作为抗糖尿病剂的噻二唑衍生物的制作方法

专利名称：作为抗糖尿病剂的噻二唑衍生物的制作方法
作为抗糖尿病剂的噻二唑衍生物
本发明涉及遙二唑烷酮衍生物、含有该化合物的药物组合物、制备该 化合物的方法和通过使用该化合物来治疗蛋白酪氨酸磷酸酶介导的病症的 方法。
因此，本发明提供了下列化合物或其可药用盐
本发明的化合物为蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP酶)的抑制剂；具体而言， 本发明的化合物抑制PTP酶-lB (PTP-1B)和T-细胞PTP酶(TC PTP)，由 此可用于治疗受PTP酶活性介导的病症。因此，本发明的化合物可用于治 疗抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、肥胖、糖尿病、高血压以及大血管和小 血管的缺血性疾病、伴随2型糖尿病的病症、包括血脂异常如高脂血和高 甘油三酯血、动脉粥样硬化、血管再狭窄、肠易激惹综合征、胰腺炎、脂 肪细胞肿瘤和癌如脂肉瘤、血脂异常和其它涉及抗胰岛素性的紊乱。此外， 本发明的化合物可用于治疗癌症、骨质疏松症、神经变性疾病和感染性疾 病以及涉及炎症和免疫系统的疾病。本发明还涉及本发明化合物的用途，可用于治疗抗胰岛素性、葡萄糖
耐受不良、2型糖尿病、肾功能不全(糖尿病性和非糖尿病性)、糖尿病性肾 病、肾小球肾炎、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、糖尿病性视网膜病、 肥胖、所有类型的心力衰竭、包括急性和慢性充血性心力衰竭、左心室功 能障碍和肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上性和室性心律失常、心房 纤维性颤动和心房朴动、高血压、原发性和继发性肺动脉高压、肾血管高 压、血脂异常、动脉粥样硬化、大血管和小血管缺血性疾病、心绞痛(不稳 定型或稳定型)、心肌梗塞及其后遗症、缺血/再灌注损伤、有害的血管重 塑、包括血管再狭窄，其它血管疾病的管理，包括偏头痛、外周血管疾病 和雷诺病、肠易激惹综合征、胰腺炎、癌症、骨质疏松症、多发性硬化、 中风、脊髓损伤、神经变性疾病如阿尔茨海默病、帕金森病和聚谷氨酰胺 紊乱(polyglutamine disorders)如亨廷顿病和脊髓小脑性共济失调、感染性 疾病以及涉及炎症和免疫系统的疾病和涉及肌肉变性的疾病。
下文列出的是用于描述本发明化合物的各个术语的定义。这些定义如 同它们在说明书通篇中4吏用的那样应用于各术语，除非它们在具体实例中 单独地或作为较大基团一部分被限定。通常，无论何时烷基作为结构的一 部分提到，也意欲表示任选被取代的烷基。
任意的本发明化合物的可药用盐指与碱形成的盐，即阳离子盐，例如 碱金属和碱土金属盐，如钠、锂、钟、钙、镁和铵盐如铵、三甲铵、二乙 基铵和三(羟基甲基)-甲基铵盐，以及与氨基酸形成的盐。
如上文所述，本发明提供了 1，1-二氧代-1，2，5-參二唑烷-3-酮衍生物、 舍有它们的药物组合物、制备该化合物的方法以及通过施用治疗有效量的 本发明化合物或其药物组合物来治疗和/或预防与PTP酶活性、特别是 PTP-1B和TC PTP活性相关的病症的方法。
本发明的具体实施方案为 5-(3-羟基-7-甲氧基秦2-基)-l，l-二氧代-[l，2，51噻二唑烷-3-酮； 5-(3-羟基-7-甲氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5噻二唑烷-3-酮钾盐； 5-(3-羟基-7-丙氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5噻二唑烷-3-酮； 5-(3-羟基-7-丙氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5嚷二唑烷-3-酮钾盐；5-(3-羟基萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5噻二唑烷-3-酮； 5-(3-羟基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5]瘗二唑烷-3-酮钾盐； 5-(3-羟基-7-甲基-萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5-噻二唑烷-3-酮；和 5-(3-羟基-7-甲基-萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5-噻二唑烷-3-酮钾盐。
可以通过采用流程l中的下述通用操作制备本发明的化合物。
流程1
8
其中R为氢、Cw烷基或d-4烷氧基。
d-4烷基定义为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基
或叔丁基。C,4烷氧基定义为CH30-、 CH3CH20-、 CH3CH2CH20-、 (CH3)2CHO-、 CH3CH2CH2CH20-、 (CH3)2CH2CH20-、 CH3CH2CH(CH3)0-或(CH3)3CO-。
将化合物l由羧酸转化为被保护的胺化合物2。使用三氟乙酸(TFA) 除去氨基保护基。化合物3的^J^被适当的a-溴酯烷基化。通过使异氰酸 氯磺酰酯与适当的醇在有机溶剂如MeCN、 DCM或THF中反应将化合物 4转化为化合物5。
使用TFA从化合物5上除去氨基保护基。在碱存在下使化合物6环化 成化合物7。通过氢化除去羟基保护基而得到化合物8。
Cf ,N」
、
6在分别有或无稀释剂、优选例如对试剂而言惰性并且是其溶剂的那些、 催化剂、缩合剂或所述其它试剂和/或惰性气体的存在下，在低温、室温或 升高温度(优选所用溶剂沸点或与之接近)下和在大气压或超大气压下，按 照标准方法进行上述反应。优选的溶剂、催化剂和反应条件在所附的解释 性实施例中给出。
本发明还包括本发明方法的任意变化形式，其中将在其任意阶段上可 获得的中间体产物用作原料物质并进行剩余的步骤，或者其中在反应条件.
