专利名称：樟脑酸根为配体的抗肿瘤铂(Ⅱ)配合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有有效抗肿瘤活性的新型铂(II)配合物、其制备方法和所述铂(II)配合物中典型化合物的体外抗肿瘤性质。
二.
背景技术：
在顺铂类抗癌药物研究中，作为离去基团的阴离子的特性对药物的活性影响很大。如果采用不稳定的离去基团，化合物的毒性将增大；如果使用惰性的离去基团，化合物则通常无活性。自含有环丁二酸根的卡铂研制成功后，二元羧酸在抗肿瘤铂(II)配合物药物的研发中一直扮演重要的角色。如乙二酸、丙二酸和去甲斑蝥酸都已得到实际应用。因此设计与合成含有二元羧酸根的具有低毒和水溶性好的顺铂类化合物来改进抗肿瘤制剂是一条重要的途径。
三.
发明内容
本发明的目的是在于提供新型的含有二元羧酸根的顺铂(II)类配合物，这些配合物具有低毒、较好水溶性、有效的抗肿瘤活性，用于治疗人类肿瘤。本发明公开了一类新型铂(II)配位化合物，其特征在于应用樟脑酸根为配阴离子与铂胺配阳离子反应形成的新型铂(II)配位化合物。该类化合物的组成由下面(1)、(2)、(3)式表示 其中式(1)、式(2)和式(3)中的樟脑酸根可以是其外消旋体、D型旋光异构体[(1R，3S)-(+)-樟脑酸根]或L型旋光异构体[(1S，3R)-(-)-樟脑酸根]。式(1)中的R基团相同，分别为氢原子、C1-5烷基或C1-8氧杂烷基；式(2)中的环己二胺为1，2-反式环己二胺，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型；式(3)中的4，5-二(氨甲基)-2-烷基-1，3-二氧戊环所示R1和R2相同或不相同，分别为氢原子或C1-5烷基，或可与一碳原子联结形成环烷基，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型。本发明的铂配合物包括上述化学式所示的所有立体异构体及其混合物。
本发明的另一个目的是提供制备式(1)、式(2)和式(3)所示的铂(II)配合物的方法。在这些二价铂配合物的合成中，它们首先是由四氯合铂酸钾与相关的二胺(氨)配体作用得到含二卤素离子二胺配位的铂化合物，由式(4a)和(4b)代表。然后在避光通氮气条件下，通过方法A使用银离子除去二卤二胺(氨)合铂(II)的卤素离子，所得中间体与一价碱金属阳离子或铵离子的樟脑酸盐作用得到顺-(樟脑酸根)·二胺(氨)合铂(II)化合物；或通过方法B使用樟脑酸银盐与二卤二胺(氨)合铂(II)作用得到顺-(樟脑酸根)·二胺(氨)合铂(II)化合物。 式(4a)和4(b)中的Hal代表Cl-、Br-和I-离子，其中式(4a)的R基团相同，分别为氢原子或C1-5烷基或C1-8氧杂烷基，式(4b)连在胺氮原子上的圆弧表示两个胺基由烷基相连。
本发明还有一个目的是公开上述铂(II)配合物中典型化合物对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的体外抑制作用。
本发明有代表性的化合物包括顺-(DL-樟脑酸根)·二氨合铂(II)(略为GS-1a)；顺-(D-樟脑酸根)·二氨合铂(II)(略为GS-1b)；顺-(DL-樟脑酸根)·二异丙胺合铂(II)(略为GS-2a)；顺-(D-樟脑酸根)·二异丙胺合铂(II)(略为GS-2b)；顺-(DL-樟脑酸根)·(1，2-反式环己二胺)合铂(II)(略为GS-3a)；顺-(D-樟脑酸根)·(1，2-反式环己二胺)合铂(II)(略为GS-3b)；顺-(DL-樟脑酸根)·[(1R，2R)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)(略为GS-4a)；顺-(D-樟脑酸根)·[(1R，2R)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)(略为GS-4b)；顺-(DL-樟脑酸根)·[(1S，2S)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)(略为GS-5a)；顺-(D-樟脑酸根)·[(1S，2S)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