得到表面多權皱，孔隙较 不均一，但完全交联的皮肤细胞支架材料。实验成功。
[002引实施例3 :
[002引称取2.Og壳聚糖溶于lOOmL，质量分数为5 %的醋酸溶液，将壳聚糖粉末和醋酸加 入量程为50mL的烧杯中，用蜡膜封闭烧杯口，并W转速3(K)r/min，溫度在60°C条件下完全 溶解至透明澄清溶液制成0. 02g/mL的壳聚糖溶液，W纯水溶液配制0. 05g/mL的化C12盐 溶液，将壳聚糖溶液与化Cl2盐溶液W2:1的体积比混合形成化C12溶液和壳聚糖醋酸溶液 的混合溶液6mL。称取0. 9g的海藻酸钢粉末放入50mL的烧杯中，再加入30mL纯水，溫度控 制为50°C，50化进行溶解2h，制备得0. 03g/mL的海藻酸钢溶液。在直径为10cm的培养皿 中加入2mL的海藻酸钢溶液，使海藻酸钢溶液均匀的铺满培养皿的底面，静置lOmin后用一 次性滴管快速均匀的滴入6mU化02溶液和壳聚糖醋酸溶液的混合溶液静置2min，待边缘 开始成膜时，将培养皿放入低压真空干燥箱，低压干燥12min，取出即可得到孔隙较均匀且 较多的适合养殖皮肤细胞的材料。实验成功。
[0027] 在实施例1~3中，我们W壳聚糖的浓度为变量来制备材料W获取用于制备可降 解人工皮肤支架最好的壳聚糖浓度。W浓度为0.〇〇5g/mL、0. 01g/mL、0. 02g/mL的壳聚糖醋 酸溶液与0.〇3g/mL的海藻酸钢溶液、0. 05g/mL的化Cl2溶液根据上述制备方法制备人工皮 肤支架。
[0028] 各实验结果总结如下：
[0029]
[0030] 实施例4 :
[0031] 称取2.Og壳聚糖溶于lOOmL，质量分数为5 %的醋酸溶液，将壳聚糖粉末和醋酸加 入量程为50mL的烧杯中，用蜡膜封闭烧杯口，并W转速30化/min,溫度在60°C条件下完全 溶解至透明澄清溶液制成0. 02g/血的壳聚糖溶液，W纯水溶液配制0.Olg/血的化Cl2盐 溶液，将壳聚糖溶液与化C12盐溶液W2:1的体积比混合形成化C12溶液和壳聚糖醋酸溶液 的混合溶液。称取0. 9g的海藻酸钢粉末放入50mL的烧杯中，再加入30mL纯水，溫度控制 为50°C，50化进行溶解化，制备得0. 03g/mL的海藻酸钢溶液。在直径为10cm的培养皿中 加入2mL的海藻酸钢溶液，使海藻酸钢溶液均匀的铺满培养皿的底面，静置lOmin后用一次 性滴管快速均匀的滴入6mU^Cl2溶液和壳聚糖醋酸溶液的混合溶液静置2min，待边缘开 始成膜时，将培养皿放入低压真空干燥箱，低压干燥12min，取出得到完全交联的皮肤细胞 支架材料。实验成功。
[003引实施例5 :
[003引称取2. Og壳聚糖溶于lOOmL，质量分数为5%的醋酸溶液，将壳聚糖粉末和醋酸加 入量程为50mL的烧杯中，用蜡膜封闭烧杯口，并W转速3(K)r/min，溫度在60°C条件下完全 溶解至透明澄清溶液制成0.02g/mL的壳聚糖溶液，W纯水溶液配制0.02g/mL的化C12盐 溶液，将壳聚糖溶液与化Cl2盐溶液W 2:1的体积比混合形成化C12溶液和壳聚糖醋酸溶液 的混合溶液。称取0. 9g的海藻酸钢粉末放入50mL的烧杯中，再加入30mL纯水，溫度控制 为50°C，50化进行溶解化，制备得0. 03g/mL的海藻酸钢溶液。在直径为10cm的培养皿中 加入2mL的海藻酸钢溶液，使海藻酸钢溶液均匀的铺满培养皿的底面，静置lOmin后用一次 性滴管快速均匀的滴入6mU化02溶液和壳聚糖醋酸溶液的混合溶液静置2min，待边缘开 始成膜时，将培养皿放入低压真空干燥箱，低压干燥12min，取出得到完全交联的皮肤细胞 支架材料。实验成功。
[0034] 在实施例3、4、5中，我们W化化的浓度为变量来制备材料W获取用于制备可降 解人工皮肤支架最好的化C12溶液浓度。W浓度为0. 01g/mL、0. 02g/mL、0. 05g/mL的化C12 溶液与0. 03g/mL的海藻酸钢溶液、0. 02g/mL壳聚糖醋酸溶液根据上述制备方法制备人工 皮肤支架。
[0035] 各实验结果总结如下：
