专利名称：制备含1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-s-氧化物的药剂的方法
技术领域：
本发明涉及5-苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物作为药理活性物质的应用，特别对大的哺乳动物，尤其是人类的肝损伤的治疗和预防作用，本发明还涉及含有作为有效成分的5-苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的药剂，以及具有有价值的药用性质、特别是肝保护性质的新的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的化合物。
Perez等(Libiegs Ann.Chem(李比希化学年报).1981，1510-1512)、Tamayaki等(Chem.Lett(化学通迅)1980，619-620)和Boehringer等(Phospholus and Sulfur(磷和硫)，12(1981)，115-122)研究三硫酮的氧化反应，从中得知了5-苯基-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物，但该化合物迄今未见报导有药理活性。
茴香三硫酮(5-(4-甲氧基苯基)-3 H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮)作为利胆药是现有有售的药剂(商品名为Suifarlem 、Felvitin)，该药剂也已知是具有保肝性质的药品。
本发明的目的是开发对肝损伤有预防和治疗作用的新药剂。本发明进一步目的是制备具有有价值的药理性质的新的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮衍生物。
现已发现通式为Ⅰ的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物这一类化合物具有有价值的药理性质，特别是显示出肝保护性质。
式中，R1为氢、C1-2烷基、低碳烷氧基、羟基、卤素、三氟甲基或硝基;
R2为氢、卤素或低碳烷氧基;或R1与R2连结于相邻的碳原子上，共同形成含1-2个碳原子的亚烷二氧基。
它们的显著特点是，有好的配伍性，较少毒性，特别是对肝脏有保护作用，使之免于受外源性肝毒性物质的损伤。
基于它们的药理性质，特别是基于肝保护作用，式Ⅰ所示的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物适宜于作为药物，特别是用于预防和治疗肝损伤，例如由于药物的使肝中毒的剂量、化学毒物或射线引起的肝损伤。
通式Ⅰ所示的化合物的R1和R2所含的低碳烷基可以是直链或支链，含C1-C4较好，尤其是1-2个碳原子的更好。低碳烷氧基R1或R2最好是甲氧基。R1或R2为卤素取代基时可考虑是氟、氯或溴，最好是氯或氟。
若R1是一个烷基时，最好是甲基，并处于2-位或3-位。R1若是卤素取代基时，最好处于4-位。R2最好是氢。
通式Ⅰ的5-苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物显示有价值的药理性质，尤其是肝保护性质，并且有较好的配伍性和毒性小的特征。
这样，这类物质能够使肝脏免受损伤，例如能够保护肝脏免受外源性肝毒物质引起的损伤或对抗这些毒物。
众所周知，一定剂量的一些化学物质和某些药物可引起肝细胞的损伤，并导致肝脏细胞溶解和肝坏死。肝细胞发生细胞溶解性的损伤时，某些转氨酶由受损伤的肝细胞中释放到循环血液的量增加了，测定这些转氨酶在血清中的活性，就能够确定肝脏的损伤和评价受损伤的程度。
醋氨酚(即扑热息痛或称4-(N-乙酰基氨基)酚)就是一种已知的有肝损伤作用的物质。在生理允许的剂量下，通常它作为镇痛剂，但在大剂量时，却是一种很强的肝毒物质。高剂量的醋氨酚引起啮齿类的肝损伤，类此可知它能引起人的肝坏死。因此醋氨酚作为致肝毒的标准物，用于动物的标准化药理试验，以评价受试物质的肝保护作用。
通式Ⅰ的化合物对醋氨酚的肝损伤作用具有明显的防护作用，如同后面所述的动物药理标准化试验所指出的那样。
