专利名称：一种具有抗病毒作用的组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种具有抗病毒作用的组合物及其制备方法。属药物领域。
背景技术：
流行性感冒病毒，简称流感病毒，是一种造成人类及动物患流行性感冒的RNA病 毒，在分类学上，流感病毒属于正黏液病毒科，它会造成急性上呼吸道感染，并借由空气迅 速的传播，在世界各地常会有周期性的大流行。流行性感冒病毒在免疫力较弱的老人或小 孩及一些免疫失调的病人会引起较严重的症状，如肺炎或是心肺衰竭等。根据流感病毒感 染的对象，可以将病毒分为人类流感病毒、猪流感病毒、马流感病毒以及禽流感病毒等类 群，其中人类流感病毒根据其核蛋白的抗原性可以分为三类甲型流感病毒(Influenza A virus)，又称A型流感病毒；乙型流感病毒(Influenza Bvirus)，又称B型流感病毒；丙型 流感病毒(Influenza C virus)，又称C型流感病毒。祖国医学称流感为“时行感冒”，属外感热病中的“时气病”。时行感冒是指时行疫 疠邪毒侵犯肺卫而引起流行的重症感冒，发病突然，症见身热、恶寒，甚则壮热，微恶寒，头 痛重胀，肢体骨节酸痛，呼吸气粗，咳嗽重浊，咽喉肿痛，神疲乏力，苔薄，脉数等。时行感冒 临床上具有传染性、流行性和证侯相似性的特点，如《诸病源候论》中所述“是以一岁之中， 病无长少，率相近似者，此则时行之气也。” “病者多相染者”。其描述与“疠气”致病特点相 似，亦可归属于“疫疠”范畴。目前中药复方具有抗病毒功效的较多，成分复杂，作用靶点 多，抗病毒机理也不尽相同。(流感病毒感染机制及中西医防治研究现状，《中医儿科杂志》， 2007年3卷1期)。
发明内容
本发明的技术方案是提供了一种具有抗病毒作用的组合物，本发明还提供了该药 物组合物的治疗方法和用途。本发明提供了一种具有抗病毒作用的组合物，它是由下述重量配比的原料药制备 而成的制剂油患子10-30份、黄芩50-150份、木芙蓉叶5-15份、薄荷0. 1-0. 3份、莪术 0. 3-0. 7 份、柴胡 0. 5-0. 7 份。进一步优选地，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂油患子20份、黄芩100份、木芙蓉叶10份、薄荷0. 2份、莪术0. 5份、柴胡0. 5份。其中所述的油患子，又名无患子Sapindus mulorossi Gaertn，为无患子科植物 无患子的种子。所述的木芙蓉叶为锦葵科植物木芙蓉Hibiscus mutabilis的叶片，夏、秋二季，剪 下叶片，晒干。本发明组合物是由油患子、黄芩、木芙蓉叶、柴胡的水或有机溶剂提取物为活性成 分，加入莪术油、薄荷油，及药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成常用的制剂。其中，所述的制剂是口服制剂、外用制剂。
其中，所述的制剂是口服液、喷雾剂或水剂。本发明还提供了一种制备所述的组合物的方法，它包括如下步骤a、取重量配比的各原料油患子10-30份、黄芩50-150份、木芙蓉叶5-15份、薄荷 0. 1-0. 3 份、莪术 0. 3-0. 7 份、柴胡 0. 5-0. 7 份；b、取油患子，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，离心，取上清液，上大孔吸 附树脂柱，然后先用水洗至基本无色，再用30% -70%乙醇洗脱，洗至基本无色，收集乙醇 洗脱液，回收乙醇，浓缩，离心，收集上清液即得油患子提取物；c、取黄芩，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，离心，取上清液，上大孔吸附 树脂柱，然后先用水洗至基本无色，再用30% -70%乙醇洗脱，洗至基本无色，收集乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩，离心，收集上清液即得黄芩提取物；d、取木芙蓉叶，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，取上清液，上大孔吸附 