专利名称：普利醇的提取制备工艺及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及用白虫蜡为原料的高碳脂肪醇普利醇(Policosanol)提取工艺及普利醇的应用。
背景技术：
普利醇为包含有C24、C26、C28、C30、C28系列高碳脂肪醇，并以二十八烷基醇为最主要组成成份。而普利醇的提取工艺目前已知有用蔗蜡、糠蜡、蜂蜡为原料，采用苯与异戊醇混合溶媒、乙醇为提取溶剂。应用于工业生产时因工艺流程长，投资大、能耗高和产品成本高的问题。目前普利醇的主要作用有(1)提高反应灵敏性；(3)提高应激能力；(4)促进性激素作用，减轻肌肉疼痛；(5)改善心肌功能；可用来防治X综合症、动脉粥样硬化并发症、胃溃疡、提高男性性能力、局部缺血。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种原料利用率高，产品含量高，工艺流程简单，能耗低，生产成低的普利醇提取制备工艺。
本发明的另一目的旨在提供普利醇的具有降低胆固醇、除低血脂的应用方法。
本发明的目的是通过下述方式实现的本发明的提取制备工艺(1)取白虫蜡原料，在罐内加压100-115℃熔解化；(2)加入原料1-2倍量的20-25％的NaOH或KOH溶液；(3)保持罐内压力为0.1-0.15Mpa下皂化；皂化物经水洗后，干燥得粗品；(4)将粗品投入连续提取器中，加入六号溶剂油或石油醚进行连续提取；(5)提取液浓缩后得浓缩液，将浓缩液冷却，析出晶体；过滤得晶体状物；将晶体状物干燥。
所述(3)步中皂化反应5-7小时。
所述(3)步中在40-60℃下干燥。
所述(4)步中连续提取2-4小时。
所述(5)步中浓缩液冷却至15-45℃；晶体状物干燥2-4小时，温度为40-65℃。
所述(5)步中晶体状物干燥后球磨成细粉过60-120目筛，将干燥物粉碎、混合、包装即可。
本发明的另一目的是通过下述方式实现的由上述工艺制备的普利醇应用作为提高耐力、降低胆固醇、降低血脂的保健产品。
由上述工艺制备的普利醇应用作为提高耐力、降低胆固醇、降低血脂的保健药。
本发明所使用的六号溶剂油为外观为无色透明液体，是各种低级烷烃的混合物，主要用于得料，植物油脂的萃取溶剂等。在各个石化生产厂家均能生产的且可以买到的常用溶剂油。
本发明是一种以昆虫同翅目蜡蚧科的白蜡虫(Ericerus pela)寄生在女贞树或白蜡树吸取树汁后雄虫体腹面与背面蜡腺分泌的蜡质物(白虫蜡)为原料，经皂化和六号溶剂油或石油醚连续萃取后获得具有保健功能的普利醇(Policosanol)生产工艺。
本发明针对原有的生产工艺的工艺流程长，投资高、能耗大和产品成本高的问题，不适合工业化生产高含量普利醇的上述问题，经大量实验研究针对原料白虫蜡以适宜工艺提取普利醇的工艺路线，提出了一个可以降低投资成本和能耗，而获得普利醇含量达40-99％，收率在25％以上的适合工业化的生产工艺。普利醇属脂溶性物质，较低极性有机溶剂对普利醇溶解较好，本发明工艺通过皂化反应，提取方式，不同溶剂极性的选择，在综合考虑产品的纯度、收率、提取率主要因素，经过对多个因素和不同水平进行了多次正交试验，并以普利醇纯度、收率、提取率为评价指标，反复试验的基础上才得到本发明的生产工艺。且产品具有提高耐力、降低胆固醇、降低血脂的功能。
试验例1本发明制备的普利醇作为保健药，对高脂血症模型大鼠血脂水平的影响。
1材料与方法动物健康SD大鼠，雌雄各半，3月龄，体重15-180克，由湖南中医学院实验动物中心提供。
药物本发明制备的普利醇，含量90％。
非诺贝特胶囊，0.1克/粒，西安第四制药厂生产。
临用前用蒸馏水配制成要求浓度的混悬液。
实验方法SD大鼠60只，随机分为正常组(12只)和高脂造模组(48只)。高脂造模组模型制备成功后，随机分为模型组、普利醇低剂量组、普利醇高剂量组、非诺贝特对照组。每组为12只大鼠，然后普利醇组分别以2.0、4.0mg/ml浓度灌胃，非诺贝特组以1.8mg/ml浓度灌胃，正常组与模型组则以等量蒸馏水灌胃，容量10ml/Kg，每日1次，给药15天。除正常组大鼠每日饲以普通饲料外，其余各组均隔日饲以一次高脂饲料，一次普通饲料。末次给药半小时后，将各组大鼠颈动脉放血处死，按要求留取血清。
