一种壳聚糖包覆的vc-ve脂质体及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物制剂及化妆品领域，具体而言是一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体 及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 1965年，英国学者Bangham和Standish最早发现将磷脂分散在水中会形成多层囊 泡，每一层均为脂质双分子层，囊泡中央和各层之间被水相隔开，并称之为脂质体。脂质体 一经发现就引起了生物学家、药学家的兴趣。鉴于其独特的结构特点和组成，脂质体可作为 功能性成分的载体起到缓释、稳定有效成分等作用。
[0003] 维生素 C是一种水溶性的维生素，它可合成胶原蛋白和黏多糖，减少自由基对皮 肤的损害，延缓衰老，还可抑制皮肤中异常色素的沉积和酪氨酸酶的活性，减少黑色素的形 成，被广泛应用在美白和抗氧化护肤化妆品中。而维生素 E是一种脂溶性的维生素，它可以 钝化过氧化自由基的活性或与脂质过氧化自由基反应，并具有抗衰老、提高机体免疫力等 作用。
[0004] 但是维生素 C性质不稳定，在储藏和加工过程中受热、见光易氧化、分解，导致其 利用率显著降低，故不能充分发挥效用。其次，维生素 C是水溶性的，不易渗透到皮肤角质 层，而脂质体恰具有增强渗透性的特点。故为提高其在人体中的吸收利用率，将维生素 C包 裹在脂质体的内水腔中。
[0005] 由于目前常见的维生素 C或维生素 E脂质体存在稳定性欠佳、不易储存、脂质体内 活性物质容易泄露等问题。同时。目前制备脂质体的方法主要有薄膜蒸发法，反相蒸发法， 冻融法，乙醇注入法等。上述方法存在有机溶剂残留、颗粒单分散性差等缺点。这些不足抑 制了维生素 C和维生素 E在化妆品行业的应用。
[0006] 因此，我们需要一种新的维生素 C或维生素 E脂质体及其制备方法，以克服现有技 术中的不足，发展维生素 C和维生素 E在化妆品行业的应用。
【发明内容】
[0007] 为解决现有技术的不足，本发明提出一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体，该脂质体 具有包封率高、稳定性好、脂质体粒径均匀，单分散性高等优点。同时，本发明还提出一种超 临界二氧化碳法，避免了产品中有机溶剂的残留，从而提高了所述VC-VE脂质体在化妆品 应用中的安全性。
[0008] 为实现上述目的，所采取的技术方案是：一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体，包含以 下组份：卵磷脂、胆固醇、维生素 C、维生素 E及壳聚糖；其中，所述VC-VE脂质体以卵磷脂和 胆固醇形成的磷脂双分子层为脂质体骨架材料，维生素 C包埋于所述脂质体的内水相，维 生素 E包封于所述磷脂双分子层间，并且，壳聚糖包覆于所述VC-VE脂质体的表面。
[0009] 在本发明一实施例中，所述各组份之间的质量比关系为： 所述卵磷脂与所述胆固醇的质量比为（4?4.5) : 1，优选地，所述卵磷脂与所述胆固 醇的质量比为4 : I; 所述卵磷脂：维生素 C:维生素 E的质量比为17 : (7?17) : 1，优选地，所述卵磷脂： 维生素 C :维生素 E的质量比为17 : (7?9) : 1。
[0010] 在本发明一实施例中，所述卵磷脂选自蛋黄卵磷脂。
[0011] 本发明还提供一种上述壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的制备方法，以超临界二氧化 碳流体为介质，经过成膜、孵化和包覆步骤而制得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体。
[0012] 在本发明一实施例中，所述制备方法包括以下步骤： (1) 先将维生素 E溶解于甲醇，获得维生素 E的甲醇溶液；然后，将卵磷脂、胆固醇和所 述维生素 E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，旋转蒸发成膜并去除有机溶液，然后加入维 生素 C溶液并搅拌；其中， 所述卵磷脂选自蛋黄卵磷脂； 所述卵磷脂与所述胆固醇的质量比为（4?4.5) : 1，优选地，所述卵磷脂与所述胆固 醇的质量比为4:1; 所述卵磷脂：维生素 C:维生素 E的质量比为17 : (7?17) : 1，优选地，所述卵磷脂： 维生素 C :维生素 E的质量比为17 : (7?9) : 1; 所述氯仿与甲醇的体积比为（7?8) :3 ; (2) 使步骤（1)的混合液在5(T60°C温度下、在压力为12~16Mpa的二氧化碳气氛下孵 化，获得VC-VE脂质体溶液； (3) 将步骤（2)获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸 溶液中，室温反应后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中， 所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1: 4。
[0013] 在本发明一实施例中，在步骤（3)中，所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度 为 1 ?3mg/ml 〇
[0014] 在本发明一实施例中，在所述步骤（2)中，孵化时间为1小时；在所述步骤（3)中， 室温反应时间为1小时。
[0015] 在本发明一实施例中，所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6. 5。
[0016] 在本发明一较佳实施例中，提供一种上述壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的制备方 法，所述制备方法具体包括： (1) 先将维生素 E溶解于甲醇，获得维生素 E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇 和所述维生素 E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使 有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素 C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；其中， 所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4 : 1; 所述蛋黄卵磷脂：维生素 C :维生素 E的质量比为17 : (7?17) : 1; 所述氯仿与甲醇的体积比为8:3 ; (2) 使步骤（1)的混悬液在5(T60°C温度下、在压力为12~16Mpa的二氧化碳气氛下孵 化1小时，获得VC-VE脂质体溶液； (3) 将步骤（2)获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸 溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中， 所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4 ; 所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6. 5 ; 所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为1?3mg/ml。
