一种银杏提取物的提取工艺的制作方法_2

文档序号:9832285阅读:来源:国知局
却降温,使稀释液的温度降到12°C以下,并保温10?14h,然后将低温的稀释液放在离心机内离心分离,离心可以经过多次离心,离心后去过滤制得精滤液。
[0036]S4、吸附步骤:将精滤液用吸附黄酮和内酯的树脂柱吸附,水洗树脂柱,收集从树脂柱上洗脱下来的溶液,得到第一次洗脱液。
[0037]具体地,将精滤液用吸附黄酮和内酯的树脂柱进行吸附,树脂柱可以选用DM130型大孔树脂、也可以选用DlOl型大孔树脂,还可以选用AB-8型大孔吸附树脂。精滤液作为流动相通入树脂柱内,树脂柱能够吸附银杏的有效成分,主要吸附黄酮和内酯,同时也会吸附部分银杏酸,吸附持续2?4h,吸附完成后,去掉流出液,将树脂柱拿出,对树脂柱进行水洗2?4h,并用70?75%的乙醇解析,解析完毕后,收集解析液作为第一次洗脱液,将第一次洗脱液作为流动相进入除酸步骤。
[0038]S5、除酸步骤:将第一洗脱液用除酸的除酸树脂柱吸附,收集第一洗脱液经除酸树脂柱吸附后流出的溶液,得到第二次洗脱液。
[0039]具体地,将第一洗脱液依次通入吸附银杏酸的第一除酸树脂柱和第二除酸树脂柱内进行除酸,从第二除酸树脂柱流出的液体为第二次洗脱液。第一除酸树脂柱和第二除酸树脂柱连通,第一次除酸和第二次除酸是连续的。第一次除酸树脂柱内树脂的型号为13D,第二次除酸树脂柱内树脂的型号为DAD-1。通过两次除酸,能极大的降低流动相内的银杏酸的含量,第一次除酸树脂柱为包容性的除酸,能除去大部分的酸,在第一除酸树脂柱吸附后,经第一除酸树脂柱吸附后的第一洗脱液中银杏酸的含量小于1ppm;第二次除酸树脂柱为去除性的除酸,能去除第一次中未去除的部分酸,第二除酸树脂柱吸附后,第二次洗脱液中银杏酸的含量小于lppm。
[0040]S6、干燥步骤:将第二次洗脱液浓缩、干燥。
[0041]最后对第二次洗脱液进行减压浓酸、减压干燥,制得银杏提取物,在制得的银杏提取物中黄酮的含量大于24.5%,内酯的含量大于7%,本发明提供的银杏提取物的提取工艺在符合国家药典的范围内去实施,最大的化的提高整个提取流程的效率,提取得更加完全。
[0042]实施例一
[0043]首先进行提取步骤,取银杏叶,将银杏叶用清水清洗干净,并晾干,将晾干后的银杏叶置于恒温干燥箱内烘7h,调节恒温干燥箱内的温度为70°C,7h后,关闭干燥箱电源,使银杏叶在干燥箱内自然冷却,然后将冷却后的银杏叶采用粉碎机粉碎,本实施例中优选采用气流粉碎机对银杏叶进行粉碎,粉碎后过60目筛,得银杏叶粉末,银杏叶粉末的平均粒径为30um。利用银杏叶粉末进行提取,提取更充分。
[0044]将银杏叶粉末利用体积分数为50%的乙醇进行浸泡,并将浸泡有银杏叶粉末的乙醇放在恒温水浴中,调节水浴的温度为60°C,并利用电动搅拌器搅拌2h,2h能使银杏叶粉末中的有效成分充分溶于乙醇中,2h后过滤,收集滤液作为第一浸提液。然后在残渣中再次加入为50 %的乙醇,按照同样的方法,浸提2h,然后过滤,收集滤液作为第二浸提液,合并第一浸提液和第二浸提液得提取液。利用50%的乙醇提取,纯度更高,除杂更完全。
[0045]然后进行浓缩步骤,将提取液经过两次浓缩,第一次浓缩后的乙醇含量为40%,第二次浓缩后无乙醇。
[0046]浓缩步骤后进行水沉步骤,将浓缩液加水稀释,经过两次稀释、过滤后,取滤液作为稀释液,将稀释液放置在冷沉罐内,利用5?10°C的冷冻盐水对冷沉罐内的稀释液进行冷却降温,使稀释液的温度降到12°C,并保温10h,然后将低温的稀释液放在离心机内离心,离心可以经过多次离心,本实施例中稀释液经过三次离心。离心后去过滤制得精滤液。