2、观察指标与测定方法血脂采用酶法试剂盒，在AEROSET全自动生化分析仪测定TC、TG、HDL-C含量，再根据测定结果计算出低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量，LDL-C的含量＝TC-(1/2TG+HDL-C)。
3、结果实验结果表明，喂饲高脂饲料2周后，高脂造模组大鼠的血清总胆固醇、甘油三酯含量显著升高，与正常对照组相比具有显著性差异(P＜0.01)，提示模型制备成功。治疗给药15天后，模型组大鼠血中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量仍然维持高水平，与正常组大鼠相比，差异具有显著性意义(P＜0.01，P＜0.05)。而普利醇低剂量组、普利醇高剂量组、非诺贝特对照组大鼠血中TC、TG、LDL-C含量则显著下降，与模型组相比，差异亦均有显著性意义(P＜0.01，P＜0.05)，表明普利醇组及非诺贝特治疗给药后均能显著地降低血中TC、TG、LDL-C含量。结果见表1、表2。
表1 高脂饲料喂饲2周后大鼠血脂含量的变化 X±S
注与正常组比较，*P＜0.05；**P＜0.01表2 普利醇治疗给药15天对高脂血症大鼠血脂含量mmol/L的影响 X±S组别 n TC TG HDL-C LDL-C
注与模型组比较，*P＜0.05；**P＜0.01结论本实验结果表明，普利醇组低剂量与高剂量均有显著地降低高脂血症大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量的作用，与模型组相比差异具有显著性意义。提示本发明产品具有较好的降血脂作用。
试验例2本发明制备的普利醇作为保健药，抗疲劳作用的实验。
1 材料与方法动物健康昆明种大鼠，雄性，体重18-22克，由湖南中医学院实验动物中心提供。在(22±1)℃温度下饲养，自由采食饮水，每天光照8小时。
药物本发明制备的普利醇，含量90％。
临用前用蒸馏水配制成要求浓度的混悬液。
实验方法小鼠70只，适应性饲养一周后随机分成正常组、普利醇低剂量组、普利醇高剂量组，每组24只。然后普利醇低剂量组和普利醇高剂量组，分别以1.5、3.0mg/ml浓度灌胃，正常组则以等量蒸馏水灌胃，容量0.2ml/10g，每日1次，给药15天。末次给药半小进后，从每组中各取12只，将其放入水温为25±1℃的水槽中测定其游泳耐力。游泳进室温控制在25±1℃，水深30cm。以小鼠自游泳开始至沉入水底无力上浮的时间作为游泳时间。每组另外12只小鼠在尾根部负荷4％体重铅皮同样条件游泳30分钟，游泳后安静15分钟眼眶采血，进行血尿氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)指标测定。BUN、LDH采用试剂盒，在AEROSET全自动生化分析仪上测定。
结果1、普利醇对小鼠游泳耐力的影响结果见表3.普利醇低剂量组和普利醇高剂量组小鼠游泳时间与对照组相比差异显著(P＜0.05)，表明普利醇低剂量与高剂量均能延长小鼠游泳时间，增强游泳耐力。而普利醇高剂量与低剂量相比，高剂量有优于低剂量的作用趋势。
表3 普利醇对小鼠游泳耐力影响 X±S
注与正常组比较，*P＞0.05；**P＜0.05；与普利醇低剂量组比较，#P＜0.052、普利醇对小鼠负重游泳后血清生化指标的影响结果见表4.普利醇高剂量和普利醇低剂量均能显著降低血尿素(BUN)含量(与正常组比较，P＜0.01，或P＜0.05)，增强血清乳酸脱氢酶(LDH)活性(与正常组比较，P＜0.05)。而普利醇高剂量组在降低BUN指标方面，与普利醇低剂量相比亦具有显著性意义(P＜0.05)，增强LDH活性方面，两剂量组作用相当。
表4 普利醇对小鼠负重游泳后血清尿素氮、乳酸脱氢酶的影响 X±S
注与正常组比较，**P＞0.05；***P＜0.01；与普利醇低剂量组比较，##P＜0.053、结论尿素氮是评价机体承受体力负荷能力，评价长时间中等强度的运动、剧烈运动时对机体疲劳程度的最常用生化指标。而乳酸脱氢酶则具有催化乳酸与丙酮酸相互转变的作用，其活性增强有利于乳酸的清除和缺氧条件下能量供应，对于延缓疲劳发生和高强度运动的持续进行具有重要意义。因而乳酸脱氢酶活性亦是评价受试物抗疲劳功能的重要生化指标。
