一种萹蓄乙酸乙酯提取物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明提供了一种篇蓄乙酸乙酯提取物，该提取物用于制备预防或治疗支气管哮喘的药物，属于中医药技术领域。
【背景技术】
[0002]支气管哮喘(以下简称“哮喘”)是一种常见的多发性慢性呼吸道疾病，其发病机制目前尚不完全清楚。目前全球至少有3亿以上，我国有近3000万哮喘患者，哮喘已成为仅次于癌症的世界第二大致死和致残疾病。在我国，哮喘疾病发病也呈逐年上升的趋势。2010年北京、重庆、广州三个城市的同期调查资料显示:儿童哮喘的患病率分别为3.15%,7.45 %、2.09 %，与10年前的2.69 %、4.63 %、1.33 %相比，均明显上升。目前哮喘疾病的有效控制率低下，总体状况不容乐观，其主要原因是随着社会经济的发展生活水平的提高，环境变化加快，汽车尾气、工业废气、家庭装修、食品添加剂、家养宠物等过敏原越来越多，这都必然导致哮喘的发病率越来越高。因此亟待寻找能更安全有效的治疗哮喘的药物。
[0003]气道阻塞是哮喘的重要病理特征，而气道平滑肌的异常收缩是导致这一症状的主要原因。目前支气管扩张剂如￠2-受体激动剂被广泛应用于临床，但治疗效果有限，30-45%哮喘病人的肺功能无法得到改善，即使症状有所缓解，停止治疗后病情亦容易反复发作，严重者更需要住院治疗。这给患者本人和家庭造成了极大的痛苦，同时也加重了社会经济的负担和损失。
[0004]篇蓄又称畜辩、粉节草、扁竹寥等，属于寥科植物，拉丁文名Polygonum AviculareL.，其地上干燥部分入药，是常用中药。全国大部分地区均产该种药草，其中以河南、四川、浙江、山东、吉林、河北等地产量较大，我国湖北武陵山区也有一定产量。篇蓄苦，微寒，具有利尿通淋，杀虫，止痒等药理功能，常用于膀胱热淋，小便短赤，淋沥涩痛，皮肤湿疹，阴痒带下等疾病治疗。该药中主要有黄酮、糖酯、木脂素、留体以及其它类型的化合物。
【发明内容】
[0005]本发明要解决的技术问题是:目前，哮喘的发病率越来越高，而现有药物疗效有限。
[0006]为了解决上述技术问题，本发明利用篇蓄及其提取物舒张气道平滑肌治疗哮喘，此方面的研究，尚未见国内外有相关报道。即，本发明提供了一种篇蓄乙酸乙酯提取物，该提取物经过试验发现能够舒张气道平滑肌，能够用于缓解哮喘患者气道阻塞，因此上述篇蓄乙酸乙酯提取物能够应用于在制备治疗支气管哮喘药物中。
[0007]本发明提供的一种篇蓄乙酸乙酯提取物的制备方法，包括如下步骤:
[0008](1)、选取干燥的篇蓄茎叶作为原料，磨成粉末；
[0009](2)、将步骤⑴所得粉末以乙醇浸泡并加热回流提取，收集提取液，蒸干，得到提取物；
[0010](3)、将步骤(2)所得提取物溶解于水中，用石油醚萃取，分别收集上层石油醚部萃取液和水部溶液，上层石油醚部萃取液蒸干后制得浸膏，即篇蓄石油醚提取物；
[0011](4)、将步骤(3)所得的水部溶液用乙酸乙酯萃取，分别收集上层萃取液和下层水相部分，上层萃取液蒸干后制得浸膏，即为篇蓄乙酸乙酯提取物；
[0012](5)、将步骤(4)中的下层水相部分继续以正丁醇萃取，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即篇蓄正丁醇提取物。
[0013]优选地，步骤⑵中粉末以体积浓度为70%的乙醇加热回流提取2?4次，每次提取乙醇的添加量为篇蓄粉末体积的8?12倍。每次提取时间为2?3小时。
[0014]优选地，步骤(2)中，提取液还经离心或抽滤处理，去除固体杂质后，收集上层液，然后将上层液蒸干，得到提取物。
[0015]优选地，步骤(3)中用石油醚萃取2?5次。
[0016]优选地，步骤⑷中用乙酸乙酯萃取2?5次。
[0017]优选地，步骤(5)中用正丁醇萃取2?5次。
[0018]本发明通过上述的制备方法制备得到了篇蓄乙酸乙酯提取物、篇蓄石油醚提取物和篇蓄正丁醇提取物。
[0019]本发明提供上述的制备方法制备得到的篇蓄乙酸乙酯提取物在制备治疗支气管哮喘药物中的应用，蓄乙酸乙酯提取物作为活性成分与药学上可接受的载体或辅料制备成抗免疫性炎症的药物或药物组合物。
[0020]本发明针对以上提取物进行了生物活性试验，具体研究结论如下:
[0021]篇蓄乙酸乙酯提取物抑制高钾引起气道平滑肌收缩。
[0022]篇蓄乙酸乙酯提取物抑制乙酰胆碱引起气道平滑肌收缩。
[0023]本发明的有益效果:通过对实验小鼠离体气管环张力的检测发现，篇蓄乙酸乙酯提取物具有有效的气管平滑肌舒张作用，有望应用于缓解哮喘患者气道阻塞。
【附图说明】
[0024]图1为本发明篇蓄各提取部提取物的制备方法示意图。
[0025]图2a为本实施例中篇蓄的水部提取物对乙酰胆碱引起气道平滑肌收缩的作用图。
[0026]图2b为本实施例中篇蓄的石油醚提取物对乙酰胆碱引起气道平滑肌收缩的作用图。
[0027]图2c为本实施例中篇蓄的乙酸乙酯提取物对乙酰胆碱引起气道平滑肌收缩的作用图。
[0028]图2d为本实施例中篇蓄的正丁醇提取物对乙酰胆碱引起气道平滑肌收缩的作用图。
[0029]图3a为本实施例中乙酸乙酯提取物对高钾的剂量效应图。
[0030]图3b?3c为本实施例中乙酸乙酯提取物对高钾诱导的外钙的内流有部分抑制作用的图。
[0031]图4a?4b为本实施例中篇蓄乙酸乙酯部提取物对乙酰胆碱诱导的内钙的释放有部分抑制作用的图。
【具体实施方式】
[0032]下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
[0033]下面结合实施例对本发明做详细具体的说明，但是本发明的保护范围并不局限于以下实施例。
[0034]1、如图1所示，篇蓄乙酸乙酯及其它各部提取物的制备:
[0035]篇蓄购自北京同仁堂(武汉)。经过干燥，打成粉，用70%的乙醇(体积为篇蓄粉末体积的10倍)加热回流提取三次，抽虑，收集过滤液，用旋转蒸发器蒸干，获得提取物(乙醇浸膏)。提取物溶溶于水中。石油醚萃取3次，获取石油醚部及水部。水部用乙酸乙酯萃取3次，获得乙酸乙酯部和水相。水相继续用正丁醇萃取三次，获得正丁醇部。以上各部用旋转蒸发器蒸干分别获得石油醚部、乙酸乙酯部、正丁醇部，获得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物，共约为原料药干重的2%左右。各部提取物溶解于3% DMS0中调pH至7.4用于生物活性实验检测。
[0036]2、小鼠气管的体外分离:
[0037]雄性成年的BALB