>[0149] 按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备方法制备凝胶膏基质；按照凝胶 膏剂8中青葛班醋醇质体处方和常山乙素醇质体处方称取各辅料及药物，但不进行醇质体 的制备过程，仅将各辅料（包括药物）与凝胶膏基质混合，从而制得普通青葛班醋/常山乙 素凝胶膏剂。
[0150] 似青葛班醋醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂的制备 阳151] 按照实施例1中凝胶膏剂8的处方和制备方法制备青葛班醋醇质体/常山乙素醇 质体凝胶膏剂。 阳152] 设备及材料 阳153] 高效液相色谱仪（2487型双波长紫外检测器，1515型高压输液累，717型自动进 样器，美国Waters公司）；色谱柱DiamonsilC18(2)(4. 6mmX250mm，5ym)(北京迪马科 技有限公司）；Fisher色谱纯乙腊（赛默飞世尔科技公司）；脱毛膏化ir?Lotionwith 八1〇6化曰11〇1111((：皿1?(：服0胖16册0).，抑〇;-次性针筒式过滤器（〇13,0.22^111，聚四氣乙 締）（天津市津腾实验设备有限公司）。 阳154] 动物皮肤的处理
[0K5] 雄性昆明种小白鼠（20-25g)(购自北京军事医学科学院实验动物中屯、，动物许可 证号：SCXK-(军）-2012-004)，小鼠断颈处死后，用脱毛膏脱毛，剥离腹部皮肤，去除脂肪 层，生理盐水冲洗后备用。 阳156] 体外透皮研究
[0157] 试验采用垂式化anz扩散池（体积：18. 0ml，扩散面积：2. 92cm2);溫度： 32. 5 + 0. 5°C;转速：350转/分钟；将（面积：2.92cm2,含青葛班醋约3mg，常山乙素约 0. 〇2mg)复方醇质体凝胶膏剂或复方凝胶膏剂紧密贴于小鼠皮肤角质层一侧，固定于装置 上，在接收室中注满接收液（30 %乙醇-70 %水）。分别于1、2、4、8、12、24小时，将接收室中 的接收液全部倒出（补加同体积新鲜接收液），样品经一次性针筒式过滤器过滤，进高效液 相色谱仪，按照相应的液相条件（其中测定青葛班醋的液相条件为：流动相：乙腊-0. 1%憐 酸（该0. 1 %憐酸的配制方法：将0. 1 %憐酸水溶液中加入碱性物质，调节抑值至3. 0而制 得的一种缓冲盐溶液）（40:60)，流速1.Oml/min，柱溫30°C，检测波长210皿；测定常山乙素 的液相条件为：流动相：乙腊-0. 1 %憐酸（该0. 1 %憐酸的配制方法：将0. 1 %憐酸水溶液 中加入碱性物质，调节抑值至3. 0而制得的一种缓冲盐溶液）（9:91)，流速1.Oml/min，柱 溫30°C，检测波长225nm)，分别测定各接收液中样品中青葛班醋和常山乙素的含量。
[0158] 分别W青葛班醋和常山乙素的单位面积的累积透皮量Q对时间ti/2作图，结果如 图11和12所示；W单位面积的累积透皮量Q对ti/2进行方程拟合，其结果见表5 ;24小时 药物的累计透过量和透皮率见表6。
[0159] 表5 :复方凝胶膏剂与本发明的复方醇质体凝胶膏剂的透皮零级方程拟合结果
[0160]
阳161]表6 :复方凝胶膏剂与本发明的复方醇质体凝胶膏剂24小时累计透过率阳 162]
阳163]结果：
[0164]如图11、图12和表5、表6所示，本发明的青葛班醋醇质体/常山乙素醇质体凝胶 膏剂与普通青葛班醋/常山乙素凝胶膏剂相比，药物具有更快的透皮速率，单位时间内醇 质体凝胶膏剂的药物透皮量有明显提高。
[01化]另外，采用上述方法测试了其它凝胶膏剂1~7和9~10的透皮性能，其结果显 示单位时间内均较相应的普通凝胶膏剂的药物透皮量有明显的提高。
[0166]实施例5 :本发明复方抗追醇质体凝胶膏剂的药效学研究阳167] 青葛班醋醇质体/常山乙素醇质体凝胶膏剂与普通青葛班醋/常山乙素凝胶膏剂 的经皮抗追活性和抗复燃情况对比（青葛班醋和常山乙素纯度>98%)。 阳168]样品的制备
[0169] (1)复方凝胶膏剂的制备
[0170] 根据各给药剂量组的剂量要求，按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备 方法制备凝胶膏基质，并按照凝胶膏剂8中青葛班醋醇质体处方和常山乙素醇质体处方称 取各辅料（青葛班醋和常山乙素的用量根据不同给药剂量组的用量称取），但不进行醇质 体的制备过程，仅将各辅料（包括药物）与凝胶膏基质混合，从而制得复方凝胶膏剂。 阳171] (2)复方醇质体凝胶膏剂的制备
