一种由大黄制成的治疗神经系统疾病的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明属于中药领域，为一种由大黄制成的治疗神经系统疾病的药物组合物，具体涉及一种治疗帕金森病的药物组合物。该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：大黄1～3，秦艽1～3，绒毛桢楠1～3。该药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。该药物组合物可用于制备治疗帕金森病的药物。
【专利说明】[0001] 一种由大黄制成的治疗神经系统疾病的药物组合物
【技术领域】
[0002] 本发明属于中药领域，涉及一种由大黄、秦艽、绒毛桢楠组成的具有治疗帕金森病 作用的药物组合物。
[0003]
【背景技术】
[0004] 帕金森病（Parkinson' s disease，PD)是一种常见的神经系统变性疾病，老年人多 见，平均发病年龄为60岁左右，40岁以下起病的青年帕金森病较少见。我国65岁以上人 群ro的患病率大约是1. 7%。大部分帕金森病患者为散发病例，仅有不到10%的患者有家族 史。帕金森病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺（dopamine, DA)能神经元的变性死亡， 由此而引起纹状体DA含量显著性减少而致病。导致这一病理改变的确切病因目前仍不清 楚，遗传因素、环境因素、年龄老化、氧化应激等均可能参与ro多巴胺能神经元的变性死亡 过程。
[0005] 帕金森50%?80%的病例起病隐袭，首发症状通常是一侧手部的4?8Hz的静止 性"捻丸样"震颤。这种震颤在肢体静止时最为显著，在肢体执行活动时减弱，在睡眠中消 失；情绪紧张或疲劳能使震颤加重，通常震颤在双手，双臂与双腿最为严重，症状出现的先 后顺序也是手部最早，腿部最迟，下颌、舌头、前额与眼睑也能出现震颤，但发声不受影响， 许多病人只表现僵直；帕金森病患者出现震颤，僵直进展性加重，动作变得愈来愈慢(动作 缓慢)，愈来愈少(动作过少)，愈来愈难发动(动作缺失)。僵直再加上动作过少可能促成肌 肉酸痛与疲乏的感觉。面无表情，成为面具脸，口常张开，眨眼减少，可能造成与抑郁症相 混淆，躯体姿势前屈。病人发现开步很困难；步态拖曳，步距缩小，两上肢齐腰呈固定屈曲 位，行走时两上肢没有自然的摆动，步态可以出现并非有意的加速，病人为了避免跌倒而转 入奔走，出现慌张步态。由于姿势反射的丧失，病人身体的重心可发生移位而出现前冲或后 冲。讲话声音减弱，出现特征性的单调而带口吃状的呐吃。动作过少加上对远端肌肉控制 的障碍可引起写字过小症以及执行日常生活活动时日益加重的困难，大约50%的病例有痴 呆症状，而且抑郁症也属常见。
[0006] 帕金森病的起病缓慢，早期症状并不十分明显，且存在个体差异，一般分以下四种 情况： (1)静止性震颤：震颤往往是发病最早期的表现，通常会出现单侧手指搓丸样运动，其 后会发展为同侧下肢和对侧肢体在静止时出现不自主的有节律颤抖，早期在变换位置或运 动时，症状可减轻或停止。震颤会随情绪变化而加剧。
[0007] (2)肌强直：早期多从单侧肢体开始，患者感觉关节僵硬及肌肉发紧。影响到面肌 时，会出现表情呆板的"面具脸"；影响到躯干、四肢及髋膝关节呈特殊的屈曲姿势。
[0008] (3)运动迟缓：早期患者上肢的精细动作变慢，如系鞋带、扣纽扣等动作比以前缓 慢许多，甚至无法顺利完成。写字也逐渐变得困难，笔迹弯曲，越写越小，称为"小写症"。
[0009] (4)姿势和步态异常：由于四肢、躯干、颈部肌肉强直使患者站立时呈现特殊屈曲 的姿势，头前倾，躯干腹屈，肘关节屈曲，腕关节伸直，前部内收，髋和膝关节略弯曲。行走时 起步困难，一旦开步，身体前倾，步伐小而越走越快，不能及时停步，即"慌张步态"。行进中， 患侧上肢的协同摆动减少以至消失；转身困难，以致要用连续数个小碎步才可。