下原位形成原料物质。
本发明的化合物和中间体还可以按照通常本身已知的方法相互转化。 本发明还涉及任意的新原料物质、中间体及其制备方法。 最后，本发明的化合物以游离形式或作为其前药衍生物获得。
特别地，可以使用可药用碱将1，1-二氧代-1，2，5-瘗二唑烷-3-酮部分的 NH-基团转化为盐。可以使用常规方法、有利地在醚或醇溶剂如低级链烷 醇的存在下形成盐。可以使用醚如乙醚从其溶液中沉淀出盐。可以通过用 酸处理将所得盐转化为游离化合物。这些或其它盐还可以用于纯化获得的 化合物。
本发明的任意化合物的前药衍生物是所述化合物的衍生物，其在施用 后经由某种化学或生理过程在体内释放出母体化合物，例如前药当接触到 胜利pH或经由酶作用被转化为母体化合物。示例性的前药衍生物是苯酚 的O-酰基衍生物，其中酰基具有如本文定义的含义。优选可通过在生理条 件下水解转化为母体苯酚的可药用酯衍生物。
由于化合物、前药衍生物以及其盐形式的化合物之间的密切关系，无 论何时在本文中提到化合物时，也意欲包括前药衍生物和相应的盐，前提 是这在情况中是可能的和适当的。
包括其盐在内的化合物还可以以其水合物的形式而得到，或者包括用 于其结晶的其它溶剂。
如上文所述，本发明的化合物为PTP酶的抑制剂，由此可用于治疗 PTP酶介导的病症。因此，本发明的化合物可用于治疗抗胰岛素性、葡萄 糖耐受不良、肥胖、糖尿病、高血压以及大血管和小血管的缺血性疾病、伴随2型糖尿病的病症、包括血脂异常如高脂血和高甘油三酯血、动脉粥 样硬化、血管再狭窄、肠易激惹综合征、胰腺炎、脂肪细胞肿瘤和癌如脂 肉瘤、血脂异常和其它涉及抗胰島素性的紊乱。此外、本发明的化合物可 用于治疗癌症、骨质疏+〉症、神经变性疾病和感染性疾病以及涉及炎症和 免疫系统的疾病。
因此、本发明的化合物可用于治疗抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、2 型糖尿病、肾功能不全(糖尿病性和非糖尿病性)、糖尿病性肾病、肾小球 肾炎、肾小^U更化、原发性肾病的蛋白尿、糖尿病性视网膜病、肥胖、所 有类型的心力衰竭、包括急性和慢性充血性心力衰竭、左心室功能障碍和 肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上性和室性心律失常、心房纤维性颤 动和心房朴动、高血压、原发性和继发性肺动脉高压、肾血管高压、血脂 异常、动脉粥样硬化、大血管和小血管缺血性疾病、心绞痛(不稳定型或稳 定型)、心肌梗塞及其后遗症、缺血/再灌注损伤、有害的血管重塑、包括 血管再狭窄，其它血管疾病的管理，包括偏头痛、外周血管疾病和雷诺病、 肠易激惹综合征、胰腺炎、癌症、骨质疏松症、多发性硬化、中风、脊髓 损伤、神经变性疾病如阿尔茨海默病、帕金森病和聚谷氨酰胺紊乱如亨廷 顿病和脊髓小脑性共济失调、感染性疾病以及涉及炎症和免疫系统的疾病 和涉及肌肉变性的疾病。
本发明还提供了药物组合物，其包含单独的或与一种或多种可药用栽 体组合的治疗有效量的本发明的药理活性化合物。
本发明的药物组合物是适于对哺乳动物、包括人经肠如口服或直肠、. 透皮和胃肠道外施用的那些，用于治疗PTP酶活性、特别是PTP-1B和 TC PTP活性介导的病症。这类病症包括例如抗胰岛素性、葡萄糖耐受不 良、肥胖、糖尿病、高血压以及大血管和小血管的缺血性疾病、伴随2型 糖尿病的病症、包括血脂异常如高脂血和高甘油三酯血、动脉粥样硬化、
血管再狭窄、肠易激惹综合征、胰腺炎、脂肪细胞肿瘤和癌如脂肉瘤、血 脂异常和其它涉及抗胰岛素性的紊乱。此外、本发明的化合物可用于治疗
癌症、骨质疏松症、神经变性疾病和感染性疾病以及涉及炎症和免疫系统 的疾病。
8因此、本发明的药理活性化合物可以用于制备药物組合物，其包含有 效量的、与适于经肠或胃肠道外应用的赋形剂或载体联合或混合的所述化
合物。优选包含活性成分以及如下成分的片剂和胶嚢
a) 稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或 甘氨酸；
b) 润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二
醇；对于片剂还有
c) 粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、西黄蓍胶、曱基纤维素、
羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要的话，还有
d) 崩解剂，例如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐或者泡腾合剂；和/或
e) 吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。可注射组合物优选为等张水溶 液或混悬液，栓剂有利地由脂肪乳剂或混悬剂制备。
所述组合物可以是无菌的和/或含有佐剂，例如防腐剂、稳定剂、润湿 或乳化剂、溶解促进剂、调节渗透压的盐和/或緩冲剂。此外，它们还可以 含有其它有治疗价值的物质。分别按照常规的混合、制粒或包衣方法制备 所述的组合物，它们含有约0,1-75%、优选约1-50%的活性成分。
适于透皮应用的制剂包括治疗有效量的本发明的化合物和载体。有利 的栽体包括可吸收的药理学上可接受的溶剂以帮助穿过宿主的皮肤。例如， 透皮装置是包含背衬膜、储库和确保装置在皮肤上的手段的绷带剂形式， 所述的储库含有化合物、任选含有载体、任选有控速屏障以历经长时间向 宿主的皮肤以控制和预定的速率传递化合物。
因此，本发明提供了如上所述的药物组合物，其用于治疗PTP酶介导 的病症，优选抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、肥胖、糖尿病、高血压以及 大血管和小血管的缺血性疾病、伴随2型糖尿病的病症、包括血脂异常i口 高脂血和高甘油三酯血、动脉粥样硬化、血管再狭窄、肠易激惹综合征、,. 胰腺炎、脂肪细胞肿瘤和癌如脂肉瘤、血脂异常和其它涉及抗胰岛素性的 紊乱。此外、本发明的化合物可用于治疗癌症、骨质疏木》症、神经变性疾 病和感染性疾病以及涉及炎症和免疫系统的疾病。
因此、本发明提供了如上所述的药物组合物、其用于治疗PTP酶介导的病症，优选抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、2型糖尿病、肾功能不全(糖 尿病性和非糖尿病性)、糖尿病性肾病、肾小球肾炎、肾小球硬化、原发性
肾病的蛋白尿、糖尿病性视网膜病、肥胖、所有类型的心力衰竭、包括急 性和慢性充血性心力衰竭、左心室功能障碍和肥厚型心肌病、糖尿病性心 肌病、室上性和室性心律失常、心房纤维性颤动和心房朴动、高血压、原; 发性和继发性肺动脉高压、肾血管高压、血脂异常、动脉粥样硬化、大血 管和小血管缺血性疾病、心绞痛(不稳定型或稳定型)、心肌梗塞及其后遗 症、缺血/再灌注损伤、有害的血管重塑、包括血管再狭窄，其它血管疾病 的管理，包括偏头痛、外周血管疾病和雷诺病、肠易激惹综合征、胰腺炎、 癌症、骨质疏;^症、多发性硬化、中风、脊髓损伤、神经变性疾病如阿尔 茨海默病、帕金森病和聚谷氨酰胺紊乱如亨廷顿病和脊髓小脑性共济失调、 感染性疾病以及涉及炎症和免疫系统的疾病和涉及肌肉变性的疾病。
药物组合物可以含有单独的或者与其它治疗剂组合的治疗有效量的如 上所述的本发明化合物，例如各自是如本领域所报道的有效治疗剂量。这 类治疗剂包括