文献上对醋氨酚的代谢作用及肝毒性作用已作了详尽的讨论。例如，已知醋氨酚代谢物与谷胱甘肽的结合作用，对于醋氨酚的解毒和清除起着重要的作用，还知，当给以过量的醋氨酚时，造成了细胞中谷胱甘肽的匮乏，这时就出现了特别强烈的肝毒性。此外还已知，肝毒性作用还部分地由于代谢作用生成的活性物质与肝组织的大分子形成共价键;还已知，由于细胞膜的脂质过氧化作用以及其中产生的过量的活泼自由基、特别是氧自由基，它们在醋氨酚的肝毒性作用中起着关键的作用。这样，通式Ⅰ所示的5-苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物对于因醋氨酚诱发的肝损伤的防护作用表明，这些化合物具有阻断脂质过氧化的性质，它们可能起到了自由基捕获剂的作用和具有抗氧化作用。
药理试验的说明A)对于过量醋氨酚引起的小鼠死亡的保护作用的测定每组试验用雌性小鼠20-30只，体重约20g。试验中，动物给以常规的饲料量，可随时摄取pH为3的饮水。
这些动物的致毒作用是给腹腔注入1000mg/kg的醋氨酚(悬浮于0.5ml的阿拉伯胶的水溶液中)而产生的。
致毒前1小时，用灌胃器对一个试验组的动物给予悬浮剂形式的受试化合物50mg/kg。对照组用同样数量的动物，致毒前1小时只给所说悬浮剂。
观察在6天内各试验组的动物死亡的数目，并由此计算受试物的保护作用，用达到的百分保护率表示(即受试组动物的死亡数与对照组动物的死亡数之差，除以各组的动物数)。
下面的表A列出了用上述试验方法得到的结果。对式Ⅰ化合物列出的实施例号是指后面所述的制备实施例号。
表A
<p>B)对醋氨酚诱导的小鼠肝损伤，使血清中转氨酶值增高的防护作用的测定本试验用体重约25g的雌性小鼠，动物可摄取所给食物和随意饮用pH为3的饮水。
动物的致毒作用是将450mg/kg的醋氨酚(悬浮于0.5ml的阿拉伯胶水溶液中)注入腹腔而产生的。
致毒前1小时，作为一种防毒措施，用灌胃器给这些动物以悬浮剂形式的受试有效物质75mg/kg;对照组动物在致毒前1小时只给悬浮剂。
给醋氨酚18小时后，处死动物，切断颈切脉放血。
对上述两种药效试验的每一种情况，取两只动物的血样放在一个试管中，室温放置2-3小时，在4℃倾析1小时，然后于2500xg离心10分钟。
血清上清液转移到塑料试管中，测定其中的转氨酶SGOT(即血清谷氨酸-草酰乙酸转氨酶)及SGPT(即血清谷氨酸-丙酮酸转氨酶)的活性，按照由德国临床化学协会推荐的优化的标准条件下的已知标准方法测定(见临床化学及临床生物化学杂志(Z.Klin.Chem.U.Klin.Biochem.)8(1970)，658-660和同上杂志10(1972)，281-283)，用国际单位/升/分钟表示。在波长为334nm用自动光谱仪(Eppendorff厂制造，光谱仪No.61)测定其活性。为测定GOT和GPT所用的试剂盒是由Boehringer-Mannheim公司制造的(即GOT和GPT自动测试盒，诊断剂No.258 822和258 784，由Boehringer-Mannheim有限公司制造)。
按上述的试验方法得到的结果列于表B中。表中的转氨酶活性用国际单位/升/分钟表示。从未进行预处理的对照组和进行了预处理的试验组测得的各个结果求出的平均值(m)和标准偏差(sem)也列于表中。此外，保护作用以达到的百分保护率表示，计算后列于表中(保护率＝对照与试验组的血清活性平均值之差除以对照组平均值)。
基于通式Ⅰ的化合物的药理性质，特别是它们的保肝作用，这些化合物适用于预防和治疗肝脏损伤。因此这些物质适用于预防和治疗由于肝损伤所造成的病理状态，例如肝硬化、无意的或事故性的被肝毒化学物质所引起的中毒例如除莠剂、超剂量药物造成的肝中毒、使用具有肝毒副作用的药物进行治疗，例如癌化疗、射线引起的肝损伤，例如癌放疗。
使用的剂量随个体而不同，并根据接受治疗的患者的状况、使用的物质和给药方式自然加以变更。用于较大的哺乳动物，特别是人的剂型，一般是每单个剂量含有效物质5-50mg为宜。
本发明还涉及通式为Ⅰa的新的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的化合物及其制备法。
式中，R1′为C1-2烷基、低碳烷氧基、羟基、卤素、三氟甲基或硝基;
