专利名称：治疗神经系统疾病的孕烯醇酮硫酸盐的制作方法
技术领域：
本申请涉及使用孕烯醇酮硫酸盐(一种神经活性留体)以预防和治疗神经系统疾病或功能紊乱。
背景技术：
神经变性疾病特征是慢性、渐进的神经元变性，引起神经系统功能紊乱且通常最终导致死亡。根据国家神经系统疾病与中风研究院(the National Institute ofNeurological Disorders and Stroke)报告,神经变性 疾病包括超过600种神经系统疾病，毎年影响约5000万美国人。美国毎年花费亿万美元在直接医疗费上，仅阿尔茨海默病就估计姆年花费 1000 亿美兀(Brown 等.，(2005) Environmental Health Perspectives)。神经变性疾病如阿尔茨海默病、唐氏综合症和路易体痴呆与神经元组织中的淀粉样斑块相关。这些斑是由￠-淀粉样肽(AP)组成的纤维缠结构成。最普遍的异构体是A ^ト40和A P !_42,尽管A ^ !_42更加纤维化并与疾病状态相关。目前，有一些治疗(如果有)用于不同范围的神经系统疾病。通常，现有的治疗对症状的益处最小，仅集中于减少疾病症状的严重性或強度。需要其他g在预防和、或治疗神经变性疾病有害效果的方法。发明概述本申请部分是基于发现孕烯醇酮硫酸盐(PREGS)显示亲神经活性和提供神经保护抗￠-淀粉样肽诱导的神经毒性。根据本申请的ー个方面，提供了治疗患神经系统疾病或功能紊乱对象的方法。该方法包括施用有效量的孕烯醇酮硫酸盐给对象以治疗神经系统疾病或功能紊乱。神经系统疾病或功能紊乱的非限制性例子包括年龄相关的神经变性、阿尔茨海默病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、进行性脑灰质萎缩、巴藤病、疯牛病(BSE)、化疗诱发的神经病变、克雅病、糖尿病性神经病变、唐氏综合症、额颞叶变性、亨廷顿病、HIV相关性痴呆、克拉贝病、路易体痴呆、多系统性萎縮、尼曼-皮克病、帕金森病、多神经炎、朊病毒病、原发性侧索硬化、雷弗素姆氏病、山霍夫氏病、老年痴呆症，少年型家族性黑朦性痴呆、脊髄小脑性共济失调、脊髄性肌萎縮、亚急性脊髄混合变性、脊髓痨或血管性痴呆。在一些实施方式中，神经系统疾病或功能紊乱由烧伤、外伤性损伤、机械性损伤、手术损伤、生理损伤、病理性损伤或免疫性损伤引起。在一些实施方式中，神经系统疾病或功能紊乱是神经变性疾病。P -淀粉样肽如A ^ト42积聚可引起神经变性疾病。根据本申请的另ー个方面，提供了方法治疗有神经元组织中0 -淀粉样肽积聚相关病情的对象。该方法包括施用有效量的孕烯醇酮硫酸盐给对象以治疗病情。在一些实施方式中，病情是阿尔茨海默病、唐氏综合症或路易体痴呆。根据本申请的另外ー个方面，提供了減少或防止神经元组织中￠-淀粉样肽积聚的方法。该方法包括使神经元组织接触孕烯醇酮硫酸盐。在一些实施方式中，￠-淀粉样
肽是 A ^ !_42。根据本申请公开的另ー个方面，提供了刺激或促进神经元细胞生长的方法。该方法包括以有效刺激或促进神经元细胞生长的 量使神经元细胞接触孕烯醇酮硫酸盐。在ー些实施方式中，神经元细胞是在组织中。所述组织可以是脑组织、脊髄组织或外周神经组织。在一些实施方式中，神经元生长包括神经突触生长。除非另有说明，下列实施方式同等地适用于本申请的各方面内容。在一些实施方式中，所用孕烯醇酮硫酸盐是合成的PREGS㈠对映异构体(ent-PREGS)。在其他实施方式中，孕烯醇酮硫酸盐ロ头、静脉内、肌肉内、鞘内、舌下、颊侧、鼻内、关节内、腹膜内、皮下或局部施用。在一些实施方式中，孕烯醇酮硫酸盐作为预防施用。在一些实施方式中，对象若非如本发明所述没有需要孕烯醇酮硫酸盐治疗的迹象。在其他实施方式中，在孕烯醇酮硫酸盐之外还给对象施用其它药剂。本申请的各项限定包括本申请的不同实施方式。由此可见，含ー种要素或要素组合的本申请任ー限定适用于本申请的各方面。本申请的实施方式可以不同方法实践或进行。同样，本文所用表达和术语是为了描述目的，不应视作限制。“包括”、“包含”或“具有”、“含有”、“涉及”和其它变形涵盖其后所列的项目和其等价物以及其它项目。本申请的这些和其他方面以及多种优势和用途可參考详细描述。应当理解本申请的各方面涵盖不同实施方式。本申请述及的所有文献全部以引用的方式并入本文中。附图
简要说明附图不按比例绘制。出于阐明目的，不是每种成分都在每张图中标出。在图中图I显示PREGS对B104细胞存活的效果。在24小时中以0. 25到40 ii M范围间的不同浓度PREGS处理B104细胞。结果以细胞存活百分比表示，是3次试验的平均值土标准误差。PREG是非毒性的且不影响B104细胞存活。图2显示PREGS的亲神经活性。B104细胞在⑷没有PREGS、⑶存在5 u MPREGS条件下低密度培养7天所见的的神经突触生长。箭头显示PREGS诱发的显著突触生长。图3是显示人A3卜42肽纤维形式(fA@ 1-42)对B104细胞坏死效果的柱状图。坏死效果早在处理后6小时开始显现。fAP 1-42肽从5 ii M增加到20 ii M时，观察到显著的剂量依赖性坏死。坏死细胞的百分比是两次试验的平均值土标准误差。图4是显示PREGS对B104细胞抗人A ^ ^42肽纤维形式(fA ^ 1-42)毒性的神经保护作用的柱状图。20 ii M PREGS能保护B104细胞抗20 y M fAP 1-42肽诱发的毒性。在第24小时观察到效果并维持到96小吋。发明的详细描述本文所述的申请部分涉及孕烯醇酮硫酸盐(PREGS)和使用PREGS治疗和预防神经系统疾病或功能紊乱的方法。本申请还涉及PREGS抗神经元组织中￠-淀粉样肽积聚引起的神经毒性和神经变性的保护能力。在一些实施方式中，本申请的方法使用PREGS作为亲神经剂以刺激或促进神经元细胞生长。在一些实施方式中，所用孕烯醇酮硫酸盐是合成的PREGS(-)对映异构体(ent-PREGS)。本申请的方法包括施用有效量的孕烯醇酮硫酸盐给需要的对象以治疗、预防或缓解神经系统疾病或功能紊乱。PREGS属于能通过与神经递质门控离子通道相互作用来影响神经元兴奋性的神经留体组。ent-PREGS (合成的PREGS (-)对映异构体)比其生理对应物更有效刺激大鼠和小鼠的记忆(Akwa等 Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2001 ；98 :14033-37)。孕烯醇酮硫酸盐和其合成的对映异构体类似物ent-PREGS与经典类固醇激素具有不同的化学结构，已知它们能调节大脑功能，且所述调节与内分泌机制无关。
