中。在测定的最终步骤中，碱性憐酸酶标记物 与对氨基苯酪憐酸醋反应W切割憐酸醋基团并允许释放的对氨基苯酪在工作电极处电化 学地氧化。基于测量的电流，读数器能够借助于嵌入的算法和工厂确定的校正曲线计算样 品中的生物标志物的量。
[0087] 管试者 本发明的方法可W用在正在经历或预期会经历长期体力活动不足的哺乳动物受试者 上。在某些实施方案中，所述受试者是成年人受试者。本文中使用的术语"成年人受试者" 表示20岁W上的人受试者。因而，成年人受试者可W是30、40或50岁或更大。在某些实 施方案中，所述受试者将是老年人，即，50岁或更大。所述评价方法可W用在参与临床研究 的受试者中，其中所述受试者将经历延长的活动不足阶段，例如，所述受试者将邸床数天， 例如，10天或更多天。所述治疗和评价方法可W用在正在经历或预期会经历在医院环境、康 复设备或私人家庭等中的延长的活动不足阶段的受试者中。例如，所述受试者可W是由于 损伤、疾病或外科手术可能或将被限制在床的受试者。所述受试者也可W是自我施加延长 的活动不足阶段的受试者，例如处于抑郁中的受试者。
[0088] 对照估 将在活动不足3天或更多天时取自试验受试者的生物样品中的一种或多种生物标志 物的水平之间的差异与对照值进行对比。所述对照值是基于得自对照群体的可比较生物样 品中的一种或多种生物标志物的水平的差异，例如，已经经历可比较的长期体力活动不足 阶段(例如，邸床休息3-10天或更多天）的一般群体或选定的人受试者群体。例如，选定的 群体可W包含男性受试者或女性受试者或老年受试者等。因此，选定的对照值可W考虑试 验受试者所属的类别。本领域普通技术人员用不超过例行实验可W选择适当的类别。
[0089] 所述差异和因此所述对照值可W呈多种形式。例如，所述对照值可W是在类似活 动不足天数中在未治疗的对照受试者中观察到的生物标志物的循环水平的差异（阴性的或 阳性的，Wmg/ml、ng/ml等计)。所述对照值可W是在可比较的活动不足阶段中在未治疗的 对照受试者中的生物标志物的循环水平的变化百分比（阴性的或阳性的)。
[0090] 如下建立对照值：测定一般群体或选定群体中的大个体样品，并使用统计模型 诸如用于选择限定最适特异性（最高真阴性率）和敏感性（最高真阳性率）的确信判据 或接受者操作特征曲线的预测值方法，如在7Knapp，R.G.，和Miller,M.C. (1992). ClinicalEpidemiologyandBiostatistics.WilliamandWilkins，HarualPublishing Co.Malvern,Pa.中所述，其明确地通过引用并入本文。另外，通过遵循来自Clinicaland L油oratoryStandardsInstitute(CLSI),文件C28-A3c(2011)的指南，可W建立一般 群体或选定群体的参比区间或预期值。
[0091]干预 可使用本发明的方法试验的干预，包括、但不限于营养干预。运样的营养干预的例子包 括、但不限于HMB、高蛋白饮食（梦/^化〉1或1. 2g蛋白Ag体重/天）、含有高剂量的亮氨 酸（~15g/天）或亮氨酸代谢物诸如a-酬异己酸盐化IC)和a-径基异己酸盐化ICA) 和高剂量的必需氨基酸（~45g/天，含有至少15g亮氨酸）的补剂。 阳OW] 用于评价干预效力的系统 还提供了用于确定干预对人受试者中的与长期体力活动不足有关的膜岛素抗性的效 力的系统。