)(略为GS-5b)；顺-(DL-樟脑酸根)·[4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(略为GS-6a)；顺-(D-樟脑酸根)·[4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(略为GS-6b)；顺-(DL-樟脑酸根)·[(4R，5R)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(略为GS-7a)；顺-(D-樟脑酸根)·[(4R，5R)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(略为GS-7b)；
顺-(DL-樟脑酸根)·[(4S，5S)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(略为GS-8a)。
顺-(D-樟脑酸根)·[(4S，5S)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(略为GS-8b)；顺-(DL-樟脑酸根)·二(2-甲氧基乙基胺)合铂(II)(略为GS-9a)；顺-(D-樟脑酸根)·二(2-甲氧基乙基胺)合铂(II)(略为GS-9b)。
本发明由下述实施例得到进一步的阐述，但这些说明并不是限制本发明。
按本发明所制备的化合物的结构已被不同的分析方法诸如元素分析、红外光谱、质子核磁共振光谱和阳离子电喷雾质谱所证实。以下为本发明方法制备一些代表性化合物的实施例。实施例1合成顺-(DL-樟脑酸根)·二氨合铂(II)顺-二碘·二氨合铂(II)(0.97克，2毫摩尔)、硝酸银(0.68克，4毫摩尔)混合加入水(50毫升)，60℃下避光通氮气反应24小时，硅藻土辅助过滤，滤液中加入DL-樟脑酸(0.40克，4毫摩尔)与氢氧化钠(0.16克，4毫摩尔)的水溶液，60℃下避光通氮气反应16小时，将溶液浓缩，析出大量白色固体。过滤，用水、乙醇、乙醚反复洗涤，60℃下真空干燥，得产物0.41g(48％)。IR(KBr)3424vs(br)，3266vs(br)，2967m，2881w，1594vs，1544vs，1460m，1384vs，1355vs1H-NMR(D2O/TMS)δ0.47-0.67(m，3H)，0.91-1.08(m，6H)，1.24-1.31(s，1H)，1.60(s，1H)，1.74-1.75(s，1H)，2.08(m，1H)，2.55-2.56(s，1H)ESI-MS[M+甲醇+H]+＝460(30％)，[M+H]+＝428(6％)实施例2合成顺-(DL-樟脑酸根)·二(异丙胺)合铂(II)顺-二碘·二(异丙胺)合铂(II)(1.13克，2毫摩尔)、硝酸银(0.68克，4毫摩尔)混合加入水(50毫升)，60℃下避光通氮气反应24小时，硅藻土辅助过滤，滤液中加入DL-樟脑酸(0.40克，4毫摩尔)与氢氧化钠(0.16克，4毫摩尔)的水溶液，60℃下避光通氮气反应16小时，将溶液浓缩，析出大量白色固体。过滤，用水、乙醇、乙醚反复洗涤，60℃下真空干燥，得产物0.39g(38％)。IR(KBr)3430s(br)，3217s(sh，br)，2971vs，2880w，1595vs(br)，1462m，1383vs，1351vs，1164w，1118w1H-NMR(DMSO-d6/TMS)δ0.70-0.85(m，3H)，0.97-1.26(m，18H)，1.44-2.36(br，4H)，2.64-2.70(br，1H，CH)，2.96-3.18(m，2H)，5.85-5.99(br，NH2)ESI-MS[M+甲醇+H]+＝544(100％)，[M+H]+＝512(44％)实施例3合成顺-(D-樟脑酸根)·[(1R，2R)-1 ，2--反式环己二胺]合铂(II)顺-二氯·[(1R，2R)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)(0.76克，2毫摩尔)、硝酸银(0.68克，4毫摩尔)混合加入水(50毫升)，60℃下避光通氮气反应24小时，硅藻土辅助过滤，滤液中加入D-樟脑酸(0.40克，4毫摩尔)与氢氧化钠(0.16克，4毫摩尔)的水溶液，60℃下避光通氮气反应16小时，将溶液浓缩，析出大量白色固体。