R2为氢、卤素或低碳烷氧基;或R1′与R2连结于相邻的碳原子上，共同形成含1-2个碳原子的亚烷二氧基。
通式Ⅰ表示的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物，可由相应的通式为Ⅱ的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮化合物用已知的方法氧化而获得。
式中R1与R2的含义同上。
通式Ⅱ表示的化合物的氧化以生成相应的通式Ⅰ化合物的反应，可根据将1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮氧化成相应的S-氧化物的已知的方法来进行，例如用前面所列的文章中所述的方法进行。
前面引用的文献中给出了适宜的氧化剂，例如在有含羟基的一种有机溶剂(例如乙酸或甲醇)存在下的过氧化氢;过乙酸的芳香烃(例如苯)溶液;在对反应条件呈惰性的非质子传递溶剂例如卤代烷烃(如二氯甲烷或氯仿)或丙酮中的3-氯过苯甲酸;或在丙酮和低碳醇(特别是甲醇)组成的混合物中的过碘酸钠。氧化剂的用量以大约等当量为好，最好不要过量，当反应混合物中检测不出原料了时，反应就立即中止。反应温度按使用的氧化剂种类而变化，可在-10℃到50℃之间。如需要的话，还可将另外的有机溶剂加到反应介质中，所说有机溶剂在反应条件下呈惰性，例如芳烃(如苯或甲苯)。采用大约等当量(直至过量15%)的3-氯过苯甲酸，在较低的温度下(例如-25℃到室温之间)进行氧化，证明是特别适宜的。
生成的通式Ⅰ的化合物用已知的方法能自反应混合物中分离出并纯化。
作为原料使用的通式Ⅱ的5-苯基-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮化合物是已知的，且/或可按已知的方法或类似于已知方法的方法制备。
例如，为了制备通式Ⅱb的化合物，可将通式Ⅲ的酮酯用已知的方法进行环硫化，例如用P4S10处理，更好的是按Pedersen及Lawesson所述的方法(见四面体(Terahedron)35，2433-2437)与式Ⅳ表示的2，4-双(4-甲氧苯基)-1，3-二硫代-2，4-二膦丁环-2，4-二硫化物(2，4-bis(4-methoxyphenyl)-1，3-dithia-2，4-oliphosphetan-2，4-disulphide，称为Lawesson试剂)反应，若在元素硫的存在下则更好。
式Ⅱb中，R1″的定义与前述的R1相同，但羟基除外;R2的定义同前述。
式Ⅲ中，R1″和R2与上述的定义相同，R4为低碳烷烃，特别是乙基。
与Lawesson试剂和元素硫的反应是在惰性溶剂、特别是无水芳香烃如甲苯中、在较高温度(最好是在反应混合物的沸腾温度)下进行。每1mol的通式Ⅲ的酮酯采用通式Ⅳ的化合物1-2mol、元素硫1-2mol来进行反应是较好的。
由通式Ⅴ的烯类化合物，在高温下于一种有机溶剂中与硫磺反应，可获得通式Ⅱ的化合物 式中R1和R2的定义同前。
该反应最好在高温、例如175-235℃下进行，用四氢噻吟矾作溶剂，按美国专利No.3，847，943所述的方法进行操作。
通式Ⅱb的化合物的制备，是由式Ⅵ的苯乙酮化合物(式中R1″和R2的定义同前)起始，在碱存在下首先与二硫化碳反应，生成式Ⅶ的化合物(式中R1″和R2的定义同前)
该中间体进而与五硫化二磷反应，生成通式Ⅱ的化合物。
式Ⅵ的化合物与二硫化碳的反应，可以按照(例如)由Thuillier等所述的方法进行(法国化学会志(Bull.Soc.Chim.France)，Série 5，化学会报告集(Mémoires Présentes ála Soc.Chim.)(1959)，1398-1401)。该反应最好是在惰性有机溶剂中例如苯或乙醚中进行，用叔醇的碱金属如叔丁醇钠或叔戊醇钠催化。此时生成的中间体与P2S5反应，最好是在芳香烃如甲苯或二甲苯中、在反应混合物的沸腾温度下进行。
为了制备通式Ⅱ的、其中R1为羟基的化合物，可将通式Ⅱ中R1为甲氧基的相应的化合物用已知的方法去甲基化。例如甲氧基用氯化吡啶鎓处理，进行酸性裂解。
