专利名称：一种鲜三七提取物及其制备方法和其药用制剂的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体地，涉及一种鲜三七提取物，以其为活性成分的 药用制剂，从鲜三七提取三七总皂苷的方法。
背景技术：
三七Panax notoginseng(Buck)F. H. Chen为五加科人参属植物，有“金不换”、 “南国神草”等美誉，是我国名贵中药材，也是云南独具特色的中药材资源，主产云南文山。 文山以其特殊自然条件优势，成为传统中药三七种植的原产地，其产量占全国总产量的 90%以上。国内外的专家学者对三七的化学成分进行了较为系统的研究，目前已经从三七根 中分离到多种达玛烷型三萜皂苷，即人参皂苷(ginsenoside) Rb1, Rb2i, Re、Rd、Rg1, Re、、 Rg2^Rh1,Rg3>20- (0)-葡萄糖人参皂苷 Rfj1Ja3,三七皂苷(notoginsenoside)礼、&、1 3、 R4> R6、R8、R9、A、B、C、D、E、G、H、I、J、K、L、M、0、P、Q、L、S、T，胶股兰皂苷(gypenoside) XVII。加上三七其它部位分离得到的化合物，三七中已经分离得到的皂苷类化合物达到了 70余种。但其主要成分仍为三七总皂苷，包括三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参 皂苷Rb1、人参皂苷Rd，在三七主根中R1+ Rg1+ Rb1 > 5%，而三七芦头中R1+ Rg1+ Rb1三者 含量之和大于10%。三七生产中常见的提取总皂苷的方法有冷浸法、醇回流、水提法；所用溶剂为乙 醇、水；所用原料均为干品原料。三七中淀粉含量达到70%左右，一般不宜采用水或低浓度 乙醇提取，以免糊化。因此醇回流提取是本方法的最佳选择。传统三七提取均采用干品进 行提取。多采用60%或70%的乙醇进行提取，但由于提取过程中工艺参数选择的不同，会直 接造成三七总皂苷有效成分种类及含量差别很大。干品含水量按我国药典要求，须小于等 于14%。鲜三七皂苷含量高于干品三七约20%，而鲜品三七含水量70%左右。因此，用鲜三七 为原料提取活性成分较之用干品作原料是一个较为理想的选择。
发明内容
本发明的目的是提供一种用鲜三七为原料提取的皂苷含量高的三七提取物。本发明的另一目的是提供一种用鲜三七为原料制备三七提取物的方法。本发明的再一目的是提供一种由鲜三七提取的提取物制成的药物制剂。为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案
鲜三七提取物，其含有三七皂苷札4 10%、人参皂苷Rgl23 36%、人参皂苷Re2 5%、 人参皂苷1^27 39%、人参皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、 人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的65 95%。优选的三七提取物，其含有三七皂苷R1 4 7%、人参皂苷23 30%、人参皂苷 Re 2 3. S^KASS-Rb1 27 35%、人参皂苷Rd 4 7%，其中三七皂苷R1、人参皂苷Rgl、 人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的65 85%。
更优选的三七提取物，其含有三七皂苷R1 7 8%、人参皂苷Rg1 27 34%、人参 皂苷Re 3 4%、人参皂苷Md1 33 36%、人参皂苷Rd 6 8%，其中三七皂苷R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的80 90%。本发明同时提供鲜三七提取物，其含有三七皂苷礼4 10%、人参皂苷Rgl23 36%、人参皂苷Re2 5%、人参皂苷1^27 39%、人参皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人 参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的65 95%，由下述方法提取而 得
采用鲜三七为原料，先将三七主根或芦头破碎成6-10mm的颗粒或切成厚度在l_3mm的 薄片，用6-8倍量的70% 95%乙醇经热回流循环提取6-10个小时，放置过滤，收集滤液 减压浓缩，并经大孔吸附树脂柱吸附，然后用70-80%乙醇洗脱，洗脱液脱色后减压浓缩，干