在一个实施方案中，所述系统包括：(a)用于鉴别正在经历或预期在不久的将来 经历长期体力活动不足的受试者的子系统；化）用于在体力活动不足开始之前或当时从在 (a)中鉴别的受试者取生物样品的子系统；（C)用于给所述受试者施用干预的子系统；（d) 用于在受试者已经变得体力活动不足之后3天或更多天从在（a)中鉴别的受试者取生物样 品的子系统；（e)用于测量通过子系统化）和（d)得到的生物样品中选自C-肤、IGFBP-2和 瘦素的一种或多种生物标志物的水平的子系统；和（f)用于计算通过子系统化）和（C)得 到的生物样品中的一种或多种生物标志物的水平的差异的子系统。在某些实施方案中，所 述系统进一步包括运样的子系统：其将通过子系统（d)计算的差异与一种或多种对照值进 行对比，所述对照值基于在可比较的体力活动不足阶段开始时和之后取自未治疗的对照受 试者的可比较生物样品中的一种或多种生物标志物的水平的差异。
[0093] 在某些实施方案中，所述用于鉴别正在经历或预期会经历延长的活动不足阶段的 受试者的子系统会鉴别出按计划会经历手术的受试者，所述手术通常导致3天或更多天的 邸床休息阶段。所述子系统也可W鉴别出具有通常导致3天或更多天的邸床休息阶段的疾 病的受试者。由于老年受试者在外科手术、疾病等W后通常经历比年轻受试者更长的活动 不足阶段，所述系统也可W包含鉴别受试者年龄的子系统。该后一子系统可W与鉴别受试 者状态的子系统相同或不同，即，如果受试者可能经历长期体力活动不足阶段和当受试者 可能经历长期体力活动不足阶段时。
[0094] 接纳正在经历、可能或预期会在长时间段中经历延长的活动不足阶段（梦/^化邸 床休息）的受试者的场所可W使用本系统，例如，医院、康复中屯、、医护疗养所等。所有子系 统可W被所述场所直接使用。可替换地，一些子系统可W被试验场所使用，诸如向接纳受试 者的场所报告的实验室或者被接纳受试者的场所指导执行某些试验的实验室。本系统也可 W被指导受试者护理的医师使用，所述受试者在医院、康复场所、家庭环境等处正在经历、 可能或预期会经历延长的活动不足阶段。本系统也可W被公司使用，所述公司开发目的在 于减小人受试者中与长期体力活动不足有关的膜岛素抗性的干预。 实施例
[0095] 本发明的方法至少部分地基于发明人的W下发现：在18位经历10天的邸床休息 的健康老年受试者中，3种循环膜岛素抗性生物标志物的水平增加或减少统计上显著的量。 所述方法还至少部分地基于发明人的W下发现：HMB干预会改变运些循环生物标志物的水 平的变化。 阳〇96] 受试者 在筛选时验证下述包括标准：> 60至《79岁的男性或女性；> 20但是《35的身体质 量指数（BMI);具有>9 的短表现身体电池（Sho;rtPerformancePhysicalBatteiy,SPPB) 评分的走动（没有运动限制的完全功能）；具有预定活动水平的顺应性。排除标准排除运 样的受试者：其已经经历近期的重大外科手术，具有活跃的恶性肿瘤（异常基细胞或鱗状 细胞皮肤癌或子宫颈的原位癌）；深静脉血栓形成值VT)或其它高凝血障碍的历史；难治性 贫血；糖尿病或〉126mgML的禁食血糖值的历史；部分或完全假肢的存在；〉1.4mgML 的肾脏疾病或血清肌酸酢；在静止或锻炼EKG过程中评估的屯、血管疾病的证据；未治疗的 甲状腺功能减退；肝病；慢性或急性胃肠道疾病；失控的严重腹泻、恶屯、或呕吐；正在积极 追求重量减轻；被招募进其它临床试验中；不能在邸床休息研究阶段中克制住吸烟或不能 在邸床休息阶段中中断抗凝血治疗。如果潜在受试者正在摄入已知会影响蛋白代谢的任何 药物（梦/^化促孕剂、类固醇、生长激素、屈大麻酪、大麻烟、HMB、游离氨基酸补剂、辅助重量 减轻的饮食添加物），也排除他们。