[0010] 此外，有时患者还会合并出现语言减少和声音低沉单调、吞咽困难、流涎、睡眠障 碍、抑郁或痴呆等症状。
[0011] 本发明提供了一种治疗帕金森病的药物组合物，研究表明该组合物对帕金森病具 有较好的治疗效果。
【发明内容】
[0012] 本发明的目的是提供一种治疗帕金森病的药物组合物。
[0013] 本发明的另一目的是提供药物组合物的制备方法。
[0014] 本发明的还提供该药物组合物在制备治疗帕金森病以及老年痴呆药物中的应用。
[0015] 本发明的目的是通过以下方式实现的： 一种治疗帕金森病的药物组合物，是由以下重量份的原料制成的：大黄1?3,秦艽 1?3,绒毛桢楠1?3。
[0016] 所述药物组合物优选是由以下重量份的原料制成的：大黄1，秦艽2,绒毛桢楠3。 [0017] 所述药物组合物优选是由以下重量份的原料制成的：大黄2,秦艽3,绒毛桢楠2。 [0018] 所述药物组合物优选是由以下重量份的原料制成的：大黄3,秦艽1，绒毛桢楠1。 [0019] 所述药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成口服制剂。
[0020] 所述药物组合物制备成的口服制剂为片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。
[0021] 所述药物组合物优选采用如下方法制备：取大黄、秦艽、绒毛桢楠，混合，加入5? 10倍量的水煎煮2?4次，每次0. 5?2小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细 粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。
[0022] 所述药物组合物可用于制备治疗帕金森病的药物。
[0023] 所述药物组合物还可用于制备治疗老年痴呆症的药物。
[0024] 本发明所述的药物组合物中的大黄，为寥科大黄属植物掌叶大黄、唐古特大黄或 药用大黄的根茎及根。掌叶大黄，Rheum. palmatumL·，多年生高大草本。根茎粗壮。茎直 立，1? 2米左右，中空，光滑无毛。基生叶大，有粗壮的肉质长柄，约与叶片等长；叶片宽心形 或近厘巡，径达40cm以上，3?7掌状深裂，每裂片常再羽状分裂，上面流生乳头状小突起， 下面有柔毛；茎生叶较小，有短柄；托叶鞘筒状，密生短柔毛。花序大圆锥状，顶生；花梗纤 细，中下部有关节。花紫红色或带红紫色；花被片6,长约1. 5_，成2轮；雄蕊9 ;花柱3。瘦 果有3棱，沿棱生翅，顶端微凹陷，基部近心形，暗褐色。花期6?7月，果期7?8月。生 于山地林缘或草坡，喜欢阴湿的环境，野生或栽培。分布于陕西、甘肃东南部、青海、四川西 部、云南西北部及西藏东部。唐古特大黄，R.palmatumL. Var.tanguticumMaxim. exRegel. [R.tanguticumMaxin. Ex. Balf·]，多年生高大草本，高2米左右。莖无毛或有毛。根生叶 略呈圆形或宽心形，直径40?70厘米，3?7掌状深裂，裂片狭长，常再作羽状浅裂，先端锐 尖，基部心形；茎生叶较小，柄亦较短。圆锥花序大形，幼时多呈浓紫色，亦有绿白色者，分枝 紧密，小枝挺直向上；花小，具较长花梗；花被6, 2轮；雄蕊一般9枚；子房三角形，花柱3。 瘦果三角形，有翅，顶端圆或微凹，基部心形。花期6?7月。果期7?8月。本种与掌叶 大黄极相似，主要区别为：叶片深裂，裂片常呈三角状披针形或狭线形，裂片窄长。花序分枝 紧密，向上直立，紧贴干茎。生于山地林缘较阴湿的地方。分布于四川、西藏东北部、甘肃、 青海。药用大黄，R. officinale Bail 1.