树脂柱，然后先用水洗至基本无色，再用30% -70%乙醇洗脱，洗至基本无色，收集乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩，离心，收集上清液即得木芙蓉叶提取物；e、取柴胡，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，离心，取上清液，浓缩至柴胡 的质量体积，加入等体积的无水乙醇静止，过滤，滤液喷雾干燥得柴胡提取物；f、取莪术，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，用挥发油回收装置回收莪术油；g、取薄荷，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，用挥发油回收装置回收薄荷油；e、将b至g步骤制备的油患子提取物、黄芩提取物、木芙蓉叶提取物、柴胡提取物、 莪术油、薄荷油混合，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成常用的制剂。本发明还提供了所述的组合物在制备具有抗病毒药物中的用途。所述的药物是抗 流感病毒和副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒。进一步地，所述的抗流感病毒是抗甲型 流感病毒、抗乙型流感病毒；所述的副流感病毒为副流感病毒I型、III型；所述的腺病毒为 3、7型腺病毒。本发明还提供了所述的组合物在制备洗水液、果蔬菜清洗剂、空气消毒剂剂、洗浴 用品中的用途。本发明组合物属于纯中药抗病毒制剂，人体使用安全，无腐蚀性、无毒性、对环境 无污染；可用于制备抗病毒的洗水液、水果、蔬菜清洗剂、空气清洗剂、洗浴、洗发等各种表 面抗病毒水剂。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说 明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容 所实现的技术均属于本发明的范围。
图1本发明药物配伍筛选试验图
具体实施例方式实施例1本发明组合物水剂的制备
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1、油患子提取液油患子(500g)，粉碎成粗颗粒，加8倍量水煎煮三次，每次1 小时，滤过，合并滤液，浓缩至(1000g)，离心(4000r/min)，取上清液，上大孔吸附树脂柱 (D101)(树脂1000g)，上样速度为2BV/h，上完后静置1小时，然后先用水洗至基本无色， 用水量为8000g左右，水洗速度为3-4BV/h，再用50 %乙醇洗脱，洗至基本无色，用醇量为 2000g左右，洗脱速度为2BV/h，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，并浓缩至500g，离心，收集上清 液即得。2、黄芩提取液黄芩(500g)，粉碎成粗颗粒，加8倍量水煎煮三次，每次1小时， 滤过，合并滤液，浓缩至(1000g)，离心(4000r/min)，取上清液，上大孔吸附树脂柱(D101) (树脂1000g)，上样速度为2BV/h，上完后静置1小时，然后先用水洗至基本无色，用水量为 8000g左右，水洗速度为3-4BV/h，再用50%乙醇洗脱，洗至基本无色，用醇量为2000g左右， 洗脱速度为2BV/h，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，并浓缩至500g，离心，收集上清液即得。3、木芙蓉叶提取液木芙蓉叶(500g)粉碎成粗颗粒，加8倍量水煎煮三次，每次 1小时，滤过，合并滤液，浓缩至(1000g)，离心(4000r/min)，取上清液，上大孔吸附树脂柱 (D101)(树脂1000g)，上样速度为2BV/h，上完后静置1小时，然后先用水洗至基本无色， 用水量为8000g左右，水洗速度为3-4BV/h，再用50%乙醇洗脱，洗至基本无色，用醇量为 2000g左右，洗脱速度为2BV/h，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，并浓缩至500g，离心，收集上清 液即得。