a)抗糖尿病剂，例如胰岛素、胰岛素衍生物和4莫拟物；胰岛素促分泌 剂，例如磺脲类，例如格列吡嗪、格列本脲和亚莫利阿玛尔；促胰岛素磺 酰脲受体配体，例如氯茴苯酸类，例如那格列奈和瑞格列奈；噻喳烷酮衍 生物，例如格列酮类，例如吡格列酮和罗格列酮；葡糖激酶激活剂；GSK3 (糖原合酶激酶-3)抑制剂，例如SB-517955、 SB-4195052、 SB-216763、 NN-57-05441和NN-57-05445; RXR配体，例如GW-0791和AGN-194204; 钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白抑制剂，例如T-1095;糖原磷酸化酶A抑制 剂，例如BAYR3401;双胍类，例如甲福明；ot-糖普酶抑制剂，例如阿卡 波糖；GLP-1 (胰高血糖素样肽-l)、 GUM类似物如Exendin-4(艾塞那肽 -4)和GLP-1模拟物；PPAR(过氧化物酶体增生物激活受体)调节剂，例如 非-格列酮类PPARy激动剂，例如N-(2-苯曱酰基苯基)-L-酪氨酸类似物， 例如GI-262570和JTT501; DPPIV (二肽基肽酶IV)抑制剂，例如LAF237、 MK-0431、沙格列汀和GSK23A; SCD-l(硬脂酰-CoA去饱和酶-l)抑制剂； DGAT1和DGAT2(二酰基甘油酰基转移酶1和2)抑制剂；ACC2(乙酰CoA羧化酶2)抑制剂；和AGE断裂剂(breaker)(高级糖化终产物)；
b) 抗血脂异常剂，例如3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A (HMG-CoA)还原 酶抑制剂，例如洛伐他汀、匹伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、西立伐他汀、 美伐他汀、维洛他汀(velostatin)、氟伐他汀、达伐他汀、阿托伐他汀、罗 苏伐他汀和rivastatin (雷司他汀)；HDL增加化合物，例如胆固醇酯转移 蛋白(CETP)抑制剂，例如JTT705; Apo-Al类似物和模拟物；角鲨烯合酶 抑制剂；FXR (法呢醇X受体(farnesoid X receptor))和LXR (肝X受体)配 体；考来烯胺；贝特类(fibrates);烟酸和阿司匹林；
c) 抗肥胖剂，例如芬特明、来普汀(leptin)、溴隐亭、右旋苯丙胺、苯 丙胺、氟苯丙胺、右旋氟苯丙胺、西布曲明、奥利司他、右旋氟苯丙胺、 吗吲味、芬特明、苯甲曲秦、安非拉酮、氟西汀、安非他酮、托吡酯、安 非拉酮、节非他明、苯丙醇胺、依考匹泮、麻黄碱和伪麻黄碱；胆固醇吸 收调节剂，例如ZETIA⑧和KT6-971;和大麻素受体拮抗剂，例如利莫那 班；和
d) 抗高血压剂，例如髓袢利尿剂，例如依他尼酸、呋塞米和托塞米； 血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂，例如贝那普利、卡托普利、依那普利、 福辛普利、赖诺普利、莫昔普利、培咮普利、喹那普利、雷米普利和群多 普利；Na-K-ATP酶膜泵抑制剂，例如地高辛；中性内肽酶(NEP)抑制剂； ACE/NEP抑制剂，例如奥马曲拉、山帕曲拉和法西多曲；血管紧张素II 拮抗剂，例如坎地沙坦、依普罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、替米沙坦和缬 沙坦，特别是缬沙坦；肾素抑制剂，例如地替吉仑、占吉仑、特拉吉仑、 阿利吉仑、RO 66-1132和RO-66-1168; P-肾上腺素能受体阻滞剂，例如 醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、比索洛尔、美托洛尔、纳多洛尔、普萘 洛尔、索他洛尔和噢吗洛尔；影响收缩力的物质，例如地高辛、多巴酚丁 胺和米力农；钓通道阻滞剂，例如氨氯地平、爷普地尔、地尔硫箪、非洛 地平、尼卡地平、尼莫地平、硝苯地平、尼索地平和维拉帕米；醛甾酮受 体拮抗剂，例如依普利酮；和醛甾酮合酶抑制剂，例如anastrazole (阿那 却哇)和fadrazole (法却哇)。
其它具体的抗糖尿病化合物由Patel Mona在Ea:/^W《 /;/" /"ve^/gDf"^y， 2003， 12(4)， 623-633，

图1-7中有描述，其引入本文作为参考。本发 明的化合物可以与其它活性成分同时、在其之前或之后分别地通过相同或 不同施用途径或者在同 一药物制剂中 一起施用。
通过编号、通用名或商品名而i^识别的治疗剂的结构可以从标准目录
"默克索引"的现行版本或从数据库、例如国际专利(尸《^"&^1^/71"//0朋/)
(例如IMS世界出版物)中获得。其相应的内容引入本文作为参考。
因此、本发明提供了药物组合物，其包含治疗有效量的本发明化合物 以及治疗有效量的其它治疗剂，所述其它治疗剂优选选自抗糖尿病剂、降 血脂剂、抗肥胖剂或抗高血压剂，最优选选自如上所述的抗糖尿病剂或抗 肥胖剂。
本发明还涉及用作药物的如上所述的药物组合物。
本发明还涉及如上所述的药物组合物或联合产品在制备用于治疗PTP 酶活性、特别是PTP-1B和TC PTP活性介导的病症的药物中的用途。这 类病症包括抗胰鸟素性、葡萄糖耐受不良、肥胖、糖尿病、高血压以及大 血管和小血管的缺血性疾病、伴随2型糖尿病的病症、包括血脂异常如高 脂血和高甘油三酯血、动脉粥样硬化、血管再狭窄、肠易激惹综合征、胰 腺炎、脂肪细胞肿瘤和癌如脂肉瘤、血脂异常和其它涉及抗胰岛素性的紊 乱。此外、本发明的化合物可用于治疗癌症、骨质疏松症、神经变性疾病 和感染性疾病以及涉及炎症和免疫系统的疾病。这类病症还包括抗胰岛素 性、葡萄糖耐受不良、2型糖尿病、肾功能不全(糖尿病性和非糖尿病性)、 糖尿病性肾病、肾小球肾炎、肾小球石更化、原发性肾病的蛋白尿、糖尿病 性视网膜病、肥胖、所有类型的心力衰竭、包括急性和慢性充血性心力衰 竭、左心室功能障碍和肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上性和室性心 律失常、心房纤维性颤动和心房朴动、高血压、原发性和继发性肺动脉高 压、肾血管高压、血脂异常、动脉粥样硬化、大血管和小血管缺血性疾病、 心绞痛(不稳定型或稳定型)、心J^塞及其后遗症、缺血/再灌注损伤、有 害的血管重塑、包括血管再狭窄，其它血管疾病的管理，包括偏头痛、外 周血管疾病和雷诺病、肠易激惹综合征、胰腺炎、癌症、骨质疏松症、多 发性硬化、中风、脊髓损伤、神经变性疾病如阿尔茨海默病、帕金森病和聚谷氨酰胺紊乱如亨廷顿病和脊髓小脑性共济失调、感染性疾病以及涉及 炎症和免疫系统的疾病和涉及肌肉变性的疾病。
因此，本发明还涉及用作药物的本发明化合物、本发明化合物在制务
用于治疗PTP酶活性、特别是PTP-1B和TCPTP活性介导的病症的药物 组合物中的用途以及涉及用于PTP酶活性、特别是PTP-1B和TC PTP活 性介导的病症的药物组合物，所述组合物包含本发明的化合物或其可药用 盐以及用于此的可药用稀释剂或载体。
本发明还提供了治疗PTP酶活性、特别是PTP-1B和TC PTP活性介 导的病症的方法，该方法包括施用治疗有效量的本发明化合物。
对约50-70 kg的哺乳动物而言，单位剂量可以含有约lmg-1000mg、 有利地约5mg-500mg活性成分。式I化合物的治疗有效剂量取决于温血动 物(哺乳动物)的种属、体重、年龄和个体情况、施用形式和涉及的化合物。
根据前述，本发明还提供了治疗联合产品，例如药盒、成套药盒，例 如用于如本文定义的任意方法，其包含本发明的化合物或其可药用盐，意 欲与至少一种药物組合物并4亍地或依次地4吏用，所述药物组合物包含至少 一种其它治疗剂，所述治疗剂优选选自抗糖尿病剂、降血脂剂、抗肥胖剂 或抗高血压剂。药盒可以包含施用说明书。
类似地，本发明提供了成套药盒，其包含(i)本发明的药物组合物； 和(ii)包含选自抗糖尿病剂、降血脂剂、抗肥胖剂或抗高血压剂的化合物或 其可药用盐的药物组合物，为组分(i)至(ii)的两个单独单位的形式。
同样，本发明提供了如上定义的方法，该方法包括共同施用、例如并 行地或依次地施用治疗有效量的本发明化合物或其可药用盐和第二种药物 物质，所述的第二种药物物质抗糖尿病剂、降血脂剂、抗肥胖剂或抗高血 压剂，例如如上文所示的那些。
优选本发明的化合物被施用于有需要的哺乳动物。
优选本发明的化合物用于治疗对调节PTP酶活性、特别是PTP-1B和 TC PTP活性有响应的疾病。
与PTP酶活性、特别是PTP-1B和TC PTP活性相关的病症优选选自 抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、2型糖尿病、肾功能不全(糖尿病性和非糖