，本种与上2种的主要不同点是：基生叶5浅裂，浅裂 片呈大齿形或宽三角形；托叶鞘膜质，较透明，上有短毛。花较大，淡黄绿色，花蕾椭圆形，果 枝开展，翅果边缘不透明。生于山地林缘或草坡。分布于河南系部、湖北西部、四川、贵州、 云南、陕西、甘肃等地。性味：苦，寒。功效：攻积滞；清湿热；泻火；凉血；祛瘀；解毒。主治： 实热便秘；热结胸痞；湿热泻痢；黄疸；淋病冰肿腹满；小便不利；目赤；咽喉肿痛；口舌生 疮；胃热呕吐；吐血；咯血；衄血；便血；尿血；蓄血；经闭；产后瘀滞腹痛；症瘕积聚；跌打 损伤；热毒痈瘍；丹毒;烫伤。
[0025] 本发明所述的药物组合物中的秦艽，为龙胆科龙胆属植物秦艽、粗茎秦艽、麻花 究、或达乌里秦究的干燥根。秦究，Gentiana macrophylla Pall.，多年生草本，高20?60 厘米。主根粗长，圆柱形，上粗下细，扭曲不直，有少数分枝，中部多呈罗纹状；根茎部有许 多纤维状残存基叶。茎直立或斜上，圆柱形，光滑无毛。基生叶多丛生，无柄，叶披针形或长 圆状披针形，长达40厘米，宽3?5厘米，先端尖，全缘，主脉5条；茎生叶3?4对，对生， 基部连合。花多集成顶生及茎上部腋生的轮伞花序；花萼管一侧裂开过半，萼齿浅；花冠筒 状，深蓝紫色，长约2厘米，先端5裂，裂片间有5片短小褶片；雄蕊5,着生于花冠管中部；子 房长圆状，无柄。蒴果长圆形或椭圆形。种子椭圆形，褐色，无翅，有光泽。花期7?9月。 果期8?10月。生于草地及湿坡上。分布黑龙江、辽宁、内蒙古、河北、山西、陕西、河南、宁 夏、甘肃、青海、新疆及四川等地。粗莖秦究，G. crassicaulis Duthie ex Burk.，与上种相 似，高20?40厘米。主根茎粗大，大部或全部分裂为小根，相互缠绕扭结一起。叶片较大， 窄椭圆形或椭圆状披针形。花茎粗壮而短，稍倾斜，花多数，在茎顶簇生呈头状，稀腋生作 轮状；花萼管仅于顶端一侧开裂，萼齿极浅或无；花冠壶状，黄色或蓝紫色，长约3厘米，裂 片先端微尖，内部有斑点；雄蕊5;子房长圆形，有柄。蒴果内藏，长圆形，无柄。花期6?9 月，果期9?10月。生于海拔2100?4500米的高山草甸、山坡草地、灌丛及林缘。分布于 四川、贵州、云南、西藏、甘肃、青海。麻花究，G. straminea Maxim·，与上种相似，高10?20 厘米。基生叶多丛生，无柄，叶片较大，披针形；茎生叶对生，较小。花较少成聚伞花序，有长 梗；花萼筒黄绿色，膜质，一侧开裂，萼齿2?5 ;花冠管状，黄色，漏斗形，先端5裂，裂片卵 圆形；雄蕊5,着生于花冠管中下部；子房上位，1室，有2个侧膜胎座。蒴果，开裂为2个果 瓣，椭圆状披针形。种子褐色，有光泽，狭长圆形。花期7?9月。果期8?10月。生于海 拔2000?5000米的高山、草甸、溪边。分布于湖北、四川、西藏、甘肃、青海、宁夏。达乌里 秦究，G. dahurica Fisch.,与上一种相似，根单一或稍分枝，向左扭转，细长圆柱形，直径不 足1厘米。叶片长窄披针形，无柄；茎生叶较小，对生，无柄，线状披针形至线形。花常较多 或1?3朵，顶生，成轮伞花序；花萼管部通常不开裂；裂片5,不整齐，线形，先端渐尖；花冠 深蓝色；雄蕊5,花丝线状钻形；子房长圆形，无柄，花柱线形，柱头2裂。蒴果椭圆形。种子 淡褐色，有光泽。花期7?8月，果期9?10月。生于海拔800?4500米的田埂、路旁、河 滩沙地、向阳山坡草地及干草原等地。分布于华北、东北、西北、四川等地。性味：辛、苦，微 寒。功能：袪风湿，舒筋络，清虚热，退黄。主治：风湿痹痛，篮胝拘挛，骨节酸痛，日晡潮热， 小儿疳积发热。