本文所用术语“神经系统疾病或功能紊乱”涉及的是以神经元组织和/或神经元组织功能损坏、退化或缺失为特征的神经系统疾病。神经系统疾病或功能紊乱的例子包括但不限于年龄相关的神经变性、阿尔茨海默病、肌萎縮性脊髓侧索硬化症、进行性脑灰质萎缩、巴藤病、疯牛病(BSE)、化疗诱发的神经病变、克雅病、唐氏综合症、糖尿病性神经病变、额颞叶变性、亨廷顿病、HIV相关性痴呆、克拉贝病、路易体痴呆、多系统性萎縮、尼曼-皮克病、帕金森病、多神经炎、朊病毒病、原发性侧索硬化、雷弗素姆氏病、山霍夫氏病、老年痴呆症，少年型家族性黑朦性痴呆、脊髄小脑性共济失调、脊髄性肌萎縮、亚急性脊髄混合变性、脊髓痨或血管性痴呆。在一些实施方式中，神经系统疾病或功能紊乱由烧伤、外伤性损伤、机械性损伤、手术损伤、生理损伤、病理性损伤或免疫性损伤引起。在一些实施方式中，神经细胞损伤或功能紊乱不包括阿尔茨海默病和年龄相关的痴呆。本文中术语“疾病”或“紊乱”可交換使用，涉及对身体状态或某些器官状态的任何如下所述的改变，所述改变阻断或干扰机体功能和/或引起患病对象的诸如不适、功能紊乱、痛苦或甚至死亡等症状。“神经变性疾病”的特征是逐步和渐进的神经元组织和/或神经元组织功能丧失。在一些实施方式中，神经变性疾病以￠-淀粉样肽(AP)积聚为特征。通过a、0和Y _分泌酶连续裂解淀粉样蛋白前体形成39-43个氨基酸残基的AP肽。APy2更加纤维化并认为是淀粉样斑块的主要成分，淀粉样斑块似乎引起神经元退化和随后发展的疾病状态。因此，本申请的ー个方面涉及治疗神经元组织如脑、脊髄或外周神经系统中￠-淀粉样肽积聚。此外，本申请也涉及治疗、预防或缓解以神经元组织中￠-淀粉样肽积聚为特征的病情。所述病情的例子包括但不限于阿尔茨海默病、唐氏综合症或路易体痴呆。反映AP肽神经毒性效果的细胞凋亡和坏死速度以及神经留体对其的调节主要通过流式细胞术和其他细胞存活实验研究。另外，使用特定神经元标记通过免疫化学分析潜在的神经留体亲神经活性。由Alois Alzheimer在1907年首先描述的阿尔茨海默病(AD)是ー种渐进的神经变性疾病，导致脑萎縮、认知缺陷和痴呆。其特征是老年斑和神经纤维缠结(Hyman，Neurobiol Aging 1997,18 :527-32 ；Delacourte 等，Neurology 1999,52 1158-65 ；Selkoe, JAMA 2000,283 :1615-1617)。神经纤维缠结的主要病理学成分是高度磷酸化微管相关蛋白 tau 的双股螺旋形细丝(Grundke-Iqbal 等，Proc Natl Acad Sci USA. 1986,83 4913-17 ;Bu6e等，fcain Res Rev 2000，33 :95-30)，它破坏神经元细胞骨架的稳定性从而导致神经变性(Alonso 等,Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1997,94 :298-03)。老年斑主要由过量3 _ 淀粉样(AP)蛋白积聚引起(Hyman, Neurobiol Aging 1997,18 :527-32 ；Selkoe, JAMA2000,283 :1615-1617)。正常情况下，该AP蛋白是淀粉样蛋白前体的可溶性代谢产物，是能在健康人血浆和CSF中检测到的循环肽(Haass等，Nature 1992，359 :322-35 ；Selkoe,Physiol Rev 2001,81 :741-66)。已知脑积聚AP月太，特别是A@ト42在体内和体外对神经元高度有毒(LeFerla 等 Nat Genet 1995,9(1) :21-30 ;Tan 等 Journal of Neurochemistry1998,71 :95-105 ;Shimohama 等 Apoptosis 2000,5(1) :21-30)。AD迄今为止病因未明。流行病学调查显示AD是超过65岁老年人中痴呆的主要原因(HeImer等，Med Sci (Paris) 2006，22 :288-96)。其普遍性估计达到全球约5000到10000万个案例。由于人群预期寿命增加和年龄老化，AD正成为ー个急需克服的社会和经济性公共健康问题。不幸的是，目前没有AD治愈方法。仅有的药物治疗(胆碱脂酶抑制剂和NMDA受体配体)对ー些病人产生相对小的症状益处，但没有减缓疾病进展。中枢神经系统(CNS)能生成称为“神经甾体”的适当类固醇(Baulieu等，BiolCell 1991, 71 :3-10 ;Schumacher 等，Prog Neurobiol 2003, 71 :3-29),在神经兀和神经胶质细胞中鉴定了參与此类胆固醇生物合成和代谢的酶(图2 ;Akwa等，J Steroid BiochemMol. Biol. 1991,40 :71-81 ；J. Cell. Biol. 1993，121 :135-43 ；Zwain 等，Endocrinology1999,140 :3843-52 ;Mensah_Nyagan等，Pharmacol Rev 1999,51 :63-81 ;Mellon等，TrendsEndocrinol Metab 2002,13(1) :35-43)。已知许多类固醇影响CNS活性，在这些神经活性类固醇中，神经留体调节不同的脑功能如记忆、应激、焦虑或睡眠，如动物模型的精神药理学和行为学研究所不(Akwa 等，J Soc Biol 1999,193 :293-98 ;Rupprecht 等，IntRev Neurobiol 2001，46 :461-77)。特别是，孕烯醇酮(PREG)和其硫酸盐衍生物PREGS能提高年轻啮齿动物的记忆カ(Flood等，Proc Natl Acad Sci USA 1992,89 :1567-71 ；Proc Natl Acad Sci USA 1995,92 :10806-10 ；Darnaudery 等，Brain Res 2000,852:173-79 ;Akwa 等，Proc Nat Acad Sci USA 2001,98 :14033-37)并逆转药剂导致(Meziane等，Psychopharmacology (Berl) 1996,126 :323-30 ；Maurice 等，Neuroscience 1998,3 413-28)、与年龄老化相关(Vall6e 等，Proc Natl Acad Sci USA 1997，94 :14865-70)或
