作为酪氨酸激酶调节剂的三唑并哒嗪的制作方法

专利名称：作为酪氨酸激酶调节剂的三唑并哒嗪的制作方法
相关申请的互相参考
本申请要求2005年12月21日提交的美国临时申请专利号60/752,634的优先权，其全文通过引用结合本文中。
发明领域 本发明涉及作为蛋白酪氨酸激酶调节剂的新的化合物。更具体地，本发明涉及作为c-Me抑制剂的新的化合物。

背景技术：
本发明涉及作为酪氨酸激酶，包括c-Met抑制剂的三唑并哒嗪。己报道三唑并哒嗪具有有用的治疗性质US 5278161和US2003181455报道作为肾素抑制剂的三唑并哒嗪；US 6355798报道分别作为GABA抑制剂和GABAA受体配体的三唑并哒嗪；WO2005002590和US 2005096322报道介导骨质增加的三唑并哒嗪；US2004192696报道用于治疗或减轻疾病或症状严重性的三唑并哒嗪。高校实验室已经在下列文献中报道用三唑并哒嗪进行的实验合成科学(Science of Synthesis)(2002)，12，15-225，杂环(Heterocycles)(2003)，61，105-112，杂环(Heterocycles)(2002)，57(11)，2045-2064，杂环化学杂志(Journal ofHeterocyclic Chemistry)(1998)，35(6)，1281-1284和四面体(Tetrahedron)(1999)，55(1)，271-278。
值得注意的还有US 4810705；DE 2222834(等同于US 3823137)；DE 2147013(等同于US 3919200)；DE 2113438；DE 2030581(等同于US 3823137)；DE 1670160(US 3506656)；DE 1545598(等同于US3483193)；DE 2161587；DE 4309285；WO 2004021984；US 2004147568；JP 63199347；WO 1999037303；US 6297235；US 6444666；WO2001034603；WO 2004017950；CA 2132489；WO 2004058769；US2004192696 WO 2003074525；WO 2003032916；日本专利申请号62-147775；US 4260755；WO 2002012236；EP 464572；EP 404190；EP 156734；WO 2005002590；WO 2003074525；JP 63310891和E1Massry，Abdel Moneim；Amer，Adel，＂新的s-三唑并[4，3-b]哒嗪的合成＂杂环(Heterocycles)(1989)，29(10)，1907-14；Amer，Adel；El Massry，Abdel Moneim；Badawi，Mohamed；Abdel-Rahman，Mohamed，M.；E1Sayed，Safaa A.F.，＂含氮杂环的合成反应和结构研究.14节.2-(2-芳基乙基)-2-羟基-4-氧代戊酸及其腙的脱水形成杂环＂，Journal fuerPraktische Chemie/Chemiker-Zeitung(1997)，339(1)，20-25；Legraverend，Michel；Bisagni，Emile；Lhoste，Jean Marc，＂s-三唑并[4，3-b]哒嗪C-核苷(1)的合成＂，杂环化学杂志(Journal of Heterocyclic Chemistry)(1981)，18(5)，893-8；Albright，J.D.；Moran，D.B.；Wright，W.B.，Jr.；Collins，J.B.；Beer，B.；Lippa，A.S.；Greenblatt，E.N.，＂6-(取代-苯基)-1，2，4-三唑并[4，3-b]哒嗪的合成和抗焦虑活性＂，药物化学杂志(Journal ofMedicinal Chemistry)(1981)，24(5)，592-600；How，Pow-Yui；Parrick，John，＂哒嗪基腙的热环化生成s-三唑并[4，3-b]哒嗪和哒嗪并[2，3-a]苯并咪唑＂，化学协会杂志(Journal of the Chemical Society)，Perkintransactions 1有机和生物有机化学(Organic and Bio-Organic Chemistry)(1972-1999)(1976)，(13)，1363-6；Lundina，I.B.