专利名称：具有提升的水溶解度的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物及其制备方法，以 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有提升的水溶解度的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物。更详细地，涉及通过将水溶解度低的雷帕霉素增容成高分子纳米粒子而提升水溶解度的含雷帕霉素的注射剂型组合物及其制备方法，以及用于与放射线疗法联用的抗癌组合物。
背景技术：
雷帕霉素(分子式=C51H79NO13,分子量914. 2)也被称为西罗莫司(siroIimus),其作为大环内酯类化合物，由于具有免疫抑制活性，从而被商品化为器官移植患者的移植排斥抑制剂(雷帕霉素(R apamune))。此外，雷帕霉素除了可以抑制器官移植的排斥，还可用于治疗肺炎(pulmonary inflammation)、全身性红斑狼疮(systemic lupuserythematosis)、牛皮癖等免疫炎症皮肤疾病(immunoinf lamma tory skin disorders)、免疫炎症肠道疾病(immunoinflammatory bowe I disorders)、眼部炎症(ocularinflammation)、再狭窄(restenosis)、风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)等。最近，有关于雷帕霉素不仅具有免疫抑制剂的功能，还具有作为哺乳动物雷帕霉素革巴蛋白(mTOR :mammalian target of rapamycin)的抑制剂，诱导细胞死亡(apoptosis),破坏癌细胞的抗癌剂功能的报道。但是，由于雷帕霉素对于水的溶解度非常低(iiyg/mL)，因此存在经口给药时，吸收率非常低，个体间的生物利用度的变化非常严重的缺点。已被介绍的含雷帕霉素的剂型有雷帕霉素片剂。上述片剂含有蔗糖、乳糖、聚乙二醇8000、硫酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮(Povidone)、泊洛沙姆188、单油酸甘油酯等赋形剂。此外，雷帕霉素经口溶液剂中含有Phosal 50PG (卵磷脂、丙二醇、单甘油酯、双甘油酯、乙醇、大豆脂肪酸、抗坏血酸棕榈酸酯)与聚山梨醇酯80，含有I. 5^2. 5%的乙醇。但是，上述雷帕霉素经口溶液剂对人进行经口给药时，生物利用度(absolutebioavailability)约为14%左右，将雷帕霉素片剂经口给药时与将雷帕霉素溶液剂经口给药时相比，显示出相对要高约25%的生物利用度。但是，两种制剂的生物利用度均在20%以下，其原因在于雷帕霉素对水的低溶解度。因此，利用多种增容技术，进行了各种制剂化雷帕霉素的尝试。美国第5，559，121号专利中公开了一种胶囊制剂组合物，该胶囊制剂包含一种溶液，该溶液为，在含表面活性剂聚山梨醇酯80、N，N- 二甲基乙酰胺，以及卵磷脂或磷脂中的一种的混合溶液中溶有雷帕霉素的溶液。美国第5，616，588号专利中公开了一种注射用水溶液组合物,该组合物为,雷帕霉素以0. f4mg/mL的浓度溶解在丙二醇水溶液中，并且不含有非离子性表面活性剂。但是，现有的雷帕霉素注射用水溶液的情况下，因水溶液的稳定性降低，存在需要在很快的时间内进行给药的缺点。目前没有以商业化进行销售的注射剂型。另一方面，韩国第0160957号专利公开了一种用于抑制器官或组织移植排斥的组合物，该组合物含有雷帕霉素，雷帕霉素的含量为对抑制哺乳类的器官或组织的移植排斥有效的量。但是，该专利中公开了将雷帕霉素与橄榄油等油，乙醇、丙二醇及聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨醇酯80等表面活性剂一起使用的情况。另一方面，美国第6，322, 805号与6，616, 941号专利中公开了一种利用两亲性嵌段共聚物的高分子胶束，该两亲性嵌段共聚物是采用作为能够使难容性药物增溶的技术，将作为亲水性嵌段的聚乙二醇(A)与作为疏水性嵌段的聚乳酸(B)结合为A-B型的双嵌段。但是，没有公开利用上述高分子胶束对雷帕霉素进行增溶的具体实例。
发明内容