肽诱发(Maurice等，Neuroscience 19983:413-28)的健忘症。制得注意的是，合成的PREGS对映异构体(ent-PREGS)也刺激记忆且比天然PREGS更有效(Akwa等，Proc Nat AcadSci USA2001,98 :14033-37)。除了其记忆错误(promnesiant)和抗健忘性质之外,神经甾体可在神经保护中发挥作用(Schumacher 等，J Neurocytol 2000，29 :307-26) oPREG减少海马 HT-22神经元培养物中淀粉样肽导致的死亡(Gursoy等,Neurochem Res 2001, 26 (I) :15_21)。孕酮(PROG)在脑挫伤或脑缺血后保护神经元(Roof等,Exp Neurol 1994,129 :64-9 ;Gonzales_Vidal等，Arch Med Res 1998,29 117~24)，曰抗A 13 蛋白神经韋性(Goodman等,J Neurochem 1996,66 :1836-44)。许多文献报道了 17 0-雌ニ醇(E2)的亲神经和神经保护效果(Fereira等，J Neurosci 1991,11:392-400 ;Murphy 等，J Neurosci 1996,16 :4059-68 ;Goodman 等，JNeurochem 1996,66:1836-44)。已知 E2 (Goodman 等，JNeurochem 1996,66 :1836-44 ;Green等，J Neurocytol 2000,29 :419-23)以及其非女性化(nonfeminizing)对映异构体(Green等，Endocrinology 2001,142 :400-06)具有抗淀粉样肽神经毒性的神经保护。在此情况中，仍需评估PREGS和ent-PREGS抗A P肽诱导的神经毒性的效果。关于人中神经留体活性的知识仍然有限。然而，显示在人脑组织中存在一些神经留体(Lanthier 等，J Steroid Biochem 1986,25 :445-49 ;Lacroix等，J Steroid Biochem1987,28 :317-25 ;Weill-Engerer 等，J. Clin Endocrinol Metab 2002,87 :5138-43),以及涉及其生物合成和代谢的酶(Stoffel-Wagner，Eur J Endocrinol 2001,145 :669-679 ； Weill-Engerer 等，Brain Res 2003,969 :117-25 ；Yau 等，Neuroscience2003, 121 307-14)。有趣的是，AD老年病人脑的某些区域与非痴呆的对象相比，某些神经甾体的浓度显著较低，与此负相关的是高水平的AP蛋白和超磷酸化tau蛋白(Weill-Engerer等，JClin Endocrinol Metab 2002,87:5138-43)。这些发现提示神经留体可保护神经元抗老年斑和神经纤维缠结导致的损害(Schumacher等，Prog Neurobiol 2003, 71 :3_29),突出了该类固醇在AD中潜在作用的重要性(Akwa等，Alzheimer Dis Assoc Disord 2005,19 226-39)。如本文所用，“需要的对象”是例如目前或之前患神经系统疾病或功能紊乱的人。另外，对象可能怀疑患有神经系统疾病或功能紊乱或由医学领域技术人员认为具有患神经系统疾病或功能紊乱的风险或风险提高。神经系统疾病或功能紊乱可由烧伤、外伤性损伤、机械性损伤、手术损伤、生理损伤、病理性损伤或免疫性损伤引起。在ー些方面，可以是以^ -淀粉样肽如APト42积聚为特征的神经变性疾病所引起的神经系统疾病。
在一些实施方式中，对象若非如本发明所述没有需要孕烯醇酮硫酸盐治疗的迹象。对象没有需要孕烯醇酮硫酸盐治疗的迹象是对象没有需要孕烯醇酮硫酸盐治疗的征兆或症状。本领域普通技术人员已知需要孕烯醇酮硫酸盐治疗的迹象。所述迹象的例子包括健忘症、经前综合症、睡眠问题和抑郁症。术语“治疗”或“处理”包括预防、改善、防止或治愈病情。病情发生后治疗旨在减少、改善或一起去除病情和/或ー种或多种其相关症状、或防止其恶化。病情开始前治疗对象(即预防性治疗)_在降低发病风险和/或如若发病则减轻其严重性。如本文所用，术语“防止”涉及预防性治疗具有发展病情风险的对象，使得发病的可能性減少或使得病情相比如若没有预防性治疗较轻的可能性増加。通过例如确定治疗的生理学效果如治疗施用后症状減少或没有，可測量本申请治疗方法的效果。在一些实施方式中，神经元生长包括神经突触生长。神经突触生长包括朝向靶细胞的轴突生长，轴突可与靶细胞形成突触。确立所述神经元连接性模式对于神经系统正常功能是必须的。可用本领域已知的多种测试评估此性质。例如，在存在或没有治疗时使用免疫荧光能直接检测神经。治疗相比“治疗前”或相比对照具有更长神经突(包括轴突和/或树突)的神经其神经细胞生长获得了增强。神经细胞可体内(in vivo)、体外(in vitro)或活体外(ex vivo)处理。因此，细胞可以处于完整的对象之中，或是从对象中分离的，或是体外细胞系。“有效量”孕烯醇酮硫酸盐是必需或足以在对象中提供医学上需要的生物学结果(例如治疗、防止或改善神经系统疾病或功能紊乱)的量。另外，所需生物学效果包括刺激神经细胞的神经突触生长。有效量随着治疗的特定病情、治疗对象的年龄和身体状况、病情严重性、治疗持续时间、同时疗法(如果有)的性质、特定施用途径以及医疗保健技术人员知识和专业范围内的类似因素而变化。该量可用已知方法以经验为主确定且随着对象不同而不同。一般优选使用本申请所涉及药剂(単独或结合其他治疗剂)的最大剂量，即根据可靠医疗判断的最高安全剂量。通常，孕烯醇酮硫酸盐的剂量是约10-100mg。其它施用形式如静脉内施用可采用较低的剂量。如果在初始应用剂量时对象中的反应不足，可使用更高剂量(或通过不同的更集中化传递途径有效达到的更高剂量)直到对象耐受允许的程度。应当理解，孕烯醇酮硫酸盐用于治疗或预防神经系统疾病或功能紊乱，即它可在具有发展神经元细胞损伤或功能紊乱风险的对象中预防性使用。因此，有效量是能降低风险、延迟发生或同时防止神经系统疾病或功能紊乱的量。应当意识到，当孕烯醇酮硫酸盐在严重情况下使用吋，它用于防止ー种或多种通常来自此类不良情况的医学上的不良結果。