一种组合物及其在抗病毒药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 单纯疱疼病毒1型（Herpes simplex virus，HSV-1)和单纯疱疼病毒2型（Herpes simplex virus，HSV-2)属于疱疹科病毒，HSV-1和HSV-2不仅引起口唇或生殖粘膜疱疹，同 时也是引起脑炎、肝炎、全身严重感染甚至宫内感染的重要病原。
[0003] 呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，RSV)主要引起呼吸系统感染， 在婴幼儿、老年以及免疫缺陷人群引起严重肺炎，是人类上呼吸道感染的重要病原之一。
[0004] 甲型流感病毒（Influenza A virus，Flu-A)属于正粘科病毒，在人类和其他生物 每年都有小范围的流行，引起上呼吸系统感染。大流行时，可引起严重呼吸系统感染，甚者 引起肺炎、脑炎甚至死亡。
[0005] 上述三种病毒的治疗目前已有的药物存在毒性大、安全性低的问题，从天然产物 中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物 最有重要价值。
[0006] 本发明涉及的化合物I是一个2011年发表（Fan-Yu Meng et al.，2011. Schiglautone A, a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens. Organic Letters 13(2011) 1502 - 1505) 的化合物，我们对化合物I进行了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物III和化合物 IV，并用化合物III和化合物IV制备了组合物，并对该组合物抗病毒活性进行了评价，其具 有抗病毒活性。
【发明内容】
[0007] 本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合 物中化合物III和化合物IV的质量百分数分别为40%和60%。
[0008]
[0009] 本发明公开的组合物可以制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0010] 药效学实验表明，本发明的组合物具有较好的抗病毒作用。本发明的药学上可接 受的盐具有同样的药效。
[0011] 组合物的体外实验表明，组合物具有很强的抗HSV-1、HSV-2、RSV和flu A的活性， 因此本发明的组合物有望被用于制备新型抗病毒药物。
[0012] 以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1化合物Schiglautone A的制备
[0014] 化合物Schiglautone A (I)的制备方法参照Fan-Yu Meng等人发表的文献 (Fan-Yu Meng et al. , 2011. Schiglautone A, a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens. Organic Letters 13(2011) 1502 - 1505)的方法。
[0016] 实施例2 Schiglautone A的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0017] 将化合物I (502mg，1. OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化铵（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（7. 520g，40.0 Ommol)和6mL的50%氢氧化钠溶液。混合物在35摄 氏度搅拌8h。8h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶液。然 后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤3次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩去 除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 〇， v/v)，收集棕色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的棕色粉末（508mg，71% )。
[0018] 4 NMR(500MHz，DMS0-d6) δ 13.40(S，1H)，6. 10(s，1H)，5.63(S，1H)，5.53(S，1H)，3 .85 (d, J = 11. 2Hz, 4H), 3. 52 (d, J = 10. 8Hz, 4H), 2. 96 (s, 1H), 2. 20 (s, 1H), 2. 16 (s, 2H), 2. 00 (s, 1H), 1. 84 (d, J = 13. 9Hz, 4H), 1. 69 (s, 1H), 1. 58 (dd, J = 22. 2, 8. 5Hz, 4H) ,1-51 (s, 1H )，1. 47 (s, 1H)，1. 26 (dd, J = 9. 1，4. 4Hz, 4H)，1. 21 (s, 1H)，1. 08 - 0· 98 (m, 4H)，0· 96-0. 94 ( m, 9H), 0. 94-0. 85 (m, 6H).
[0019] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6) δ 211. 46(s)，209. 14(s)，170. 06(s)，161. 12(s)，143. 5 1 (s), 132. 01 (s), 127. 77 (s), 85. 96 (s), 82. 40 (s), 70. 19 (s), 69. 10 (s), 57. 14 (s), 52. 73 (s ),51. 90 (s), 45. 77 (s), 40. 67 (s), 38. 57 (s), 38. 32 (s), 35. 04 (s), 33. 55 (s), 33. 27 (s), 29. 85 (s), 28. 98 (s), 26. 71 (s), 25. 50 (s), 24. 05 (s), 22. 31 (s), 21. 06 (s), 20. 56 (s), 20. 00 (s) ,18. 69 (s), 18. 11 (s), 15. 07 (s).
[0020] HRMS(ESI)m/z[M-H] calcd for C34H51Br206： 715. 2032 ；found 715.2027.