依据本发明，通式Ⅰ的化合物可以与常规的药用辅助剂和/或载体共同制成固态或液态的药物制剂。固体制剂的实例有口服制剂如胶囊、片剂、颗粒剂或糖锭剂，或者栓剂。固体制剂可含有制药上常用的无机和/或有机载体，如滑石粉、乳糖或淀粉;此外，制药上常用的辅助剂，例如润滑剂如硬脂酸镁，或片剂崩解剂。栓剂可含有熟知的栓剂基质。液体剂型如溶液剂、悬浮液或乳剂，可含有常用的稀释剂如水或石腊油，还可含有分散剂如聚乙二醇等。还可以加入其它的辅料，例如防腐剂、稳定剂、矫味剂。
有效成分可以同药用辅料和/或载体用已知的方法混合，制成制剂。为了制成固体药品，例如将有效成分与辅料和/或载体按常规方法混合，在湿的或干的状态下成粒。根据所用辅料的类型，必要时也可以经简单混合，制成可直接压片的粉剂。颗粒或粉剂可直接装入胶囊，或用常规方法压成素片，最好是用已知的方法将它们包上糖衣。
下面的实施例对本发明加以说明，但不应认为以此限制本发明的范围。
实施例15-(4-氯苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物a)在100ml无水的甲苯中加入乙酸4-氯苯甲酰乙酯22.7g(0.1mol)、Lawesson试剂(2，4-双(4-甲氧苯基)-1，3-二噻-2，4-二膦丁环-2，4-二硫化物)100g(0.25mol)和元素硫6.4g(0.2mol)，于100℃搅拌10小时。反应毕，将含有生成的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮的反应混合物在室温下冷却。过滤，滤液倒入300g硅胶柱中。甲苯用轻石油醚洗脱，然后，用甲苯/轻石油醚混合液(50∶50)洗脱5-(4-氯苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮。得到的粗品再一次经硅胶柱、用甲苯/轻石油醚洗脱纯制后，用甲苯重结晶，得到5-(4-氯苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮9.6g，熔点135℃。
b)将4.9g(0.02mol)的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮溶解于60ml氯仿中。溶液冷却到0℃，将5.3g纯度为80-90%的3-氯代过苯甲酸(约为0.026mol)于150ml氯仿中的溶液滴加到上述的冷溶液中。大约30分钟滴加完毕，红色的反应混合物于0℃再保持1小时。
反应毕，反应混合物先用100ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后用水洗，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液在室温下减压浓缩成30ml，残留物经过175g硅胶柱，用氯仿洗脱。此时未反应的原料首先洗脱出，并可回收。然后得到氧化生成的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物。将含有该S-氧化物的洗脱部分在室温下减压蒸干，剩余物加入轻石油醚使之结晶，将得到的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物红色固体滤集。在空气中迅速干燥，得到S-氧化物3.4g，熔点123-125℃。
实施例25-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物a)100g(0.41mol)5-(4-甲氧苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮和335g(2.9mol)的氯化吡啶鎓组成的混合物在210-215℃温度下加热4小时。然后将反应混合物冷却到80℃，用2升的温水洗涤，以除去吡啶鎓盐。将400ml 10%的氢氧化钠水溶液加到剩余物中。将生成的5-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮的钠盐滤集，用500ml温水溶解，加入乙酸，使5-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮沉淀。吸滤并干燥沉淀物。得到的粗品溶解于300ml乙醇与25ml二乙胺的热混合液中，所得溶液流经氧化铝短柱。用100ml热乙醇洗脱柱子。得到的红色洗脱液减压浓缩到原体积的一半，此时5-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮的二乙胺盐结晶析出。滤集该红色结晶，加到250ml烯盐酸中。得到的悬浮液在室温下搅拌1小时。沉淀出的5-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮滤出，水洗后，用五氧化二磷干燥。得5-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮23.5g，熔点192℃。
