奥美拉唑钠冻干粉针剂及制备方法和质量控制方法

专利名称：：奥美拉唑钠冻干粉针剂及制备方法和质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种质子泵抑制药物及制备方法和质量控制方法，特别涉及奥美拉唑钠冻干粉针剂及制备方法和质量控制方法，属于医药
技术领域：
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背景技术：
：奥美拉唑钠为胃壁细胞质子泵抑制剂，能特异性地抑制壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上的H+、K+-ATP酶，从而有效地抑制胃酸的分泌。由于H+、K+-ATP酶是壁细胞泌酸的最后一个过程，故本品抑酸能力强大。它不仅能非竞争性抑制促胃液素、组胺、胆碱及食物、剌激迷走神经等引起的胃酸分泌，而且能抑制不受胆碱或^受体阻断剂影响的部分基础胃酸分泌，对^受体拮抗剂不能抑制的由二丁基环腺苷酸(DcAMP)剌激引起的胃酸分泌也有强而持久的抑制作用。本品对胃蛋白酶分泌也有抑制作用，对胃黏膜血流量改变不明显，也不影响体温、胃腔温度、动脉血压、静脉血红蛋白、动脉氧分压、二氧化碳分压及动脉血pH。主要成份是奥美拉唑钠，其化学名称5-甲氧基_2-{[(4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基)甲基]_亚磺酰基}_1H-苯并咪唑钠一水合物。分子式C17H18N3Na03S*H20;分子量385.41。200610042004.1中公开了"一种稳定的注射用奥美拉唑钠制剂"，指出用甘露醇和乙二胺四乙酸二钠作辅料，发明了一种稳定的剌激性小的且不需配有专用溶剂的注射用奥美拉唑钠。该制剂中使用甘露醇作赋形剂，得到的制剂复溶后溶液不溶性微粒超标，不符合现有注射剂基本标准。200810001181.4中公开了"一种奥美拉唑钠冻干粉针剂及其制备方法"，保护的是其产品的制备方法，加入柠檬酸钠溶液调节pH值。200810062160.3中公开了"一种奥美拉唑钠冻干粉针剂及制备方法"，通过辅料P-环糊精或羟丙基-e-环糊精和亚硫酸钠保证了制剂的稳定性，澄清度，用硼砂-碳酸钠缓冲液稳定了PH值的变化，用依地酸钙钠代替乙二胺四乙酸二钠缓解骨钙流失。该专利申请采用13-环糊精为辅料，是通过包合药物的有效成分奥美拉唑钠而确保制剂的稳定性，但同时在进入人体后药物的有效成分不易被释放，结果导致药物的疗效降低，副作用加大。目前上市的奥美拉唑钠冻干粉针剂的不溶性微粒和有关物质的问题一直困扰该产品的使用，辅料是影响其不溶性微粒的重要因素，如甘露醇、P_环糊精等，但如果不用辅料其药物的成型性、稳定性又很难保证。本发明人意外地发现不加赋形剂，通过抗氧剂与螯合剂联合应用，调节制备过程中中间体溶液ra值在一定的范围，以及控制冻干过程中各阶段温度，能够很好地解决奥美拉唑钠上述问题。
发明内容本发明的一个目的是提供奥美拉唑钠冻干粉针剂；本发明的另一个目的是提供奥美拉唑钠冻干粉针剂的制备方法；本发明的另一个目的是提供奥美拉唑钠冻干粉针剂的质量控制方法。本发明主要是通过如下技术方案实现的注射用奥美拉唑钠冻干粉针剂由药物活性成分奥美拉唑钠、依地酸二钠和无水亚硫酸钠组成。其中奥美拉唑钠与依地酸二钠的重量比是28-85:1，优选重量比是56.8:1。其中奥美拉唑钠与无水亚硫酸钠的重量比是21-85:1，优选重量比是42.6:1。奥美拉唑钠冻干粉针剂的制备方法如下取处方量约90%的常温注射用水，加入依地酸二钠和无水亚硫酸钠，搅拌至完全溶解；将原料加入，搅拌至完全溶解；检测溶液的ra值，并用NaOH溶液调节pH值；加入针用活性炭，搅拌吸附，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，压塞。其中间体溶液pH值范围控制在9.5-12.0，优选为10.1_11.1之间，最优选为10.7-10.9。其中冷干过程中预冻温度控制在_35°〇以下，一次升温温度控制在_3°C『C，二次升温温度控制在28°C42°C。本发明奥美拉唑钠冻干粉针剂的质量控制方法如下含量检测方法照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(33-37:4-8:63-55)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;测定法取本发明药物5个制剂单位，精密称定，倾出内容物；精密称定空瓶重量，求出平均装量；精密称取内容物适量，加稀释剂溶解，制成供试品溶液；取奥美拉唑钠对照品适量，精密称定，加稀释剂制成对照品溶液；取上述两种溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。按平均装量计算，含奥美拉唑钠以奥美拉唑(C17H19N303S)计应为标示量的93.0%107.0%。有关物质检测方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(33-37:4_8:63-55)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;精密称取本发明药物适量，加稀释剂溶解制成供试品溶液；量取供试品溶液适量，加稀释剂制成预试溶液；取预试溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的10%;再取供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2-4倍；供试品溶液色谱图H168/66杂质峰不得大于总峰面积的0.3%;最大杂质的峰面积均不得大于总峰面积的1.0%;总杂质的峰面积不得大于总峰面积的2.5%。