；Frolova，N.N.；Postovskii，I.Ya.；Bedrin，A.V.；Vereshchagina，N.N.，＂哒嗪和s-三唑并[4，3-b]哒嗪的2-(5-硝基-2-呋喃基)乙烯基衍生物的合成和抗结核活性的研究＂，Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal(1972)，6(4)，13-17；Sircar，Ila，＂新的1，2，4-三唑并[4，3-b]哒嗪和相关化合物的合成＂，杂环化学杂志(Journal of Heterocyclic Chemistry)(1985)，22(4)，1045-8；Bratusek，Urska等，＂N-邻苯二甲酰-氮杂色氨酸衍生物的合成＂，ActaChimica Slovenica(1996)，43(2)，105-117；Sala，Martin等，＂3-(a-和b-D-阿拉伯呋喃糖基)-6-氯-1，2，4-三唑并[4，3-b]哒嗪的合成＂，碳水化合物研究(Carbohydrate Research)(2003)，338(20)，2057-2066；Cucek，Karmen等，＂新的[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪的合成＂，ARKIVOC(Gainesville，FL，美国)[在线计算机档案](2001)，(5)，79-86，URLhttp://www.arkat-usa.org/ark/journal/Volume2/Part3/Tisler/MT-161/MT-161.pdf；Svete，Jurij等，＂1-(s-三唑并[4，3-x]吖嗪基-3)-取代的多羟基化合物的简单的单罐合成＂，杂环化学杂志(Journal ofHeterocyclic Chemistry)(1997)，34(4)，1115-1121；Kosary，Judit等，＂新的[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪的制备.12节哒嗪化合物领域的研究＂Pharmazie(1983)，38(6)，369-71；Kosary，J.等，＂哒嗪化合物领域的研究.II.[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-羧酸衍生物＂，Acta ChimicaAcademiae Scientiarum Hungaricae(1980)，103(4)，405-13；Stanovnik，B.等，＂产物类别1吡唑＂，合成科学(Science of Synthesis)(2002)，12，15-225；Vranicar，Lidija等，＂在酸性催化剂的存在下用肼转化N-(5-乙酰基-6-甲基-2-氧代-2H-吡喃-3-基)苯甲酰胺＂，杂环(Heterocycles)(2003)，61，105-112；Bratusek，Urska等，＂(Z)-3-苯甲酰基氨基-4-二甲基氨基-2-氧代-3-丁烯的合成与反应性。1-芳基-和1-杂芳基-取代的4-苯甲酰基氨基-5-甲基-1H-吡唑的制备＂，杂环(Heterocycles)(2002)，57(11)，2045-2064；Bratusek，Urska等，4-[1-(二甲基氨基)亚乙基]-2-苯基-5(4H)-噁唑酮转化为2-(苯甲酰基氨基)-3-氧代丁酸甲酯。1-取代的4-(苯甲酰基氨基)-3-甲基-5(2H)-吡唑酮的合成＂，杂环化学杂志(Journal of Heterocyclic Chemistry)(1998)，35(6)，1281-1284；Vranicar，Lidija等，＂作为(E)-α，β-二脱氢氨基酸衍生物的合成子的2H-吡喃-2-酮＂，四面体(Tetrahedron)(1999)，55(1)，271-278。
