取物的制备
[0022] 黄芪/刺五加复方提取物1 :取黄芪饮片80kg、刺五加饮片20kg;粉碎成最粗粉。 加入到多功能提取浓缩机组中，加8倍量水，浸泡lh。KKTC回流提取2. 0h，提取液经滤布 过滤,滤渣再加水提取2次，每次加8倍量水并回流提取2h，分次过滤，合并滤液，趁热(液温 为55°C) 10000转/min离心15分钟，上清液减压浓缩至相对密度约I. 1 (彡70°C，约I.Og 生药/mL)，即得黄芪/刺五加复方提取物。
[0023] 黄芪/刺五加复方提取物2:取黄芪饮片80kg、刺五加饮片20kg;粉碎成最粗粉。 加入到多功能提取浓缩机组中，加8倍量水，浸泡lh。KKTC回流提取2. 0h，提取液经滤布 过滤,滤渣再加水提取2次，每次加8倍量水并回流提取2h，分次过滤，合并滤液，趁热(液温 为45°C)，10000转/min离心15分钟，上清液减压浓缩至相对密度约I. 1 (彡70°C，约I.Og 生药/mL)，即得黄芪/刺五加复方提取物。
[0024] 黄芪/刺五加复方提取物3:取黄芪饮片80kg、刺五加饮片20kg;粉碎成最粗粉。 加入到多功能提取浓缩机组中，加8倍量水，浸泡lh。KKTC回流提取2. 0h，提取液经滤布 过滤，滤渣再加水提取2次，每次加8倍量水并回流提取2h，分次过滤，合并滤液，冷至室温 下10000转/min离心15分钟，上清液减压浓缩至相对密度约I. 1 (彡70°C，约I.Og生药/ mL)，即得黄芪/刺五加复方提取物。
[0025] 黄芪/刺五加复方提取物对比例：根据【背景技术】部分中公开号为CN101559095A的 专利公开的内容，称取80kg刺五加和20kg黄芪，除去杂质，混合后置于多功能提取浓缩机 组中，进行两次提取，第一次以两种药材10倍量水进行70°C低温真空动态提取浓缩，煎煮4 小时，收集浓缩液；第二次以两种药材8倍量水进行70°C低温真空动态提取浓缩，煎煮3小 时，将两次浓缩液混合，混合药液浓缩至70°C热测相对密度为1. 15的清膏，清膏经醇沉，过 滤至澄清，过滤液回收乙醇后清液减压浓缩至相对密度约I.I(< 70°C，约I.Og生药/mL)， 即得黄芪/刺五加复方提取物对比例。
[0026] (2)黄芪/刺五加复方提取物有效成分的检测对比试验
[0027] 检测对象：上述制备的黄芪/刺五加复方提取物1、2、3和黄芪/刺五加复方提取 物对比例。
[0028] 检测方法：
[0029] ①总糖含量的检测
[0030] 对照品溶液的制备：取105°C干燥至恒重的无水葡萄糖0. 25g，精密称定，置50ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇 勾，备用；
[0031] 供试品溶液的制备：取黄芪/刺五加复方提取物0. 5g，精密称定，置50ml量瓶中， 加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，备用；
[0032] 总糖含量的测定：精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置25ml量瓶中， 各加5%苯酚溶液lml，硫酸5ml，摇匀，置水浴中加热15min，取出，冰水冷却5min，用水稀释 至刻度，摇匀；另取水2. 0ml，同上平行操作作为空白对照，照紫外-可见分光光度法（2010 版兽药典附录26页)，在490nm波长处测定吸收度，计算，即得。
[0033] ②还原糖含量的检测
[0034] 3, 5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）的配制：将6. 3克DNS和262ml2mol/L氢氧化 钠，加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中，再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠， 搅拌溶解，冷却后加水定容到1000ml，即制成3, 5-二硝基水杨酸试剂，贮于棕色瓶中备用；
[0035] 葡萄糖标准溶液的制备：准确称取干燥至恒重的葡萄糖lg，加少量蒸馏水溶解后 定容至250mL，使葡萄糖浓度为lmg/mL;
[0036]葡萄糖标准曲线的绘制：分别吸取 0? 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、1. 2、1. 4、1. 6、1. 8、 2.OmL葡萄糖于25mL量瓶中，用蒸馏水补加至2mL，再加入3, 5-二硝基水杨酸溶液3mL，沸 水显色5min，流水迅速冷却后用水定容至25mL，摇匀，在540nm波长处测定吸光值。以2.Oml 蒸馏水代替葡萄糖标准溶液按同样显色方法操作为空白调零，在540nm处比色，以葡萄糖 量（mg)为横坐标，以吸光值为纵坐标,绘制标准曲线；
[0037] 还原糖含量的测定：吸取2mL黄芪/刺五加复方提取物样液(可稀释适当倍数)，置 于25mL容量瓶中，再加入3, 5-二硝基水杨酸溶液3mL，沸水显色5min，然后以流水迅速冷 却，用水定容至25mL，摇匀。以试剂空白调零，在540nm处比色，参照葡萄糖标准曲线求出还 原糖的量；
[0038] 计算出样品管光密度值的平均值，在标准曲线上分别查出相应的还原糖毫克数， 按下式计算出样品中还原糖的百分含量。
[0039]
【主权项】
1. 一种黄芪/刺五加复方提取物的制备方法，其特征在于，将黄芪、刺五加饮片粉碎， 加水浸泡，提取，过滤，收集滤液，滤渣再提取2次，分次过滤，合并3次所述滤液；将合并后 的滤液趁热离心；上清液浓缩至相对密度为1. 05-1. 2,即得所述黄芪/刺五加复方提取物。
2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述趁热离心温度为40~80°C。
3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述趁热离心温度为50~60°C。
4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述加水浸泡时固液比为1:8,浸泡 时间为1小时。
5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述提取温度为100°C，提取时间为 每次2小时。
【专利摘要】本发明公开了一种黄芪/刺五加复方提取物的制备方法，包括将黄芪、刺五加饮片粉碎，加水浸泡，提取，过滤，收集滤液，滤渣再提取2次，分次过滤，合并3次所述滤液；将合并后的滤液趁热离心；上清液浓缩至相对密度为1.05-1.2，即得所述黄芪/刺五加复方提取物。该制备方法通过对黄芪、刺五加复方采用水提并对滤液趁热离心处理的提取工艺提高了所得到的黄芪/刺五加复方提取物中各有效成分的含量。
【IPC分类】A61K36-481
【公开号】CN104721251
【申请号】CN201310698088
【发明人】张许科, 刘兴金, 张晓会
【申请人】洛阳惠中兽药有限公司
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2013年12月18日