[0021]
[0022] 实施例3 Schiglautone A的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0023] 将化合物II (358mg，0. 5mmol)溶于10mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (690mg，5.0mmol)，碘化钾（168mg，1.0mmol)和二乙胺（2920mg，40mmol)，混合物加热回流 8h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有机相。依次用水和 饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 0, v/V)，收集棕色集 中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物ΠΙ的棕色粉末（231. 2mg，66% )。
[0024] 4 MIR (500MHz，DMS0-d6) δ 20. 07 (s，1H)，6. 13 (s，1H)，6. 06 (s，1H)，5. 55 (s，1H) ,3. 52 (d, J = 5. 1Hz, 4H), 3. 01 (s, 1H), 2. 89 (s, 8H), 2. 72 (s, 2H), 2. 64 (s, 2H), 2. 40 (s, 2H) ,2. 22 (s, 1H), 2. 10 (s, 1H), 1. 89 (d, J = 18. 6Hz, 4H), 1. 72 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 1. 62 (d, J = 11. 5Hz, 2H), 1. 55 (s, 1H), 1. 50 (s, 1H)，1. 40 (d, J = 9. 3Hz, 2H), 1. 33 - 1. 27 (m, 3H), 1. 25 (s ，1H)，1. 14 (s，12H)，1. 08 - 0· 60 (m，19H) ·
[0025] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6) δ 211. 64(s)，209. 43(s)，170. 46(s)，161. 60(s)，144. 1 0 (s), 132. 71 (s), 127. 95 (s), 86. 25 (s), 82. 80 (s), 67. 46 (s), 66. 70 (s), 57. 84 (s), 52. 91 (s ),52. 75 (s), 52. 29 (s), 48. 15 (s), 46. 37 (s), 41. 36 (s), 38. 76 (s), 38. 62 (s), 35. 42 (s), 34. 04 (s), 30. 43 (s), 29. 67 (s), 26. 91 (s), 25. 78 (s), 24. 44 (s), 22. 81 (s), 21. 64 (s), 21. 25 (s) ,20. 20 (s), 18. 97 (s), 18. 50 (s), 15. 57 (s), 12. 85 (s).
[0026] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C42H73N206：701. 5469 ；found:701. 5465〇
[0027]
[0028] 实施例4 Schiglautone A的0-(二轻乙胺基）乙基衍生物（IV)的合成
[0029] 将化合物II (358mg，0· 5mmol)溶于15mL乙腈，加入无水碳酸钾（0· 345g， 2. 5mmol)，碘化钾（0. 084g，0. 5mmol)和二乙醇胺（1. 0514g，lOmmol)，混合物加热回流 9h。 反应结束后将反应液倒入冷水中，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，依次用水和饱和食 盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂。产物用硅胶柱层析纯化（石油醚/丙酮 100:1，v/v)，得到化合物IV的淡黄色固体（0· 199g，52% )。
[0030] 4 NMR (500MHz，DMS0-d6) δ 17. 77 (s，1H)，6. 00 (s，1H)，5. 40 (s，1H)，5. 20 (s，1H)，3 .37 (d, J = 17. 8Hz, 4H), 3. 28 (s, 8H), 2. 87 (s, 1H), 2. 51 (d, J = 6. 5Hz, 4H), 2. 43 (s, 8H), 2. 2 4 (s, 2H), 2. 06 (d, J = 12. 7Hz, 2H), L 76 - 1. 68 (m, 5H), 1. 57 (s, 1H), L 53 - 1. 39 (m, 8H), 1. 36 (s, 1H), 1. 24 (s, 1H), 1. 20 - 1. 14 (m, 3H), 1. 11 (s, 1H), 0. 94 - 0. 82 (m, 10H), 0. 80 (s, 3H), 0. 76 (s, 3H), 0. 72 (d, J = 20. 0Hz, 3H).
[0031] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6) δ 211. 39(s), 208. 98(s), 169. 80(s), 160. 73(s), 143. 0 2 (s), 131. 42 (s), 127. 05 (s), 85. 91 (s), 82. 25 (s), 66. 70 (s), 65. 63 (s), 58. 62 (s), 56. 55 (s ),56. 61 (s), 53. 30 (s), 52. 45 (s), 51. 52 (s), 45. 29 (s), 40. 06 (s), 38. 52 (s), 38. 17 (s), 34. 73 (s), 33. 17 (s), 29. 35 (s), 28. 38 (s), 26. 34 (s), 25. 00 (s), 23. 45 (s), 22. 05 (s), 20. 67 (s) ,20. 07 (s), 19. 31 (s), 18. 41 (s), 17. 73 (s), 14. 59 (s).
[0032] HRMS(ESI) :m/z [M+H]+calcd for C42H73N201〇： 765. 5265 ；found:765. 5261 〇
[0033]
[0034] 实施例5组合物抗病毒活性
[0035] (一）实验例：组合物对疱疹病毒的作用研究：
[0036] (1)细胞株与病毒株：
[0037] 人胚肾细胞（HEK293,为HSV-1、HSV-2病毒敏感细胞）购自美国Clontech公司； 单纯疱疹病毒1型（HSV-1) Sm44株、单纯疱症病毒2型（HSV-2) 333株引自中国⑶C病毒病 研究所。
[0038] (2)细胞毒性测定：
[0039] 组合物的制备：将研磨之后过200目网的40mg化合物III的粉末和研磨之后过 200目网的60mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用涡轮搅拌仪混合即得到100mg组 合物，使用时用水溶解这l〇〇mg的组合物即得到组合物的溶液。
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