蛋白激酶是信号传导途径的酶组分，它催化末端磷酸盐从ATP迁移至蛋白的酪氨酸、丝氨酸和/或苏氨酸残基的羟基。因此，抑制蛋白激酶功能的化合物是评估蛋白激酶活动的生理学结果的有价值的工具。哺乳动物的正常或突变蛋白激酶的过表达或不适当表达已经成为广泛研究的主题，并已经被证实在许多疾病，包括糖尿病、血管生成、银屑病、再狭窄、眼病、精神分裂症、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、心血管疾病和癌症的发展中起到重要作用。已经研究激酶抑制作用的强心益处。总之，蛋白激酶抑制剂在治疗人和动物疾病方面具有特别的用途。
肝细胞生长因子(HGF)(也称为扩散因子)受体c-Met，是调节细胞增殖、形态形成和能动性的受体酪氨酸激酶。c-Met基因被转译为170kD蛋白，该蛋白被加工为由140kDβ跨膜亚单位和50kD糖基化细胞外α亚单位组成的细胞表面受体。
经相同细胞的c-Met突变、c-Met和/或HGF/SF的过表达、c-Met和HGF/SF表达和c-Met信号传导的过表达和/或异常出现于多种人实体瘤，并被认为参与血管生成、肿瘤发展、侵入和转移。
例如，具有不受控制的c-Met活动的细胞系是高度侵入和转移的。正常和经改变细胞表达c-Met受体的一个显著区别在于，肿瘤细胞中的酪氨酸激酶结构域的磷酸化不依赖于配体的出现。
已经在大量人疾病，包括肿瘤和癌症，例如，遗传和散发的人乳头状肾癌、乳腺癌、直肠结肠癌、胃癌、神经胶质瘤、卵巢癌、肝细胞癌、头和颈鳞状细胞癌、睾丸癌、基底细胞癌、肝癌、肉瘤、恶性胸膜间皮瘤、黑瘤、多发性骨髓瘤、骨肉瘤、胰腺癌、前列腺癌、滑囊肉瘤、甲状腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌、膀胱移行细胞癌、睾丸癌、基底细胞癌、肝癌-和白血病、淋巴瘤和骨髓瘤-例如，急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)、急性早幼粒细胞白血病(APL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓性白血病(CML)、慢性嗜中性细胞白血病(CNL)、急性未分化细胞白血病(AUL)、退行发育的大细胞淋巴瘤(ALCL)、幼淋巴细胞白血病(PML)、幼年粒-单核细胞白血病(JMML)、成人T细胞ALL、伴有三系骨髓发育不良的AML(AML/TMDS)、混合系白血病(MLL)、骨髓增生异常综合征(MDSs)、骨髓增生性疾病(MPD)、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓肉瘤、非霍奇金淋巴瘤和霍奇金病(也称为霍奇金淋巴瘤)中鉴别出C-Met突变/更替。
参见Maulik G，Shrikhande A，Kij ima T，Ma PC，Morrison PT，Salgia R.，肝细胞生长因子受体c-Met在瘤形成方面的作用和治疗性抑制作用的潜力.Cytokine Growth Factor Rev.2002年2月；13(1)41-59并在此引用Bieche，M.H.Champeme和R.Lidereau，散发的乳房肿瘤中的MET基因的罕见突变(信件).Int.J.Cancer 82(1999)，908-910页；R.L.Camp，E.B.Rimm和D.LRimm，Met表达与腋淋巴结阴性乳腺癌患者的预后不良相关.Cancer 86(1999)，2259-2265页；LNakopoulou，H.Gakiopoulou，A.Keramopoulos等，在侵入乳腺癌中c-Met酪氨酸激酶受体表达与异常β-连接素表达和有利预后因素相关.Histopathology 36(2000)，313-325页；C.Liu，M.Park和M.S.Tsao，在原发性人直肠结肠癌中的c-Met原癌基因而不是表皮细胞生长因子受体或c-erbB-2的过表达.Oncogene.7(1992)，181-185页；K.Umeki，G.Shiota和H.Kawasaki，人大肠癌中的c-met癌基因更替的临床意义.Oncology 