4、柴胡浸膏粉柴胡(500g)粉碎成粗颗粒，加8倍量水煎煮三次，每次1小时，滤 过，合并滤液，浓缩至(800g)，离心(4000r/min)，取上清液，加入800ml的乙醇静止48h，过 滤，喷雾干燥得固体。阴凉干燥处保存。5、莪术油莪术(500g)粉碎成粗颗粒，加入6倍水量煎煮，用挥发油回收装置回收 莪术油。6、薄荷油薄荷(500g)粉碎成粗颗粒，加入6倍水量煎煮，用挥发油回收装置回收 薄荷油。7、抗病毒水剂的制备油患子提取液20ml，黄芩100ml，木芙蓉叶10ml混合搅拌， 再加入莪术油0. 5ml，薄荷油0. 2ml搅拌均勻，在加入柴胡浸膏粉0. 5g，去离子水170ml搅 拌2h后得。实施例2本发明洗手液的制备配方乙酰化羊毛酯0. 6-1. 8%甘油 1-4. 8%抗病毒水剂(实施例1制备)20-30 %十二烷基二甲基氧化胺(30%浓度)18-35%脂肪醇聚氧乙烯醚2. 5-4. 8%羟乙基纤维素0.5-1%香精适量纯水 20-30%实施例3本发明果蔬清洗剂的制备配方抗病毒水剂(实施例1制备)15-30%浓度为47%的烷基多苷10-40%
浓度为 100 % 的 EDTA0. 1-0. 5 %氯化钠饱和溶液0. 5-1 %实施例4本发明空气消毒剂的制备 配方抗病毒水剂(实施例1制备)60-70 %蒸馏水 10-20%香精 5-10%实施例5本发明水剂的制备取油患子100g、黄芩500g、木芙蓉叶50g、薄荷lg、莪术3g、柴胡3g，按实施例1的 方法提取，制备成水剂。实施例6本发明水剂的制备取油患子300g、黄芩1500g、木芙蓉叶150g、薄荷3份、莪术7g、柴胡7g，按实施例 1的方法提取，制备成水剂。以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。试验例1试验例1本发明药物原料药配伍筛选试验各细胞分别于96孔细胞培养板中生长成单层，吸弃培养上清，用无血清DMEM液洗 涤两次，加入10TCID50 (10—1)的流感病毒液20ul/L，35°C,5% C02 培养箱中吸附2h，吸弃病 毒液，加入不同配比的抗病毒药液(内含2mg/L胰蛋白酶)100ul/孔培养，测定抗病毒药液 的抗病毒的抑制率。用正交试验L1836来确定配方的抗流感病毒抑制率，各配方组均是在同 等用量下进行
ABCDEF抑制率实验110120120. 30. 50. 270实验210100100. 20. 30. 383实验3108080. 10. 20. 568实验415120120. 30. 30. 574实验515100100. 10. 20. 285实验6158080. 20. 50. 371
6 首先，把每个因素1水平所有方案试验结果相加；把2水平方案试验结果相加；把 3水平方案试验结果相加。这实际上是把每1个因素的试验结果分成了3组。所得的结果 如下A因素的平均抑制率:al=77a2 =80 a3=82
B因素的抑平均制率:bl=76b2=85b3 =78
C因素的平均抑制率:cl=80c2=82c3 =77
D因素的平均抑制率:dl=77d2=82d3 =79
E因素的平均抑制率:el=79e2=80. 5e3 =82
F因素的平均抑制率:fl=78.5 f2=80. 5f3 =81为了直观的表示，把A，B，C，D，E，F因素的平均值表示出来，如图1所示从上图可 明显看出，正交试验确定的最佳方案为A3B2C2D2E3F3。即最佳配比为油患子20份、黄芩 100份、木芙蓉10份、薄荷0. 2份、莪术0. 5份、柴胡0. 5份。通过实验验证，该最佳配比的 抑制率为95%。将上述最佳配比按实施例1的方法制备成水剂进行下述药效学试验。试验例2莪术、柴胡、黄芩、木芙蓉叶、抗病毒水剂抗病毒比较试验1、体外试验1. 1本发明抗病毒水剂对病毒增殖的影响