以上实验结果表明，普利醇具有延长小鼠游泳时间，并具有降低小鼠负重游泳后的血清尿素氮含量，增强其乳酸脱氢酶活性的作用。故普利醇能增强机体对运动负荷的适应能力，具有抗疲劳作用。
具体实施例方式
实施例1取白虫蜡原料，在反应罐内加压110℃熔解化；(2)加入原料1.5倍量的20％的NaOH溶液；(3)保持反应罐内压力为0.1-0.15Mpa下皂化6小时；皂化物经水洗后，在50℃干燥得粗品；(4)将粗品投入连续提取器中，加入六号溶剂油进行连续提取3小时；(5)提取液于浓缩器中回收浓缩得浓缩液，将浓缩液冷却至20℃，析出晶体；过滤得晶体状物；将晶体状物干燥3小时。晶体状物干燥后球磨成细粉过90目筛，将干燥物粉碎、混合、包装即可。
实施例2取白虫蜡原料，在反应罐内加压100℃熔解化；(2)加入原料1倍量的25％的KOH溶液；(3)保持反应罐内压力为0.1-0.15Mpa下皂化5小时；皂化物经水洗后，在40℃干燥得粗品；(4)将粗品投入连续提取器中，加入石油醚进行连续提取2小时；(5)提取液于浓缩器中回收浓缩得浓缩液，将浓缩液冷却至15℃，析出晶体；过滤得晶体状物；将晶体状物干燥2小时。晶体状物干燥后球磨成细粉过60目筛，将干燥物粉碎、混合、包装即可。
实施例3取白虫蜡原料，在反应罐内加压115℃熔解化；(2)加入原料2倍量的20％的NaOH溶液；(3)保持反应罐内压力为0.1-0.15Mpa下皂化7小时；皂化物经水洗后，在65℃干燥得粗品；(4)将粗品投入连续提取器中，加入六号溶剂油进行连续提取4小时；(5)提取液于浓缩器中回收浓缩得浓缩液，将浓缩液冷却至45℃，析出晶体；过滤得晶体状物；将晶体状物干燥4小时。晶体状物干燥后球磨成细粉过120目筛，将干燥物粉碎、混合、包装即可。
实施例4取实施例1所制得的普利醇制成保健胶囊药，其中每粒含0.15克普利醇产物，作为口服降血脂，降胆固醇，提高耐力保健品，一天2粒，早、晚各一粒。
权利要求
1.普利醇的提取制备工艺，其特征在于(1)取白虫蜡原料，在罐内加压100-115℃熔解化；(2)加入原料1-2倍量的20-25％的NaOH或KOH溶液；(3)保持罐内压力为0.1-0.15Mpa下皂化；皂化物经水洗后，干燥得粗品；(4)将粗品投入连续提取器中，加入六号溶剂油或石油醚进行连续提取得提取液；(5)提取液浓缩后得浓缩液，将浓缩液冷却，析出晶体；过滤得晶体状物；将晶体状物干燥。
2.根据权利要求1所述的普利醇提取制备工艺，其特征在于，所述(3)步中皂化反应5-7小时。
3.根据权利要求1所述的普利醇提取制备工艺，其特征在于，所述(4)步中连续提取2-4小时。
4.根据权利要求1所述的普利醇提取制备工艺，其特征在于，所述(5)步中将浓缩液冷却至15-45℃。
5.根据权利要求1或5所述的普利醇提取制备工艺，其特征在于，所述(5)步中晶体状物干燥2-4小时，温度为40-65℃。
6.根据权利要求1所述的普利醇提取制备工艺，其特征在于，所述(5)步中晶体状物干燥后球磨成细粉过60-120目筛，将干燥物粉碎、混合、包装即可。
7.应用权利要求1所述提取制备工艺用白虫蜡原料所得的普利醇作为提高耐力、降低胆固醇、降低血脂的食品或保健物质。
8.应用权利要求1所述提取制备工艺用白虫蜡原料所得的普利醇作为提高耐力、降低胆固醇、降低血脂的保健药。
全文摘要
普利醇的提取制备工艺及其应用，用白虫蜡原料，在罐内加压100－115℃熔解化；加入原料1－2倍量的20－25％的NaOH或KOH溶液；保持罐内压力为0.1－0.15MPa下皂化；皂化物经水洗后，干燥得粗品；将粗品投入连续提取器中，加入六号溶剂油或石油醚进行连续提取；提取液浓缩后得浓缩液，将浓缩液冷却至15－45℃，析出晶体；过滤得晶体状物；将晶体状物干燥。使用白虫蜡原料应用提取制备工艺所得的普利醇作为提高耐力、降低胆固醇、降低血脂的食品或保健物质，保健药。
文档编号C07C29/74GK1660732SQ200410047139
公开日2005年8月31日 申请日期2004年12月31日 优先权日2004年12月31日
发明者王智娟, 陈开义, 文句平, 骆协平 申请人:湖南太阳植物资源有限公司