[0036]
[0037]
[003引 实施例6 :
[003引称取2.Og壳聚糖溶于lOOmL，质量分数为5 %的醋酸溶液，将壳聚糖粉末和醋酸加 入量程为50mL的烧杯中，用蜡膜封闭烧杯口，并W转速3(K)r/min，溫度在60°C条件下完全 溶解至透明澄清溶液制成0. 02g/mL的壳聚糖溶液，W纯水溶液配制0. 05g/mL的化Cl2盐 溶液，将壳聚糖溶液与化C12盐溶液W1:1的体积比混合形成化C12溶液和壳聚糖醋酸溶液 的混合溶液。称取0. 9g的海藻酸钢粉末放入50mL的烧杯中，再加入30mL纯水，溫度控制 为50°C，50化进行溶解化，制备得0. 03g/mL的海藻酸钢溶液。在直径为10cm的培养皿中 加入2mL的海藻酸钢溶液，使海藻酸钢溶液均匀的铺满培养皿的底面，静置lOmin后用一次 性滴管快速均匀的滴入4mU化02溶液和壳聚糖醋酸溶液的混合溶液静置2min，待边缘开 始成膜时，将培养皿放入低压真空干燥箱，低压干燥12min，取出得到完全交联的皮肤细胞 支架材料。实验成功。
[0040] 在实施例3、6中，我们W壳聚糖的浓度为变量来制备材料W获取用于制备可降 解人工皮肤支架最好的混合溶液体积比。W化C12溶液（0.05g/mL)与壳聚糖醋酸溶液 (0. 02g/mL)的体积比为1:1或2:1为变量与0. 03g/mL的海藻酸钢溶液根据说明书中所述 制备方法制备人工皮肤支架。
[0041] 各实验结果总结如下：
[0042]
[0043]与W海藻酸钢、壳聚糖、醋酸、氯化巧、纯水为原料的其他组织工程皮肤支架对比 如下：
[0044]
[0045]
[0046]【1】《海藻酸钢-壳聚糖皮肤组织工程支架材料及其制备方法》.尹静波、胡巧巧、 吴振飞、刘小瑕、颜世峰.2012. 9. 14。
【主权项】
1. 一种可降解人工皮肤支架的制备方法，其特征在于制备步骤为： a. 用于制备皮肤支架的多糖溶液，以质量浓度为2%~5%的醋酸为溶剂溶解壳聚糖形 成质量浓度〇. 01g/mL~0. 03g/mL的壳聚糖醋酸溶液；以纯水为溶剂制成质量浓度0.0 lg/ mL~0. 04g/mL 的海藻酸钠溶液；另配制 0. 01g/mL~0. 05g/mL 的 CaC；y^§液； b. 将CaCl2溶液和壳聚糖醋酸溶液按的体积比配制混合溶液； c. 在底面为平面的容器中加入海藻酸钠溶液，形成光滑平整的溶液层，再加入b步骤 所得混合溶液，使两者比例为海藻酸钠溶液：混合溶液的体积比大于或等于1:1 ; d. 室温反应不少于2min，放入真空干燥箱内，保持干燥箱温度不高于16°C，抽真空干 燥12min，真空度大于0.1 Mpa，得到可降解人工皮肤支架。2. 根据权利要求1所述可降解人工皮肤支架的制备方法，其特征在于所述壳聚糖的浓 度优选0.02 g/mL。3. 根据权利要求2所述可降解人工皮肤支架的制备方法，其特征在于所述CaCl 2溶液 的浓度优选〇. 〇5g/mL。4. 根据权利要求3所述可降解人工皮肤支架的制备方法，其特征在于所述0. 05g/mL CaCl2溶液与0. 02g/mL壳聚糖醋酸溶液的体积比为2:1。5. 权利要求1~4任一所述制备方法获得的可降解人工皮肤支架。
【专利摘要】一种可降解人工皮肤支架及其制备方法，先配制壳聚糖醋酸溶液，再配制海藻酸钠溶液和CaCl2溶液；将CaCl2溶液和壳聚糖醋酸溶液配制混合溶液；在底面为平面的容器中加入海藻酸钠溶液，形成光滑平整的溶液层，再加入所得混合溶液；室温反应后放入真空干燥箱内，抽真空干燥得到可降解人工皮肤支架。所得材料符合皮肤组织工程支架材料的要求，强度及韧性均良好。
【IPC分类】A61L27/58, A61L27/20
【公开号】CN105148323
【申请号】CN201510514564
【发明人】王婷, 崔青, 刘旭, 喻曦子, 郭悦彤, 陈战
【申请人】东南大学
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年8月20日