本发明注射用奥美拉唑钠药物组合物冻干粉针剂的质量控制方法优选如下含量检测方法照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(35:6:59)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;测定法取本发明药物5瓶，精密称定，倾出内容物；精密称定空瓶重量，求出平均装量；精密称取内容物适量，加稀释剂溶解并制成每lml中约含奥美拉唑O.lmg的溶液，作为供试品溶液；取奥美拉唑钠对照品适量，精密称定，加稀释剂制成每lml中约含0.lmg的溶液，作为对照品溶液；取上述两种溶液各20ia，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果再乘以0.940，即得；按平均装量计算，含奥美拉唑钠以奥美拉唑(C17H19N303S)计应为标示量的93.0%107.0%。有关物质用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(35:6:59)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;精密称取本发明药物内容物适量，加稀释剂溶解并制成每lml中约含奥美拉唑0.lmg的溶液，作为供试品溶液；量取供试品溶液适量，加稀释剂制成每lml中含奥美拉唑1Pg的溶液，作为预试溶液；取预试溶液20ii1注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的10%;再取供试品溶液20iU注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液色谱图H168/66杂质峰不得大于总峰面积的0.3%;最大杂质的峰面积均不得大于总峰面积的1.0%;总杂质的峰面积不得大于总峰面积的2.5%。其中试验所用缓冲液(1)磷酸盐缓冲液(pH7.4):取磷酸二氢钠(NaH2P04H20)0.166g与磷酸氢二钠(Na2HP0412H20)1.074g，加水使溶解并稀释至1000ml，pH值应为7.4，即得。(2)四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4):取四丁基硫酸氢铵6.78g与氢氧化钠0.8g，加磷酸盐缓冲液(PH7.4)使溶解并稀释至lOOOml，即得。(3)磷酸盐缓冲液(pHll.0):取磷酸二氢钠(NaH2P04H20)0.34g与磷酸氢二钠(Na2HP0412H20)0.63g，加水溶解并稀释至lOOOml，用磷酸调节pH值至11.0，即得。(4)稀释剂取乙腈200ml，加磷酸盐缓冲液(pHll.0)稀释至lOOOml，即得(需新鲜配制)。本发明人通过奥美拉唑钠冻干粉针剂中处方的筛选，抗氧剂与螯合剂的联合应用，中间体溶液pH值的控制，冻干过程中最低共熔点的摸索，冻干条件的控制等创造性劳动，很好地解决了奥美拉唑钠冻干粉针剂不溶性微粒和有关物质问题，使其制剂含量、有关物质都较现有技术更佳。并发明了一种灵敏度高、专属性强、精密度好、稳定性好的质量控制方法，能很好地控制本发明药物的质量。有益的技术效果下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。试验例1赋形剂的选择在加速(在温度40°C±2°C，相对湿度75%±5%)的条件下放置3个月，考察样6品的含量、有关物质、性状、成型性、不溶性微粒等各项指标的变化。按以下处方，分别称取原辅料，取处方量约90%的常温注射用水，加入下列所示辅料，搅拌至完全溶解。加入奥美拉唑钠，搅拌至完全溶解。检测溶液的pH值，并用NaOH溶液调PH值至10.5;加入0.1%(W/V)的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，检验。结果见下表赋形剂的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由试验结果可知处方1-6含有甘露醇、右旋糖酐、乳糖的制剂的不溶性微粒均不合格。处方7不加辅料则明显改善制剂的不溶性微粒，且不影响其冻干品成型性，但奥美拉唑钠药物存在不稳定、易氧化等问题，因此，初步确认处方中不加赋形剂，进一步考察加入抗氧剂对含量、有关物质的改善情况。试验例2抗氧剂的选择在加速(在温度40°C±2°C，相对湿度75%±5%)的条件下放置3个月，考察样品的含量、有关物质、性状、不溶性微粒等各项指标的变化。按以下处方，分别称取原辅料，取处方量约90%的常温注射用水，加入下列所示辅料，搅拌至完全溶解。加入奥美拉唑钠，搅拌至完全溶解。检测溶液的pH值，并用NaOH溶液调PH值至10.5;加入0.1%(W/V)的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，检验。结果见下表抗氧剂的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>由试验结果可知加速条件下放置3个月，处方1-5加入抗氧剂得到的制剂有关物质和含量变化不明显，其中处方2、5有关物质的变化较小，但处方5加入甘露醇得到制剂不溶性微粒项不符合规定，处方6不加甘露醇和抗氧剂得到的制剂不溶性微粒虽合格，但经加速条件下放置3个月后有关物质增加明显，进一步验证不溶性微粒与加入赋形剂有关。综合以上说明，在处方中加入抗氧剂可明显改善药物稳定性，其中加入无水亚硫酸钠得到的制剂有关物质的变化较小，因此，以无水亚硫酸钠最佳。试验例3金属离子螯合剂的选择在加速(在温度4(TC±2°〇，相对湿度75%±5%)的条件下放置3个月，考察样品的含量、有关物质、性状、不溶性微粒等各项指标的变化。本发明药物为无菌冻干制剂，为了防止金属离子对药物自身氧化的催化作用，我们向本发明制剂中加入了一定量的金属离子螯合剂。按以下处方，分别称取原辅料，取处方量约90%的常温注射用水，加入下列所示辅料，搅拌至完全溶解。