孕烯醇酮硫酸盐可联合其它治疗剂，如治疗神经系统疾病或功能紊乱所用其它治疗剂。其它治疗剂的例子包括但不限于こ酰胆碱酯酶抑制剂(例如多奈哌齐、加兰他敏和利凡斯的明)、NMDA受体拮抗剂(例如美金刚)、多巴胺激动剂(例如溴隐亭、培高利特)和单胺氧化酶-B抑制剂(例如司立吉兰和雷沙吉兰)。孕烯醇酮硫酸盐和其它治疗剂可同时或连续施用。当其它治疗剂为同时施用吋，它们能在同一或分开的制剂中，但同时施用。其它治疗剂和孕烯醇酮硫酸盐的施用也可在时间上分开，意味着治疗剂在不同时刻施用，在孕烯醇酮硫酸盐施用之前或之后施用。施用这些化合物的时间间隔可以是几分钟或更长。施用时，孕烯醇酮硫酸盐和其它治疗剂优选以药物制剂的形式，以可药用量和可药用配方来应用。所述制剂可包含盐、缓冲剂、保存 剂、相容载体和任选的其它治疗剂。药用时，盐应是可药用的，但非可药用盐可用于方便地制成其可药用盐，因此属于本申请的范围之内。所述药学可接收的和可药用盐包括但不限于从下列酸中制备的盐盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、马来酸、こ酸、水杨酸、柠檬酸、甲酸、丙ニ酸、琥珀酸等。同样，可药用盐也可制备成碱金属或碱土金属盐，如纳、钾或钙盐。孕烯醇酮硫酸盐可以结合可药用载体。本文所用术语“可药用载体”指一种或多种可人用的相容固体或液体填充料、稀释剂或包囊物质。术语“载体”指与活性成分组合以利使用的有机或无机、天然或合成的成分。药物组合物的组分也能与本申请的各种分子以适当的方式共混合，使得彼此间不会发生显著损害所需药物功效的相互作用。药物组合物也可包含上述适当缓冲剂，包括こ酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐、甘氨酸、硼酸盐、碳酸盐、重碳酸盐、氢氧化物(和其它碱基)和上述化合物的可药用盐。所述药物组合物还可包含适当保存剂，如苯扎氯铵、氯代丁醇、对羟基苯甲酸酯和硫柳汞。药物组合物可方便地以单位剂型呈现，且通过药学领域熟知的方法制备。所有方法都包括使活性剂与载体相联的步骤，所述载体包含ー种或多种辅助成分。一般，制备组合物是通过使活性化合物与液体载体、精细粉碎的固体载体或以上这两种载体构成均匀、密切的关联，随后，根据需要进行产物的成形。在一些实施方式中，孕烯醇酮硫酸盐可ロ头、静脉内、肌肉内、鞘内、舌下、颊侧、鼻内、关节内、腹膜内、皮下或局部施用。当需要全身传递时，可将孕烯醇酮硫酸盐制成肠胃外施用的注射制剂，例如药团推注或连续输注。注射用制剂可以是单位剂型的形式，保存于例如加有保存剂的安瓿或多剂量容器中。组合物可采用的形式如在油或水载体中的悬浮液、溶液或乳液，可包含配方用制剂如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。用于肠胃外施用的药物制剂包括水溶形式的活性化合物的水溶液。另外，活性化合物的悬浮液可制备成适当的油性注射悬浮液。适当的亲脂性溶剂或载体包括脂肪油如麻油、或合成的脂肪酸酯如油酸こ酯或甘油三酷、或脂质体。水性注射悬浮液可包含增加悬浮液粘性的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。可选地，悬浮液也可包含适当稳定剂或増加化合物溶解性的试剂以制备高浓缩溶液。或者，活性化合物可以粉末形式用于在使用前用适当载体(例如盐水、缓冲液或灭菌无热原水)再生。适合口服的组合物可以是分散的多単位形式，如胶囊、片剂、药丸、锭剂，各含预定量的活性化合物(孕烯醇酮硫酸盐)。其它组合物包括水溶液或非水溶液中的悬浮液，如糖浆、酏剂、乳液或凝胶。ロ服药物制品可制备成固体赋形剂，可选性地研磨所得混合物，根据需要添加适当辅助剂后将颗粒混合物加工成片剂或糖衣丸的核心。适当的赋形剂是填充剂，如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇或纤维素制品，例如玉蜀黍淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚こ烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可加入崩解剂，如交联聚こ烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐如海藻酸钠。任选地，ロ头制剂也可在盐水或缓冲液中制成，即用于中和内部酸环境的EDTA，或可以无任何载体而施用。本发明还包括上述组合物的ロ服剂型。可化学修饰ー种或几种组分使得所得衍生物经ロ传递有效。一般，考虑的化学修饰是将至少一修饰部分连接到组成分子上，其中所述修饰部分允许(a)蛋白质水解抑制和(b)从胃或肠进入血流的吸收。还需要ー种或几种组分的总体稳定性提高和体内循环时间延长。所述修饰部分的例子包括聚こニ醇、こニ醇和丙ニ醇的共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚こ烯醇、聚こ烯吡咯烷酮和聚脯氨酸。Abuchowski 和 Davis, 1981,"可溶性聚合物-酶加合物"("Soluble Polymer-EnzymeAdducts" ) In Enzymes as Drugs,Hocenberg 和 Roberts,eds. ,Wiley-Interscience,NewYork, NY,第 367-383 页;Newmark,等，1982, J. Appl. Biochem. 4 :185-189。能使用的其它聚合物是聚_1，3- ニ氧戍环和聚_1，3,6- ニ氧八环。如上所述，就药用而目，优选聚こニ醇修饰。组分(或衍生物)的释放部位可以是胃、小肠(十二指肠、空肠或回肠)或大肠。不溶于胃而会在十二指肠或肠其它地方释放物质的现成制剂是本领域技术人员所已知的。释放优选避免胃环境的不利影响，这可以通过孕烯醇酮硫酸盐保护或是在胃环境外如肠中释放生物活性物质来实现。为确保充分的胃内环境抗性，需要至少能在pH 5. 0防渗的包衣。用作肠溶包衣材料的常用惰性成分的例子是こ酸偏苯三甲酸酯纤维素(CAT)、羟丙基甲基纤维素酞酸酯(HPMCP)、HPMCP 50,HPMCP 55、聚醋酸こ烯酞酸酯(PVAP)、Eudragit L30D、Aquateric、酞酸醋酸纤维素(CAP)、Eudragit L、Eudragit S和虫胶。