各细胞分别于96孔细胞培养板中生长成单层，吸弃培养上清，用无血清DMEM液洗 涤两次，加入10TCID50 (10—1)的流感病毒液20ul/L，35°C,5% C02 培养箱中吸附2h，吸弃病 毒液，加入不同浓度的药液(内含2mg/L胰蛋白酶)100ul/孔培养。试验时各稀释药物设3 个复孔，同时设刚性溶媒对照、病毒对照及正常细胞对照。莪术、柴胡、黄芩、木芙蓉叶、抗病 毒水剂(由实施例1制备)设两个稀释度1 5，1 10，均是在同等剂量下进行比较。每个 稀释度加入10倍稀释的不同滴度病毒，每个滴度接种两管细胞，将流感病毒、副流感病毒、 呼吸道合胞病毒组放入35°C温箱旋转培养，腺病毒组放入37°C温箱培养，次日开始观察病 变，连续观察十天判定结果，见如下表MDCK细胞中抗流感病毒情况 在Vero细胞中抗副流感病毒的情况如下 在HEP-2细胞中抗3、7型腺病毒及抗呼吸道合病毒的情况如下
型腺病毒的抑制作用明显优于单个的莪术、黄芩、木芙蓉叶。2体内抗病毒的保护作用2. 1对甲型流感病毒感染小鼠的保护作用甲型流感病毒株感染半数小鼠致死量(LD5CI))滴定取ICR小鼠56只，体质量13_16g，雌雄各半，随机分7组，每组8只，取增毒3次的 病毒尿囊液，稀释10倍，每组滴1个病毒浓度，各组小鼠在乙醚浅麻醉下以血凝滴度为640 病毒尿囊液30Q1滴鼻感染小鼠，观察14d内死亡数，按Reed-Muench法计算，结果LD50为 10_2.5。本发明抗病毒水剂对甲型流感病毒感染小鼠的保护作用取TCR小鼠120只，体质量13 16g，雌雄各半，随机分6组，每组20只①正常 对照组等量NS ；②模型对照组等量NS ；③利巴韦林组；④本发明抗病毒水剂(由实施例 1制备)小剂量组10ml/kg ；⑤抗病毒水剂中剂量组20mlg/kg ；⑥抗病毒水剂大剂量组 50ml/kg(由实施例1制备)。以上各组小鼠均灌胃给药，给药容量10ml/kg, 1次/dX5d， 于给药dl各组小鼠(除正常对照组外)，在乙醚浅麻醉下，以血凝滴度640以上的尿囊液， 给小鼠滴鼻感染，每鼠50ul (20个LD5(i致死量)，观察动物感染后发病及死亡情况，记录14d 内死亡数，结果见表抗病毒水剂对甲型流感病毒小鼠死亡的保护作用 2. 2对乙型流感病毒感染小鼠的保护作用血凝试验根据文献方法确定血凝滴度640以上，可用于乙型流感病毒感染小鼠 致死量(LD5C1))滴度。取TCR小鼠120只，体质量13 16g，雌雄各半，随机分6组，每组20只①正常对 照组等量NS ；②模型对照组等量NS ；③利巴韦林组；④抗病毒水剂(由实施例1制备)小 剂量组10ml/kg ；⑤抗病毒水剂中剂量组20ml/kg ；⑥抗病毒水剂大剂量组50ml/kg。以 上各组小鼠均灌胃给药，给药容量10ml/kg，1次/dX5d，于给药dl各组小鼠(除正常对照 组外)，在乙醚浅麻醉下，以血凝滴度640以上的尿囊液，给小鼠滴鼻感染，每鼠50ul (20个 LD5(I致死量)，观察动物感染后发病及死亡情况，记录14d内死亡数，结果见表抗病毒水剂 结果表明对甲型流感病毒，乙型流感病毒感染体有一定的保护作用。 上述试验证明，本发明药物属于纯中药抗病毒制剂，人体使用安全，无腐蚀性、无 毒性、对环境无污染；用于制备抗病毒的洗水液、水果、蔬菜清洗剂、空气清洗剂、洗浴、洗发 等各种表面抗病毒水剂，外用及内服均具有明显的抗病毒功效，也可用于甲型、乙型流感病 毒的预防和治疗。
权利要求
一种具有抗病毒作用的组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂油患子10-30份、黄芩50-150份、木芙蓉叶5-15份、薄荷0.1-0.3份、莪术0.3-0.7份、柴胡0.3-0.7份。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料药制备而 成的制剂油患子20份、黄芩100份、木芙蓉叶10份、薄荷0. 2份、莪术0. 5份、柴胡0. 5份。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于它是由油患子、黄芩、木芙蓉叶、柴 胡的水或有机溶剂提取物为活性成分，加入莪术油、薄荷油，及药学上可接受的辅料或辅助 性成分制备成常用的制剂。