56(1999)，314-321页；H.Kuniyasu，W.Yasui，Y.Kitadai等，硬癌型胃癌中的c-met基因的频繁扩增.Biochem.Biophys.Res.Commun.189(1992)，227-232页；H.Kuniyasu，W.Yasu1，H.Yokozaki等，人胃癌中的c-met mRNA的异常表达.Int.J.Cancer 55(1993)，72-75页；W.S.Park，R.R.Oh，Y.S.Kim等，原发性胃癌中的Met基因激酶结构域中的突变的缺乏和Met和HGF/SF蛋白的频繁表达.Apmis108(2000)，195-200页；J.H.Lee，S.U.Han，H.Cho等，人胃癌中的新的种系近膜Met突变.Oncogene 19(2000)，4947-4953页；T.Moriyama，H.Kataoka，H.Tsubouchi等，人神经胶质瘤细胞中的肝细胞生长因子(HGF)、HGF激活剂和c-met基因体外共表达.FEBS Lett.372(1995)，78-82页；Y.W.Moon，RJ.Wei1，S.D.Pack等，人神经胶质瘤中检测出的MET基因的错义突变.Mod.Pathol.13(2000)，973-977页；M.DiRenzo，M.Olivero，T.Martone等，人HNSC癌转移扩散期间选择met癌基因的体细胞突变.Oncogene 19(2000)，1547-1555页；K.Suzuki，N.Hayashi，Y.Yamada等，人肝细胞癌中的c-met原癌基因的表达.Hepatology 20(1994)，1231-1236页；W.S.Park，S.M.Dong，S.Y.Kim等，儿童肝细胞癌中的Met/肝细胞生长因子受体基因的激酶结构域中的体细胞突变.Cancer Res.59(1999)，307-310页；L.Schmidt，K.Junker，G.Weirich等，患遗传性乳头状肾癌和相同的新的MET原癌基因突变的两个北美家庭.Cancer Res.58(1998)，1719-1722页；J.Fischer，G.Palmedo，R.von Knobloch等，多发性遗传性乳头状肾细胞肿瘤中的MET原癌基因的突变等位基因的复制和过表达.Oncogene.17(1998)，733-739页；Z.Zhuang，W.S.Park，S.Pack等，遗传性乳头状肾癌中突变MET等位基因的携带7种非随机重复的三体性.Nat Genet 20(1998)，66-69页；M.Olivero，G.Valente，A.Bardelli等，HPRCC家族中的MET癌基因酪氨酸激酶的ATP-结合位点中的新的突变.Int.J.Cancer 82(1999)，640-643页；L.Schmidt，K.Junker，N.Nakaigawa等，乳头状肾癌中的原癌基因的新的突变.Oncogene 18(1999)，2343-2350页；M.Jucker，A.Gunther，G.Gradl等，Met/肝细胞生长因子受体(HGFR)基因过表达于人白血病和淋巴瘤的某些情况.Leuk.Res.18(1994)，7-16页；E.Tolnay，C.Kuhnen，T.Wiethege等，肝细胞生长因子/扩散因子及其受体c-Met过表达并与恶性胸膜间皮瘤中的增加的微血管密度相关.J.CancerRes.Clin.Oncol.124(1998)，291-296页；J.Klominek，B.Baskin，Z.Liu等，肝细胞生长因子/扩散因子经c-met受体刺激趋化性和恶性间皮瘤细胞的生长.Int.J.Cancer 76(1998)，240-249页；Thirkettle，P.Harvey，P.S.Hasleton等，胸膜恶性间皮瘤中的钙粘着蛋白、HGF/SF、met和erbB-2的免疫反应性.Histopathology 36(2000)，522-528页；P-G.Natali，M.R.Nicotra，M.F.Di Renzo等，人黑素细胞瘤中的c-Met/HGF受体的表达恶性黑瘤发展关系的验证.Br.J.Cancer 