加入奥美拉唑钠，搅拌至完全溶解。检测溶液的ra值，并用NaOH溶液调PH值至10.5;加入0.1%(W/V)的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，检验。结果见下表金属离子螯合剂的选择8<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由试验结果可知加入螯合剂的处方1、2，加速条件下放置3个月有关物质基本保持不变，且处方2最优；而只加螯合剂的处方3、4和只加抗氧剂的处方5有关物质变化较为明显，超过3%，所以本发明药物选择依地酸二钠作为螯合剂最优，并且与抗氧剂无水亚硫酸钠联合应用。试验例4抗氧剂用量的选择在加速(在温度4(TC±2"，相对湿度75%±5%)的条件下放置3个月，考察样品的pH值、含量、有关物质、性状等各项指标的变化。奥美拉唑钠42.6g、依地酸二钠1.0g、无水亚硫酸钠按下表所示、注射用水1000ml。取处方量约90%的常温注射用水，加入依地酸二钠和无水亚硫酸钠，搅拌至完全溶解。加入奥美拉唑钠，搅拌至完全溶解。检测溶液的ra值，并用NaOH溶液调pH值至10.5;加入O.1%(W/V)的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，检验。结果见下表抗氧剂用量的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由试验结果可知加入无水亚硫酸钠O.lg处方加速条件下放置3个月有关物质增加明显，超过2.5%。加入其他量无水亚硫酸钠制剂有关物质无明显变化。综合考虑临床用药安全性，奥美拉唑钠与无水亚硫酸钠的重量比是21-85:1，优选重量比是42.6:1。试验例5金属离子螯合剂用量的选择在加速(在温度4(TC±2°〇，相对湿度75%±5%)的条件下放置3个月，考察样品的pH值、含量、有关物质、性状等各项指标的变化。奥美拉唑钠42.6g、依地酸二钠按下表所示、无水亚硫酸钠1.0g、注射用水1000ml。取处方量约90%的常温注射用水，加入依地酸二钠和无水亚硫酸钠，搅拌至完全溶解。加入奥美拉唑钠，搅拌至完全溶解。检测溶液的ra值，并用NaOH溶液调pH值至10.5;加入O.1%(W/V)的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，检验。结果见下表金属离子螯合剂用量的选择10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>0.1%(W/V)的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，检验。结果见下表pH值范围的确定<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由试验结果可知奥美拉唑钠冻干粉针剂当pH值低于9.5有关物质超过规定限度，在pH值在9.5以上各项指标较好，pH值10.7-10.9范围内有关物质无明显变化。综合人体耐受性控制其pH值在9.5-12.O之间，优选IO.1-11.l之间，最优选pH值为10.7-10.9。经溶血试验及血管剌激试验，证明在该pH值范围内本制剂无溶血现象，对血管无任何剌激性。试验例8最低共熔点的测定采用先冷却再加热的方法，这样可避免出现过冷现象，所测的共熔点更准确。经试验测定，奥美拉唑钠的最低共熔点为_4.5t:，从而确定冻干工艺的预冻考察温度为_35°C以下。试验例9冻干工艺的筛选冷冻干燥分为三个阶段预冻、低温真空升华，高温干燥。根据冻干过程设计了三种冷冻干燥条件进行实验选择，将冻干箱真空度抽至10Pa以下，不同冻干结果见下表冻千工艺的筛选指标23预冻温度rc)-20°C-25°C-35°C预冻时间(h)233低温升华温度rc)-20。C0°C-25°C0°C-35。C0。C低温升华时问(h)1014〗8向礼'i.—十一'fer/Vi.乂蔓(C)020025028高温T'燥吋问(h)223保温温度fC)202528保温时间(h)333性状白色块状物白色块状物白色块状物成型性差较差好溶解性较差较好好含水量2.32%2.02%1.87%机械强度较好较好好由试验结果可知按照冻干工艺3制备的样品各项指标较好，工艺1、2制备的样品成型性、溶解性较差，因此我们优选冻干工艺3，其冻干工艺为开启前箱制冷，使制品温度降至_25°C以下，时间约为23hr;开启后箱制冷将冷凝器温度降低至-35°C;将冻干箱真空度抽至lOPa以下；一次升温设定导热油温度为-3°C8°C;当导热油温度达到设定温度25hr后，每隔2hr提高导热油温度1°C2°C，直到所有制品温度均过0°C，继续保温26hr，一次升华结束；二次升温设定导热油温度为28t:42t:;当导热油温度曲线与制品温度曲线平行时，继续保温23hr，冻干结束；冻干结束后，进行压塞。试验例10有关物质检测方法的选择为使制得的成品质量得到更好的控制，拟采用高效液相法(中国药典2005年版二部附录VD)对本发明实施例l制得的样品的有关物质进行检查，并进行了相关的方法学研允。1色谱条件仪器岛津LC-10Atvp高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外可见检测器，Anastar色谱工作站。试剂乙腈(色谱纯)；磷酸二氢钠(分析纯)；磷酸氢二钠(分析纯)；磷酸钠(分析纯)；四丁基硫酸氢铵(分析纯)；重蒸水。色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶(4.6mmX150mm，5iim)为固定相，以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(35:6:59)为流动相，检测波长为280nm。