要解决的技术问题本发明用于解决如上所述的现有技术中存在的问题，以提供一种不含有有机溶 齐U、活体适合性优异，并且仅使用生物可降解的高分子而能够进行静脉注射、皮下/肌肉注射的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，以及其制备方法和用于与放射性疗法联用的抗癌组合物作为技术问题。技术方案为了解决上述技术问题，本发明提供一种含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物。其特征为，所述含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物包含i)由亲水性嵌段(A)与疏水性嵌段(B)构成的A-B型双嵌段共聚物；ii )末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐；以及iii)作为活性成分的雷帕霉素；在此，所述A-B型双嵌段共聚物与聚乳酸或其衍生物的碱金属盐所形成的胶束的内部包封有雷帕霉素。另一方面，本发明提供一种含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物的制备方法，所述含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物的制备方法包括下列步骤(a)将(i)由亲水性嵌段(A)与疏水性嵌段(B)构成的A-B型双嵌段共聚物、(ii)末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐、以及(iii)作为活性成分的雷帕霉素在有机溶剂中进行增容；(b)从上述步骤(a)的产物中去除有机溶剂；以及(C)在上述步骤(b)的产物中加入水性介质。再一方面，本发明提供一种用于与放射性疗法联用的抗癌组合物，所述用于与放射性疗法联用的抗癌组合物包含(i)由亲水性嵌段(A)与疏水性嵌段(B)构成的A-B型双嵌段共聚物；(ii)末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐；以及(iii)作为活性成分的雷帕霉素。在此，所述A-B型双嵌段共聚物与聚乳酸或其衍生物的碱金属盐所形成的纳米粒子的内部包封有雷帕霉素。发明效果上述注射剂型组合物可提供干燥后在水溶液中重构时，雷帕霉素的溶解度为0. lmg/mL以上的注射液。根据本发明，雷帕霉素的溶解度可以为0. lmg/mL以上，不含有有机溶剂，活体适合性优异，并且仅使用生物可降解的高分子，从而能够获得能够进行静脉注射、皮下/肌肉注射的雷帕霉素注射剂组合物，并且将本发明的组合物与放射线疗法联用，可期待显著提高抗癌功效的效果。本发明的含雷帕霉素注射剂型组合物可以根据协同作用来使放射线照射效果最大化，从而能够减少放射线治疗时引起的毒性。此外，雷帕霉素作为不仅对放射线有增敏作用，而且具有免疫抑制作用等有力的药理活性的药物，是具有严重副作用的药物之一，此夕卜，由于不溶于水，需要使用增溶剂进行制剂化。目前，用于注射剂的增溶剂为表面活性剂，大部分具有过敏反应等毒性，但本发明的含雷帕霉素注射剂型组合物不仅不会引起增溶剂的毒性，而且使雷帕霉素的用量最小化，从而减少副作用，同时能够最大程度地发挥放射线的增敏作用。
图I为根据制备例I的D，L-PLA-COONa的NMR光谱。 图2为根据制备例2的mPEG-PLA的NMR光谱。图3为表示实验例I获得的含雷帕霉素的高分子纳米粒子的体内动态评价的图表。
图4为表示实验例2获得的含雷帕霉素的高分子纳米粒子组合物的放射线增敏作用实验结果的图表。图5为表示实验例3获得的含雷帕霉素的高分子纳米粒子在试管内的抗癌活性实验的结果的图表。图6为表示实验例4获得的含雷帕霉素的高分子纳米粒子的体内动态实验结果的图表。图7为表示实验例5获得的含雷帕霉素的高分子纳米粒子在动物模型中的抗癌功效实验结果的图表。图8为表示实验例6获得的含雷帕霉素的高分子纳米粒子在动物模型中的放射线增敏作用实验结果的图表。
具体实施例方式下面，对本发明进行更详细的说明。本发明中的术语“雷帕霉素”包括雷帕霉素、其衍生物或类似物，以及它们在制药上允许的盐。雷帕霉素的衍生物或类似物具体包括苯甲酰雷帕霉素、依维莫司、替西罗莫司、吡美莫司、白欧利莫斯(bi olimus)等，但不限于这些。此外，术语“纳米粒子”为粒径在纳米级的粒子的总称的概念，包括胶束、混合胶束、纳米囊或纳米球等，其大小不局限于这些，例如可以具有f500nm的粒径。本发明的所述两亲性双嵌段共聚物(i)为由亲水性嵌段(A)与疏水性嵌段(B)构成的A-B型双嵌段共聚物，所述亲水性嵌段(A)为聚乙二醇，所述疏水性嵌段(B)为聚乳酸或其衍生物。所述亲水性嵌段(A)的聚乙二醇可以是聚乙二醇、甲氧基聚乙二醇等，但不限于这些。具体为甲氧基聚乙二醇。