[0047]接着进行吸附步骤,将精滤液上柱吸附,精滤液优选通过DlOl型大孔树脂进行吸附,控制流动相的流速为lml/min AlOl型大孔树脂能将精滤液内的有效成分吸附,主要吸附黄酮和内酯,吸附持续2h,吸附完成后,去掉流出液,将DlOl型大孔树脂拿出,对DlOl型大孔树脂进行水洗2h,并用70 %的乙醇解析,解析完毕后,收集解析液作为第一次洗脱液,将第一次洗脱液作为流动相进入除酸步骤。
[0048]接着进行除酸步骤,将第一洗脱液通入吸附银杏酸的第一除酸树脂柱内进行除酸,经第一除酸树脂柱吸附后的第一洗脱液再通入与第二除酸树脂柱,从第二除酸树脂柱流出的液体为第二次洗脱液。第一除酸树脂柱和第二除酸树脂柱连通,第一次除酸和第二次除酸是连续的。通过两次除酸,能极大的降低流动相内的银杏酸的含量,第一次除酸树脂柱内的树脂的型号是13D,能除去大部分的酸,经检测,经第一除酸树脂柱吸附后的第一洗脱液中银杏酸的含量为9ppm,第二次除酸树脂柱内的树脂的型号是DAD-1树脂,第二除酸树脂柱吸附后,第二次洗脱液中银杏酸的含量为0.9ppm。
[0049]最后进行干燥步骤,对第二次洗脱液进行减压浓酸、减压干燥,制得银杏提取物,在制得的银杏提取物中黄酮的含量为25.2%,内酯的含量为8%,本发明提供的银杏提取物的提取工艺在符合国家药典的范围内去实施,最大的化的提高整个提取流程的效率,提取得更加完全。
[0050]实施例二
[0051]首先进行提取步骤,本实施例中将银杏叶洗净、晾干、烘干、以及粉碎的方法相同,这里不再赘述,本实施例的提取步骤与实施例一的区别在于银杏叶粉末的平均粒径为42um。利用银杏叶粉末进行提取,提取更充分。银杏叶粉末的平均粒径为42um时,细胞几乎完全破壁,提取效果更好,提取时间更短。
[0052]将银杏叶粉末利用体积分数为55%的乙醇进行浸泡,并将浸泡有银杏叶粉末的乙醇放在恒温水浴中,调节水浴的温度为70°C,并利用电动搅拌器搅拌3h后过滤,收集滤液作为第一浸提液。然后在残渣中再次加入为60%的乙醇,按照同样的方法,浸提3h,然后过滤,收集滤液作为第二浸提液,合并第一浸提液和第二浸提液得提取液。利用60%的乙醇提取,纯度更高,除杂更完全。
[0053]然后进行浓缩步骤,将提取液经过两次浓缩,第一次浓缩后的乙醇含量为45%,第二次浓缩后无乙醇。
[0054]浓缩步骤后进行水沉步骤,将浓缩液加水稀释,经过两次稀释、过滤后,取滤液作为稀释液,将稀释液放置在冷沉罐内,利用5?10°C的冷冻盐水对冷沉罐内的稀释液进行冷却降温,使稀释液的温度降到10°C,并保温12h,然后将低温的稀释液放在离心机内离心,离心可以经过多次离心,本实施例中稀释液经过三次离心。离心后去过滤制得精滤液。
[0055]接着进行吸附步骤,本实施例中吸附步骤与实施例一中的吸附步骤相同,这里不再赘述。不同之处在于,本实施例中树脂柱优选AB-8型大孔吸附树脂,控制流动相的流速为lml/min。
[0056]接着进行除酸步骤,将第一洗脱液依次通入吸附银杏酸的第一除酸树脂柱和第二除酸树脂柱内进行除酸,从第二除酸树脂柱流出的液体为第二次洗脱液。第一除酸树脂柱和第二除酸树脂柱连通,第一次除酸和第二次除酸是连续的。通过两次除酸,能极大的降低流动相内的银杏酸的含量,第一次除酸树脂柱内的树脂的型号是13D,能除去大部分的酸,经检测,经第一除酸树脂柱吸附后的第一洗脱液中银杏酸的含量为9.3ppm,第二次除酸树脂柱内的树脂的型号是DAD-1树脂,第二除酸树脂柱吸附后,第二次洗脱液中银杏酸的含量为0.8ppm。
[0057]最后进行干燥步骤,对第二次洗脱液进行减压浓酸
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