13尿病性)、糖尿病性肾病、肾小球肾炎、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、 糖尿病性视网膜病、肥胖、所有类型的心力衰竭、包括急性和慢性充血性 心力衰竭、左心室功能障碍和肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上性和 室性心律失常、心房纤维性颤动和心房朴动、高血压、原发性和继发性肺 动脉高压、肾血管高压、血脂异常、动脉粥样硬化、大血管和小血管缺血 性疾病、心绞痛(不稳定型或稳定型)、心肌梗塞及其后遗症、缺血/再灌注 损伤、有害的血管重塑、包括血管再狭窄，其它血管疾病的管理，包括偏 头痛、外周血管疾病和雷诺病、肠易激惹综合征、胰腺炎、癌症、骨质疏 松症、多发性硬化、中风、脊髓损伤、神经变性疾病如阿尔茨海默病、帕 金森病和聚谷氨酰胺紊乱如亨廷顿病和脊髓小脑性共济失调、感染性疾病 以及涉及炎症和免疫系统的疾病和涉及肌肉变性的疾病。
与PTP酶活性、特别是PTP-1B和TC PTP活性相关的病症优选选自 抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、肥胖、糖尿病、高血压以及大血管和小血 管的缺血性疾病、伴随2型糖尿病的病症、包括血脂异常如高脂血和高甘 油三酯血、动脉粥样硬化、血管再狹窄、肠易激惹综合征、胰腺炎、脂肪 细胞肿瘤和癌如脂肉瘤、血脂异常和其它涉及抗胰岛素性的紊乱。此外、 本发明的化合物可用于治疗癌症、骨质疏术》症、神经变性疾病和感染性疾 病以及涉及炎症和免疫系统的疾病。
最后，本发明提供了如下的方法或用途，其包括施用本发明的化合物 以及治疗有效量的抗糖尿病剂、降血脂剂、抗肥胖剂或抗高血压剂。
最终，本发明提供了如下的方法或用途，其包括施用如本文所述的药 物组合物形式的本发明化合物。
如说明书通篇和权利要求书中所用的术语"治疗"嚢括相关领域的技 术人员已知的所有不同的治疗形式或模式，特别包^防、治愈、延^J^ 展和姑息治疗。
上述性质可以有利地使用哺乳动物如小鼠、大鼠、狗、猴子或离体器 官、组织及其制备物在体外和体内试验中得以证实。所述化合物可以以溶 液、例如优选水溶液在体外应用以及经肠、胃肠道外、有利地经静脉内例 如作为混悬液或水溶液在体内应用。体外剂量可以在约ljiM-lnM浓度、优选10nM-200nM的范围。体内的治疗有效量根据施用途径可以在约 l-500mg/kg、优选约l-100mg/kg的范围。
方法来评价(例如Peters G.等人，J. Biol. Chem， 2000， 275， 18201-09)。 例如，可以如下测定体外PTP-1B抑制活性
通过采用96-孔微量滴定板格测定从磷酸肽底物中释放的无机磷酸盐 的量，从而确定在不同活性剂存在下人PTP-lB(hPTP-lB)活性的评价。该; 测定(100pL)在由50mMTRIS(pH7.5)、 50mMNaCl、 3mM DTT组成的 测定緩冲液中于环境温度进行。该测定通常在0,4。/。二甲亚砜(DMSO)的存 在下进行。然而，对某些难溶性化合物而言，使用高至10%的浓度。通过 向含有测定緩冲液、3nmoles合成磚酸肽底物(GNGDpYMPMSPKS)和测 试化合物的孔中加入0.4pmoleshPTP-lB(氨基酸l-411)引发典型反应。10 分钟后，加入180nL孔雀绿试剂(0.88mM孔雀绿、8.2mM钼酸铵、IN HC1 水溶液和0.01% Triton X-100)以终止反应。15分钟后通过因与孔雀绿试剂 复合而产生的绿色对无机磷酸盐(酶反应的产物)进行定量，采用Molecular Devices (Sunnyvale, CA) SpectraMAX Plus分光光度计测定为A62o。将测 试化合物溶于100% DMSO (Sigma， D-8779)中，用DMSO稀释。活性定 义为由于未被抑制的hPTP-lB^4w的活性减去具有酸活化的hPTP-lBn_411| 的试管的活性所产生的吸光度的净变化。
通过PCR从人海马cDNA文库(Clonetech)中克隆hPTP-lBfl-4111，插 入到Ncol限制位点上的pET 19-b载体(Novagen)中。使用该克隆转化大肠 杆菌(E. coli)菌抹BL21 (DE"，作为在20%甘油中的储备培养物于_80*€储 存。对于酶生产，将储备培养物接种入Lb/Amp中，于37'C生长。在培养 物达到OD咖=0.6后，通过用lmM IPTG诱导来开始PTP-1B的表达。4 小时后，通过离心收集细菌沉淀。将细胞重新混悬于70mL裂解緩冲液 (50mMTris、 lOOmM NaCl、 5mMDTT、 0.1% Triton X-100， pH7.6)中， 在冰上孵育30分钟，然后超声处理(在全功率下4 x 10秒阵发)。以100,000 xg将裂解物离心60分钟，将上清液进行緩冲液交换，用阳离子交换POROS 20SP柱、随后用阴离子交换Source 30Q (Pharmacia)柱使用线性 NaCl梯度洗脱进行纯化。收集酶，调整至lmg/mL于-80t:冷冻干燥。
或者，可以通过测定已知竟争性底物的水解产物确定在不同活性剂存 在下的人PTP-1B活性的评价。例如，底物对硝基苯基磷酸盐(pNPP)的裂 解导致释放出可以用分光光度计实时监测的黄色对硝基苯酚(pNP)。同样， 荧光底物6，8-二氟-4-甲基伞形基(umbelliferyl)磷酸铵盐(DiFMUP)的水解 导致释;^文出可以容易地用荧光读出器以连续模式追踪的荧光DiFMU (Anal. Biochem. 273, 41， 1999; Anal. Biochem. 338， 32， 2005):
pNPP测定
将化合物与lnM重组人PTP-lBu-2^或PTP-lBu-32^—起在緩冲液 (50mM Hepes, pH 7.0， 50mM KC1， lmM EDTA， 3mM DTT， 0.05% NP-40 中于室温赙育5分钟。通过添加pNPP (2mM终浓度)引发反应并在室温下 进行120分钟。用5N NaOH终止反应。采用任意的标准384孔板读出器 测定405nm处的吸收度。
DiFMUP测定
将化合物与lnM重组人PTP-lBn.298,或PTP-lBn.322!—起在緩冲液 (50mM Hepes, pH 7.0， 50mM KC1， lmM EDTA， 3mM DTT， 0.05% NP-40 (或0.001% BSA)中于室温孵育5分钟。通过添加DiFMUP (6pM终浓度) 引发反应，在荧光平板读出器上于355rnn ^和460nm发射波长处动态 进行。使用历经15分钟的反应速率来计算抑制。
在含有用pET19b载体(Novagen)构建的质粒的大肠杆菌BL21 (DE3) 中表达PTP-lBn-298卜采用"请求式，，补料分批策略使细菌在^出培养基 中生长。通常，以补料分批模式启动5.5升发酵，于37匸自动生长过夜。 光密度在20-24 OD6oo之间改变，培养物于30X:与IPTG —起孵育至终浓 度为0.5mM。 8小时后收集细菌细胞，产生200-350gm(湿重)。将细胞冷 冻为小片，于-80'C贮存备用。所有步骤在4'C下进行，另有说明除外。使 细胞( 15g)在37"C下短暂融化，重新混悬于50mL裂解緩沖液中，所述緩冲液含有50mM Tris画HCl、 150mM NaCl、 5mM DTT、含有1片完全(不 含EDTA)蛋白酶混合物(宝灵曼公司(Boehringer Mannheim))、 lOOpM PMSF和100|ng/mL DNase I。通过采用Virsonic 60 (Virtus)进行超声处理 (4 x 10秒阵发，全功率)使细胞裂解。以35，000xg收集沉淀，采用Polytron 重新混悬于25mL裂解緩冲液中，如上所述进行收集。合并两份上清液， 以100,000xg离心30分钟。在该阶段将可溶性裂解物于-80。C贮存或者用 于进一步纯化。将应用10kD MWCO膜的透析过滤用于对蛋白质进行緩冲 液更换和降低NaCl浓度，然后进行阳离子交换色语法。透析过滤緩沖液 含有50mMMES、 75mMNaCl、 5mMDTT， pH6.5。然后将可溶性上清 液装载到以20mL/min的速率用阳离子交换緩冲液(50mM MES和75mM NaCl， pH 6.5)平衡的POROS 20 SP (lxl0cm)柱上。分析柱(4.6x 100mm) 以类似方式运行，但流速降至10mL/min。采用线性盐梯度(75-500mM NaCl，在25 CV中)从柱子上洗脱出蛋白质。按照SDS-PAGE分析鉴定出 和汇集含有PTP-lBn—2981的级分。采用Sephacryl S-100 HR (Pharmacia)进 行最终的纯化。将柱子(2.6x35 cm)用50mMHEPES、 lOOmM NaCl、 3mM DTT(pH7.5)平衡并以2mL/min的流速运行。汇集最终的蛋白质，使用具 有MWCO 10,000的Ultrafree-15浓缩器(Millipore)浓缩至 5mg/mL。将浓 缩的蛋白质于-8(TC贮存备用。