所述亲水性嵌段(A)的数均分子量优选为50(T20000道尔顿，更优选为100(Tl0000道尔顿，最优选为100(T5000道尔顿。亲水性嵌段(A)的数均分子量不足500道尔顿时，则亲水性部分与疏水性部分相比要小，从而有可能使本发明的组合物不溶于水，如果超过20000道尔顿时，则亲水性部分太大，从而难以形成胶束。此外，以双嵌段共聚物整体100重量％为基准，所述双嵌段共聚物内的亲水性嵌段(A)的含量优选为4(T70重量％，更优选为5(T65重量％，这样有利于能够稳定维持两亲性双嵌段共聚物的胶束。上述疏水性嵌段(B)的聚乳酸或其衍生物例如可以为选自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己内酯、聚二氧六环-2-酮、聚氨基酸、聚原酸酯、聚酸酐及它们的共聚物中的一种以上。更具体地，可以是聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己内酯或聚二氧六环-2-酮。根据本发明的一个具体例，所述疏水性嵌段(B )的聚乳酸或其衍生物可以为选自聚乳酸、聚丙交酯、聚己内酯、乳酸与扁桃酸的共聚物、乳酸与乙醇酸的共聚物、乳酸与己内酯的共聚物及乳酸与1，4_ 二氧六环-2酮的共聚物中的一种以上。所述疏水性嵌段(B)的数均分子量优选为50(Tl0000道尔顿，更优选为50(T5000道尔顿。疏水性嵌段(B)的数均分子量不足500道尔顿时，则亲水性部分大，有可能存在不形成胶束的问题，如果超过10000道尔顿时，则疏水性部分变大，有可能存在组合物不在水中增溶的问题。此外，以双嵌段共聚物整体100重量％为基准，所述两亲性双嵌段共聚物内的疏水性嵌段(B)的含 量优选为3(T60重量％，更优选为35 50重量％，这样有利于能够稳定维持两亲性双嵌段共 聚物的胶束。
本发明的末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐具有使含有药物的胶束内芯的内部变硬，从而提高药物的包封率的作用。所述末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物可以使用选自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己内酯、聚酸酐及它们的共聚物中的一种以上。更具体地，所述聚乳酸或其衍生物为聚丙交酯、聚乙交酯、聚己内酯或它们的共聚物。根据本发明的一个优选具体例，所述聚乳酸或其衍生物可以为选自聚乳酸、乳酸与扁桃酸的共聚物、乳酸与乙醇酸的共聚物，以及乳酸与己内酯的共聚物中的一种以上。本发明的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐是指如上所述的聚乳酸或其衍生物的末端羧酸阴离子与碱金属离子通过离子结合而结合的形态。所述碱金属优选为选自钠、钾及锂中的一种以上的I价金属，更优选为钠。此外，对于所述聚乳酸或其衍生物的碱金属盐，与碱金属离子进行离子结合的羧基相反侧末端可以取代为选自羟基、乙酰氧基、苯甲酰氧基、癸酰氧基、棕榈酰氧基以及烷氧基中的一种以上。具体地，本发明的末端至少含有一个羧基的聚乳酸碱金属盐可由下述化学式I表示化学式I
权利要求
1.一种含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，所述含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物包含 i)由亲水性嵌段(A)与疏水性嵌段(B)构成的A-B型双嵌段共聚物； ii)末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐；以及 iii)作为活性成分的雷帕霉素； 在此，所述A-B型双嵌段共聚物与聚乳酸或其衍生物的碱金属盐所形成的胶束的内部包封有雷帕霉素。
2.根据权利要求I所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在 于，所述双嵌段共聚物的亲水性嵌段(A)的数均分子量为50(T20000道尔顿、所述疏水性嵌段(B)的数均分子量为50(Tl0000道尔顿，以双嵌段共聚物整体100重量％为基准，双嵌段共聚物内的亲水性嵌段(A)的含量为4(T70重量％。
3.根据权利要求I所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，所述亲水性嵌段(A)为聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇，所述疏水性嵌段(B)选自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己内酯、聚二氧六环-2-酮、聚氨基酸、聚原酸酯、聚酸酐及它们的共聚物中的一种以上。
