中，如 果例如需要获得两个肽或蛋白质残基共价附着于单一 PEG部分的缀合物，可以使用两个末 端都可用于缀合的PEG双官能形式。
[0077] 在另一种实施方式中，分枝PEG表示为R(PEG-OH)m，其中R表示中心核心部分，例 如季戊四醇或甘油，并且m表示分枝臂的数目。分枝臂的数目（m)可以在三到一百或更多 的范围内。在另一种实施方式中，羟基经历化学修饰。在另一种实施方式中，分枝PEG分子 描述于美国专利第6, 113, 906号、第5, 919, 455号、第5, 643, 575号和第5, 681，567号中， 所述专利特此以全文引用的方式并入。
[0078] 在另一种实施方式中，本发明提供具有PEG部分的0ΧΜ，所述PEG部分不像在标准 聚乙二醇化程序中一样直接附着于0ΧΜ，而是所述PEG部分通过例如Fmoc或FMS的接头附 着。在另一种实施方式中，接头对碱非常敏感并且在弱碱性条件下可去除。在另一种实施 方式中，经由Fmoc或FMS与PEG连接的OXM与游离OXM具有相等活性。在另一种实施方 式中，经由Fmoc或FMS与PEG连接的OXM的活性大于游离0ΧΜ。在另一种实施方式中，经 由Fmoc或FMS与PEG连接的OXM包含与游离OXM不同的活性。在另一种实施方式中，经由 Fmoc或FMS与PEG连接的OXM不同于游离0ΧΜ，不具有中枢神经系统活性。在另一种实施 方式中，经由Fmoc或FMS与PEG连接的OXM不同于游离0ΧΜ，不能穿过血脑屏障进入脑中。 在另一种实施方式中，与游离OXM相比，经由Fmoc或FMS与PEG连接的OXM包含延长的循 环半衰期。在另一种实施方式中，经由Fmoc或FMS与PEG连接的OXM连同Fmoc或FMS部 分一起失去其PEG部分，因此恢复游离0ΧΜ。
[0079] 在另一种实施方式中，本发明提供下式的化合物：(X) η-Y，其中Y是OXM的带有游 离氨基、羧基或羟基的部分，并且X是式（i)基团：
[0080]
【主权项】
1. 一种组合物，其由胃泌酸调节素、聚己二醇聚合物（PEG聚合物）W及9-巧基甲氧撰 基（Fmoc)或2-賴基-9-巧基甲氧撰基（FM巧组成，其中所述阳G聚合物经由Fmoc或FMS 与所述胃泌酸调节素的氨基末端连接。
2. 权利要求1的组合物，其中所述胃泌酸调节素由SEQ ID NO: 1所示氨基酸序列组成。
3. 权利要求1到2中任一项的组合物，其中所述PEG聚合物是具有琉基部分的PEG聚 合物。
4. 权利要求1到3中任一项的组合物，其中所述PEG聚合物是PEG 3。。
5. -种药物组合物，其包含权利要求1到4中任一项的组合物和药学上可接受的载剂。
6. -种组合物，其由胃泌酸调节素、聚己二醇聚合物（PEG聚合物）W及9-巧基甲氧撰 基（Fmoc)或2-賴基-9-巧基甲氧撰基（FM巧组成，其中所述阳G聚合物经由Fmoc或FMS 与所述胃泌酸调节素的氨基酸序列的十二号位置上的赖氨酸残基（Lysi2)连接。
7. 权利要求6的组合物，其中所述胃泌酸调节素由SEQ ID NO: 1所示氨基酸序列组成。
8. 权利要求6到7中任一项的组合物，其中所述PEG聚合物是具有琉基部分的PEG聚 合物。
9. 权利要求6到8中任一项的组合物，其中所述PEG聚合物是PEG 3。。
10. -种药物组合物，其包含权利要求6到9中任一项的组合物和药学上可接受的载 剂。
11. 一种组合物，其由胃泌酸调节素、聚己二醇聚合物（PEG聚合物）W及9-巧基甲氧 撰基（Fmoc)或2-賴基-9-巧基甲氧撰基（FM巧组成，其中所述阳G聚合物经由Fmoc或 FMS与所述胃泌酸调节素的十H号赖氨酸残基（LysJ连接。
12. 权利要求11的组合物，其中所述胃泌酸调节素由SEQ ID NO: 1所示氨基酸序列组 成。
13. 权利要求11到12中任一项的组合物，其中所述PEG聚合物是具有琉基部分的PEG 聚合物。
14. 权利要求11到13中任一项的组合物，其中所述PEG聚合物是PEG 3。。
15. -种药物组合物，其包含权利要求11到14中任一项的组合物和药学上可接受的载 剂。
16. -种改进胃泌酸调节素的曲线下面积（AUC)的方法，其由W下步骤组成；使聚己二 醇聚合物（PEG聚合物）经由9-巧基甲氧撰基（Fmoc)或2-賴基-9-巧基甲氧撰基（FM巧 与所述胃泌酸调节素氨基酸序列的12号位置上的赖氨酸残基或30号位置上的赖氨酸残基 或氨基末端缀合。
17. 权利要求16的方法，其中所述胃泌酸调节素由SEQ ID NO: 1的氨基酸序列组成。
18. 权利要求16到17中任一项的方法，其中所述阳G聚合物经由Fmoc或FMS与所述 胃泌酸调节素的所述氨基末端或赖氨酸残基缀合。