[0017] 本发明还提供上述壳聚糖包覆的VC-VE脂质体在化妆品中的应用。
[0018] 在本发明中应用超临界二氧化碳流体来制备VC-VE脂质体。所述超临界二氧化碳 流体是一种环境友好型溶剂，在制备结束后易于与产物分离且不造成环境污染，并具备优 良溶剂的特性。在本发明中，超临界二氧化碳法的优势主要表现在以下几个方面：第一，与 其他制备方法比较，超临界二氧化碳法制备的脂质体粒径较为均匀，单分散性高；第二，与 蒸发、萃取或稀释等操作比较，利用超临界二氧化碳法制备的脂质体有机溶剂残留量低，为 脂质体的安全应用提供了可能；第三，在孵化过程中，超临界二氧化碳流体可以溶解磷脂中 的小分子杂质，释放二氧化碳时杂质会被带离体系，达到纯化磷脂提高脂质体质量的目的； 第四，超临界二氧化碳流体是二氧化碳气体在一定温度下经高压作用形成的，体系中的高 压有利于活性分子进入脂质体的内水相，进而提高脂质体的包封率。此外，超临界二氧化碳 流体环境可以塑化磷脂分子的结构，这种塑化作用有利于磷脂分子形成热力学更稳定的构 象，使双分子层的排列更加均匀，以达到提高脂质体稳定性的目的。
[0019] 与现有技术相比，本发明的制备方法，利用超临界二氧化碳流体避免了产品中有 机溶剂的残留、提1? 了脂质体中维生素 C的包封率等，使获得的VC-VE脂质体具有脂质体 粒径均匀、单分散性高、稳定性高等优点。同时，本发明将具有优异特性的化妆品添加剂壳 聚糖包覆于VC-VE脂质体的表面，不仅提高了 VC-VE脂质体的稳定性，也拓展了应用本发明 的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的化妆品的功能。
【附图说明】
[0020] 图1是本发明的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的原子力显微镜图； 图2a是应用本发明的制备方法制得的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的粒径分布； 图2b是应用现有的薄膜分散法制备壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的粒径分布。
【具体实施方式】
[0021] 以下结合实施例对本发明做详细的说明，实施例旨在解释而非限定本发明的技术 方案。
[0022] 实施例1 本实施例提供一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体及其制备方法，所述制备方法包括： (1) 先将维生素 E溶解于甲醇，获得维生素 E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇 和所述维生素 E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使 有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素 C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；其中， 所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4:1; 所述蛋黄卵磷脂：维生素 C :维生素 E的质量比为17 : 7 : 1 ; 所述氯仿与甲醇的体积比为7 : 3; (2) 使步骤（1)的混悬液在50°C温度下、在压力为12Mpa的二氧化碳气氛下孵化1小 时，获得VC-VE脂质体溶液； (3) 将步骤（2)获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸 溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中， 所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4 ;所述壳聚糖的醋酸溶液 的pH值为6. 5 ;所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为lmg/ml。
[0023] 具体来说，本实施例的制备方法如下： 称取50mg蛋黄卵磷脂及12. 5mg胆固醇置于圆底烧瓶中，移入3ml VE的甲醇溶液 (lmg/ml)，再加入7ml的氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，温度设定为40°C，抽真空使 有机溶剂完全挥发。再加入IOml VC溶液（2mg/ml)于上述圆底烧瓶中，磁力搅拌使膜脱落。 将上述混悬液及磁子置于高压反应釜中，并将高压反应釜置于50°C的恒温水浴中，通CO 2气 体至釜内压力为12MPa。然后关闭进气阀，孵化一个小时。孵化结束后，将恒温水浴温度降 至室温，缓慢释放CO 2气体至体系压力降至常压，即得VC-VE脂质体溶液。
[0024] 取Iml脂质体溶液，以滴加的方式加入到4ml壳聚糖的醋酸溶液中（lmg/ml)，壳聚 糖的醋酸溶液PH=6. 5,边滴加边搅拌，室温下混合一小时后即得壳聚糖包覆的VC-VE脂质 体。
[0025] 实施例2 本实施例提供一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体及其制备方法，所述制备方法包括： (1) 先将维生素 E溶解于甲醇，获得维生素 E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇 和所述维生素 E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使 有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素 C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液； 其中， 所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4 .2 : 1; 所述蛋黄卵磷脂：维生素 C :维生素 E的质量比为17 : 7 : 1 ; 所述氯仿与甲醇的体积比为8 : 3; (2) 使步骤（1)的混悬液在55°C温度下、在压力为HMpa的二氧化碳气氛下孵化1小 时，获得VC-VE脂质体溶液； (3) 将步骤（2)获