这些包衣材料可用作混合膜。包衣或包衣混合物也能用于不需要抗胃环境保护的片剂。这可包括糖包衣，或使得片剂更易吞咽的包衣。胶囊可由硬壳(如明胶)组成，用于传递干治疗剂剂(即粉末)；对于液体形式而言，可使用软明胶売。胶囊的壳材料可以是厚淀粉或其它可食用纸。对于药丸、锭剂、模型片剂或模印片，可使用湿制丸技木。治疗剂可作为精细多颗粒包括在制剂中，以颗粒或弹丸形式，颗粒大小约为1mm。用于胶囊给药的制剂也可以是粉末形式、轻压缩拴塞或甚至片剂形式。治疗剂剂可压制而成。还可包括着色剂和增味剂。例如，可将孕烯醇酮硫酸盐(如通过脂质体或微球体封装)制成制剂，随后将其包含在可食用产品中，如含着色剂和增味剂的冷冻饮料。 可用惰性物质来稀释治疗剂或增加治疗剂的体积。这些稀释剂包括碳水化合物，特别是甘露醇、乳糖、无水乳糖、纤维素、蔗糖、修饰的葡聚糖和淀粉。也可使用某些无机盐作为填充剂，包括三磷酸钙盐、碳酸镁和氯化钠。一些可购得的稀释剂是ast-Flo、Emdex,STA-Rx 1500、Emcompress 和 Avicello崩解剂可以包含在治疗剂的固体剂型中。用作崩解剂的物质包括但不限于淀粉，包括基于淀粉的市售崩解剂Explotab。羧甲淀粉钠、离子交换树脂、羧甲基纤维素钠、ultramylopectin、海藻酸钠、明胶、桔皮、羧甲基纤维素、天然海绵和皂土都可使用。崩解剂的另一形式是不溶的阳离子交换树脂。粉末化树胶可用作崩解剂和粘合剂，包括琼脂、刺梧桐树胶或黄芪胶等树胶的粉末。藻酸和其钠盐也可用作崩解剂。
粘合剂用于使治疗剂聚结成硬片剂，粘合剂包括来自天然产物的物质，如阿拉伯胶、黄芪胶、淀粉和明胶。其它包括甲基纤维素(MC)、こ基纤维素(EC)和羧甲基纤维素(CMC)。聚こ烯吡咯烷酮(PVP)和羟丙基甲基纤维素(HPMC)都能以こ醇溶液的形式用于治疗剂的造粒。治疗剂的制剂可包括抗摩擦试剂以防止制备过程中的粘着。可使用润滑剂作为治疗剂和模壁间的ー层，它们包括但不限于硬脂酸，包括其镁和钙盐、聚四氟こ烯(PTFE)、液体石蜡、植物油和蜡。也可使用可溶性润滑剂如十二醇硫酸钠、十三烷基硫酸镁、不同分子重量的聚こニ醇、Carbowax 4000和6000。可加入能改善药物在制备中的流动特性和有助于压缩中重排的助流剂。助流剂可包括淀粉、滑石、焦化硅石和水合硅铝酸。为帮助治疗剂溶解于水性环境，可加入表面活化剂作为润湿剂。表面活化剂可包括阴离子洗涤剂如十二烷基硫酸钠、磺基丁ニ酸钠ニ辛酯和琥珀酸ニ辛酯钠。可使用阳离子洗涤剂，包括苯扎氯铵或苄索氯铵。制剂中可作为表面活化剂的非离子洗涤剂列表是 聚桂醇400、聚こニ醇40硬脂酸酷、聚氧こ烯氢化蓖麻油10、50和60、单硬脂酸甘油酯40、60、65和80、蔗糖脂肪酸酷、甲基纤维素和羧甲基纤维素。这些表面活化剂単独或以不同比例的混合物存在于孕烯醇酮硫酸盐制剂中。可ロ服的药物制品包括明胶制成的推合胶囊、以及由明胶、塑化剂如甘油或山梨醇制成的软的密封胶囊。推合胶囊包含活性成分、填充物如乳糖、粘合剂如淀粉、和/或润滑剂如滑石或硬脂酸镁，以及可选的稳定剂的混合物。在软胶囊中，活性化合物可溶于或悬于适当液体，所述液体如脂油、液体石蜡或液体聚こニ醇。另外，可加入稳定剂。也可采用ロ服用微球体。所述微球体是本领域所熟知的。所有ロ服制剂应为适合ロ服的剂型。对于颊侧给药，组合物可采用常规方式制成的片剂或锭剂形式。对于吸入施用，根据本申请所用化合物可方便地以来自加压包或雾化器的气雾喷雾形式传递，为此使用适当推进剂，例如ニ氟ニ氯甲烷、三氯氟甲烷、ニ氯四氟こ烷、ニ氧化碳或其它合适气体。在加压喷雾剂情况中，通过提供阀门按计量传递来确定剂量単位。用于吸入器或吹入器的例如明胶胶囊和弹筒可配制成含化合物和适当粉末基底如乳糖或淀粉的粉末混合物。本文也考虑了肺传递孕烯醇酮硫酸盐。孕烯醇酮硫酸盐在吸入时传递给哺乳动物的肺，然后穿过肺上皮层进入血流给。其它吸入分子的报导包括Adjei等，1990, Pharmaceutical Research, 7 :565-569 ；Adjei 等，1990, International Journalof Pharmaceutics，63 :135—144(leuprolide acetate； ；Braquet %=,1989, Journalof Cardiovascular Pharmacology,13(suppl.5) : 143-146(endothelin-1) ；Hubbard等，1989, Annals of Internal Medicine,卷 III,第 206-212 页(al-antitrypsin)；Smith 等，1989，J. Cli n. Invest. 84 :1145-1146 (a-1-proteinase) ；0swein 等，1990， " Aerosolization of Proteins" ， Proceedings of Symposium on RespiratoryDrug Delivery II，Keystone, Colorado, March，(recombinant human growth hormone)；Debs 等，1988，J. Immunol. 140 :3482-3488 (interferon- Y and tumor necrosis factoralpha)和Platz等，美国专利号5，284，656(粒细胞集落刺激因子)。用于全身效果的肺传递药物的方法和组合物描述于Wong等1995年9月I日发行的美国专利号5，451，569。本申请的实施可采用大量设计用于肺传递治疗产物的机械设备，包括但不限于本领域技术人员熟悉的雾化器、计量剂量吸入器和粉末吸入器。适合本发明实践的一些具体市售装置例子是Mallinckrodt, Inc. , St. Louis,Missouri 生产的 Ultravent 雾化器；Marquest Medical Products, Englewood, Colorado生产的 Acorn II 雾化器；Glaxo Inc. , Research Triangle Park, North Carolina 生产的Ventolin 计量剂量吸入器；Fisons Corp. , Bedford, Massachusetts 生产的 Spinhaler 粉末吸入器。所有这些装置需要使用适合分送孕烯醇酮硫酸盐的制剂。通常，各制剂专门适合所用的装置种类并使用合适的推进物质，此外还包括常用的稀释剂、佐剂和/或载体外。