68(1993)，746-750页；O.Hjertner，M.L.Torgersen，C.Seidel等，肝细胞生长因子(HGF)从成骨细胞介导白细胞介素-11分泌HGF在与骨髓瘤相关的溶骨疾病中的可能作用.Blood 94(1999)，3883-3888页；C.Liu和M.S.Tsao，人非小细胞肺癌中的转化成长因子-α和酪氨酸激酶受体体外和体内表达.Am.J.Pathol.142(1993)，1155-1162页；M.Olivero，M.Rizzo，R.Madeddu等，人非小细胞肺癌中的肝细胞生长因子/扩散因子的过量表达和活化.BrJ.Cancer 74(1996)，1862-1868页；E.Ichimura，A.Maeshima，T.Nakajima等，人非小细胞肺癌中的c-met/HGF受体的体外和体内表达及其预后意义.Jpn.J.Cancer Res.87(1996)，1063-1069页；Takanami，F.Tanana，T.Hashizume等，肺腺癌中的肝细胞生长因子和c-Met/肝细胞因子受体作为预后标志评估它们的表达.Oncology 53(1996)，392-397页；J.M.Siegfried，L.A.Weissfeld，J D.Luketich等，非小细胞肺癌肝细胞生长因子的临床意义.Ann Thorac.Surg.66(1998)，1915-1918页；M.Tokunou，T.Niki，K.Eguchi等，肌成纤维细胞中的c-MET表达肺腺癌中的自分泌激活和预后意义中的作用.AmJ.Pathol.158(2001)，1451-1463页；R.Ferracini，M.F.Di Renzo，K.Scotlandi等，Met/HGF受体过表达于人骨肉瘤并被旁分泌或自分泌循环活化.Oncogene 10(1995)，739-749页；M.F.Di Renzo，M.Olivero，D.Katsaros等，Met/HGF受体在卵巢癌中的过表达.Int.J.Cancer58(1994)，658-662页；H.M.Sowter，A.N.Corps和S.K.Smith，卵巢上皮性肿瘤液中的肝细胞生长因子(HGF)刺激卵巢癌细胞的迁移.Int.J.Cancer 83(1999)，476-480页；M.Ebert，M.Yokoyama，H.Friess等，c-met原癌基因和肝细胞生长因子在人胰腺癌中的共表达.Cancer Res.54(1994)，5775-5778页；L.L.Pisters，P.Troncoso，H.E.Zhau等，良性和恶性人前列腺组织中的c-met原癌基因表达.J.Urol.154(1995)，293-298页；P.A.Humphrey，X.Zhu，R.Zarnegar等，前列腺癌中的肝细胞生长因子及其受体(c-MET).AmJ.Pathol.147(1995)，386-396页；K.Rygaard，T.Nakamura，M.Spang-Thomsen等，SCLC细胞系和异种移植物中的原癌基因c-met和c-kit及其配体、肝细胞生长因子/扩散因子和干细胞因子的表达.BrJ.Cancer 61(1993)，37-46页；Y.Oda，A.Sakamoto，T.Saito等，肝细胞生长因子(HGF)/扩散因子及其受体c-MET表达与滑囊肉瘤的预后不良相关.Hum.Pathol.31(2000)，185-192页；M.F.Di Renzo，M.Olivero，G.Serini等，衍生自滤泡上皮的人甲状腺癌中的c-MET/HGF受体过表达.J.Endocrinol.Invest 18(1995)，134-139页；K.Gohji，M.Nomi，Y.Niitani等，膀胱癌中的血清肝细胞生长因子独立预后值.J.Clin.Oncol.18(2000)，2963-2971页。