可以如下测定与酶的活性位点的竟争性结合 在有和无添加化合物(l-2mM)的存在下通过在250nL 0.15mM PTP-1B^2^上获取iH-"N HSQC光傳检测配体结合。通过将化合物添加 到15]\-标记的蛋白质中观察二维HSQC光谱中的151\-或'H-酰胺化学位移 改变来测定结合。由于"N光镨编辑，所以未观察到来自配体的信号，而 仅观察到蛋白质信号。因此，可以在高化合物浓度下检测结合。将引起与 用已知活性位点结合剂所看到的化学位移变化类似的化学位移变化模式的 化合物看做是阳性的。
在含有用pET19b栽体(Novagen)构建的质粒的大肠杆菌BL21 (DE3) 中表达所有蛋白质。通过使细菌在含有"N-标记的氯化铵的基础培养基上 生长而均匀地产生"N-标记的PTP-1B^98。所有纯化步骤在4'C下进行。
17使细胞( 15g)在37'C下短暂融化，重新混悬于50mL裂解緩沖液中，所述 緩冲液含有50mM Tris-HCl、 150mM NaCl、 5mM DTT (pH8.0)、含有1 片完全(不含EDTA)蛋白酶混合物(宝灵曼^^司(Boehringer Mannheim))、 100nM PMSF和100照/mL DNase I。通过超声处理裂解细胞。以35，000xg 收集沉淀，采用Polytron重新混悬于25mL裂解緩冲液中，如上所述进行 收集。合并两份上清液，以100，000xg离心30分钟。将应用10kDMWCO 膜的透析过滤用于对蛋白质进行緩冲液更换和降低NaCl浓度，然后进行 阳离子交换色谱法。透析过滤緩沖液含有50mM MES、 75mM NaCl、 5mM DTT, pH 6.5。然后将可溶性上清液装载到以20mL/min的速率用阳离子 交换緩沖液(50mM MES和75mM NaCl, pH 6.5)平衡的POROS 20 SP (lxl0cm)柱上。采用线性盐梯度(75-500mMNaCl，在25CV中)从柱子上 洗脱出蛋白质。按照SDS-PAGE分析鉴定出和汇集含有PTP-lB，s的级分。 通过采用POROS 20 HQ柱(lxl0cm)的阴离子交换色语法进一步纯化 PTP-lB,-29s。将来自阳离子交换色谱法的汇集物浓缩并在含有75mM NaCl 和5mM DTT的50mM Tris-HCl， pH 7.5中进行緩冲液更换。将蛋白质装 栽到20mL/min的珠子上，用线性NaCl梯度(75-500mM，在25CV中)洗 脱。采用SephacrylS-100HR (Pharmacia) (50mMHEPES， 100mMNaCl， 3mM DTT， pH 7.5)进行最终的纯化。NMR样品由均匀"N-标记的 PTP-lBu98 (0.15mM)和抑制剂(l-2mM)在含有NaCl (50mM)、 DL-1,4画二 硫苏糖醇-dn)(5mM)和叠氮化钠(0.02。/。)的10%D2O / 90%H2O Bis-Tris-d19 緩沖溶液(50mM， pH-6.5)溶液中组成。
于20。C在Bruker DRX500或DMX600 NMR光i普仪上+己录iH-"N HSQCNMR光i普。在所有NMR实验中，应用脉冲场梯度以提供溶剂信 号抑制。通过使用States-TPPI方法进行间接检测方向上的正交检测。采 用Bruker软件加工数据，并釆用NMRCompass软件(MSI)在Silicon Graphics计算机上进行分析。
可以如下评价体内降葡萄糖和胰岛素活性
将11周龄的成年雄性C57BL ob/ob小鼠(Jackson Lab， Bar Harbor, ME)以6只/笼圏养在逆向光循环室内(从6:00 p.m.到6:00 a.m.光照)，随意食用Purina啮齿动物食料和饮水。在第1天，在8:00 am取尾血样品，测定血浆葡萄糖水平。将动物随机分入对照组和化合物组。将各组的血浆葡萄糖水平的平均值进行匹配。然后给动物口服施用溶媒(具有0.2%吐温-80的0.5%羧甲基纤维素)或在溶媒中的化合物(30mg/kg)。每日对小鼠给药，总计3天。在第4天，取JJf出血样。采用YSI2700双通道生化分析仪(YellowSprings Instrument Co., Yellow Springs, OH)分析血浆样品的葡萄糖浓度，采用ELISA测定法测定胰岛素浓度。
本发明包括所有可药用的同位素标记的式(I)化合物，其中 一个或多个原子被具有相同原子数、但^jf、子质量或质量数与自然界中通常存在的院子质量或质量数不同的原子所替代。
适于包含在本发明化合物中的同位素的实例包括如下元素的同位素氢，例如2]3和3玩碳，例如"C、 "C和"C;氯，例如36(:1;氟，例如18F;碘，例如1231和1251;氮，例如"N和"N;氧，例如150、 170和180;磷，例如"P;和^L，例如"S。
用较重的同位素如氘、即2H替代可以由于更大的代谢稳定性、例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求而获得治疗益处，因此在一些情况中可以是廿C选的。
同位素标记的式(I)化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或者通过与所附实施例和制备例部分中描述的方法类似的方法、采用适当的同位素标记的试剂代替以前所采用的未标记试剂来制备。
下述实施例用以解斧说明本发明，但不应解释为对本发明的限制。温度以摄氏度(。C)给出。如果没有另外提及，那么所有蒸发均在减压下进行,优选在约15-100mmHg (= 2(M33mbar)下进行。通过标准分析方法、例如微量分析法、熔点(mp)和光谱特征(例如MS、 IR、 NMR)证实终产物、中间体和起始物质的结构。通常，所用缩写为本领域中常规的那些。
19实施例1
5-(3-幾基-7-甲氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5噻二唑烷-3-酮钾盐<formula>formula see original document page 20</formula>步骤l
3-苄氧基-7-甲氧基萘-2-曱酸苄酯
将5,0g (21,7mmo1) 3-羟基-7-曱氧基萘画2-甲酸、9.29g (54.3mmol)节基 溴和9.01g (65.2mmol)碳酸钾在25mL DMF中的混合物于60匸搅拌24小 时。冷却至室温后，将混合物倾入水中，萃取入EtOAc中。用3x水和l x饱和NaCl洗涤有才M目。用硫酸钠千燥有才M目，在减压下除去溶剂。使 残余固体从二氯甲烷/乙醇中结晶，得到标题化合物，为黄褐色固体，mp 96-98。。
1H-NMR(CDCI3):S 8.25 (s,1 H)'7.61 (d, J = 8.83 Hz,1 H)， 7.49 (d， J = 7.35 Hz, 2H)， 7.46 - 7.30 (m， 7H), 7.24 (d， J = 5.88 Hz, 2H)， 7.18 (dd, J = 9.20和2.58 Hz' 1H)， 7.12 (m, 1H), 5.40 (s， 2H), 5.23 (s, 2H)， 3.89 (s, 3H).分析C26H2204:计算值C, 78.38; H, 5.57.实测值C, 78.28; H， 5.56.
