专利名称：积雪草酸与羟基积雪草酸在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药提取积雪草酸与羟基积雪草酸的方法，经药理实验证明具有新的 医药用途。具体的说是积雪草酸与羟基积雪草酸作为α-葡萄糖苷酶抑制剂在制备降血糖 药物中的应用。属于医药技术领域。
背景技术：
糖尿病是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合征，系因胰岛素分泌 绝对或相对不足及靶组织对胰岛素敏感性降低，引起机体糖、脂肪、蛋白质、水和电解质等 一系列代谢紊乱，临床以高血糖为主要共同标志。久病可引起多系统损害，病情严重或应激 时可发生急性代谢紊乱如酮症酸中毒等。α-葡萄糖苷酶抑制剂是通过竞争性抑制α-葡 萄糖苷酶的活性，可阻滞双糖水解为单糖，延缓糖的吸收，使血糖平稳并缓慢的维持在一定 的水平，防治餐后高血糖症，同时还可以提高糖耐量，预防和治疗肥胖症，高三酰甘油血症， 用于治疗因碳水化合物紊乱而引起的疾病。实验研究表明阿卡波糖治疗糖尿病动物模型的 慢性并发症有效，通过降低餐后血糖浓度而减少蛋白糖基化，延迟或阻止肾、视网膜神经病 变发生以及缺血性心肌病的发展。文献报道主要α-葡萄糖苷酶抑制剂有多糖、生物碱、苷 类、多肽、糖苷类、黄酮类、皂苷和酚类等。积雪草酸与羟基积雪草酸是从伞形科Umbel 1 iferae植物积雪草CentelIa Miatica(L)Urban的干燥全草或带根全草提取纯化水解分离而得。积雪草性寒，味苦、辛， 具有清热利湿、解毒消肿之功效。我国民间常用于治疗感冒、扁桃腺炎、传染性肝炎、痢疾、 跌打损伤、疔疮肿毒、流行性脑脊髓膜炎等。并且傣族民间积雪草用于食疗治疗很多疾病。 积雪草主要成分为积雪草苷和羟基积雪草苷。另外含有黄酮类、挥发油类、多炔烯炔类等， 还含有少量积雪草酸与羟基积雪草酸(赵宇新等报道积雪草研究进展，中国中医药信息杂 志，2002年8月第9卷第8期，81-84)。资料表明积雪草酸与羟基积雪草酸是积雪草苷与羟 基积雪草苷在胃肠道内代谢的活性形式，给药时直接使用积雪草酸与羟基积雪草酸来代替 积雪草苷与羟基积雪草苷，则无须经过胃肠道细菌的代谢，使活性作用更直接，从而克服用 皂苷给药剂量不好控制的难题。植物中游离的积雪草酸与羟基积雪草酸的含量较低，从积 雪草中直接获得的三萜酸的量相对较少，而积雪草中皂苷的含量远高于三萜酸，所以我们 从积雪草中提取总皂苷，然后经过水解得总三萜酸，经过分离得积雪草酸与羟基积雪草酸。国外专利公开了积雪草酸及衍生物有治疗创伤、皮肤溃疡、抗癌、保肝、痴呆和知 识别紊乱的作用(W096/17819、W098/23575、W098/23278、W098/23574、W098/37899)。国 内专利公开了积雪草酸及衍生物有治疗皮肤创伤、抗抑郁、抗阿尔茨海默病以及保肝、 保护心脑血管和诱导肿瘤细胞调亡等多种作用(CN1238692、CN1248918、CN1543964及 CN1582946)。积雪草酸还有治疗肝纤维化、肺纤维化作用(专利申请号200610122561. 4、 200610118041. 6)。我们在α -葡萄糖苷酶抑制药物筛选过程中出人意料地发现积雪草酸与羟基积雪草酸具有很强的抑制α-葡萄糖苷酶的作用。在本专利申请之前还未有文献报道积雪草 酸与羟基积雪草酸具有抑制α-葡萄糖苷酶的作用。也未发现积雪草酸与羟基积雪草酸在 制备α-葡萄糖苷酶抑制剂的药物中的应用的报道。以往制备积雪草酸与羟基积雪草酸是从植物中分离积雪草苷与羟基积雪草苷单 一成分然后在进行水解纯化得到单一成分积雪草酸与羟基积雪草酸；另种方法就是直接从 积雪草中提取，经过繁琐的萃取、层次等分离过程而获得，较为费时费力，而且消耗大量的 溶剂，并且收率低。为克服以上技术方面的不足，我们先制备总的三萜酸，然后分离单一成 分积雪草酸与羟基积雪草酸，本发明的特点在于我们提取分离总皂苷，利用积雪草中的苷 元大部分为五环三萜酸的特点，用含水乙醇提取时加氧化钙，既提高了积雪草苷的溶解度 又除去了大量杂质，水解后再进行纯化分离，可以得到总的三萜酸及单一成分。收率大大 提高。具体操作为积雪草用乙醇或甲醇提取后，提取液不经过浓缩直接通过大孔树脂柱， 操作简单，并且解决了浓缩后有效成分部分析出，溶液浑浊不利于上柱、有效成分流失的问 题。