2试验所用缓冲液(1)磷酸盐缓冲液(pH7.4):取磷酸二氢钠(NaH2P04H20)0.166g与磷酸氢二钠(Na2HP0412H20)1.074g，加水使溶解并稀释至1000ml，pH值应为7.4，即得。(2)四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4):取四丁基硫酸氢铵6.78g与氢氧化钠0.8g，加磷酸盐缓冲液(PH7.4)使溶解并稀释至1000ml,即得。(3)磷酸盐缓冲液(pHll.0):取磷酸二氢钠(NaH2P04H20)0.34g与磷酸氢二钠(Na2HP0412H20)0.627g，加水溶解并稀释至lOOOml，用磷酸调节pH值至11.0，即得。(4)稀释剂取乙腈200ml，加磷酸盐缓冲液(pHll.0)稀释至1000ml，即得(需新鲜配制)。3系统适用性试验取本发明实施例1样品适量，用稀释剂制成约含0.lmg/ml的溶液，按上述色谱条件，进样20iU。奥美拉唑峰保留时间为6.497分钟，理论板数为6676，主峰与相邻杂质峰的分离度分别为3.404、7.452。规定理论板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，主峰与相邻杂质峰分离度大于3.0。4.l原料的破坏试验取奥美拉唑钠原料适量，加稀释剂制成1ml约含0.2mg的溶液，作为供试品溶液A。酸破坏取供试品溶液A5ml，滴加浓盐酸5滴，于6(TC烘箱中放置3小时，取出放冷，用饱和氢氧化钠溶液调节pH值至中性，过滤，进样20ill。碱破坏取供试品溶液A5ml，滴加饱和氢氧化钠溶液5滴，于6(TC烘箱中放置3小时，取出放冷，用浓盐酸调节pH值至中性，过滤，进样20ill。氧化破坏取供试品溶液A5ml，滴加高锰酸钾溶液5滴，于6(TC烘箱中放置3小时，取出放冷，过滤，进样20iU。高温破坏取供试品溶液A5ml，放置于6(TC烘箱内8小时，取出放冷，过滤，取续滤液20iU进样。光照破坏取供试品溶液A5ml，在4500LX照度下放置12小时，取出放冷，过滤，取续滤液20iU进样。4.2样品的破坏试验取本发明实施例1制得的样品适量，加稀释剂制成每lml中约含O.2mg溶液，作为供试品溶液B。样品酸破坏产物制备取供试品溶液B10ml，加浓盐酸5滴，放置于6(TC烘箱内3小时，取出放冷，用饱和氢氧化钠溶液调节pH值至中性，过滤，取续滤液20iil进样。样品碱破坏产物制备取供试品溶液B10ml，加饱和氢氧化钠溶液5滴，放置于6(TC烘箱内3小时，取出放冷，用浓盐酸调节pH值至中性，过滤，取续滤液20iU进样。样品氧化破坏产物制备取供试品溶液B10ml，加高锰酸钾溶液5滴，放置于6(TC烘箱内3小时，取出放冷，过滤，取续滤液20iU进样。样品高温破坏产物制备取供试品溶液B10ml，放置于6(TC烘箱内8小时，取出放冷，过滤，取续滤液20iil进样。样品光照破坏产物制备取供试品溶液B10ml，在4500LX照度下放置12小时，取14出放冷，过滤，取续滤液20ii1进样。酸碱空白溶剂的制备取稀释剂约5ml，加浓盐酸5滴，放置于6(TC烘箱内3小时，取出放冷，用饱和氢氧化钠溶液调节pH值至中性，过滤，取续滤液20iil进样。辅料空白溶液的制备按制剂处方量，去除主药外，加稀释剂制成空白辅料溶液，进样20iU，记录色谱图。由色谱图知，辅料基本无吸收。见附图18。空白溶剂的制备取稀释剂20iU进样。由上述破坏产物可知，原料与样品在酸、碱、氧化、高温、光照条件下均有降解产物生成，各降解产物与主成分峰均能达到较好的分离。空白试验表明辅料不干扰主药的测定。试验结果表明此色谱条件能够满足本发明药物组合物的有关物质检查的要求。分析上述空白溶剂及辅料，结果表明空白溶剂及辅料峰都在2min之前，而奥美拉唑的降解产物都在2min之后，辅料并不干扰主成分的有关物质测定，所以计算有关物质时，与奥美拉唑钠峰相对保留时间约为0.31之前的空白溶剂及辅料峰除外。5最小检出量检测精密称取奥美拉唑钠10.8mg，按奥美拉唑计9.6mg，加稀释剂溶解并制成约0.002mg/ml的浓度，精密量取5ml置100ml容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，取此溶液20ii1进样，记录色谱图。得主峰峰面积为1754，峰高约为基线噪音的3倍，因此计算最小检出量为1.92ng。6H168/66杂质峰的定位精密称取H168/66杂质对照品适量，加稀释剂溶解并制成lmg/ml的浓度，精密量取适量用稀释剂制成每lml中含0.6iig的溶液作为对照溶液，取对照溶液20iU注入液相色谱仪。H168/66峰的出峰时间为9.162min，另取奥美拉唑钠原料适量，加稀释剂制成每lml中含奥美拉唑0.lmg的溶液作为供试品溶液，取供试品溶液20y1注入液相色谱仪。奥美拉唑峰的保留时间在6.360min。取H168/66对照品溶液(lmg/ml的浓度)适量加至供试品溶液中，取该溶液进样20iU。奥美拉唑峰的保留时间在6.317min，H168/66峰的保留时间为9.108min，计算H168/66的峰与主峰的相对保留时间约为1.44，二者的分离度为4.771。7H168/66杂质峰的最小检出量精密称取H168/66杂质对照品10.2mg，加稀释剂溶解并制成lmg/ml的浓度，精密量取适量用稀释剂制成每lml中含0.6iig的溶液作为对照溶液，精密量取lml置10ml容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，取此溶液20iU进样。得主峰峰面积为1070，峰高约为基线噪音的3倍，因此计算最小检出量为1.224ng。8H168/66杂质的限度奥美拉唑钠冻干粉针剂质量控制方法中规定H168/66峰面积不得大于总峰面积的1.0X;如H168/66的峰面积大于总峰面积的O.3%，则用外标法以峰面积计算。