4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于所述的制剂是口服制剂、外用制剂。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于所述的制剂是口服液、喷雾剂或水剂。
6.一种制备权利要求1所述的组合物的方法，它包括如下步骤a、取重量配比的各原料油患子10-30份、黄芩50-150份、木芙蓉叶5-15份、薄荷 0. 1-0. 3 份、莪术 0. 3-0. 7 份、柴胡 0. 5-0. 7 份；b、取油患子，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，离心，取上清液，上大孔吸附树 脂柱，然后先用水洗至基本无色，再用30% -70%乙醇洗脱，洗至基本无色，收集乙醇洗脱 液，回收乙醇，浓缩，离心，收集上清液即得油患子提取物；C、取黄芩，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，离心，取上清液，上大孔吸附树脂 柱，然后先用水洗至基本无色，再用30% -70%乙醇洗脱，洗至基本无色，收集乙醇洗脱液， 回收乙醇，浓缩，离心，收集上清液即得黄芩提取物；d、取木芙蓉叶，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，取上清液，上大孔吸附树脂 柱，然后先用水洗至基本无色，再用30% -70%乙醇洗脱，洗至基本无色，收集乙醇洗脱液， 回收乙醇，浓缩，离心，收集上清液即得木芙蓉叶提取物；e、取柴胡，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，离心，取上清液，浓缩至柴胡的质 量体积，加入等体积的无水乙醇静止，过滤，滤液喷雾干燥得柴胡提取物；f、取莪术，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，用挥发油回收装置回收莪术油；g、取薄荷，粉碎成粗颗粒，加水煎煮，用挥发油回收装置回收薄荷油；e、将b至g步骤制备的油患子提取物、黄芩提取物、木芙蓉叶提取物、柴胡提取物、莪术 油、薄荷油混合，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成常用的制剂。
7.权利要求1-5任意一项所述的组合物在制备具有抗病毒药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于所述的药物是抗流感病毒和副流感病毒、 呼吸道合胞病毒、腺病毒。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于所述的抗流感病毒是抗甲型流感病毒、抗 乙型流感病毒；所述的副流感病毒为副流感病毒I型、II型、III型；所述的腺病毒为3、7型 腺病毒。
10.权利要求1-5任意一项所述的组合物在制备洗水液、水果、蔬菜清洗剂、空气清洗 齐U、洗浴或洗发液中的用途。
全文摘要
本发明提供了一种具有抗病毒作用的组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂油患子10-30份、黄芩50-150份、木芙蓉叶5-15份、薄荷0.1-0.3份、莪术0.3-0.7份、柴胡0.3-0.7份。本发明还提供了该组合物的制备方法和用途。本发明组合物属于纯中药抗病毒制剂，人体使用安全，无腐蚀性、无毒性、对环境无污染；可用于制备成洗水液、水果、蔬菜清洗剂、空气清洗剂、洗浴、洗发等各种抗病毒水剂。
文档编号C11D3/48GK101850088SQ201010184780
公开日2010年10月6日 申请日期2010年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者刘蓓, 夏隆江, 李昌龙, 米军 申请人:成都市康飞药业有限公司