步骤2
3-节氧基-7-甲氧基萘-2-甲酸
向6.(T7g (加mmo1) 3-千氧基-7-甲氧基萘-2-甲酸爷酯在100mL乙醇中
的混悬液中加入24mL 1.0N NaOH(1.2当量)，将混合物于60C搅拌4小时，
于室温搅拌16小时。在减压下除去溶剂，将残余固体溶于50mL水中。用
乙醚洗涤溶液，用2N HCl酸化7jC相。过滤所得沉淀，用水洗涤，干燥，
得到标题化合物，为淡黄色固体，
mp 177- 1790. 1H-NMR(CDCI3):S 11.01 (s,宽，1H>, 8.70 (s, 1H)， 7.67 (d, J =8.82 Hz' 1H), 7.53 - 7.41 (m， 5H)， 7.37 (s， 1H)， 7.27 (dd， J = 8.83和2.57 Hz, 1H), 7.20 (m， 1H)， 5.36 (s， 2H)， 3.92 (s， 3H).分析C19H1604:计算值C， 74.01; H， 5.23.实测值C， 73,71; H， 5.46.步骤3
(3-爷氧基-7-甲氧基萘-2-基)-氨基甲酸叔丁酯
向4.6g (14.9mmo1) 3-千氧基-7-曱氧基萘-2-甲酸在40mL无水t-BuOH + 40mL无水甲苯的混悬液中加入2.38 (22mmol)三乙胺。向所得溶液中加 入5.34g (19.4mmo1) DPPA，将混合物于室温搅拌5分钟，然后于100。C搅 拌18小时。将混合物冷却至室温，然后倾入水中。将混合物萃取入EtOAc 中，用饱和NaCl洗涤有树目。在减压下除去溶剂，残余物通过快速色镨 法使用己烷/乙酸乙酯(85:15)进行纯化，洗脱出标题化合物，为油状物，緩 慢变成蜡状固体。
1H-NMR (CDCI3):S 8.48 (s， 1H), 7,50 (d， J = 8.82 Hz， 1H)， 7.48 — 7.31 (m, 7H), 7.10 (s, 1H), 6.99 (dd, J = 8.82 and 2.57 Hz， 1H)' 5.17 (s， 2H)' 3.84 (s， 3H)' 1.54 (s, 9H).
步骤4
3-苄氧基-7-甲氧基萘-2-基胺
将4."g (lllmmol) (3_爷氧基-7-甲氧基萘-2-基)-氨基甲酸叔丁酯在 50mL TFA/二氯甲烷(1:1)中的溶液于室温搅拌30分钟。在减压下除去溶 剂，将10%碳酸氢钠水溶液加入到残余物中。将混合物萃取入EtOAc中，. 用硫酸钠干燥有才M目。在减压下除去溶剂，残余物通过快速色谱法使用二
氯甲烷进行纯化，洗脱出标题化合物，使其从乙醇中结晶，得到白色固体，
mp 149—151。. 1H-NMR (CDCI3):5 7.54 — 7.32 (m， 6H)， 7.09 (s, 1H), 6.92 (d' J = 9.20 Hz, 2H), 6.89 (dd， J = 8.82和 2.57Hz,1H), 5.18 (s'2H)'4.11 (s'宽，2H)， 3,87 (s， 3H).
步骤5
(3-苄氧基-7-甲氧基萘-2-基氨基)-乙酸甲酯
向2.76g (9.88mmo1) 3-节氧基-7画甲氧基萘-2-基胺和2.73g (19.8mmo1) 碳酸钾在20mLDMF中的混合物中加入2,26g (14.8mmol)溴乙酸曱酯。将 混合物于60。C搅拌2小时，然后于室温搅拌16小时。将混合物倾入水中， 萃取入EtOAc中。用水(3 x )、饱和NaCl(l x )洗涤有树目，用疏酸钠干燥。 在减压下除去溶剂，使残余物从乙醇中结晶，得到标题化合物，为灰白色 固体，mp 129 - 1310.; NMR (CDCI3):S 7.50 (s, 宽，2H)， 7.49 (d, J = 8.46 Hz， 1H), 7.45 — 7.33 (m， 3H)， 7.07 (s， 1H)' 6.97 (d, J = 2.20 Hz， 1H), 6.89 (dd, J = 8.82和2.57 Hz, 1H)， 6.62 (s， 1H)， 5.20 (s， 3H), 4.05 (s， 2H)， 3.88 (s， 3H), 3.80 (S, 3H). MS (M+1): 352.分析C21H21N04:计算值C, 71.78; H' 6.02; N， 3.99. 实测值C, 71.61; H， 5.86; N， 3.91.
步骤6
N-(叔丁氧羰基氨磺酰基)-N-(3-千氧基-7-甲氧基萘基)甘氨酸甲酯 向1.24g (8.77mmol)异氰酸氯磺酰酯在25mL 二氯甲烷中的溶液中滴 加649mg (8.76mmol)叔丁醇在3mL二氯甲烷中的溶液。将溶液于室温搅 拌30分钟，然后滴加2.2g (6.26mmo1) (3-千氧基-7-甲氧基萘-2-基氨基)-乙 酸甲酯和1.27g (12.6mmol)三乙胺在25mL 二氯曱烷中的溶液。将混合物 于室温搅拌90分钟，然后用水洗涤。用硫酸钠干燥有树目，在减压下除去 溶剂。残余油状物通过快速色谱法使用己烷/乙酸乙酯(70:30)进行纯化，洗
脱出标题化合物，为油状物。
1H-NMR (CDCI3):5 8.10 (s, 1H), 7.68 (S，宽，1H)， 7.54 (d， J = 9.80 Hz, 1H), 7.49 — 7.29 (m, 5H), 7.17 (s, 1H)， 7.14 — 7.08 (m， 2H), 5.23 (s, 2H), 4.63 (S, 2H), 3.86 (s, 3H)， 3.68 (s， 3H)' 1.41 (s， 9H). MS (M-1): 529. 步骤7
N-氨磺酰基-N-(3-爷氧基-7-甲氧基萘基)甘氨酸甲酯 将3.1g (5.85mmo1) N画(叔丁氧絲氨磺酰基)-N-(3-千氧基-7-甲氧基萘 基)甘氨酸甲酯在40mL三氟乙l二氯甲烷(l: 1)中的溶液于室温搅拌30分 钟。在减压下除去溶剂。将二氯甲烷加入到残余物中，然后在减压下(4x) 除去，得到油状固体，将其与乙醚一起研磨(16小时)，得到标题化合物， 为固体，
mp 137 - 1390; ，H-NMR (CDCI3):S 8.01 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.83 Hz， 1H), 7.51 - 7.32 (m 5H)， 7.23 — 7,05 (m' 3H), 5.17 (s,宽,2H)， 5.15 (s, 2H), 4.39 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.67 (s， 3H). MS (M+1): 431.分析C21H22N206S:计算值C， 58.59; H， 5.15; N， 6.51.实测值C， 58.53; H， 5.05; N, 6.62. 步骤8
5-(3-千氧基-7-甲氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5噻二唑烷-3-酮钾盐 向1.89g (4.39mmo1) N-氨磺酰基-N-(3-千氧基-7-甲氧基萘基)甘氨酸甲酯在5mL THF中的溶液中滴加4.4mL l.OM叔丁醇郜在THF中的溶液。 将混合物于室温搅拌18小时。过滤所得浓稠沉淀，用小体积的THF洗涤。 在减压下干燥固体，得到标题化合物，mp 182-198°。 步骤9
5-(3-羟基-7-甲氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2,51噻二唑烷-3-酮钾盐
将1.75g (4.01mmo1) 5-(3-千氧基-7-甲氧基萘画2-基)-1，1-二氧代画[1，2，5
瘗二唑烷-3-酮钾盐在150mL水中的溶液在500mg 10% Pd / C上于50psi
氢化24小时。滤出催化剂，用乙酸乙酯洗涂含水滤液。将水相冷冻干燥，
得到标题化合物，为浅褐色非晶形固体
mp 260 - 265"° 1H-NMR (DMSO-de: .37.90 (s, 1H), 7.54 (d, J = 9.04
Hz, 1H), 7.14 (s' 1H》，7.12 (d， J = 2.64 Hz, 1H), 6.98 (dd， J = 9.04和2.64 Hz, 1H)， 4.20 (s，
2H)， 3.81 (s， 3H). MS (M-1): 307.