根据本发明药物组合物加速试验和长期试验考察结果，将限度定为与主峰相对保留时间约为1.44处如显杂质峰，其峰面积不得大于总峰面积的0.3%。9有关物质测定法取本发明实施例1制得的样品内容物适量，加稀释剂溶解并制成每lml中约含奥美拉唑O.lmg的溶液，作为供试品溶液；量取供试品溶液适量，加稀释剂制成每lml中约含1Pg的溶液，作为预试溶液。取预试溶液201注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10%;再取供试品溶液20注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液色谱图如显杂质峰(与主峰相对保留时间约为0.31以前的辅料峰除外)，H168/66杂质峰(与主峰相对保留时间约为1.44的杂质峰)不得大于总峰面积的0.3%;其他单个杂质的峰面积均不得大于总峰面积的1.0%;总杂质的峰面积不得大于总峰面积的2.5%。试验例11含量测定方法的选择采用高效液相法对本发明实施例1制得的样品的含量进行检查，并进行了方法学研究。l含量测定标准曲线精密称取奥美拉唑钠对照品28.2mg(水分5.26%，含量100.02%)，按奥美拉唑计25.lmg，置50ml量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，分别准确量取0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml分别置于10ml容量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。分别取各溶液20iU，注入液相色谱仪。结果见下表。含量测定线性关系试验结果浓度C(ug/ml)25.150.275.3100.4150.6200.8峰面积169328314046512107357288294543321525772401峰面积269479414078752112694287657543413025786550平均峰面积69403914062632118031287976043367275779476以峰面积A对浓度C(yg/ml)进行线性回归，得线性方程为A=2.9042X104C-47607R=0.9999试验结果表明奥美拉唑峰面积A与溶液浓度C在25.1200.8yg/ml范围内线性关系较好。2精密度试验精密称取本发明实施例1制得的样品适量，加稀释剂溶解并稀释制成每1ml约含奥美拉唑O.lmg的溶液，摇匀，作为供试品溶液；精密量取20iil注入液相色谱仪，分别进样6次。测定结果见下表。含量测定精密度试验数据次数123456峰面积285399428271252835598286350028289802833289平均峰面积为2840414，RSD为0.52%。说明此方法精密度较好。3稳定性试验精密称取本发明实施例1制得的样品适量，加稀释剂溶解并稀释制成每1ml约16含奥美拉唑0.lmg的溶液，摇匀，作为供试品溶液；分别于0、1、2、4、6、8小时，精密量取20yl，注入液相色谱仪。测定结果见下表。含量测定稳定性试验数据<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>平均值为2855402，RSD=0.48%，表明本法重复性较好。4回收率试验按处方量的80.0%、100.0%和120.0%分别精密称取奥美拉唑钠对照品及其他辅料，置250ml容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取奥美拉唑钠对照品适量，加稀释剂制成浓度每lml约含奥美拉唑O.lmg的溶液，分别取上述溶液各201，注入液相色谱仪，按外标法计算，得奥美拉唑钠回收率。含量测定回收率试验数据<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>测定结果平均回收率为100.04%，RSD为0.35%，结果表明高效液相法测定本发明药物组合物回收率较好，辅料不影响主药测定。实验例12稳定性试验1、样品及试药来源注射用奥美拉唑钠，按照实施例l所述处方和工艺自制3批，批号分别为AZ1、AZ2、AZ3;奥美拉唑钠对照品购自中国药品生物制品检定所。2、试验方法(1)加速稳定性试验分别取3批样品，按市售包装，在温度40°C±2°C，相对湿度75%±5%的条件下放置6个月，分别于1、2、3、6个月取样，考察性状、pH值、有关物质、含量。结果见下表加速稳定性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>由试验结果可知本发明药物经加速试验6个月，考察项目的检测结果与0个月比较均无明显变化，说明本发明药物在上述试验条件下稳定。(2)长期稳定性试验按市售包装，将样品在温度25t:土2。C，相对湿度60X±10%的条件下放置12个月，分别于0、3、6、9、12、18、24个月取样，考察性状、pH值、有关物质、含量。结果见下表长期稳定性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>由试验结果可知本发明药物经长期试验考察24个月，考察项目的检测结果与0个月比较均无明显变化，说明本发明药物在上述试验条件下稳定。(3)配伍的稳定性试验取按实施例1处方及工艺制得的成品，分别加入到5%葡萄糖溶液和0.9%氯化钠注射液100ml中，摇匀，作为模拟配伍溶液A、B。分别于0、l、2、4、6、8小时检查模拟配伍溶液A的性状、澄明度、pH值后，精密量取模拟溶液A2.5ml，用5%葡萄糖稀释至10ml，摇匀，作为供试品溶液A;取5X葡萄糖注射液作为空白溶液A。分别于0、1、2、4、6、8小时检查模拟配伍溶液B的性状、澄明度、pH值后，精密量取模拟溶液B2.5ml，用0.9%氯化钠稀释至10ml，摇匀，作为供试品溶液B。取0.9%氯化钠注射液作为空白溶液B。分别取上述各溶液20iU进样。