醇或丙酮中的一种或者两者的混合后的 溶剂。
本发明采用普通电磁搅拌器或者机械搅拌，其搅拌速度为 400-5000rpm，外水相中无机盐的浓度可在0 - 10. 0g/100ml，也可适
当增加。
采用本发明方法所制各微球表面光滑圆整，颗粒规则无粘连(图 l，图2)，平均粒径在30nm以下可控(图3)，载药量和包封率高，緩释 期在4周以上，其体外释药曲线较为光滑平坦(图4)，
本发明所述的緩释微球制剂在生产时制备成注射用粉针剂，在使 用前由医护人员将其混悬于注射用溶媒中(通常为含0.2%-1%羧甲基 纤维素钠与0-0. 2V土温80的5%甘露醇溶液)后进行注射。
本发明的有益效果是本发明所涉及的微球制备方法筒便易行， 成本较低。所制备的微球的粒径小，减少了对体内组织的刺激。通过 选用适合的PLA:PGA质量百分比的PLGA为基质材料，提高了利培酮的 包封率，改善了此类微球的粒径分布，延长了微球在体外的释药时间； 通过加入稳定剂，即达到了微球的灭菌效果，而且成功地解决了单纯 的利培酮PLGA微球经6°Co照射后由白色变为黄色，而且药物降解的问 题(图5)。而且附加剂的加入改善了微球内部的拓朴导结构，优化 了药物从微球中的累积释放率，
本发明有别于国外利培酮长效注射液的地方是采用的包裹材料 PLGA中的单体比例不同；微球的成分由药物、PLGA和附加剂构成；所 制备的微球的粒径在平均粒径在30pm以下可控，径距分布较窄；包封率高，可达90%左右；具有优良的緩释性能，突释很小，緩释期在 4周以上。
图1利培酮-PLGA緩释微球冻干粉剂
图2利培酮-PLGA緩释微球显微镜图(200 x )
图3利培酮-PLGA緩释微球粒径分布图
图4三批利培酮-PLGA緩释微球体外释药曲线(实施例1的方法 制备)
图5经60Co照射后微球含量的HPLC图谦(不加入稳定剂) 图6经60Co照射后微球含量的HPLC图谱(加入稳定剂后) 图7实施例1的含18mg利培酮的100mg微球微球在家兔体内的血 药浓度曲线
图8含18mg利培酮的普通注射液在家兔体内的血药浓度曲线
具体实施例方式
实施例1緩释30天的利培酮微球的制备
取PLGA 1.8g (分子量为20000， LA/GA 60: 40)及叔丁基对羟基 茴香醚(BHA)溶于有机溶剂中制成油相。有机溶剂为二氯曱烷(DCM) 或二氯甲烷和曱醇的混合液。将500mg利培酮样品溶于上述油相中， 超声混合均匀。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50XM吏其充分溶解， 调节使其浓度为5%作为水相。在水相分散介质溶液中加入无机盐。将 上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的 浓度稀释为1. 5%,室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。 然后洗涤、离心、干燥。平均粒径10nm左右。
实施例2緩释45天的利培酮微球的制备
取PLGA 1. 8g (分子量为25000, LA/GA 90: 10 )及BHA溶于有机 溶剂中制成油相。有机溶剂为二氯曱烷(DCM)或二氯甲烷和曱醇的混合液。将500mg利培酮样品溶于上述油相中，超声混合均匀。称取适量 PVA于双蒸水中，水浴50t:使其充分溶解，调节使其浓度为5%作为水 相并在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述油相注入150ml PVA 溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释为1.5%，室温下 磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。 平均粒径15jim左右。
实施例3 单乳法制备利培酮微球
取PLGA 1.8g (分子量为20000， LA/GA 60:40 )溶于有机溶剂中 制成油相。有机溶剂为乙酸乙酯(DCM)或乙酸乙酯和甲醇的混合液。将 500mg利培酮样品溶于上述油相中，超声混合均匀。称取适量PVA于 双蒸水中，水浴501C使其充分溶解，调节使其浓度为5%作为水相，并 在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述油相注入150ml PVA溶液， 1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释为1.5%，室温下磁力搅 拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥后加入 少量的甲硫氨酸溶液，冻干。
实施例4 未加附加剂的微球的制备
取PLGA (LA/GA 50: 50 )溶于有机溶剂中制成油相。有机溶剂为 乙酸乙酯(DCM)或乙酸乙酯和甲醇的混合液。将利培酮样品溶于上述油 相中，超声混合均匀。称取适量PVA于双蒸水中，水浴S01C使其充分 溶解，调节使其浓度为5%作为水相，并在水相分散介质溶液中加入无 机盐。将上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水 相PU的浓度稀释为1. 5%，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微 球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。
实施例5 复乳法制备利培酮微球(水/油/水)
