本发明涉及一种中药制剂，特别涉及一种中药制剂及在制备治疗女性外阴阴道炎症栓剂中的应用。
(二)
背景技术：
阴道炎是妇科最常见疾病，生育年龄妇女性活动较频繁，且阴道是分娩、宫腔操作的必经之道，容易受到损伤及外界病原体的感染；绝经后妇女及婴幼儿雌激素偏低，局部抵抗力下降，也易发生感染，因此，阴道炎在妇女的各个年龄段都较易发生。近年来，随着感染因素的增加，阴道炎的发病率呈上升趋势，有资料显示，75％的育龄妇女都曾患过阴道炎，并可反复发作。目前临床上常见的阴道炎主要有:①阴道内正常菌群失调导致的细菌性阴道病；②假丝酵母菌引起的外阴阴道假丝酵母菌病③妇女自然绝经及卵巢去势后导致的萎缩性阴道炎④阴道毛滴虫引起滴虫性阴道炎⑤非特异性外阴炎等。中药在治疗这类疾病中发挥了非常显著的疗效，日益为业界所重视。
阴道栓剂在防治女性生殖道感染主要有以下几方面优势：①在腔道内起局部作用，这是阴道栓的特色和长处所在，能够将药物直接送达病处，逐渐释放药物，延长药物的作用时间，从而发挥显著的疗效。②使用方便，尤其适用于不能或者不愿口服给药的患者，提高患者的依从性。③可以避免肝脏的首过效应和胃肠道中胃酸对药物的破坏作用。④避免某些易溶性药物在体内溶化后，局部浓度过大造成对胃肠道粘膜的刺激性。
传统中医药理论对于运用栓剂治疗妇科疾病具有悠久的历史，最早有文字记载的史料可以追溯至秦汉时期，张仲景所著的《金匮要略》就已收载了“矾石丸”的制法和用法：“矾石3分，杏仁1分，上为末，炼蜜为丸，如枣核大。纳脏中，剧则再纳之，主治妇人经水闭不利、脏坚癖不止，中有干血、下白物……”在此中医药理论指导和启示下，本发明人结合临床用药经验，优选黄连、苦参、黄柏、地肤子、稀莶草、蛇床子、蚕砂、地骨皮、千里光、枯矾、冰片、野菊花、川楝子、苍术、浮萍、紫草、白头翁、土荆皮等中药组方，结合现代制药工艺，制备成治疗女性外阴阴道炎症疾病的阴道栓剂，发挥疏风清热、燥湿止带、杀虫止痒的功效。
(三)
技术实现要素：
本发明目的是提供一种中药栓剂及其在制备治疗女性外阴阴道炎症药物中的应用，该栓剂除能有效治疗女性外阴阴道炎症外，还能修复受损的阴道粘膜，维护阴道内菌群的稳定。
本发明采用的技术方案是：
本发明提供一种中药制剂，所述中药制剂由如下质量配比的原料制成：黄连1-20份、苦参1-20份、黄柏1-20份、地肤子10-50份、稀莶草10-50份、蛇床子10-50份、蚕砂1-30份、地骨皮10-40份、千里光10-50份、枯矾1-15份、冰片1-15份、野菊花10-50份、川楝子10-30份、苍术1-15份、浮萍1-30份、紫草1-30份、白头翁1-30份和土荆皮10-45份。
进一步，优选所述中药制剂由如下质量配比的原料制成：黄连3-15份、苦参5-15份、黄柏3-15份、地肤子20-40份、稀莶草20-40份、蛇床子15-35份、蚕砂5-20份、地骨皮10-30份、千里光20-40份、枯矾3-10份、冰片3-5份、野菊花10-30份、川楝子10-20份、苍术1-10份、浮萍15-30份、紫草15-30份、白头翁15-30份和土荆皮10-25份。
进一步，优选所述中药制剂由如下质量配比的原料制成：黄连3-20份、苦参5-20份、黄柏5-20份、地肤子20-50份、稀莶草20-50份、蛇床子15-50份、蚕砂10-30份、地骨皮15-40份、千里光20-50份、枯矾5-15份、冰片10-15份、野菊花15-50份、川楝子15-30份、苍术15-20份、浮萍15-30份、紫草10-30份、白头翁15-30份和土荆皮10-45份。