[0097] 将24位最初参与研究的健康受试者随机化成2组。在治疗组中的受试者接受2 个0 -径基-0 -甲基下酸盐（HMB)药囊，其含有1. 5克化-HMBasi，盐湖城，化址）、4 克麦芽糊精和200mg巧W及另外的甜味剂和调味剂（flavoringgroups)。在对照组中的 受试者接受2个对照药囊，其除了不含化-HMB W外与HMB药囊相同。该研究是双盲研究。 在研究的临床部分中，研究人员和受试者都不知晓任何研究产品的身份。指令受试者如下 每天摄取2次：将每个药囊混合进他们选择的无热量的、无咖啡因的、无碳酸盐的、非基于 奶的饮料中。使用HMB或对照物的处理在邸床休息之前5天开始，且持续直到康复阶段结 束。
[0098]为了在邸床休息前和邸床休息阶段的饮食稳定，受试者进食代谢上受控的饮食， 其提供畑A用于蛋白摄入（0.8g蛋白Ag体重/天）。根据下述方程式，使用关于静止能 量消耗的Harris-Benedict方程式，估计总卡路里需要：对于女性=[655 + (9. 56XWkg 为单位的体重）+ (1.85XWcm为单位的高度）-(4. 68XW年为单位的岁数）]XAF，或 者，对于男性=[66 + (13. 7xWkg为单位的体重）+巧xWcm为单位的高度）-化08 XW年为单位的岁数]XAF，其中AF=I. 6 (对于走动阶段)和1.35 (邸床休息阶段)的活动 因子。在给出总卡路里和蛋白摄入的情况下，操作饮食的其它部分W将非蛋白卡路里保持 约60%来自碳水化合物和40%来自脂肪。随意提供水。
[0099] 5天（走动阶段）的饮食稳定W后，受试者连续邸床10天。在被限于邸床休息时， 允许受试者使用床侧便桶进行排尿，或让其进入轮椅中如厕。给受试者提供进行海绵浴或 在轮椅中淋浴的选择。采取预防措施W检测和预防深静脉血栓形成，包括血液d-二聚体试 验巧日果d-二聚体试验是阳性的，随后超声检查)、在邸床休息阶段中的被动活动度训练、在 邸床休息阶段中T邸软管和SCD的使用。给受试者提供药物W帮助减轻与人仰邸有关的回 流问题。受试者由护理人员持续监测，并接受研究医师的每天体格检查。
[0100] 在邸床休息的第1天和在邸床休息结束时，从受试者收集禁食血液样品用于测量 生物标志物。 阳101] 如果受试者在邸床休息前（第I天至第5天）永久地中断产品，或如果受试者在 邸床休息阶段中断产品且已经完成了小于8天的邸床休息，那么所述受试者退出研究。具 有阳性D-二聚体试验或深静脉血栓形成值VT)诊断超声的受试者也退出研究。
[0102] 如果发生下述事件中的一个或多个，将受试者的结果数据归类为分析不可评价 的：A.受试者接受错误产品，与随机化方案相反，B.受试者接受被排除的伴随治疗，其被 定义为影响重量或代谢的药物或饮食添加物（梦/^化促孕剂、类固醇、生长激素、屈大麻酪、 大麻烟、HMB、游离氨基酸补剂、辅助重量减轻的饮食添加物和鱼油补剂），C.在最终就诊/ 离开时受试者具有< 67%的总研究产品摄取，运通过产品摄取记录确定。 阳103] 最终的分析样品大小是，n= 18受试者，在对照组中n= 8(n= 1男性，n= 7女 性），和在实验性HMB组中n= 10(n= 2男性，n= 8女性）。
[0104]生物标志物分析 从RBMHumanDiscoveiT地图vl.O产生的基于规则的医学（RulesBasedMedicine,RBM,Myriad,T讶数据由在血清中测量的n= 187种生物标志物组成，所述血清在2个时 间点（邸床休息前和邸床休息后）收集自18位老年受试者。评价了每种标志物的分布。每 种标志物具有最小可检测的剂量（LDD)值，其被