燥以上所述的各组分的百分数均为重量百分数。本发明另外提供了制备上述任意一项所述的鲜三七提取物的方法采用鲜三七主 根或三七剪口为原料，先将三七主根或芦头破碎成6-10mm的颗粒或切成厚度在l_3mm的薄 片，用6-8倍量的70% 95%乙醇经热回流循环提取6-10个小时，放置过滤，收集滤液减压 浓缩，并经大孔吸附树脂柱吸附，然后用70-80%乙醇洗脱，洗脱液脱色后减压浓缩，干燥。所述的方法中大孔吸附树脂采用DlOl大孔树脂；脱色采用D941树脂和药用炭两 步脱色；浓缩采用单效浓缩器。本发明更具体的方法可描述为
(1)取新鲜三七主根或芦头破碎成粗粉6-10mm的颗粒或切成厚度在l_3mm的薄片， 用6-8倍量70% 95%乙醇热回流循环提取6-10小时，回收乙醇至无醇味，加水稀释成 0. 20-0. 30g生药/ml，混勻，沉淀12-18小时，离心去除杂质，过滤；
(2)所述(1)步骤所得滤液以流速为1.0-1. 4BV/H的流速经DlOl大孔树脂吸附，然后 用树脂体积1-4倍量的纯化水过柱除去杂质，流速2-4BV/h，弃去水液，用70-80%的乙醇溶 液3-5倍量以流速2-4BV/h的速度洗脱收集液脱液，至TLC检测无皂苷流出为止；
(3)再将(2)步骤所得洗脱液以流速为6升至9升/min的流速过D941树脂脱色，洗脱 液上完后，加入树脂1-3倍量70-80%的乙醇以相同流速冲洗树脂柱，至TLC检测无皂苷流 出为止，合并初流液和洗脱液；
(4)在(3)步骤后加入生药重量4-6%的药用炭于45 55°C保温脱色30 40分钟，在 此温度下过滤除炭，减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1. 20，离心，去除不溶物， 最后减压干燥。本发明还提供了由本发明的三七提取物制成的药用制剂，所述药用制剂为注射 液、冻干粉针剂、输液剂、胶囊剂、颗粒剂或片剂。目前，三七总皂苷的常规提取方法为干品药材冷浸和乙醇回流提取、水提取，再经 吸附树脂富集总皂苷成分，且吸附树脂富集的成分多为含量较高的三七皂苷R1，人参皂苷 Rgl，人参皂苷Re，人参皂苷Rbl和人参皂苷Rd;本发明方法应用了鲜三七原料，同时对提取 溶剂进行优化，使得提取的三七总皂苷成分纯度高，提取得率更高。因此鲜品提取法是本方 法的优势所在。本发明三七提取物可根据本领域熟知的制备方法，由三七提取物、或三七提取物
5和药用辅料制成不同药用制剂，比如注射液、冻干粉针剂、输液剂、胶囊剂、颗粒剂或片剂。所述药用辅料为氯化钠、葡萄糖、淀粉、糊精、蔗糖、滑石粉、硬脂酸镁。本发明采用高效液相色谱仪，以乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱的方法对三七 提取物及制剂中的成分进行鉴别检测，5分钟后的色谱峰，以三七总皂苷对照提取物的主要 色谱峰校正，三七提取物及其制剂的相似度在0. 95以上。具体说来，本发明采用高效液相色谱仪，以乙腈和水溶液作为流动相进行梯度洗 脱的方法对三七提取及其制剂中皂苷成分进行HPLC鉴别检测，各成分的出峰顺序依次为 三七皂苷Rl，人参皂苷Rgl，人参皂苷Re，人参皂苷Rbl和人参皂苷Rd。综上，与现有技术相比，本发明的鲜三七提取物及其制剂及其提取方法具有以下 优点
1、鲜三七提取物纯度高、颜色浅、杂质少。2、经本发明方法制备的鲜三七提取物比传统方法得率高1-2%。3、经过本发明方法制备而得的鲜三七提取物得率、含量及制剂的含量明显高于常 规方法制备的样品，总皂苷含量可提升10 25%。4、经过本发明方法制备而得的鲜三七提取物含量提升的同时，杂质成分相应减 少。以电感耦合等离子体质谱仪对三七提取物中无机元素进行测定，结果，重金属及有害 元素含量小于0. 0007%。；以气相色谱仪对三七提取物中的大孔吸附树脂有机残留物进行检 测，结果，未检测出正已烷、苯、甲苯、对二甲苯，邻二甲苯、苯乙烯、1，2-二乙基苯和二乙烯苯。5、通过降压物质检查、过敏检查、异常毒性检查、热原检查、溶血与凝聚检查、刺激 试验等结果，表明由本三七提取物制备的制剂安全性更高。
具体实施例方式
下面用本发明的试验例来说明本发明的优异效果 试验例1
本发明用鲜三七为原料提取三七提取物的最佳工艺选择试验 1、乙醇浓度选择用破碎机把鲜三七根茎破碎成6-10mm的鲜颗粒，选择三因素四水平 实验来考察热回流提取时间(h)，乙醇的用量(倍)，乙醇的浓度(％)作为考察因素，以干浸膏 提取率和五个单体皂苷含量(Rl、Rgl、 Rbl、 Re、Rd) %为考察指标，选用(34)正交表进行试 验。因素水平安排见下表。
权利要求