更进一步，优选所述中药制剂由如下质量配比的原料制成：黄连5份、苦参10份、黄柏5份、地肤子30份、稀莶草30份、蛇床子30份、蚕砂15份、地骨皮30份、千里光30份、枯矾8份、冰片15份、野菊花30份、川楝子10份、苍术10份、浮萍15份、紫草10份、白头翁15份和土荆皮15份。
本发明所述中药制剂由所述质量配比原料的乙醇提取物制成。
本发明还提供一种所述中药制剂的制备方法，所述方法为：按配方量，将各原料混合，加入混合原料重量10倍量pH4-5的体积浓度85％乙醇水溶液回流浸提1小时，过滤，获得一次滤液和一次滤渣；一次滤渣加入混合原料重量5倍量pH4-5的体积浓度85％乙醇水溶液体回流浸提1小时，过滤，获得二次滤液和二次滤饼；合并一次滤液和二次滤液，减压浓缩至无液体流出，取浓缩物于50-100℃干燥至恒重，获得中药制剂。
此外，本发明还提供一种所述中药制剂在制备治疗妇科炎症的阴道栓剂中的应用，所述的阴道栓剂是由中药制剂与基质以质量比1：5-30制成；所述基质包含促渗剂和乳化剂，所述促渗剂为PEG-400(聚乙二醇)和PEG-6000中的一种或两种，所述乳化剂为S-40(聚氧乙烯单硬脂酸酯)。
进一步，优选所述的阴道栓剂是由中药制剂与基质以质量比1:10混合制成。
进一步，所述基质由如下质量配比的原料组成：1-30份PEG-400、1-20份PEG-6000和1-10份乳化剂S-40。
更进一步，所述基质由如下质量配比的原料组成：6份PEG-400、3份PEG-6000和1份乳化剂S-40。
本发明所述阴道栓剂的制备方法为：按配方量，将中药制剂和基质分别在40-60℃温度下熔融，以100-200r/min的搅拌速度搅拌20-40min，将熔融物再升温至40-80℃注模成型，制成阴道栓剂。
进一步，优选所述阴道栓剂的制备方法为：按配方量，将中药制剂和基质分别在50℃温度下熔融，以150r/min的搅拌速度搅拌40min，熔融物再升温至60℃注模成型，制成阴道栓剂。
本发明制备的每枚栓剂重1.5-5g，相当于含生药量8g/g，优选2.2-3g。最佳配方为：中药制剂1份、PEG-400：6份、PEG-6000：3份、S-40：1份组成。
本发明的有益效果主要体现在：本发明配伍来源于临床实践，配伍合理，经药效学验证和临床验证，能有效杀灭白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单孢军、链球菌等微生物，能有效治疗外阴阴道炎所引起的瘙痒、红肿、热痛、带下增多等临床症状，且用法简便，易于患者接受。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
本发明实施例所用中药原料均按照《中华人民共和国中国药典》2015年版进行采集制备。
实施例1：中药制剂(一)的制备
中药制剂配方：黄连3份、苦参5份、黄柏5份、地肤子20份、稀莶草20份、蛇床子15份、蚕砂10份、地骨皮15份、千里光20份、枯矾5份、冰片10份、野菊花15份、川楝子15份、苍术20份、浮萍20份、紫草15份、白头翁15份、土荆皮10份。
中药制剂制备：取黄连3g、苦参5g、黄柏5g、地肤子20g、稀莶草20g、蛇床子15g、蚕砂10g、地骨皮15g、千里光20g、枯矾5g、冰片10g、野菊花15g、川楝子15g、苍术20g、浮萍20g、紫草15g、白头翁15g、土荆皮10g混合，加混合物重量10倍量pH4-5(盐酸调)的体积浓度85％乙醇水溶液，回流提取1h，过滤，获得一次滤液和一次滤渣；一次滤渣滤渣再加混合物重量5倍量pH4-5(盐酸调)的体积浓度85％乙醇水溶液，回流提取1h，获得二次滤液和二次滤饼；合并一次滤液和二次滤液，减压浓缩至稠浸膏(即无液体流出)，转移至蒸发皿内，在50-80℃条件下减压干燥至恒重，获得中药制剂26g，相当于9.15g生药量/g。