由于在各种人癌发病机制中的异常HGF/SF-Met信号传导的作用，c-Met受体酪氨酸激酶的抑制剂在癌症治疗方面具有广泛的用途，其中Met活性归因于侵入/转移表型，包括其中c-Met未过表达或改变的那些。c-Met抑制剂还抑制血管生成，从而被认为在治疗与新血管形成有关的疾病，例如类风湿性关节炎、视网膜病方面有用。参见，Michieli P，Mazzone M，Basilico C，Cavassa S，Sottile A，Naldini L，Comoglio PM.双功能诱饵(dual-function decoy)Met受体的靶向肿瘤及其微环境.Cancer Cell.2004年7月；6(1)61-73. 例如，还认为c-Met过表达是某些疾病，例如，乳腺癌、非小细胞肺癌、胰腺内分泌肿瘤、前列腺癌、食管腺癌、直肠结肠癌、涎腺癌、弥漫性大B-细胞性淋巴瘤和子宫内膜癌的预后的潜在有用的预测因子。
参见Herrera LJ，El-Hefnawy T，Queiroz de Oliveira PE，Raja S，Finkelstein S，Gooding W，Luketich JD，Godfrey TE，Hughes SJ.，HGF受体c-Met过量表达于食管腺癌.Neoplasia.2005年1月；7(1)75-84；Zeng Z，Weiser MR，D′Alessio M，Grace A，Shia J，Paty PB.，c-Met表达于人直肠结肠癌的免疫印迹法分析过表达与晚期癌症相关.Clin ExpMetastasis.2004；21(5)409-17；He Y，Peng Z，Pan X，Wang H，OuyangY.[c-Met和雌激素受体在子宫内膜癌的表达和相关性]四川大学学报医学版.2003年1月；34(1)78-9，88(只有英文摘要)；Tsukinoki K，Yasuda M，Mori Y，Asano S，Naito H，Ota Y，Osamura RY，Watanabe Y.的肝细胞生长因子和c-Met免疫反应性与高级表涎腺癌的转移有关.Oncol Rep.2004年11月；12(5)1017-21；Kawano R，Ohshima K，KarubeK，Yamaguchi T，Kohno S，Suzumiya J，Kikuchi M，Tamura K.弥漫性大B-细胞性淋巴瘤患者的肝细胞生长因子和c-Met表达的预后意义.Br J Haematol.2004年11月；127(3)305-7；Lengyel E，Prechtel D，Resau JH，Gauger K，Welk A，Lindemann K，Salanti G，Richter T，Knudsen B，Vande Woude GF，Harbeck N.C-Met过表达于淋巴结阳性乳腺癌鉴别与Her2/neu无关的临床预后不良患者.Int J Cancer.2005年2月10；113(4)678-82；Hansel DE，Rahman A，House M，Ashfaq R，Berg K，Yeo CJ，Maitra A.Met原癌基因和胰岛素样生长因子结合蛋白3过表达与高分化的胰腺骨分泌肿瘤转移能力相关.Clin Cancer Res.2004年9月15；10(18 Pt 1)6152-8；Knudsen BS，Edlund M.前列腺癌和met肝细胞因子受体.Adv Cancer Res.2004；9131-67；D Masuya，C Huang，D Liu，T Nakashima，等，肿瘤内c-Met和间质肝细胞生长因子间的肿瘤-间质相互作用与非小细胞肺癌患者的肿瘤生长和预后相关.British Journal of Cancer.2004；901552-1562；Ernst Lengyel，DieterPrechtel，James H.Resau，Katja Gauger，等.C-Met过表达于淋巴结阳性乳腺癌鉴别与Her2/neu无关的临床预后不良患者.Int.J.Cancer2005；113678-682. 已经设计许多方案削弱人肿瘤的异常Met信号传导。某些这些方案包括采用HGF拮抗剂和小分子抑制剂。例如，目前在临床开发方面有大量的HGF/SF拮抗剂或抑制剂，例如，Abbott(ABT-510)、EntreMed(血管生长抑素)、Kosan Biosciences(17-AAG)、Amgen(AMG-102)、Exelixis(XL-880和XL-184)、Pfizer(PNU-145156E)和ArQule(ARQ 197)。