[0026] 本发明所述的药物组合物中的绒毛桢楠，为樟科桢楠属植物绒毛桢楠的根或叶。 绒毛桢楠 ，Machilus velutina Champ, ex Benth.，乔木，高可汰18m。枝、芽、叶下面和花序 均密被锈色绒毛。叶互生；叶柄长1?2. 5cm ;叶片倒卵形、卵状长圆形或狭倒卵形，长5? 11 (?18)cm，宽2?5 (?5. 5)cm，先端渐狭或狭短渐尖，基部楔形，革质，上面有光泽。 圆锥花序单独顶生或数个密集于小枝顶端，近无总梗，分枝多，短，近似团伞花序；花两性， 黄绿色，有香味，被锈色绒毛；花被裂片6,排成2轮，内轮花被裂片长卵形，长约6mm，宽约 3mm，外轮的较小且较狭；能育雄蕊9,排成3轮，长约5mm，第3轮雄蕊花丝基部有绒毛；退 化雄蕊长约2_，有绒毛；子房淡红色。果球形，直径约4_，紫红色。花期10?12月，果期 次年2?3月。生于湿润的山谷溪旁杂木林中。分布于浙江、江西、福建、广东、广西等地。 性味：苦；辛；凉。功能主治：化痰止咳；消肿止痛；止血。主治：咳嗽痰多；痈疖疮肿；骨折； 烧烫伤；外伤出血。
[0027] 通过如下实验研究验证本发明的技术效果： 实验一：本发明复方大黄药物对帕金森小鼠影响的实验研究 帕金森病（Parkinson' s disease, PD)又名震颤麻搏。是一种常发于中老年人的慢性 神经系统变性疾病，主要病理变化是选择性中脑黑质多巴胺神经元丧失，纹状体多巴胺含 量显著性减少，导致锥体外系一系列症状。其特征是动作的缓慢与缺失，肌肉僵直，静止性 震颤和姿势不稳。近年来，项目组一直致力于PD的研究，用百草枯成功制备了昆明种小鼠 的ro模型，又提出了治疗ro的理论。本项研究就是观察本发明复方大黄药物对帕金森病 (Parkinson' sdisease，PD)小鼠的行为学、黑质脑区单胺类神经递质的含量的影响。验证 本发明复方大黄药物对ro (帕金森病）的疗效，并为临床上治疗帕金森病（PD)提供进一步 的依据。
[0028] 1材料与方法 1. 1材料 1. 1. 1动物昆明种雄性小鼠200只，体重35±3g，购自北京中医药大学实验动物中心。
[0029] 1. 1. 2 药物 (1) 百草枯（paraquat，PQ):购自山东侨昌化学有限公司； (2) 秋水仙碱（0. 5mg/片）：西双版纳药业有限公司； (3) 美多巴（250mg/片）：购自上海罗氏制药有限公司； (4) 本发明复方大黄药物：取干燥的大黄600g、秦艽200g、绒毛桢楠200g，加5000mL水 煎煮，煎煮2次，每次1小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，即得。
[0030] (5)大黄提取物：取干燥的大黄1000g，加5000mL水煎煮，煎煮2次，每次1小时， 提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，即得。
[0031] (6)秦艽提取物：取干燥的秦艽1000g，加5000mL水煎煮，煎煮2次，每次1小时， 提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，即得。
[0032] (7)绒毛桢楠提取物：取干燥的绒毛桢楠1000g，加5000mL水煎煮，煎煮2次，每次 1小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，即得。
[0033] (8)大黄与秦艽的提取物：取干燥的大黄750g、秦艽250g，加5000mL水煎煮，煎煮 2次，每次1小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，即得。
[0034] (9)大黄与绒毛桢楠的提取物：取干燥的大黄750g、绒毛桢楠250g，加5000mL水 煎煮，煎煮2次，每次1小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，即得。