也考虑使用脂质体、微胶囊或微球体、包合物或其它载体类型。可将化学制备的孕烯醇酮硫酸盐配制成不同制剂，这取决于化学修饰类型和所用装置种类。适用于诸如喷射或超声波雾化器的制剂通常包括溶于水或其它可药用溶剂的孕烯醇酮硫酸盐。制剂还可包含缓冲液和单糖(例如用于稳定孕烯醇酮硫酸盐和调节渗透压力)。雾化器制剂还可包含表面活性剤，以减少或防止喷雾形成中溶液原子化导致的表面诱发孕烯醇酮硫酸盐集聚。用于计量吸入器装置的制剂一般包括含孕烯醇酮硫酸盐的精细粉末，其在表面活性剂帮助下悬于推进剂。推进剂可以使用与此目的的任何常规物质，如含氯氟烃、氢化含氯氟烃、氢氟碳化合物、或碳氢化合物，包括三氯氟甲烷、ニ氟ニ氯甲烷、四氟ニ氯こ醇、1，1，1，2_四氟こ烷或其组合。适当的表面活性剂包括三油酸山梨酯和大豆卵磷脂。油酸也可用作表面活性剤。用于从粉末吸入装置分送的制剂包括含孕烯醇酮硫酸盐的精细干粉，还可包括填充剂如乳糖、山梨醇、蔗糖或甘露醇，其量达到可助粉末从装置中分散出来，例如制剂重量的50%到90%。最好将孕烯醇酮硫酸盐制成平均颗粒大小低于IOmm(或微米级)的颗粒形式，最优选0. 5到5mm,用于最有效传递到肺末梢。可考虑鼻(或鼻内)传递本申请的药物组合物。鼻传递可使本申请的药物组合物在治疗产物施用给鼻后直接进入血流，不需要在肺中沉淀产物。鼻传递的制剂包含葡聚糖或环葡聚糖。对于鼻传递，所用装置是附有计量喷雾器的小硬瓶。在一个实施方式中，传递计量是通过将本申请的药物组合物吸入确定体积的小室，小室有孔，其尺寸可在小室中的液体受压缩时通过形成喷雾来将气雾剂雾化。通过压缩小室来施用本申请的药物组合物。在一个具体实施方式
中，小室装有活塞。此类装置可购买得到。或者，使用带孔或开ロ的塑料挤瓶，孔或开ロ的大小可在挤压时通过形成喷雾来雾化制剂。开ロ通常位于瓶顶部，顶部一般逐渐变细以部分配合鼻通道，从而有效施用雾化制剂。鼻吸入器优选提供计量雾化制剂的，可用于施用定量药物。孕烯醇酮硫酸盐也制成直肠或阴道组合物，如栓剂或保留灌肠，例如含常规栓剂基底如可可油或其它甘油酯的那些。除了上述制剂外，孕烯醇酮硫酸盐也可制成贮存型制剂。所述长效制剂可用适当的聚合或疏水物质(例如用可接受油配成乳剤)或离子交换树脂来配制，或制成难溶衍生物,例如难溶盐。药物组合物还可包含适当的固相和凝胶态载体或赋形剂。所述载体或赋形剂的例子包括但不限于碳酸钙、磷酸钙、多种糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶和聚合物如聚こニ醇。适当的液体或固体药物制品形式是例如水或盐水溶液、用于吸入、装入微胶囊、螺卷化(encochleated)、包被到微小金粒上、包含于脂质体、雾化、气雾剂、用于植入皮肤的弹丸、或在干燥粘附到锋利物体上后通过刮擦进入皮肤。药物组合物还包括细粒、粉末、片剂、包被片剂、(微)胶囊、栓剂、糖桨、乳剤、悬浮液、乳脂、滴剂或延长活性化合物释放的制剂，其中制备所用赋形剂和添加物和/或辅助物如崩解剂、粘合剤、涂层剂、膨胀剂、润滑剂、调味剂、增甜剂或增溶剂如上所述，按常规使用。本发明药物组合物适用于多种药物传递系统。简要的药物传递方法综述參见Langer，Science 249 :1527_1533，1990，其以引用的方式并入本文中。治疗剂包括但不限于以粒子形式提供的孕烯醇酮硫酸盐。本文所用粒子指纳米或微米颗粒(或在某些例子中更大)，可全部或部分由孕烯醇酮硫酸盐或本文所述其它治疗剂组成。粒子可包含治疗剂作为核心，外包包衣，包括但不限于肠溶包衣。治疗剂也可分散在粒子中。治疗剂也可吸收到粒子中。粒子可以具有任意级别释放动力学，包括零级释放、ー级释放、ニ级释放、延迟释放、维持释放、立即释放和其组合。除了治疗剂之外，粒子可包括药学和医学领域常规使用的物质，包括但不限于易蚀、非易蚀、可生物降解、或非生物降解的材料或其组合。粒子可以是含溶液或半固体状态孕烯醇酮硫酸盐的微胶囊。粒子可以是几乎任何形状。非生物降解和可生物降解聚合物都能用于制造传递治疗剂的粒子。所述聚合物可以是天然或合成聚合物。聚合物基于所需释放时间段选择。具有特别兴趣的生物粘性聚合物包括 H. S. Sawhney, C. P. Pathak 和 J. A. Hubell in Macromolecules, (1993) 26 :581-587描述的生物蚀解水凝胶，其内容以引用的方式并入本文中。所述聚合物包括聚透明质酸、酪蛋白、明胶、麦蛋白、聚酐、聚丙烯酸、藻酸盐、脱こ酰壳多糖、聚(甲基丙烯酸甲酷)、聚(甲基丙烯酸こ酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酷)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酷)、聚(丙烯酸异丙酯)、聚(丙烯酸异丁酯)和聚(丙烯酸异十八酷)。治疗剂可包含于控制释放系统。术语“控释”涉及药物从制剂释放的方式和分布受到控制的含药物制剂。这指立即以及非立即释放制剂，非立即释放包括但不限于维持释放和延迟释放制剂。术语“维持释放”(也称为“延长释放”)在一般指在延长时间段内持续释放药物的药物制剂，虽非必要但为优选地在延长时间段内产生基本恒定的血液药物水平。术语“延迟释放” 一般指药物从施用到从中释放有时间延迟的药物制剂。“延迟释放”可以包括或不包括在延长时间段内持续释放药物，因此，可以是或不是“维持释放”。长期维持释放植入体可能特别适合治疗慢性病。本文所用“长期”释放指植入体被构建并安排成能够按治疗水平传递活性成分的时间至少7天，优选30-60天。长期维持释放植入体是本领域普通技术人员已知的，包括上述的某些释放系统。对于眼、鼻膜、粘膜或皮肤的局部施用，可将孕烯醇酮硫酸盐制成油膏、霜剂或乳液、或制成透皮贴片或眼内插入装置或离子电渗治疗剂。例如，油膏和霜剂可单独用水性或油性基底或与适当增厚剂或胶凝剂一起制成。乳液可以用水性或油性基底制成，通常还包含ー种或多种乳化剤、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增厚剂或着色剂。(參见例如美国申请号5，563，153，名为“无菌局部麻酔凝胶”，Mueller, D.等发布，描述了基于凝胶的可药用局部载体。)