实施例2
5-(3-羟基-7-丙氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5j噻二唑烷-3-酮钾盐
步骤l
3-羟基-7-丙氧基萘-2-甲酸丙酯
向1.6g (29.6mmol)甲醇钠在DMA(30mL)中的混悬液中加入3.0g (14.7mmo1) 3，7-二羟基萘-2-甲酸。将混合物于室温搅拌1小时，然后加入 5.05g (29.7mmol)丙基哄，继续搅拌48小时。将混合物倾入水中，用2N HC1 酸化。用乙酸乙酯萃取混合物，用(3x)水和盐水(1 x)洗涂有才;i4目。用硫酸 钠干燥溶液，在减压下除去溶剂。残余油状物通过快速色谱法用二氯甲烷 进行纯化，洗脱出标题化合物，作为黄色油状物分离出。MS(M-1):287。
步骤2
3-苄氧基-7-丙氧基萘-2-甲酸丙酯
23向1.5g (5.21mmol) 3-羟基-7-丙氧基萘-2-甲酸丙酯和1.08g (7.81mmol), 碳酸钾在DMF(15mL)中的混合物中加入0,98g (5.73mmol)千基溴。将混合 物于室温搅拌48小时，然后倾入水中。用乙酸乙酯萃取混合物，用水(3x) 和盐水(lx)洗涤有机相。用硫酸钠干燥溶液，在减压下除去溶剂。残余油 状物通过快速色语法使用二氯曱烷进行纯化，洗脱出标题化合物，将其分 离为黄色油状物。
步骤3
3-千氧基-7-丙氧基萘-2-曱酸
向680mg (1.8mmo1) 3-千氧基-7-丙氧基萘-2-曱酸丙酯在EtOH(15mL) 中的溶液中加入2.0mL 1.0N NaOH，然后将混合物于60'C搅拌3小时。在 减压下除去溶剂，将残余固体溶于水中。用MTBE洗涤溶液，用1NHCI 酸化7JC相。过滤所得沉淀，用水洗涤，在减压下干燥，得到标题化合物，. 为白色固体，mp 125-128°. MS(M-1): 335。
5-(3-羟基-7-丙氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5噻二唑烷-3-酮钾盐 类似于实施例LBR509 (步骤3-9)由3-千氧基-7-丙氧基萘-2-甲酸制得 标题化合物，mp 250-255°。
1H-NMR (DMSO-d3: 57.88 (s， 1H)， 7.54 (d, J = 9.04 Hz, 1H)， 7.13 (s， 1H)， 7.12 (d， J = 2.64 Hz' 1H), 6.98 (dd, J = 9.04和2.64 Hz, 1H), 4.19 (s， 2H)， 3.98 (t, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.00 (t' 3H). MS (M-1): 335.
实施例3
5-(3-羟基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5]噻二唑烷-3-酮钾盐
<formula>formula see original document page 24</formula>
步骤l
N-(3-羟基萘-2-基)- 乙酰胺
向在0-5。C的快速搅拌的13.8g (86.8mmo1) 3-氨基萘-2-酚、饱和碳酸氢 钠(150mL)和乙醚(150mL)的混合物中滴加乙酰氯(15.8mL),将混合物于室温搅拌3小时。过滤出任何不溶性物质，酸化水相。用EtOAc萃取混合物， 用硫酸镁干燥有机相。在减压下除去溶剂，得到标题化合物。 步骤2
^(3-节氧基萘-2-基)-乙酰胺
向8.8g (43.8mmo1) !\-(3-羟基萘國2-基)-乙酰胺和9.5g (68.7mmol)碳酸 钾在丙酮(150mL)中的混合物中加入11.5g (67.3mmol)节基溴，将混合物回 流4小时。在减压下除去溶剂，将水加入到残余物中。用EtOAc萃取混合 物，用盐水洗涤有机相，然后用硫酸镁干燥。在减压下除去溶剂，将残余 的固体与乙醚/己烷(l:2)—起研磨，得到标题化合物。
步骤3
3-苄氧基萘-2-基胺
向在EtOH(75mL)中的7.1g (24.4mmo1) N-(3-爷氧基l2-基)-乙酰胺 中加入KOH在水中的溶液(10mL)，将混合物回流18小时。在冷却时，形 成黄褐色沉淀。过滤出固体，用EtOH洗涤，得到标题化合物。 5-(3-羟基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l,2，5噻二唑烷-3-酮钾盐 类似于实施例LBR509(步骤5-9)，使用溴乙酸乙酯代替溴乙酸甲酯由 3-苄氧基萘-2-基胺制得标题化合物。
1H-NMR (DMSO-d6): .57.73 (s, 1H〉， 7.43 (d， J = 8.08 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.08 Hz, 1H), 7.06 (t' J = 7.33 Hz， 1 H)， 6.96 (t， J = 7.20 Hz, 1 H)， 6.89 (s，宽 ，1 H), 4.06 (s, 2H). MS (M-1): 277..