比较其性状、澄明度、pH值、主峰面积、有关物质(面积归一化法)、5-羟甲基糠醛的变化，作为衡量稳定性的指标。5-羟甲基糠醛精密称取5-羟甲基糠醛对照品适量，用水制成每lml中含3Pg的溶液，作为对照品溶液，取此溶液20U1进样，5-羟甲基糠醛色谱峰的保留时间在2.148min，不干扰主成分的测定，5-羟甲基糠醛峰面积为848573。故采用高效液相法考察5-羟甲基糠醛。测定方法取供试品溶液20ul进样，供试品溶液A中如显5-羟甲基糠醛19的色谱峰，其峰面积不得大于对照品溶液主峰峰面积的5倍(对照品溶液折算成5%葡萄糖注射液)。5%葡萄糖注射液配伍稳定性试验数据<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>0.9%氯化钠注射液配伍稳定性试验数据<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>5%葡萄糖注射液的配伍溶液平均主峰面积为3082598，RSD为0.30%;平均有关物质为1.997%;平均5-羟甲基糠醛峰面积为292522，RSD为2.83%;其它考察指标基本稳定。结果表明奥美拉唑钠冻干粉针剂在5%葡萄糖注射液中在6小时内基本稳定。其配伍可满足临床配伍需要。氯化钠注射液的配伍溶液平均主峰面积为2752755，RSD为0.27%;平均有关物质为2.085%。结果表明奥美拉唑钠冻干粉针剂在氯化钠注射液中在8小时内基本稳定。其配伍可满足临床配伍需要。试验例13对比试验X寸比样品1奥美拉唑钠40g注射用水加至2000ml冻干后制成1000瓶将处方量的奥美拉唑钠加入配液缸中，加入1500ml注射用水搅拌至完全溶解，再用0.05mol/L柠檬酸钠溶液调节pH至10.5，加入注射用水至处方量。加入总量0.05%的针用活性炭，搅拌15分钟，过滤脱碳，将药液用0.22i！m除菌微孔滤膜精滤，测定pH值、含量、半加塞。最后进行冷冻干燥先将药品从常温降至-22.5t:，保温30分钟后，然后继续降温至_451:的温度条件下预冻3小时；然后将药品从_451:升温至-25t:，保温12小时，然后在-25°Cl(TC条件下减压真空干燥，这过程总共时间为24小时，最后在35t:高温干燥7小时，压塞、轧盖、全检合格后包装入成品库。X寸比样品2奥美拉唑钠44.63g甘露醇200g注射用水加至3000ml冻干后制成1000瓶将处方量的奥美拉唑钠与甘露醇原辅料加入配液缸中，加入2500ml注射用水搅拌至完全溶解，再用0.lmol/L柠檬酸钠溶液调节pH至10.3，加入注射用水至3000ml，得到稀释后的溶液。在所述溶液中加入占稀释后溶液重量0.05%的针用活性炭，搅拌20分钟，过滤脱碳，得到滤液，再将滤液用0.22iim除菌微孔滤膜精滤，测定pH值、含量、半加塞。冷冻干燥先将药品从常温降至-22.5t:，保温45分钟后，然后继续降温至-45t:的温度条件下预冻2小时；然后将药品从-45t:升温至-26t:，保温10小时，然后在-26°Cl(TC条件下减压真空干燥，这过程总共时间为28小时，最后在35t:高温干燥8小时，压塞、轧盖、全检合格后包装入成品库。对比样品3按照实施例1处方和工艺制备样品，得到对比样品3。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>由试验结果可知对比样品1、2长期12个月的含量和有关物质有明显变化；对比样品3加速试验6个月、长期试验12个月的有关物质无明显变化。下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果下列具体的实施例进一步描述本发明，但所述的实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。实施例1奥美拉唑钠42.6g依地酸二钠0.75g无水亚硫酸钠1.0g注射用水加至1000ml共制1000支配制，取处方量约90%的常温注射用水，加入依地酸二钠和无水亚硫酸钠，搅拌至完全溶解。将原料加入，搅拌至完全溶解。检测溶液的ra值，并用NaOH溶液调至范围10.7内；加入O.1%(W/V)的针用活性炭，搅拌吸附20分钟，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；开启前箱制冷，使制品温度降至-25t:以下，时间约为23hr;开启后箱制冷将冷凝器温度降低至_35°C以下；将冻干箱真空度抽至lOPa以下；一次升温设定导热油温度为_3°C8°C;当导热油温度达到设定温度25hr后，每隔2hr提高导热油温度1°C2°C，直到所有制品温度均过0°C，继续保温26hr，一次升华结束；二次升温设定导热油温度为28t:42t:;当导热油温度曲线与制品温度曲线平行时，继续保温23hr，冻干结束；冻干结束后，进行压塞。含量检测方法照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(35:6:59)为流动相。检测波长为280nm。理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0。测定法取本品5瓶，精密称定，倾出内容物；精密称定空瓶重量，求出平均装量；精密称取内容物适量，加稀释剂溶解并制成每lml中约含奥美拉唑O.lmg的溶液，作为供试品溶液；取奥美拉唑钠对照品适量，精密称定，加稀释剂制成每lml中约含0.lmg的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各20ii1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果再乘以0.940，即得。按平均装量计算，含奥美拉唑钠以奥美拉唑(C17H19N303S)计应为标示量的93.0%107.0%。