一般，按重量计，孕烯醇酮硫酸盐存在于局部制剂的量约为组合物总重量的0. 01%到30. 0%。孕烯醇酮硫酸盐存在量优选从约0. 5%重量到约30%重量，孕烯醇酮硫酸盐存在量最优选从约0.5%重量到约10%重量。在一个实施方式中，本申请的组合物包括凝胶混合物，用于获得与局部疼痛表面的最大接触，同时尽可能减少缓解局部疼痛所需体积和剂量。GELFOAM (Upjohn Corporation生产的ー种基于甲基纤维素的凝胶)是优选的可药用局用载体。其它可药用载体包括用于经皮肤传递的离子电渗载体。本申请还考虑使用试剂盒。在本申请的ー些方面，试剂盒包括药物制备瓶、药物制备稀释瓶和孕烯醇酮硫酸盐。含用于药物制备的稀释剂的瓶是可选的。稀释剂瓶包含稀释剂如生理盐水用于稀释可能为浓缩溶液或冻干粉末形式的孕烯醇酮硫酸盐。说明书可包括关于混合特定量稀释剂与特定量浓缩药物制品从而制备用于注射或输入的最終制剂的说明。说明书可包括用有效量孕烯醇酮硫酸盐治疗对象的说明。并且，含制品的容器可具有标记如当制品高压灭菌或以其它方式无菌化时会变色的常规标记，所述容器可以是瓶、带分隔的小瓶、带分隔的安瓶、液袋等。本申请不局限于下列描述或附图所示的详细成分组成和安排。本申请允许未述及的其它实施方式，可以多种方法实施。同样，本文所用表达和术语是为了描述目的，不应视作限制。“包括”、“包含”或“具有”、“含有”、“涉及”和其它变形涵盖其后所列的项目和其等价物以及其它项目。描述了本申请ー个实施方式的诸多方面后，本领域技术人员可想到多种改变、修饰和改进。这些改变、修饰和改进是本申请的一部分，在本申请的精神和范围内。因此，上面提到的描述和附图仅作为例子。以下将通过实施例进ー步阐述本申请，这些不是限制。本申请中引用的所有參考文献(包括文献、专利、公开的专利申请和尚未审定的相关专利申请)全部以引用的方式并入本文中。
实施例实施例IPREGS对B104细胞存活的效果为了确定PREGS是否具有神经毒性，在培养的B104细胞中进行剂量-响应研究。用从0. 25到40 ii M范围的不同浓度PREGS处理B104细胞24小时。以细胞存活百分比表示的结果显示PREGS无神经毒性，与对照细胞相比不影响这些细胞的存活(图I)。实施例2
PREGS的亲神经活性 在低密度培养的B104细胞中测定PREGS的亲神经活性。与对照细胞相比，5yMPREGS存在下培养7天，观察到了显著的神经元细胞产物(图2)。实施例3人A 0 !_42肽纤维形式对B104细胞的坏死效果用IOii M人AP卜42肽处理仅6小时后，B104细胞相较对照细胞表现出明显的坏死效果。此外，A P 1-42肽从5 u M増加至IJ 20 u M时，观察到显著的剂量依赖性坏死(图3)。实施例4PREGS对B104细胞抗人A ^ ^42肽纤维形式毒性的神经保护分析PREGS纠正人AP卜42肽所诱导细胞毒性的能力。20iiM PREGS能保护B104细胞抗20 ii M人A Pト42肽。在第24小时观察到效果，并维持到96小时(图4)。实施例5材料和方法a)细胞培养模式因其在无血清培养基中生长时的神经元表型而选择大鼠B104神经节细胞作为细胞培养物模型(Schubert等自然(Nature) 1974 ；249 :224-27)。B104细胞按常规培养在75cm2烧瓶中，所用完全培养基含添加2mM L-谷氨酰胺、青霉素G(50U/ml)、硫酸链霉素(50iig/ml)、10%胎牛血清和5%马血清的达氏改进依氏培养基(DMEM)。每周对细胞进行再次培养，且每3天更换培养基。在90%空气和10% CO2的加湿培养箱中37°C维持细胞培养物。对于实验，细胞以所需密度在血清完全培养基中平板培养24小时，随后用含或不含所需处理的无血清培养基置换培养基。b)神经甾体和P -淀粉样肽制品制备初始浓度IM 的类固醇 PREG(Sigma)、PREGS (Steraloids)、ent-PREGS (St.Louis,Missouri) >PR0G(Sigma)、别孕烯醇酮(Sigma)和 E2 (Sigma)的こ醇(0. 05% )溶液。进行剂量-反应实验，类固醇在培养基中稀释到实验需要的最终浓度。PROG和E2用作正对照。A0卜42获得自Bachem并制备成已知介导神经毒性的纤维形式(Lorenzo等Proc NatlAcad Sci USA 1994;91:12243-47)。如下所述生产A @卜42 :将该肽溶于重蒸馏水(ddH20)到 IOii g/iil，之后于 37°C 振荡(300-400rpm)孵育 I 周。使用B104人神经节细胞培养物在体外研究了两种不同但互补的方法I)PREGS或ent-PREGS的潜在亲神经效果和2) PREGS或ent-PREGS抗A P ^42肽诱导神经毒性的潜在神经保护活性。在两项研究中，将E2、PROG或别孕烯醇酮(PR0G的还原代谢物)之类类固醇代谢物用作正对照，已知它们在不同神经元毒性模型中表现出神经保护性质。细胞存活-流式细胞术采用流式细胞术观察反映AP i_42神经毒性效果以及神经甾体神经保护效果的细胞凋亡或坏死百分比，为此，用对磷脂酰丝氨酸(PS)有亲和性的膜联蛋白V染色细胞(VanGenderen et al. 2006)。在正常活细胞中，PS位于细胞膜的细胞质侧。然而，在凋亡细胞中，PS从内部转移到质膜的外片，在此，膜联蛋白V能结合PS。此外，膜联蛋白V能穿过坏死细胞受损的膜从而结合细胞内部的PS (Van Genderen等 Nat Protoc 2006;1:363-67)。细胞以所需密度接种到6孔板中，生长24小吋。随后根据两种操作步骤处理细胞用特定类固醇后用AP卜42或用AP卜42后用类固醇。根据肽浓度，在6、12或24小时进行动力学研究。为了进行流式细胞分析，用PBS洗涤细胞并通过胰蛋白酶消化收集细胞。离心和重悬于膜联蛋白结合缓冲液，用5-25 Ul膜联蛋白V孵育15分钟，然后用膜联蛋白结合缓冲液洗涤细胞，通过流式细胞术进行检測。用适当软件检测数据，分析分布图。