b)在室温、剧烈搅拌下，将9.4g80-90%的3-氯代基苯甲酸(约0.046mol)于200ml丙酮中的溶液，1小时内加到10g，0.004mol)的5-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮溶于300ml的丙酮溶液中。在室温下将反应混合物再保持一小时。析出的红色沉淀5-(4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物吸滤收集，五氧化二磷干燥。得到S-氧化物9.4g，熔点118-124℃。
按照斜面实施例中所叙述的方法，通过氧化通式Ⅱ的对应化合物，也可以制备下表中所列的相应的通式Ⅰ的化合物。
表1
实施例Ⅰ含有5-(4-氯苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的片剂制备的片剂每片含有如下的组分5-(4-氯苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物 15mg玉米淀粉 65mg乳糖 135mg明胶(10%溶液形式) 6mg将活性物质、玉米淀粉和乳糖用10%明胶溶液覆盖，糊状物搅拌研磨并制成颗粒，放到适当的金属盘上，于45℃干燥。干燥后的颗粒进入粉碎机，并于混合机内与下列的辅助剂再混合滑石粉 5mg硬脂酸镁 5mg玉米淀粉 9mg然后压制成240mg片剂。
实施例Ⅱ含有5-苯基-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的胶囊制成的胶囊每个具有如下的组分5-苯基-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物 10mg乳糖 65mg玉米淀粉 40mg可溶性淀粉 4mg硬脂酸镁 1mg将活性物质、乳糖和玉米淀粉混合，混合物用15%的可溶性淀粉溶液充分湿润并制成颗粒。湿化物料过1.6mm筛，40℃干燥，然后再过1.0mm筛。所得颗粒与硬脂酸镁混合后，制成含120mg的胶囊。
按实施例Ⅱ所述的制胶囊方法，也可制造含有作为有效物质的5-(2-甲氧苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物或5-(4-氟苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的胶囊。
权利要求
1.制备具有保肝性质的含通式Ⅰ的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的药剂的方法， 式中，R1为氢、C1-2烷基、低碳烷氧基、羟基、卤素、三氟甲基或硝基；R2为氢、卤素或低碳烷氧基；或R1和R2连结于相邻的碳原子上，共同形成含1-2个碳原子的亚烷二氧基，其特征是，将有效保肝量的通式Ⅰ的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物与制药上常用的辅料和/或载体共同制成适宜的药剂剂型。
全文摘要
本发明涉及制备含有通式I的1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮-S-氧化物的保肝药剂的方法。通式I中R
文档编号A61K31/365GK1101348SQ9410157
公开日1995年4月12日 申请日期1994年2月9日 优先权日1988年5月27日
发明者多米尼克·拜尔德, 马利-欧迪·克里斯坦, 帕特里克·丹塞特, 丹尼尔·亚瑟兰德, 丹尼尔·曼苏, 亚莫·萨西 申请人:卡利药物化学股份公司