1.鲜三七提取物，其特征在于其含有三七皂苷礼4 10%、人参皂苷Rgl23 36%、人参 皂苷Re2 5%、人参皂苷Rbp 39%、人参皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的65 95%。
2.根据权利要求1所述的三七提取物，其特征在于其含有三七皂苷R14 7%、人参皂 苷23 30%、人参皂苷Re 2 3. 5%、人参皂苷Rb1 27 ；35%、人参皂苷Rd 4 7%，其 中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的65 85%。
3.根据权利要求1所述的三七提取物，其特征在于其含有三七皂苷R17 8%、人参皂 苷收27 ；34%、人参皂苷Re 3 A^KASS-Rb1 33 36%、人参皂苷Rd 6 8%，其中 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的80 90%。
4.鲜三七提取物，其特征在于其含有三七皂苷礼4 10%、人参皂苷Rgl23 36%、人参 皂苷Re2 5%、人参皂苷Rbp 39%、人参皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的65 95%，由下述方法提取而得采用鲜三七为原料，先将三七主根或芦头破碎成6-10mm的颗粒或切成厚度在l_3mm的 薄片，用6-8倍量的70% 95%乙醇经热回流循环提取6-10个小时，放置过滤，收集滤液 减压浓缩，并经大孔吸附树脂柱吸附，然后用70-80%乙醇洗脱，洗脱液脱色后减压浓缩，干
5.制备权利要求1-4任意一项所述的鲜三七提取物的方法，其特征在于，采用鲜三七 主根或三七剪口为原料，先将三七主根或芦头破碎成6-10mm的颗粒或切成厚度在l_3mm的 薄片，用6-8倍量的70% 95%乙醇经热回流循环提取6-10个小时，放置过滤，收集滤液 减压浓缩，并经大孔吸附树脂柱吸附，然后用70-80%乙醇洗脱，洗脱液脱色后减压浓缩，干O
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂采用DlOl大孔树脂。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述脱色采用D941树脂和药用炭两步脱色。
8.根据权利要求5-7任一项所述的方法，其特征在于，所述浓缩采用单效浓缩器。
9.根据权利要求5-7任一项所述的方法，其特征在于(1)取新鲜三七主根或芦头破碎成粗粉6-10mm的颗粒或切成厚度在l_3mm的薄片， 用6-8倍量70% 95%乙醇热回流循环提取6-10小时，回收乙醇至无醇味，加水稀释成 0. 20-0. 30g生药/ml，混勻，沉淀12-18小时，离心去除杂质，过滤；(2)所述(1)步骤所得滤液以流速为1.0-1. 4BV/H的流速经DlOl大孔树脂吸附，然后 用树脂体积1-4倍量的纯化水过柱除去杂质，流速2-4BV/h，弃去水液，用70-80%的乙醇溶 液3-5倍量以流速2-4BV/h的速度洗脱收集液脱液，至TLC检测无皂苷流出为止；(3)再将(2)步骤所得洗脱液以流速为6升至9升/min的流速过D941树脂脱色，洗脱 液上完后，加入树脂1-3倍量70-80%的乙醇以相同流速冲洗树脂柱，至TLC检测无皂苷流 出为止，合并初流液和洗脱液；(4)在(3)步骤后加入生药重量4-6%的药用炭于45 55°C保温脱色30 40分钟，在 此温度下过滤除炭，减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05-1. 20，离心，去除不溶物， 最后减压干燥。
10.由权利要求1或2或3或4所述的三七提取物制成的药用制剂，所述药用制剂为注射液、冻干粉针剂、输液剂、胶囊剂、颗粒剂或片剂。
全文摘要
用鲜三七为原料提取的三七提取物，该三七提取物的制备方法，以本发明三七提取物为活性成分制备的药用制剂。本发明的三七提取物含有三七皂苷R14～10%、人参皂苷Rg123～36%、人参皂苷Re2～5%、人参皂苷Rb127～39%、人参皂苷Rd3～10%，其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd占总量的65～95%。本发明的方法制备的三七提取物杂质少，总皂苷成分纯度高，以三七提取物为活性成分制备的药用制剂疗效好，安全性高。
文档编号A61K36/258GK102145034SQ201110093879
公开日2011年8月10日 申请日期2011年4月14日 优先权日2011年4月14日
发明者崔秀明, 赵爱, 高明菊 申请人:云南文山七丹药业股份有限公司, 文山三七研究院