实施例2：中药制剂(二)的制备
中药制剂配方：黄连5份、苦参10份、黄柏5份、地肤子30份、稀莶草30份、蛇床子30份、蚕砂15份、地骨皮30份、千里光30份、枯矾8份、冰片15份、野菊花30份、川楝子10份、苍术10份、浮萍15份、紫草10份、白头翁15份、土荆皮15份。
中药制剂制备：取黄连5g、苦参10g、黄柏5g、地肤子30g、稀莶草30g、蛇床子30g、蚕砂15g、地骨皮30g、千里光30g、枯矾8g、冰片15g、野菊花30g、川楝子10g、苍术10g、浮萍15g、紫草10g、白头翁15g、土荆皮15g混合，同实施例1方法，获得中药制剂39g，相当于8.03g生药量/g。
实施例3：中药制剂(三)的制备
中药制剂配方：黄连20份、苦参20份、黄柏20份、地肤子50份、稀莶草50份、蛇床子50份、蚕砂30份、地骨皮40份、千里光50份、枯矾15份、冰片15份、野菊花50份、川楝子30份、苍术15份、浮萍30份、紫草30份、白头翁30份、土荆皮45份。
中药制剂制备：取黄连20g、苦参20g、黄柏20g、地肤子50g、稀莶草50g、蛇床子50g、蚕砂30g、地骨皮40g、千里光50g、枯矾15g、冰片15g、野菊花50g、川楝子30g、苍术15g、浮萍30g、紫草30g、白头翁30g、土荆皮45g混合，同实施例1方法，获得中药制剂74g，相当于8.65g生药量/g。
实施例4：阴道栓剂基质处方的优化
(1)、栓剂基质辅料用量的设置
将实施例2制备的中药制剂2g和20g基质分别在50℃温度下熔融，以150r/min的搅拌速度搅拌40min，熔融物再升温至60℃注模成型，制成阴道栓剂。基质由PEG-400、PEG-6000、S-40混合而成，质量比见表1。
由于PEG-400、PEG-6000、S-40的用量对栓剂的成型工艺具有极大影响，因此首先对三种辅料的配比进行优化，采用L9(34)正交表进行设计，各个因素水平见表1。
表1基质处方因素水平表
(2)栓剂基质正交实验设计
按照L9(34)正交表进行实验设计，以性状和硬度Q1、栓剂重量差异Q2和融变时限Q3(采用中国药典2015年版四部融变时限栓剂项下方法)为考察指标，并依次以0、1、2进行评分，通过积分对栓剂的基质处方进行筛选。结果见表2。
表2栓剂基质优化正交实验设计
由结果可知，在试验范围内，S-40的用量对实验结果影响较大，为主要影响因素。
(3)方差分析
通过方差分析结果表明，在试验范围内，影响因素S-40的用量对栓剂的成型差异有统计学意义，其优选的最佳基质处方为A2B2C1为最佳处方比例，结果见表3。
表3方差分析结果
实施例5：阴道栓的制备工艺优化
(1)阴道栓剂制备工艺中因数水平的确定
将实施例2制备的中药制剂2g和基质20g分别在40、50、60℃温度下熔融，以100、150、200r/min的搅拌速度搅拌20、30、40min，熔融物再升温至40、60、80℃注模成型，按表4制成阴道栓剂22g。基质由12g PEG-400、6g PEG-6000、2g S-40混合而成。
由于熔融温度、搅拌时间、搅拌速度、注模温度对栓剂的成形具有重大影响。因此对其进行不同水平的考察。按照L9(34)正交表进行设计，各个因素水平如表4。
表4四因素三水平正交表
(2)阴道栓剂制备工艺的正交实验设计
按照L9(34)正交表进行实验设计，以性状和硬度Q1、栓剂重量差异Q2和融变时限Q3(采用中国药典2015年版四部融变时限栓剂项下方法)为考察指标，并依次以0、1、2进行评分，通过积分对阴道栓剂的制备工艺进行筛选。结果见表5。
表5阴道栓剂制备工艺的正交实验设计
由结果可知，在试验范围内，搅拌时间对实验结果影响较大，为主要影响因素。