取PLGA1.8g溶于有机溶剂中制成油相。将利培酮溶于0. 1N的盐 酸溶液中作为内水相，将此溶液加入油相中，高速勻浆搅拌后作为初乳。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50'C使其充分溶解，调节使其浓 度为5%作为水相，并在水相分散介质溶液中加入无机盐。将上述初乳 注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将水相PVA的浓度稀释 为1.5%,室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮微球混悬液。然后洗 涤、离心、干燥。
实施例6复乳法制备利培酮微球(固/油/水)
取PLGA1.8g溶于有机溶剂中制成油相。将利培酮500mg混悬于 2ml明胶溶液中，高速搅拌后作为内水相，将此溶液加入油相中，高 速匀浆搅拌后作为初乳。称取适量PVA于双蒸水中，水浴50TC使其充 分溶解，调节使其浓度为5%作为水相，并在水相分散介质溶液中加入 无机盐。将上述初乳注入150ml PVA溶液，1500rpm搅拌，5min后将 水相PVA的浓度稀释为1. 5%，室温下磁力搅拌3-5小时，即得利培酮 微球混悬液。然后洗涤、离心、干燥。
实施例7 实施例1的微球及普通含利培酮注射液在家兔体内的血药 浓度比较
取6只重量在2. Okg~ 3. 5kg的新西兰大耳白兔，其中3只经肌肉 注射含18mg利培酮注射液1.2mL，分别于lh， 1. 5h， 2h, 3h， 5h， 6h， 8h， 9h， 10h， 12h， 16h， 24h耳缘静脉取血样1. 5mL;另3只新西兰 大耳白兔同样肌肉注射含18mg的100mg微球(该微球可按实施例1 方法制备)的1. 2ml含0. 5%CMC水溶液的混悬液，分别于第4h， 10h， ld， 2d， 3d, 5d， 7d， 14d， 21d， 28d， 35d及40d耳缘静脉取血样 1.5mL。所有采集的血样均于8， 000rpm离心10min后取上清液-"70t;冻 存，然后采用本领域已知方法测上述所有血样中利培酮的血药浓度， 结果见图7和图8。由图7和图8可看到，本发明的微球显示出良好
的緩释作用。
权利要求
1.一种缓释微球制剂，其包括利培酮，PLGA及稳定剂。
2. 权利要求l的緩释制剂，其中利培酮为利培酮，羟基利培酮或 它们的药用酸或盐的形式，PLGA分子量为4. 0xl03-6xl()4道尔顿，LA:GA 的质量百分比为10: 90-90: 10。
3. 权利要求1或2的緩释制剂，其中PLGA分子量为20000道尔 顿，LA/GA为60: 40,
4. 权利要求1或2的緩释制剂，其中PLGA分子量为25000道尔 顿，LA/GA为90: 10。
5. 緩释微球的制备方法，其包括将药物利培酮、PLGA和/或其 它附加剂等加入到 一种或 一种以上的有机溶剂中，待完全溶解并匀化 后加入到以每分钟400-5000转搅拌的适宜浓度的连续相溶液(加盐) 中，继续搅拌形成乳液后，将连续相溶液稀释至一定倍数，以较低的 速度搅拌约4小时，挥发有机溶剂；然后，以4000-15000rpm离心、 洗涤收集微球，进行真空干燥或冷冻干燥即得微球干粉，经辐射灭菌； 或将高分子辅料PLGA加入到一种或一种以上的有机溶剂中，待完全 溶解并匀化后作为油相，将药物利培酮溶解或混悬于水性溶液中作为 内水相，将内水相加入到油相中后高速搅拌形成初乳，加入到以每分 钟400-5000转搅拌的适宜浓度的连续相溶液(加盐)中，继续搅拌形 成乳液后，将连续相溶液稀释至一定倍数，以较低的速度搅拌约4小 时，挥发有机溶剂；然后，离心、洗涤收集微球，进行真空干燥或冷 冻干燥即得微球干粉，经辐射灭菌。
6. 根据权利要求5的方法，其中所述的活性药物利培酮包括利培 酮、羟基-利培酮、或其药用的酸和盐的形式。
7. 根据权利要求6的方法，其特征为微球基质成分中PLA:PGA 质量百分比为10: 90-90: 10，并且其分子量为4. 0 xi03-6xl04。
8. 根据权利要求6的方法，所加的附加剂包括助溶剂、稳定剂、防腐剂，包括叔丁基对羟基茴香醚(BHA) ， 二丁曱苯酚(BHT)， 培酸丙酯(PG),生育酚，肉豆蔻酸异丙酯，亚硫酸钠，亚硫酸氩钠， 焦亚硫酸钠，硫代硫酸钠，硫脲，半膀氨酸，蛋氨酸，硫代乙酸，硫 代甘油，所述有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、苯 曱醇、丙酮；或者是二者的混合液，水相分散介质是将非离子型乳化 剂溶于水中，它们在水相中的重量百分数为0.1-12%,所述的非离子 型乳化剂选自聚乙晞醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、聚丙烯
9. 根据权利要求5的方法，其特征为匀化方式包括涡旋混合、超 声和高速匀浆、每次匀化时间为5s-3min，搅拌方式包括机械搅拌和 磁力搅拌，每次搅拌混合时间30s-8min左右。
10. 根据权利要求5的方法，连续相中的无机盐选自无水碳酸钠、 氯化钠、糖类，水相中无机盐的浓度可在0- 10. Og/1 OOml，也可适 当增加。
11. 根据权利要求5的方法，辐射灭菌的方式包括6°Co照射或137Cs 照射，灭菌剂量为25xlQ4-250 xl(r拉德。
全文摘要
本发明涉及抗精神病药物利培酮(risperidone)的缓释微球及其制备方法。
文档编号A61K47/34GK101292960SQ20071010231
公开日2008年10月29日 申请日期2007年4月27日 优先权日2006年4月29日
发明者梅兴国, 王襄平 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所