19. 权利要求16到18中任一项的方法，其中所述PEG聚合物是具有琉基部分的PEG聚 合物。
20. 权利要求16到19中任一项的方法，其中所述PEG聚合物是PEG 3。。
21. -种降低胃泌酸调节素的给药频率的方法，其由W下步骤组成；使聚己二醇聚合 物（PEG聚合物）经由9-巧基甲氧撰基（Fmoc)或2-賴基-9-巧基甲氧撰基（FM巧与所述 胃泌酸调节素氨基酸序列的12号位置上的赖氨酸残基或30号位置上的赖氨酸残基或氨基 末端缀合。
22. 权利要求21的方法，其中所述胃泌酸调节素由SEQ ID NO: 1的氨基酸序列组成。
23. 权利要求21到22中任一项的方法，其中所述PEG聚合物是具有琉基部分的PEG聚 合物。
24. 权利要求21到23中任一项的方法，其中所述阳G聚合物是PEG 3。。
25. -种延长胃泌酸调节素的生物学半衰期的方法，其由W下步骤组成；使胃泌酸调 节素、聚己二醇聚合物（PEG聚合物）W及9-巧基甲氧撰基（Fmoc)或2-賴基-9-巧基甲 氧撰基（FM巧缀合，其中所述PEG聚合物经由9-巧基甲氧撰基（Fmoc)或2-賴基-9-巧基 甲氧撰基（FM巧与所述胃泌酸调节素氨基酸序列的12号位置上的赖氨酸残基或30号位置 上的赖氨酸残基或氨基末端缀合。
26. 权利要求25的方法，其中所述胃泌酸调节素由SEQ ID NO: 1的氨基酸序列组成。
27. 权利要求25到26中任一项的方法，其中所述阳G聚合物经由Fmoc或FMS与所述 胃泌酸调节素的所述氨基末端或赖氨酸残基缀合。
28. 权利要求25到27中任一项的方法，其中所述PEG聚合物是具有琉基部分的PEG聚 合物。
29. 权利要求25到28中任一项的方法，其中所述PEG聚合物是PEG 3。。
30. 权利要求25到29中任一项的方法，其中通过使所述FMS或所述Fmoc接头从所述 组合物化学水解而使所述胃泌酸调节素释放到生物学液体中。
31. 权利要求30的方法，其中所述释放的胃泌酸调节素是完整的并且重新获得GLP-1 和膜高血糖素受体结合活性。
32. 权利要求30到31中任一项的方法，其中所述生物学液体是血液、血清或脑脊液。
33. 权利要求30到32中任一项的方法，其中所述生物学液体处于人类对象中。
34. 权利要求30到33中任一项的方法，其中使所述FMS或所述Fmoc化学水解延长了 所述0XM肤在所述生物学液体中的循环时间。
35. 权利要求34的方法，其中延长所述0XM的循环时间使得所述0XM可穿过血脑屏障 并且祀向CNS。
36. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在有需要的对象中诱导 葡萄糖耐受性的用途。
37. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在有需要的对象中诱导 血糖控制的用途。
38. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在对象中减少食物摄入 的用途。
39. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在对象中减轻体重的用 途。
40. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在对象中改进胆固醇水 平的用途。
41. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在对象中增加膜岛素敏 感性的方法的用途。
42. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在对象中降低膜岛素抗 性的用途。
43. 权利要求1到5、6到10或11到15中任一项的组合物用于在对象中增加能量消耗 的方法的用途。
【专利摘要】公开了一种组合物，其包括经由可逆接头连接的胃泌酸调节素和聚乙二醇聚合物(PEG聚合物)，所述可逆接头例如9-芴基甲氧羰基(Fmoc)或2-磺基-9-芴基甲氧羰基(FMS)。还公开了包含可逆聚乙二醇化胃泌酸调节素的药物组合物和其使用方法。
【IPC分类】A61K38-26
【公开号】CN104684576
【申请号】CN201380040700
【发明人】U·E·菲马, O·赫什科维茨
【申请人】奥普科生物制品有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2013年6月4日
【公告号】CA2875599A1, EP2854838A1, US20150119320, US20150148289, WO2013183052A1