有关物质精密称取本发明药物内容物适量，加稀释剂溶解并制成每lml中约含奥美拉唑0.lmg的溶液，作为供试品溶液；量取供试品溶液适量，加稀释剂制成每lml中含奥美拉唑1Pg的溶液，作为预试溶液。照含量测定项下的色谱条件进行试验，取预试溶液20iU注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的10%;再取供试品溶液20ii1注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液色谱图H168/66杂质峰不得大于总峰面积的0.3%;最大杂质的峰面积均不得大于总峰面积的1.0%;总杂质的峰面积不得大于总峰面积的2.5%。其中试验所用缓冲液(1)磷酸盐缓冲液(pH7.4):取磷酸二氢钠(NaH2P04H20)0.166g与磷酸氢二钠(Na2HP0412H20)1.074g，加水使溶解并稀释至1000ml，pH值应为7.4，即得。(2)四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4):取四丁基硫酸氢铵6.78g与氢氧化钠0.8g，加磷酸盐缓冲液(PH7.4)使溶解并稀释至1000ml,即得。(3)磷酸盐缓冲液(pHll.0):取磷酸二氢钠(NaH2P04H20)0.34g与磷酸氢二钠(Na2HP0412H20)0.63g，加水溶解并稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至11.0，即得。(4)稀释剂取乙腈200ml，加磷酸盐缓冲液(pHll.0)稀释至1000ml，即得(需新鲜配制)。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>实施例2奥美拉唑钠42.6g依地酸二钠1.8g无水亚硫酸钠0.6g注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至10.9，预冻温度在_50°C。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>实施例3奥美拉唑钠42.6g依地酸二钠0.5g无水亚硫酸钠1.5g注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至10.7，预冻温度在_48°C。取上述方法的中间体溶液及成品考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>实施例4奥美拉唑钠50g依地酸二钠1.2g无水亚硫酸钠0.9g注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至10.3，预冻温度在-42°C。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>实施例5奥美拉唑钠40g依地酸二钠1.4g无水亚硫酸钠1.2g注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至10.5，预冻温度在-45°C。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>实施例6奥美拉唑钠60g依地酸二钠0.8g无水亚硫酸钠1.lg注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至11.l，预冻温度在_38°C。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。指标中间体溶液成品性状无色澄明液体白色冻干块状物含量(％)100.7%100.6%有关物质hw8/66杂质0.043「------0.050最大杂质0.0870.119总杂质0.2010.334实施例7奥美拉唑钠45g依地酸二钠1.lg无水亚硫酸钠0.8g注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至10.l，预冻温度在_40°C。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。指标中间体溶液成品性状无色澄明液体白色冻干块状物含量(％)100.3%99.830/q有关物质hi68/66杂质0.0420.052最大杂质0.1150.201总杂质0.1850.401总杂质0.3520.614实施例8奥美拉唑钠20g依地酸二钠0.3g无水亚硫酸钠0.9g注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至10.4，预冻温度在_50°C。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。指标中问体溶液成品性状无色澄明液体白色冻干块状物含量(％)101.3%99.98%有关物质h168/66杂质0.0420.049最大杂质0.1050.157总杂质0.1610.281总杂质0.3490.40025实施例9奥美拉唑钠80g依地酸二钠2.8g无水亚硫酸钠1.0g注射用水加至1000ml共制1000支制备工艺同实施例l，其中中间体溶液ra值调节至10.8，预冻温度在_35°C。取上述方法的中间体溶液及成品，考察样品的含量、有关物质、性状等各项指标。指标中间体溶液成品性状无色澄明液体白色冻干块状物含量(％)100.3%99.93%有关物质H168/66杂质0麓0.045最大杂质0.1000.107总杂质0.1550.201总杂质0.2520.3142权利要求一种奥美拉唑钠冻干粉针剂，其特征在于该冻干粉针剂是由药物活性成分奥美拉唑钠、依地酸二钠和无水亚硫酸钠组成。2.如权利要求1所述奥美拉唑钠冻干粉针剂，其特征在于该冻干粉针剂组成中奥美拉唑钠与依地酸二钠的重量比是28-85:1，优选重量比是56.8:1。3.