(3)方差分析
通过方差分析结果表明，在试验范围内，影响因素搅拌时间对栓剂的成型差异有统计学意义，其优选的最佳基质处方为A2B3C3D3为最佳制备工艺，即熔融温度：50℃、搅拌时间：40min、搅拌速度：150r/min、注模温度60℃为最佳工艺，结果见表6。
表6方差分析结果
实施例6：阴道栓剂制备工艺的验证
根据正交试验确定的最佳制备工艺(即实施例5)，称取2g实施例2制备的中药制剂、12g PEG-400、6g PEG-6000和2g S-40，在50℃下熔融，并保温至60℃，以150r/min的速度搅拌40min后注模，制备成10颗栓剂，每枚栓剂重2.5g左右。验证(采用中华人民共和国药典2015年版四部融变时限栓剂项下方法)实验制备的栓剂成品合格率良好，工艺稳定易行。实验结果见表7。
表7制备工艺的验证
实施例7：中药制剂体外抑菌实验
(1)供试品溶液的制备：取实施例2制备的中药制剂2.5g，用2mlDMSO溶解，制备成含生药量800mg/ml的母液。
(2)含药琼脂板的制备：使用MH琼脂，按商品说明书进行配制，链球菌使用含5％(V/V)绵羊血的MH琼脂(购自华东医药器化分公司)。按1：9体积比配制药物琼脂平板，将不同体积的含生药量800mg/ml的母液加入已加热溶解并在45-50℃水浴中平衡的含5％(V/V)绵羊血的MH琼脂中，充分混匀倾倒灭菌平皿，琼脂厚度3-4mm(约25ml)，使药物终浓度分别为80mg/mL、40mg/mL、20mg/mL、10mg/mL、5mg/mL。配制好的含药琼脂平板装入密封塑料袋中，置2～8℃冰箱中备用。
(3)菌株的接种：取铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa(Schroeter)Migula)、大肠埃希菌(Escherichia fergusonii)、化脓性链球菌(Streptococcus)、无乳链球菌(S.agalactiae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和白色念珠菌(Monilia albican)，分别制备浓度相当于0.5麦氏标准比浊管的菌悬液，再用无菌注射用水按体积比1：10稀释，以多点接种器吸取制备好菌液(约1～2μl)接种于步骤(2)含药琼脂平板表面，每点菌数约为104CFU，形成直径为5～8mm的菌斑。接种好后置35℃孵育16～20h观察结果每个浓度重复两块平板。
(4)结果评判：抑菌程度以菌斑的大小判断，与不加药物的对照平板比较，不长菌为完全抑制，参照CLSI M07-A8需氧菌抗菌药物敏感试验分级标准分级，抑菌强度依次为完全抑制>强抑制>部分抑制>弱抑制。
(5)体外抑菌实验结果(表8)：在40mg/mL浓度下，中药制剂能完全抑制铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、化脓性链球菌和无乳链球菌的生长，对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌具有较强的抑制作用；在80mg/mL浓度下能完全抑制金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长。
表8中药制剂对不同菌株的抑菌试验结果
以上所述仅为本发明的最佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本范明的权利要求范围内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本范明的保护范围之内。