[0035] (10)秦艽与绒毛桢楠的提取物：取干燥的秦艽500g、绒毛桢楠500g，加5000mL水 煎煮，煎煮2次，每次1小时，提取液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，即得。
[0036] 1. 1. 3试剂盐酸、酸性正丁醇、正庚烷、PBS液等自行配制；DAB试剂盒、TH抗体I 抗等购自武汉博士德生物有限公司。
[0037] 1. 1. 4仪器小鼠转棒测试机：浙江大学医学仪器实验厂；小鼠自主活动测试仪： 成都泰盟科技有限公司；荧光光度计：日本岛津。
[0038] 1. 2分组及造模方法取雄性7周龄昆明种小鼠200只，适应一周后随机分为10 组，每组20只。空白对照组：每天一次灌胃蒸馏水10mL · kg4小鼠体重，每周一次腹腔注 射生理盐水10mL · kg4小鼠体重；其余9组每周一次腹腔注射PQ :10mL · kg4小鼠体重，且 每天灌胃一次秋水仙碱，按成人给药量的4倍，即10mg 小鼠体重，持续7周造模给药。 此外，阳性对照组：每天灌胃一次美多巴，按照成人给药量的7. 5倍，即按125mg · kf1小鼠 体重的剂量给药，持续给药至造模后一周；本发明复方大黄药物组：每天灌胃一次本发明 复方大黄药物20g生药· kg<小鼠体重；大黄提取物组：每天灌胃一次大黄提取物20g生 药《kf1小鼠体重；秦艽提取物组：每天灌胃一次秦艽提取物20g生药小鼠体重；绒毛 桢楠组：每天灌胃一次绒毛桢楠提取物20g生药· kf1小鼠体重；大黄与秦艽的提取物组： 每天灌胃一次大黄与秦艽的提取物20g生药小鼠体重；大黄与绒毛桢楠的提取物组： 每天灌胃一次大黄与绒毛桢楠的提取物20g生药· kf1小鼠体重；秦艽与绒毛桢楠的提取 物组：每天灌胃一次秦艽与绒毛桢楠的提取物20g生药小鼠体重；均持续给药至造模 后一周。相同条件下饲养，观察小鼠的行为学改变，然后做小鼠黑质脑区单胺类神经递质的 含量检测[多巴胺（DA)、去甲肾上腺素（ΝΕ)、5-羟色胺（5-ΗΤ)]和脑组织的病理学检测。
[0039] 1. 3检测方法 1. 3. 1转棒实验正常小鼠具有攀爬能力，这需要适当的握力与运动协调性，采用转棒 实验来检测小鼠给予PQ后的运动功能障碍。停止给药一周后，将小鼠放于转棒测试仪上， 每次放10只，按每分钟20转的速度转动，记录小鼠3分钟内掉下来的次数。
[0040] 1.3.2自主活动测定停止给予PQ -周后，将小鼠放入自主活动测试仪的活动箱 中，每次同时测定10只小鼠，每个箱中1只小鼠，放入后让小鼠适应3分钟再开始测试，当 计算机进入测定程序后，由计算机自动记录小鼠10分钟内活动和站立的次数。
[0041] 1. 3. 3 DA、ΝΕ、5-ΤΗ含量的测定行为学检测完毕后，每组分别取10只小鼠做黑质 脑区单胺类神经递质含量测定。将小鼠断头取脑，称重后迅速保存在液氮中。测定时取出标 本置于匀浆器中，加入10倍的酸性正丁醇制成匀浆。手工震荡5分钟，置于台式离心机中以 2000r/min的速度离心20分钟，分别取上清液2. 5mL加入正庚烷5mL和0. 1Ν盐酸1. 2mL， 手工震荡5分钟，置于台式离心机中以2000r/min的速度离心10分钟，取下层水相后分别 测定04、呢、5-^。参照张更荣等（张更荣，范迪兴，朱建华，等.血清5-羟色胺、多巴胺的 同时提取和荧光分光光度测定法[J].临床检验杂志，1989,7 (1):13-14)提供方法测定与 相关的去甲肾上腺素（NE)、多巴胺（DA)及其5-羟色胺（5-TH)的含量。