[0172] 根据各给药剂量组的剂量要求，按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备 方法制备凝胶膏基质；按照凝胶膏剂8中青葛班醋醇质体处方和常山乙素醇质体处方称取 各辅料（青葛班醋和常山乙素的用量根据不同给药剂量组的用量称取），并按照本发明青 葛班醋醇质体和常山乙素醇质体制备方法制备醇质体；最后按照醇质体凝胶膏剂的制备方 法制备复方醇质体凝胶膏剂。 阳173] (3)空白醇质体凝胶膏剂
[0174] 按照实施例1中凝胶膏剂8的凝胶膏剂基质制备方法制备凝胶膏基质；按照凝 胶膏剂8中青葛班醋醇质体处方和常山乙素醇质体处方仅称取各辅料，而不称取相应的药 物，按照实施例1中青葛班醋醇质体和常山乙素醇质体的制备方法，分别制备两种空白醇 质体，并将两种空白醇质体与凝胶膏基质混合，从而制得空白凝胶膏剂。
[0175] 试验方法： 阳176] 设备及动物
[0177] 显微镜：0LYMPUS-BX51。
[0178] 试验动物：120只雄性昆明种小白鼠（18-22g)(购自北京维通利华实验动物技术 有限公司，许可证编号：SCXK(京）2012 - 0001);动物周龄：选用7周龄动物，适应性饲养1 天后开始给予受试物；动物要求：无特殊病原菌。 阳1巧]饲养条件：屏障系统，溫度20~23 °C，相对湿度为40~70%，全新风。采取人工 光照，12小时明暗周期。动物饲养于聚碳酸醋小鼠饲养笼，每笼10只小鼠。
[0180] 组别：复方凝胶膏剂组，复方醇质体凝胶膏剂组，空白醇质体凝胶膏剂组，空白对 照组（即小鼠接种追原虫后不进行任何处理的组别）。 阳181] 按照化学药品技术指导原则进行药效学试验。每只小鼠腹腔内定量接种含有 1000万个感染鼠追原虫的红细胞，接种量0. 2ml。接种当日，120只小鼠按空白对照组、空 白醇质体凝胶膏剂组、复方凝胶膏剂组和本发明的复方醇质体凝胶膏剂组，将小鼠随机分 为12组（动物分组和给药剂量见表7)，每组10只，按照组别每天透皮给药一次，连续给药 4天，给药面积约为2X3cm2,停药后第5天尾部取血、涂片、吉姆萨染色法染色、显微镜下观 察每个剂量组追原虫转阴率W及复燃情况。抗复燃实验涂片时间1个月。试验结果见表8 和图13。 阳182]表7 :药效学试验动物分组和给药剂量情况阳 183]
[0184] 表8 :青葛班醋/常山乙素醇质体凝胶膏与普通青葛班醋/常山乙素凝胶膏剂的 经皮抗追结果（n= 10) 阳化5]
阳186]结果： 阳187]如表8和图13所示，青葛班醋/常山乙素醇质体凝胶膏剂与青葛班醋/常山乙素 凝胶膏剂相比，抗追效果得到了增强。
[0188] 本发明采用醇质体传递技术，并且综合利用复方抗追和经皮抗追的优势，构建出 高效抗追的复方醇质体抗追凝胶膏剂。本发明制备的载药醇质体粒径小，且呈现规则的圆 球状形态，运有利于制剂中的醇质体携带药物快速透过皮肤、发挥药效。在药效对比研究 中，复方抗追凝胶膏剂可W使追原虫感染动物快速转阴，且停药后只有复方凝胶膏剂组中 的较低给药剂量组少量动物发生复燃（见表8);将复方药物分别采用醇质体技术进行包 合，再制成醇质体凝胶膏剂，可W将复燃率进一步降低，甚至达到停药后零复燃的治疗效果 (见表8)。制剂学评价显示：复方凝胶膏剂和醇质体凝胶膏剂的体外释放和透皮动力学参 数特征与上述药效学结果相一致，即：抗追药物醇质体凝胶膏剂与凝胶膏剂相比，具有更快 的释放和透皮速率，具体结果见表3-6和图9-12。
[0189]上述研究验证了复方抗追醇质体凝胶膏剂的抗追高效性，显示了醇质体技术在提 高药物抗追效果中的突出作用；同时，在醇质体技术的支持之下，使经皮制剂在抗追应用中 的前景更为广阔。 阳19〇]参考文献： 阳191] [1]王英新，杨恒林.追疾化学治疗的研究现状[J].医学综 述，2013, 19(22) :4151-4153, 阳19引 凹卢义钦.青葛素的发现与研究进展[J].生命科学研究，2012, 16(3) :260-265. 阳193] [3]李超.青葛素类抗追药动物体内药动学及体外代谢研究巧].山西医科大学