境；银杏叶提取物的浓度为5g/L，海藻粉的浓度为6g/L，薄荷醇的浓度为30ml/L，小苏打的浓度为10g/L，食盐的浓度为15g/L，葡萄糖的浓度为 18g/L0
[0110]利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，具体步骤为:
[0111]I)酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌分别进行反复驯化，使其能够耐受40°C的环境并在40°C的环境下生长良好；具体地，酿酒酵母的培养基为5° Β?麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH ;起初酿酒酵母的培养温度为28-30°C ;产朊假丝酵母的培养基为5° Be麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH ;起初产朊假丝酵母的培养温度为28_30°C ;罗伊氏乳杆菌的培养基为酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠
5.0g、柠檬酸二铵 2.0g、Tween80 1.0g、Κ2ΗΡ042.0g、MgSO4.7Η20 0.2g、MnSO4.H2O 0.05g、CaC0320.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1.0L, pH6.8 ;起初酿酒酵母的培养温度为37°C ;其他条件不变，以每次接种升高0.3°C的方法分别对酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌反复接种、培养、提纯、复壮，直至酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌能够耐受40°C的温度；
[0112]2)配制银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的混合水溶液，其中，银杏叶提取物的浓度为银杏叶提取物的浓度为5g/L，海藻粉的浓度为6g/L，薄荷醇的浓度为30ml/L，小苏打的浓度为10g/L，食盐的浓度为15g/L，葡萄糖的浓度为18g/L ;
[0113]3)步骤I)所得酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌接种于步骤2)所配制的混合水溶液中，厌氧培养30h，得生物发酵足浴制剂工程菌菌液；所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液的浓度为150cfu/mL ;
[0114]4)选取治疗高血压的组方中药:磁石、石决明、党参、黄苗、当归、桑枝、枳壳、乌药、蔓荆子、白蒺藜、白芍、炒杜仲、牛膝各10克，独活26克；将该组方中药粉碎至40-80目，并加入步骤3)所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液，于40°C下厌氧发酵30h ;菌液的加入量以菌液没过中药为最低限；
[0115]5)发酵完毕，滤除滤渣，得足浴液制剂。
[0116]潍坊张某，男性，45岁，患高血压三年有余，严重时110-190mmHg ;使用实施例3利用微生物发酵制备的中药足浴制剂进行足浴治疗，坚持足浴50天，血压至85-130mmHg，基本趋于正常；半年后随访无复发。
【主权项】
1.一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂，其特征在于:由生物发酵足浴制剂工程菌与组方中药混合后经发酵制成；所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为1-lOOOcfu/mL;所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液由酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养而得；所述酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌经过驯化培养能够耐受37-40°C环境；所述银杏叶提取物的浓度为Ι-lOg/L，海藻粉的浓度为2-15g/L，薄荷醇的浓度为5-40ml/L，小苏打的浓度为2-20g/L，食盐的浓度为2-18g/L，葡萄糖的浓度为3_40g/L。2.如权利要求1所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂，其特征在于:所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为80-120cfu/mL ;所述银杏叶提取物的浓度为5g/L，海藻粉的浓度为8g/L，薄荷醇的浓度为20ml/L，小苏打的浓度为10g/L，食盐的浓度为12g/L，葡萄糖的浓度为18g/L。3.如权利要求1所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于，具体步骤为: 1)酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌分别进行反复驯化，使其能够耐受37-40°C的环境并在37-40°C的环境下生长良好； 2)配制银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的混合水溶液，其中，银杏叶提取物的浓度为l-10g/L，海藻粉的浓度为2-15g/L，薄荷醇的浓度为5-40ml/L，小苏打的浓度为2-20g/L，食盐的浓度为2-18g/L，葡萄糖的浓度为3_40g/L ; 3)步骤I)所得酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌接种于步骤2)所配制的混合水溶液中，厌氧培养12-48h，得生物发酵足浴制剂工程菌菌液； 4)将组方中药粉碎，并加入步骤3)所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液，于37-40°C下厌氧发酵12-48h ； 5)发酵完毕，滤除滤渣，得足浴液制剂。4.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于:将步骤5)所得足浴液制剂进行浓缩，然后喷雾干燥制备足浴粉制剂。5.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于:步骤I)中，所述酿酒酵母的培养基为5° Be麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH ;起初所述酿酒酵母的培养温度为28-30°C ;所述产朊假丝酵母的培养基为5° Be麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH ;起初所述产朊假丝酵母的培养温度为28-30°C ;所述罗伊氏乳杆菌的培养基为酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、梓檬酸二钱2.0g、Tween80 1.0g、K2HPO4 2.0g、MgSO4.7H20 0.2g、MnSO4.H2O 0.05g、CaCO3 20.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1.0L, pH6.8 ;起初所述罗伊氏乳杆菌的培养温度为37°C ;以每次接种升高0.5°C的方法分别对酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌反复接种、培养、提纯、复壮，直至酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌能够耐受37-40°C的温度。6.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于:步骤2)中所述银杏叶提取物的浓度为5g/L，海藻粉的浓度为8g/L，薄荷醇的浓度为20ml/L，小苏打的浓度为10g/L，食盐的浓度为12g/L，葡萄糖的浓度为18g/L。7.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于:步骤3)中，所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液的浓度为80-120cfu/mL。8.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于:步骤4)中，将中药粉碎至40-80目。9.如权利要求8所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于:步骤5)中，首先采用设有100目滤网的板框式过滤器过滤除渣，然后采用120-125目筛再次过滤，得足浴液制剂。10.如权利要求4所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法，其特征在于:将足浴液制剂置于蒸发能力为350kg/h，真空度为-0.09Mpa的浓缩罐中进行浓缩。
【专利摘要】本发明公开了利用微生物发酵制备的中药足浴制剂及其制备方法，属于非肠胃给药制剂领域。本发明中将37-40℃环境的酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养得生物发酵足浴制剂工程菌菌液。采用该菌液发酵组方中药。银杏叶粉提取物对扩张毛孔与血管、提高给药速度均有促进作用。薄荷醇具透皮功效，能提高药物在足底皮层及角质层的通透率。小苏打、食盐、葡萄糖配制的足浴液的密度大于体液的密度，提高了足浴液的渗透压。组方中药经发酵后降解了有毒有害物质，利用有益菌与中药有效成分的协同作用，增强了中药活性素的吸收效果。本发明是祛病保健、科学给药的有效方法。
【IPC分类】A61K36/85, A61K36/732, A61P17/00, A61K35/618, A61K36/9068, A61K33/26, A61K35/747, A61P31/10, A61P9/12, A61K36/064, A61P1/10
【公开号】CN105125666
【申请号】CN201510442888
【发明人】朱民生, 王若涵, 谷雨
【申请人】朱民生
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年7月24日