[0042] 1. 3. 4黑质及纹状体的酪氨酸羟化酶（TH)染色每组取剩余的10只小鼠经10% 的水合氯醛腹腔注射麻醉后，破胸经心脏快速灌注生理盐水50mL (37°C )后灌注4%多聚甲 醛（4°C) 50mL。灌注时间各为20分钟。迅速断头取脑，置于30%蔗糖与4%多聚甲醛溶液 (4°C)后固定，静置过夜至组织下沉。取出标本后用恒温冰冻切片机（_20°C)连续切片，片 厚50 μ m。挑取黑质及纹状体部位切片放入0. 01M PBS液内待染。切片入0. 01M PBS液中浸 洗（lminX3)，入1N盐酸抗原修复30min ,用蒸馈水浸洗（1111；[11\3)，3%双氧水消除内源性 过氧化物酶的活性l0min，用蒸馏水浸洗（IminX 3)，0. 01M PBST浸洗（IminX 3)，入5%正常 羊血清封闭30min，倾去血清后不洗，直接加入适当稀释的TH抗体1抗（1% BSA-0. 01M PBST 稀释）室温过夜。切片入0. 01MPBST中浸洗（lminX3)。入1:300生物素标记的II抗3小 时。切片用0.01M PBST浸洗（IminX3)。切片入1:300辣根酶标记的链霉卵白素 III抗2? 3小时。再入0. 01MPBST浸洗（2minX3)，DAB显色10?30min，然后入水充分浸洗，裱片， 自然干燥。显微镜下观察TH阳性细胞的形态变化。
[0043] 1. 3. 5实验数据采用^ ±s表示，应用SPSS 10. 0统计软件进行统计学处理，多组 间数据采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。P〈0. 05则有统计学意义。
[0044] 2 结果 2. 1行为学变化 治疗给药1周后观察小鼠的行为学变化，每组20只小鼠做转棒实验和自主活动测试， 结果见表1。
[0045] 表1行为学检测结果
【权利要求】
1. 一种具有治疗帕金森病的药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份 的原料制成的：大黄1?3,秦艽1?3,绒毛桢楠1?3。
2. 如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成 的：大黄1，秦艽2,绒毛桢楠3。
3. 如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成 的：大黄2,秦艽3,绒毛桢楠2。
4. 如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成 的：大黄3,秦艽1，绒毛桢楠1。
5. 如权利要求1?4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用药学 中常规的制药方法制备成口服制剂。
6. 如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用药学中常规的制 药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。
7. 如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用如下方法制备：取 大黄、秦艽、绒毛桢楠，混合，加入5?10倍量的水煎煮2?4次，每次0. 5?2小时，提取 液合并，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。
8. 如权利要求1?4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物在制备治 疗帕金森病药物中的应用。
9. 如权利要求1?4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物在制备治 疗老年痴呆症药物中的应用。
【文档编号】A61P25/28GK104042690SQ201410316847
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年7月4日 优先权日:2014年7月4日
【发明者】唐冬蕾, 黄金勇 申请人:伏广珍