1. (3-苄氧基-7-溴萘-2-基)-氨基甲酸叔丁酯
类似于实施例1步骤l-3制得(3-节氧基-7-溴萘-2-基)-tJ^甲酸叔丁酉旨。
2. [(3-千氧基-7-溴萘-2-基)-叔丁氧羰基-氨基1-乙酸甲酯
实施例4向0'C的(3-节氧基-溴萘-2-基)-氨基甲酸叔丁酯(38.65g，卯.2mmol)在 DMF(300mL)中的溶液中加入NaH(3.79g， 99.3mmo1)。向溶液中加入溴乙 酸曱酯(10.3mL， 108.2mmo1)。将混合物搅拌10分钟，然后用IN HC1淬灭。 用EtOAc萃取溶液，用1N HCl(3x)和饱和NaCl洗涤。用Na2S04干燥有 机层，过滤，浓缩。使残余物从EtOAc中重结晶，得到[(3-节氧基-7-溴萘 -2-基)-叔丁氧羰基-氨基]-乙酸甲酯。
3. (3-苄氧基-7-溴萘-2-基氨基)-乙酸甲酯
类似于实施例1步骤2-5制得(3-千氧基-7-溴萘-2-基M)-乙酸甲酯。
4. 5-(3-千氧基-7-溴萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5-噻二唑烷-3-酮 类似于实施例1步骤6-8制得5-(3-爷氧基-7-溴萘-2-基)-l,l-二氧代
-1，2，5-瘗二唑烷-3-酮。
5. 5-(3-卡氧基-7-甲基-萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5-噻二唑烷-3-酮
将5-(3-千氧基-7-溴萘-2-基)-l,l-二氧代-l，2，5-噻二唑烷-3-酮(4.47g， lOmmol)、甲基硼酸(1.19g， 20mmo1)、乙酸4巴(78mg， 0.347mmo1)、 2誦二环 己基膦基-2，，6，-二曱氧基联苯、碳酸钠(30mL 2N， 60mmo1)、四氢呋喃 (100mL)和二甲氧基乙烷(100mL)于80。C加热3天。浓缩混合物，在水与乙 醚之间萃取。用1:1水:饱和碳酸氢钠洗涤有机层。酸化合并的水层，用乙 酸乙酯萃取两次。用硫酸钠干燥有机层，过滤，直接用于下一步。
6. 5-(3-羟基-7-曱基-萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5-噻二唑烷-3-酮钾盐 将来自上述反应的5-(3-千氧基-7-甲基-萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5-噻二
唑烷-3-酮在300mL乙酸乙酯中的溶液加入到Pd(OH)2/C(0.7g)在50mL EtOH中的混悬液中。将所得混悬液在H2中搅拌2天。加入硅藻土(2g)， 将混悬液通过珪藻土(2g)垫过滤，浓缩。通过在Biotage 40+M柱上用0-25% 乙腈/水梯度以40ml/min进行C18色谱法纯化残余物。蒸发溶剂，得到# 题化合物的游离形式(1.04g， 3.56mmo1)，用碳酸氢钾(7.12mL 0.5M, 3.56mmol)处理，浓缩，得到标题化合物。^-NMR(MeOD-d3) 8 8.45 (s， 1H)， 8.09 (d， J = Hz， 1H), 7.78 (d， J = Hz， 1H)， 7.72 (s， 1H)， 5.01 (s， 2H)， 2.99 (s， 3H). MS(M-1): 291。
26结果
发现本发明化合物的抑制活性(ICso值)在5nM至300nM之间。IC50值是采用所述的测定法测得的。
等同方案
本领域技术人员将公认或者采用不超过常规的实验能够确定大量与本文所述的具体操作等同的方案。这类等同方案被认为在本发明的范围内，并且被随后的权利要求所覆盖。可以选择那些专利、申请或其它文献的适当组分、工艺和方法用于本发明及其实施方案。
权利要求
1.化合物，选自5-(3-羟基-7-甲氧基萘-2-基)-1，1-二氧代-[1，2，5]噻二唑烷-3-酮；5-(3-羟基-7-丙氧基萘-2-基)-1，1-二氧代-[1，2，5]噻二唑烷-3-酮；5-(3-羟基萘-2-基)-1，1-二氧代-[1，2，5]噻二唑烷-3-酮；和5-(3-羟基-7-甲基-萘-2-基)-1，1-二氧代-1，2，5-噻二唑烷-3-酮；或其可药用盐。
2. 权利要求l的化合物，其中所述化合物选自 5-(3-羟基-7-曱氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5噻二唑烷-3-酮钾盐； 5-(3-羟基-7-丙氧基萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5噻二唑烷-3-酮钾盐； 5-(3-羟基萘-2-基)-l，l-二氧代-[l，2，5噻二唑烷-3-酮钾盐；和 5-(3-羟基-7-甲基-萘-2-基)-l，l-二氧代-l，2，5-噻二唑烷-3-酮钾盐。
3. 抑制PTP酶活性的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治 疗有效量的权利要求1的化合物。
4. 治疗PTP酶活性介导的病症的方法，该方法包括给有需要的哺乳 动物施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
5. 权利要求3所迷的方法，该方法包括施用所述化合物与抗糖尿病剂、 降血脂剂和抗肥胖剂或抗高血压剂的治疗有效量的联合产品。
6. 在哺乳动物中治疗PTP-1B活性介导的病症的方法，该方法包括给 有需要的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求l的化合物。
7. 在哺乳动物中调节葡萄糖水平的方法，该方法包括给有需要的哺乳 动物施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
8. 治疗抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、2型糖尿病、肾功能不全(糖尿 病性和非糖尿病性)、糖尿病性肾病、肾小球肾炎、肾小漆硬化、原发性肾 病的蛋白尿、糖尿病性视网膜病、肥胖、所有类型的心力衰竭、包括急性 和慢性充血性心力衰竭、左心室功能障碍和肥厚型心肌病、糖尿病性心肌 病、室上性和室性心律失常、心房纤维性颤动和心房朴动、高血压、原发 性和继发性肺动脉高压、肾血管高压、血脂异常、动脉粥样硬化、大血管和小血管缺血性疾病、心绞痛(不稳定型或稳定型)、心肌梗塞及其后遗症、 缺血/再灌注损伤、有害的血管重塑、包括血管再狭窄，其它血管疾病的管 理，包括偏头痛、外周血管疾病和雷诺病、肠易激惹综合征、胰腺炎、癌 症、骨质疏松症、多发性硬化、中风、脊髓损伤、神经变性疾病如阿尔茨 海默病、帕金森病和聚谷氨酰胺紊乱如亨廷顿病和脊髓小脑性共济失调、法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求1的化合 物。
9. 药物组合物，包含权利要求l的化合物和一种或多种可药用栽体。
10. 权利要求9的药物组合物，还包含至少一种额外的抗糖尿病剂、 降血脂剂、抗肥胖剂或抗高血压剂。
11. 权利要求9或10的药物组合物在制备用于治疗PTP酶活性介导 的病症的药物中的用途。
12. 权利要求1的化合物在制备用于治疗PTP酶活性介导的病症的药 物组合物中的用途。
13. 权利要求11或12的用途，其中PTP酶活性介导的病症选自抗胰 岛素性、葡萄糖耐受不良、2型糖尿病、肾功能不全(糖尿病性和非糖尿病 性)、糖尿病性肾病、肾小球肾炎、肾小球^更化、原发性肾病的蛋白尿、糖 尿病性视网膜病、肥胖、所有类型的心力衰竭、包括急性和慢性充血性心 力衰竭、左心室功能障碍和肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上性和室 性心律失常、心房纤维性颤动和心房朴动、高血压、原发性和继发性肺动 脉高压、肾血管高压、血脂异常、动脉粥样硬化、大血管和小血管缺血性 疾病、心绞痛(不稳定型或稳定型)、心肌梗塞及其后遗症、缺血/再灌注损 伤、有害的血管重塑、包括血管再狭窄，其它血管疾病的管理，包括偏头 痛、外周血管疾病和雷诺病、肠易激惹综合征、胰腺炎、癌症、骨质疏松 症、多发性硬化、中风、脊髓损伤、神经变性疾病如阿尔茨海默病、帕金 森病和聚谷氨酰胺紊乱如亨廷顿病和脊髓小脑性共济失调、感染性疾病以 及涉及炎症和免疫系统的疾病和涉及肌肉变性的疾病。
14. 用作药物的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明涉及新化合物，其为蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP酶)的抑制剂，因而可用于治疗PTP酶活性介导的病症。本发明的化合物还可用作以磷酸酪氨酸结合区如SH2结构域为特征的其它酶的抑制剂。因此，本发明的化合物可用于预防和/或治疗与肥胖有关的抗胰岛素性、葡萄糖耐受不良、糖尿病、高血压以及大血管和小血管的缺血性疾病、伴随2型糖尿病的病症、包括高脂血、高甘油三酯血、动脉粥样硬化、血管再狭窄、肠易激惹综合征、胰腺炎、脂肪细胞肿瘤和癌如脂肉瘤、血脂异常和其它涉及抗胰岛素性的紊乱。此外，本发明的化合物可用于治疗和/或预防癌症、骨质疏松症、神经变性疾病和感染性疾病以及涉及炎症和免疫系统的疾病。
文档编号A61K31/433GK101687828SQ200880018827
公开日2010年3月31日 申请日期2008年6月3日 优先权日2007年6月4日
发明者D·巴恩斯, G·M·科波拉, J·R·韦尔林, S·W·托皮欧, T·施塔姆斯 申请人:诺瓦提斯公司