实施例6MTT 测试在类固醇存在或没有时，通过3-(4，5_四甲基噻唑-2-yl)_2，5-ニ苯基溴化四唑实验(体外毒理学测试试剂盒，MTT based, Sigma)确定AP卜42对B104细胞的神经毒性作用。细胞以所需密度接种到96孔板中，生长24小吋。随后根据上述两种操作步骤对细胞做不同时间(6、12或24小时)处理用特定类固醇后用AP卜42或用AP卜42后用类固醇。在孵育结束时，加入含5mg/ml MTT的磷酸盐缓冲液(PBS)到各孔，孵育再进行4小吋。最后，加入100 ill含50% ニ甲基甲酰胺、20%酸性异丙醇的增溶溶液。使用自动微量滴定读数仪在590nm测定吸收值。各实验重复3次。实施例7锥虫蓝用锥虫蓝评估细胞存活性。B104细胞在6孔板中生长24小时，在上述流式细胞术或MTT测试的条件下进行处理。用I. 5%锥虫蓝(Sigma)溶液染色细胞至少10分钟，用PBS洗涤。在相差显微镜下用血细胞计数器计数未染色或细胞。所有测试和细胞计数重复3次。实施例8免疫细胞化学通过免疫标记方法研究PREGS和ent-PREGS的亲神经效果，使用某些神经元标记小鼠抗68KD神经丝蛋白突光抗体(Sigma)、小鼠抗神经元核(NeuN)单克隆抗体(Chemicon)。在特定神经留体存在或没有(对照)的条件下培养的B104细胞在こ醇/乙酸(95 5)中固定4分钟，在含2%牛血清白蛋白(BSA)的PBS中洗涤和孵育30分钟以阻断非特异性结合。用适当ー级抗体稀释液室温(RT)进行B104免疫染色2小吋。随后，洗涤细胞并用羊抗小鼠IgG孵育。在显微镜(Leica或Zeiss Axiovert 135M，微设置表面荧光系统或光学显微镜Nikon Labophot 2)下检测免疫染色着染的细胞。统计分析数据表示为平均值±3次或更多单独实验的S.E.M，各自重复3次。对于所有实验，用方差分析法(AN0VA;用于各组中不同參数的単独系列)对照组和处理组进行统计学比较，随后如必要进行Newman-Keuls post-hoc测试。显著性水平定为p < 0. 05。
权利要求
1.一种治疗患神经系统疾病或功能紊乱对象的方法，其特征在于，所述方法包括 将孕烯醇酮硫酸盐(PREGS)施用给对象，施用的量为治疗神经系统疾病或功能紊乱的有效量。
2.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述孕烯醇酮硫酸盐是合成的PREGS(-)对映异构体(ent-PREGS)。
3.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述神经系统疾病或功能紊乱是年龄相关的神经变性、阿尔茨海默病、肌萎縮性脊髓侧索硬化症、进行性脑灰质萎縮、巴藤病、疯牛病(BSE)、化疗诱发的神经病变、克雅病、糖尿病性神经病变、唐氏综合症、额颞叶变性、亨廷顿病、HIV相关性痴呆、克拉贝病、路易体痴呆、多系统性萎縮、尼曼-皮克病、帕金森病、多神经炎、朊病毒病、原发性侧索硬化、雷弗素姆氏病、山霍夫氏病、老年痴呆症、少年型家族性黑朦性痴呆、脊髄小脑性共济失调、脊髄性肌萎縮、亚急性脊髄混合变性、脊髓痨或血管性痴呆。
4.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述神经系统疾病或功能紊乱由烧伤、外伤性损伤、机械性损伤、手术损伤、生理损伤、病理性损伤或免疫性损伤引起。
5.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述神经系统疾病或功能紊乱是神经变性疾病。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述神经变性疾病由神经元组织中￠-淀粉样肽积聚引起。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述￠-淀粉样肽是A0 1-42。
8.一种治疗具有以神经元组织中￠-淀粉样肽积聚为特征病情的对象的方法，其特征在于，所述方法包括 将孕烯醇酮硫酸盐(PREGS)施用给对象，施用的量为治疗病情的有效量。
9.一种减少或预防神经元组织中￠-淀粉样肽积聚的方法，其特征在于，所述方法包括 使神经元组织接触孕烯醇酮硫酸盐(PREGS)，接触的量为减少或预防神经元组织中 淀粉样肽积聚的有效量。
10.如权利要求8-9所述的方法，其特征在于，所述爲-淀粉样肽是六ら吣。
11.如权利要求8-9所述的方法，其特征在于，所述孕烯醇酮硫酸盐是合成的PREGS(-)对映异构体(ent-PREGS)。
12.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述病情是阿尔茨海默病、唐氏综合症或路易体痴呆。
13.ー种刺激或促进神经元细胞生长的方法，其特征在于，所述方法包括 使神经元组织接触孕烯醇酮硫酸盐(PREGS)，接触的量为刺激或促进神经元细胞生长的有效量。
14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述孕烯醇酮硫酸盐是合成的PREGS(-)对映异构体(ent-PREGS)。
15.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述神经元细胞处于组织之中。
16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述组织是脑组织、脊髄组织或外周神经组织。
17.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述神经元生长包括神经突触生长。
18.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其特征在于，所述孕烯醇酮硫酸盐经ロ、静脉内、肌肉内、鞘内、舌下、颊侧、鼻内、关节内、腹膜内、皮下或局部施用。
19.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其特征在于，所述孕烯醇酮硫酸盐是预防性施用。
20.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其特征在于，所述对象若非如上所述没有需用孕烯醇酮硫酸盐治疗的迹象。
21.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法进ー步包括施用除了孕烯醇酮硫酸盐外的药剂。
全文摘要
本申请分涉及使用孕烯醇酮硫酸盐(PREGS)抗β-淀粉样肽Aβ1-42神经毒性的方法。本申请还公开了使用孕烯醇酮硫酸盐治疗神经系统疾病或功能紊乱的方法。本申请进一步公开提供使用孕烯醇酮硫酸盐方法刺激或促进神经元细胞生长。
文档编号A61K31/56GK102625703SQ200980157216
公开日2012年8月1日 申请日期2009年12月9日 优先权日2008年12月9日
发明者C·N·阿德拉 申请人:费萨尔国王专科医院及研究中心