过滤，用水、乙醇、乙醚反复洗涤，60℃下真空干燥，得产物0.65g(64％)。IR(KBr)3424vs(br)，3226s(sh，br)，2939s，2872w，1598vs(br)，1457m，1381vs，1350s，1169w，1126w，1063w1H-NMR(DMSO-d6/TMS)δ0.84-0.91(m，3H)，1.09-1.20(m，6H)，1.28(m，4H)，1.48(m，2H)，1.57-1.62(m，3H)，2.08-2.22(m，3H)，2.41-2.57(m，3H)，5.87-6.44(br，NH2)ESI-MS[M+甲醇+H]+＝540(100％)，[M+H]+＝508(40％)实施例4合成顺-(D-樟脑酸根)·[(4R，5R)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)顺-二碘·[(4R，5R)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(1.25克，2毫摩尔)、硝酸银(0.68克，4毫摩尔)混合加入水(50毫升)，60℃下避光通氮气反应24小时，硅藻土辅助过滤，滤液中加入D-樟脑酸(0.40克，4毫摩尔)与氢氧化钠(0.16克，4毫摩尔)的水溶液，60℃下避光通氮气反应16小时，将溶液浓缩，析出大量白色固体。过滤，用水、乙醇、乙醚反复洗涤，60℃下真空干燥，得产物0.55g(49％)。IR(KBr)3424s(br)，3220s(sh，br)，2966m，2881w，1620-1559s(br)，1460m，1383vs，1357s，1125m，1093s1H-NMR(DMSO-d6/TMS)δ0.77-1.14(m，15H)，1.58-2.03(m，3H)，2.45-2.87(m，7H)，3.22-3.30(m，2H)，4.82(s，1H)，6.40-7.50(br，NH2)ESI-MS[M+甲醇+H]+＝600(34％)实施例5合成顺-(D-樟脑酸根)·[(4S，5S)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)顺-二碘·[(4S，5S)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(1.25克，2毫摩尔)、硝酸银(0.68克，4毫摩尔)混合加入水(50毫升)，60℃下避光通氮气反应24小时，硅藻土辅助过滤，滤液中加入D-樟脑酸(0.40克，4毫摩尔)与氢氧化钠(0.16克，4毫摩尔)的水溶液，60℃下避光通氮气反应16小时，将溶液浓缩，析出大量白色固体。过滤，用水、乙醇、乙醚反复洗涤，60℃下真空干燥，得产物0.42g(37％)。IR(KBr)3427s(br)，3218s(sh，br)，2966m，2881w，1621-1560s(br)，1461m，1381vs，1358s，1124m，1094s1H-NMR(DMSO-d6/TMS)δ0.72-1.14(m，15H)，1.58-1.95(m，3H)，2.45-2.87(m，7H)，3.15-3.20(m，2H)，4.80(s，1H)，6.50-7.20(br，NH2)ESI-MS[M+甲醇+H]+＝600(100％)实施例6合成顺-(DL-樟脑酸根)·二(2-甲氧基乙基胺)合铂(II)顺-二碘·二(2-甲氧基乙基胺)合铂(II)(1.20克，2毫摩尔)、硝酸银(0.68克，4毫摩尔)混合加入水(50毫升)，60℃下避光通氮气反应24小时，硅藻土辅助过滤，滤液中加入DL-樟脑酸(0.40克，4毫摩尔)与氢氧化钠(0.16克，4毫摩尔)的水溶液，60℃下避光通氮气反应16小时，将溶液浓缩，析出大量白色固体。过滤，用水、乙醇、乙醚反复洗涤，60℃下真空干燥，得产物0.54g(50％)。IR(KBr)3447m(br)，3217m，3122m，2963m，2882m，2829w，1610vs，1457m，1378vs，1346vs，1119s，1052m1H-NMR(DMSO-d6/TMS)δ0.545-0.712(m，3H)，0.93-1.15(m，6H)，1.22-2.35(m，4H)，2.49(m，1H)，2.623(m，2H)，3.06(s，3H)，3.42(s，2H)，5.57-5.91(br，NH2)ESI-MS[M+甲醇+H]+＝576(40％)注因Pt元素丰度较高的同位素有194Pt、195Pt和196Pt，所以上述化合物ESI-MS质谱的准分子离子峰都有三个丰度较高的同位素峰。四.一些典型化合物对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的体外抑制作用单体化合物疗效评价