如权利要求1所述奥美拉唑钠冻干粉针剂，其特征在于该冻干粉针剂组成中奥美拉唑钠与无水亚硫酸钠的重量比是21-85:1，优选重量比是42.6:1。4.如权利要求1所述奥美拉唑钠冻干粉针剂的制备方法，其特征在于制备方法优选为取处方量约90%的常温注射用水，加入依地酸二钠和无水亚硫酸钠，搅拌至完全溶解；将原料加入，搅拌至完全溶解；检测溶液的ra值，并用NaOH溶液调节pH值；加入针用活性炭，搅拌吸附，脱炭、除菌过滤；补加注射用水至处方量；中间体检验、灌装；冻干，压塞。5.如权利要求l所述奥美拉唑钠冻干粉针剂的制备方法，其特征在于中间体溶液pH值范围控制在9.5-12，优选在10.1-11.l之间，最优选为10.7-10.9。6.如权利要求1所述奥美拉唑钠冻干粉针剂的制备方法，其特征在于冷干过程中预冻温度控制在-35°C以下，一次升温温度控制在_3°C8°C，二次升温温度控制在28°C42°C。7.如权利要求1所述奥美拉唑钠冻干粉针剂，其特征在于质量控制方法包括如下检测方法中的一种或几种含量检测方法照高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈_四丁基硫酸氢铵缓冲液(PH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(33-37:4-8:63-55)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;测定法取本发明药物5个制剂单位，精密称定，倾出内容物；精密称定空瓶重量，求出平均装量；精密称取内容物适量，加稀释剂溶解，制成供试品溶液；取奥美拉唑钠对照品适量，精密称定，加稀释剂制成对照品溶液；取上述两种溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；按平均装量计算，含奥美拉唑钠以奥美拉唑(C17H19N303S)计应为标示量的93.0%107.0%;有关物质检测方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(PH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(33-37:4_8:63-55)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;精密称取本发明药物适量，加稀释剂溶解制成供试品溶液；量取供试品溶液适量，加稀释剂制成预试溶液；取预试溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的10%;再取供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2-4倍；供试品溶液色谱图H168/66杂质峰不得大于总峰面积的0.3%;最大杂质的峰面积均不得大于总峰面积的1.0%;总杂质的峰面积不得大于总峰面积的2.5%。8.如权利要求7所述奥美拉唑钠冻干粉针剂的质量检测方法，其特征在于含量测定方法如下照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(35:6:59)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;测定法取本发明药物5个制剂单位，精密称定，倾出内容物；精密称定空瓶重量，求出平均装最；精密称取内容物适量，加稀释剂溶解并制成每lml中约含奥美拉唑0.lmg的溶液，作为供试品溶液；取奥美拉唑钠对照品适量，精密称定，加稀释剂制成每lml中约含0.lmg的溶液，作为对照品溶液；取上述两种溶液各20iil，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果再乘以0.940，即得；按平均装量计算，含奥美拉唑钠以奥美拉唑(C17H19N303S)计应为标示量的93.0%107.0%。9.如权利要求7所述奥美拉唑钠冻干粉针剂的质量检测方法，其特征在于有关物质测定方法如下照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四丁基硫酸氢铵缓冲液(pH7.4)-磷酸盐缓冲液(pH7.4)(35:6:59)为流动相；检测波长为280nm;理论塔板数按奥美拉唑峰计算应不低于2000，奥美拉唑峰与H168/66杂质峰的分离度应不小于3.0;精密称取本品内容物适量，加稀释剂溶解并制成每lml中约含奥美拉唑O.lmg的溶液，作为供试品溶液；量取供试品溶液适量，加稀释剂制成每lml中含奥美拉唑1yg的溶液，作为预试溶液；取预试溶液20iU注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的10%;再取供试品溶液20iU注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍；供试品溶液色谱图H168/66杂质峰不得大于总峰面积的0.3%;最大杂质的峰面积均不得大于总峰面积的1.0%;总杂质的峰面积不得大于总峰面积的2.5%。10.由权利要求1-6任一项所述的制备方法制备的奥美拉唑钠冻干粉针剂。全文摘要奥美拉唑钠冻干粉针剂及制备方法和质量控制方法，属医药
技术领域：
。本发明通过抗氧剂与螯合剂联合应用，调节制备过程中中间体溶液pH值在一定的范围，以及控制冻干过程中各阶段温度，从而改善药物的稳定性。另外，本发明通过对奥美拉唑钠冻干粉针剂质量控制方法的研究，建立了灵敏度高、专属性强的质量控制方法，能很好地控制本发明药物的质量。文档编号A61K47/02GK101744777SQ200910244378公开日2010年6月23日申请日期2009年12月30日优先权日2009年12月30日发明者张建立,曹相林,解玉红,谢亚,高锋申请人:北京四环科宝制药有限公司