4.根据权利要求I所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物选自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己内酯、聚酸酐及它们的共聚物中的一种以上，其数均分子量为50(T2500道尔顿。
5.根据权利要求I所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，所述碱金属选自钠、钾及锂中的一种以上的I价金属。
6.根据权利要求I所述的雷帕霉素高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，还包含2价或3价的金属离子。
7.根据权利要求6所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，所述2价或3价的金属离子选自钙、镁、钡、铬、铁、锰、镍、铜、锌及铝的金属的2价或3价阳离子。
8.根据权利要求I所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，A-B型双嵌段共聚物与末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐的重量比为9:1 3:7。
9.根据权利要求I所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，其特征在于，雷帕霉素的浓度重构为0. f25mg/mL。
10.一种含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物的制备方法，所述含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物的制备方法包括下列步骤 a)将i)由亲水性嵌段(A)与疏水性嵌段(B)构成的A-B型双嵌段共聚物、ii)末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐，以及iii)作为活性成分的雷帕霉素在有机溶剂中进行增容； b)从上述步骤a)的产物中去除有机溶剂；以及 c)在上述步骤b)的产物中加入水性介质。
11.根据权利要求10所述的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物的制备方法，其特征在于，在所述步骤c)之后，还包括在其产物中添加2价或3价金属离子的步骤(C-1)。
12.一种用于与放射性疗法联用的抗癌组合物，所述用于与放射性疗法联用的抗癌组合物包含 i)由亲水性嵌段(A)与疏水性嵌段(B)构成的A-B型双嵌段共聚物； ii)末端至少含有一个羧基的聚乳酸或其衍生物的碱金属盐；以及 iii)作为活性成分的雷帕霉素； 在此，所述A-B型双嵌段共聚物与聚乳酸或其衍生物的碱金属盐所形成的纳米粒子的内部包封有雷帕霉素。
13.根据权利要求12所述的用于与放射性疗法联用的抗癌组合物，其特征在于，还包含2价或3价的金属离子。
14.根据权利要求12所述的用于与放射性疗法联用的抗癌组合物，其特征在于，在放射性照射前I分钟 7天前给药。
15.根据权利要求12所述的用于与放射性疗法联用的抗癌组合物，其特征在于，其用于经过4 12周的期间、每周并行实施f 5次化学疗法与放射线疗法的联用疗法。
16.—种哺乳动物癌细胞的放射线治疗方法，其特征在于，对哺乳动物的癌细胞进行放射线照射时，在照射前或照射后，给药权利要求I至权利要求9中任意一项的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物，从而增进对哺乳动物癌细胞的放射线治疗的敏感性。
全文摘要
本发明涉及具有提升的水溶解度的含雷帕霉素的高分子纳米粒子注射剂型组合物。更详细地，涉及通过将水溶解度低的雷帕霉素增容成高分子纳米粒子而提升水溶解度的含雷帕霉素的注射剂型组合物及其制备方法，以及用于与放射线疗法联用的抗癌组合物。
文档编号A61P35/00GK102740834SQ201080060367
公开日2012年10月17日 申请日期2010年12月29日 优先权日2009年12月30日
发明者姜惠媛, 崔恩卿, 徐敏孝, 李思元, 禹汉娜, 郑盛允, 金峰五 申请人:株式会社三养生物制药