实验方法台盼兰排染法，SRB比色法细胞株HL-60人白血病细胞，3AO人卵巢癌细胞，BEL-7402人肝癌细胞，A549人肺癌细胞。
实验设计药物浓度分为100，10，1，0.1，0.01(μg/ml)三组。根据疗效评价计算抑制率。观察在不同浓度下药物对肿瘤细胞生长的抑制情况，顺铂和卡铂作为参照。
有关化合物对四种肿瘤细胞的体外抑制率数据分见表1、表2、表3和表4。
表1.化合物对人白血病细胞(HL-60)的体外抑制作用率
表2.化合物对人卵巢细胞(3AO)的体外抑制作用率
表3.化合物对人肝癌细胞(BEL-7402)的体外抑制作用率
表4.化合物对人肺癌细胞(A549)的体外抑制作用率
化合物对相应的肿瘤细胞GI50值图见说明书附图。其中
图1为化合物对HL-60细胞GI50值，图2为化合物对3AO细胞GI50值，图3为化合物对BEL-7402细胞GI50值，图4为化合物对A549细胞GI50值。
权利要求
1.一类具有有效抗癌活性铂(II)配位化合物，其特征在于应用樟脑酸根为配阴离子与铂胺配阳离子反应形成的新型铂(II)配位化合物。该类化合物的组成由下式表示 其中式(1)、式(2)和式(3)中的樟脑酸根可以是其DL外消旋体、D型旋光异构体[(1R，3S)-(+)-樟脑酸根]或L型旋光异构体[(1S，3R)-(-)-樟脑酸根]。式(1)中的R基团相同，分别为氢原子、C1-5烷基或C1-8氧杂烷基；式(2)中的环己二胺为1，2-反式环己二胺，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型；式(3)中的4，5-二(氨甲基)-2-烷基-1，3-二氧戊环所示R1和R2相同或不相同，分别为氢原子或C1-5烷基，或可与—碳原子联结形成环烷基，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型。本发明的铂配合物包括上述化学式所示的所有立体异构体及其混合物。
2.根据权利要求1所述铂(II)配合物的制备方法，其特征在于将式(4)代表的二卤素离子二胺配位的铂化合物在避光通氮气条件下，通过方法A使用银离子除去二卤二胺(氨)合铂(II)的卤素离子，所得中间体与—价碱金属阳离子或铵离子的樟脑酸盐作用得到顺-(樟脑酸根)·二胺(氨)合铂(II)化合物；或通过方法B使用樟脑酸银盐与二卤二胺(氨)合铂(II)作用得到顺-(樟脑酸根)·二胺(氨)合铂(II)化合物。 式(4a)和4(b)中的Hal代表Cl-、Br-和I-离子，其中式(4a)的R基团按权利1所定义，式(4b)连在胺氮原子上的圆弧表示两个胺基由烷基相连按权利1所定义。
3.根据权利要求1所述的铂(II)配合物和根据权利要求2所述制备方法获得的铂(II)配合物的抗肿瘤活性，其特征在于这一类铂(II)配合物对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的有效抑制作用。
全文摘要
本发明公开了一类具有有效抗癌活性铂(II)配位化合物，其特征在于应用樟脑酸根为配阴离子与铂胺配阳离子反应形成的新型铂(II)配位化合物，披露了其制备方法和典型化合物对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的体外抑制作用。该类化合物的组成由上式表示其中式(1)、式(2)和式(3)中的樟脑酸根可以是其DL外消旋体、D型旋光异构体[(1R，3S)－(+)－樟脑酸根]或L型旋光异构体[(1S，3R)－(－)－樟脑酸根]。式(1)中的R基团相同，分别为氢原子、C
文档编号C07C61/06GK1478785SQ0313192
公开日2004年3月3日 申请日期2003年6月19日 优先权日2003年6月19日
发明者苟少华, 王联红 申请人:南京大学