浓缩液不经过干燥直接水解成积雪草三萜酸，还可以节省时间。制备积雪草酸与羟基 积雪草酸时利用常压或中低压ODS柱层析，可跟据需要设计柱的规格，可大量制备高纯度 积雪草酸与羟基积雪草酸，分离柱具有可反复使用，易操作、成本低，纯度高的特点。整个生 产过程没有使用大量有害有机试剂，操作简单、成本低，纯度高的特点。积雪草酸与羟基积 雪草酸含量均在95%以上，特别适合产业化大量生产，与以往公开的技术相比具有明显的 区别和技术进步。我们通过对积雪草酸与羟基积雪草酸的进一步研究证明，积雪草酸与羟基积雪草 酸具有α-葡萄糖苷酶抑制剂的活性。本发明完成前未发现有关积雪草酸与羟基积雪草酸作为α -糖苷酶抑制剂、在预 防和治疗降血糖方面应用的报道。本发明具有良好的应用前景。积雪草酸(asiatic acid)的结构式
权利要求
积雪草酸与羟基积雪草酸在制备α 葡萄糖苷酶抑制剂的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用其特征在于积雪草酸与羟基积雪草酸是从伞形科积雪 草属植物积雪草中提取纯化分离而得。积雪草酸与羟基积雪草酸含量均在95%以上。
3.根据权利要求2所述的积雪草酸与羟基积雪草酸制备方法为取积雪草药材，用 含0. 1-0. 4%氧化钙或氢氧化钙的50-90%乙醇或甲醇回流提取2-3次。合并提取液，加 入药液体积0. 1-1 %的药用活性炭，搅拌，滤过，滤液直接通过已处理好的大孔树脂柱，用 50-90%乙醇或甲醇洗脱，收集流出液及洗脱液，回收溶剂，浓缩至每Iml含2g药材；加 0. 2 2mol/L的碱溶液1_4倍量，100°C水解1_5小时。放冷，用稀酸调PH值为2_6，滤 过，弃去水解液，滤饼用去离子水洗至中性；再用60-95%乙醇或甲醇加热至沸，加入药液 体积0. 2-2%的药用活性炭，趁热滤过，滤液减压浓缩回收至无醇味，加水至每Iml含Ig药 材，放置，过滤，水洗，干燥，再重结晶1-3次，得积雪草总三萜酸。取积雪草总三萜酸，用含 60-90%乙腈醋酸水溶液溶解，在常压或中低压C-18反相柱上分离纯化，用含60-90%乙腈 醋酸水溶液为洗脱剂，分别收集积雪草酸与羟基积雪草酸流分，薄层鉴定后合并，挥去部分 溶剂，分别获得积雪草酸与羟基积雪草酸。含量均在95%以上。
4.根据权利要求3所述的纯化得到积雪草酸与羟基积雪草酸的特征在于提取药材乙 醇或甲醇用量为5 10倍量；提取时间为1-3小时；水解用的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳 酸钾、碳酸钠等；调PH值为2-6的稀酸溶液为盐酸或硫酸溶液。
5.根据权利要求3所述的应用其特征在于所选用的大孔树脂为D101、D201、AB-8。
6.根据权利要求1所述的应用其特征在于在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂的药物中的 应用是指含有有效治疗剂量的积雪草酸与羟基积雪草酸和一种或多种药学上可接受的药 用赋形剂，或用积雪草酸与羟基积雪草酸组方，并用于制备α “葡萄糖苷酶抑制药物的其 它制剂中的应用。
全文摘要
从积雪草(Centella asiatica(L.)Urban)中提取制备了积雪草酸(asiatic acid)与羟基积雪草酸(madecassic acid)，经药理实验证明具有抑制α-葡萄糖苷酶活性。本发明公开了积雪草酸与羟基积雪草酸在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂药物中的新用途，在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂药物中可以是积雪草酸与羟基积雪草酸，也可以是含积雪草酸与羟基积雪草酸的组合物。同时也公开了积雪草酸与羟基积雪草酸新的制备方法。
文档编号A61K31/56GK101991578SQ200910067429
公开日2011年3月30日 申请日期2009年8月24日 优先权日2009年8月24日
发明者南敏伦, 赫玉芳, 赵全成, 赵文杰, 陈声武, 马吉胜 申请人:赵全成