发明概述 本发明提供作为蛋白酪氨酸激酶调节剂，尤其是c-Met抑制剂的新的三唑并哒嗪(式I化合物)，和这类化合物降低或抑制细胞或患者的c-Met的激酶活性，和调节细胞或患者的c-Met表达的用途和这类化合物预防或治疗患者细胞增殖性疾病和/或与c-Met有关的疾病的用途。
作为本发明的例证的是包含式I化合物和药学上可接受的载体的药用组合物。本发明的另一例证是通过使式I化合物和药学上可接受的载体混合制备的药用组合物。
从下列发明详述和从权利要求书中，本发明的其它性质和优点将显而易见。
图的描述

图1表示口服本发明化合物(实施例1号化合物)对裸鼠的U87MG胶质母细胞瘤的肿瘤生长抑制(TGI)。全部治疗开始于携带确立的皮下U87MG肿瘤的小鼠的第1天。对于研究中的各组，以肿瘤体积中位数(mm3)对时间(天数)作图表示肿瘤生长。21天研究结束时，由溶媒处理的和药物治疗的小鼠的肿瘤体积中位数的差，计算最终的TGI％，表示为溶媒处理的对照组的肿瘤体积中位数的百分率(*＝p<0.05，**＝p<0.01，***＝p<0.001)。
图2表示口服本发明化合物(实施例61号化合物)对裸鼠的U87MG胶质母细胞瘤的肿瘤生长抑制作用(TGI)。全部治疗开始于携带确立的皮下U87MG肿瘤的小鼠的第1天。对于研究中的各组，以肿瘤体积中位数(mm3)对时间(天数)作图表示肿瘤生长。12天研究结束时，由溶媒处理的和药物治疗的小鼠的肿瘤体积中位数的差，计算最终的TGI％，表示为溶媒处理的对照组的肿瘤体积中位数的百分率(*＝p<0.05，**＝p<0.01，***＝p<0.001)。
图3表示口服本发明化合物(实施例61号化合物)对裸鼠的U87MG胶质母细胞瘤的肿瘤生长抑制作用(TGI)。全部治疗开始于携带确立的皮下U87MG肿瘤的小鼠的第1天。12天研究结束时，由溶媒处理的和药物治疗的小鼠的肿瘤体积中位数的差，计算最终的TGI％，表示为溶媒处理的对照组的肿瘤体积中位数的百分率(*＝p<0.05，**＝p<0.01，***＝p<0.001)。
图4表示口服本发明化合物(实施例61号化合物)对S114肿瘤生长的作用(TGI)。用0.1mL传递体积中的5x106个S114细胞皮下接种于雌性无胸腺裸鼠的大腿左腹股沟区域。使肿瘤生长5天。小鼠按100mg/kg口服20％ HPBCD中的化合物或溶媒(20％ HPBCD，对照组)。连续4天持续定量给予。研究结束的那天，立即完整切下肿瘤并称重，以肿瘤最终湿重量(克)用作最初的功效端点。
发明详述 定义 用于本文的下列术语旨在具有下列意义(提供整个本说明书需要的另外的定义) 术语＂链烯基＂，无论单独采用还是作为取代基部分，例如，＂C1-4链烯基(芳基)＂指具有至少一个碳-碳双键的部分不饱和支链或直链单价烃基，借此通过从前体烷基分子的两个相邻碳原子中的每个除去一个氢原子生成双键，并通过从单一碳原子中除去一个氢原子生成该基团。围绕双键的原子的取向可呈顺式(Z)或反式(E)构型。典型的链烯基包括，但不限于，乙烯基、丙烯基、烯丙基(2-丙烯基)、丁烯基等。实例包括C2-8链烯基或C2-4链烯基。
术语＂Ca-b＂(其中的a和b是涉及指定碳原子数的整数)指烷基、链烯基、炔基、烷氧基或环烷基或指基团的烷基部分，其中的烷基作为含有a-b个碳原子的前缀词根出现。例如，C1-4指含有1、2、3或4个碳原子的基团。
术语＂烷基＂，无论单独采用还是作为取代基的一部分，指饱和支链或直链单价烃基，其中的基团经从单一碳原子上除去一个氢原子得到。除非明确说明(例如，通过采用限定词例如＂末端碳原子＂)，取代基变体可置于任何碳链原子上。典型的烷基包括，但不限于，甲基、乙基、丙基、异丙基等。实例包括C1-8烷基、C1-6烷基和C1-4烷基。
术语＂烷基氨基＂指经从烷基胺，例如丁胺的氮上除去一个氢原子形成的基团，而术语＂二烷基氨基＂指从仲胺，例如二丁胺的氮上除去一个氢原子所形成的基团。在两种情况下，希望对分子其它部分的连接点是氮原子。
术语＂炔基＂，无论单独采用还是作为取代基的一部分，指具有至少一碳-碳三键的部分不饱和支链或直链单价烃基，借此，通过从母体烷基分子的两个相邻碳原子的每一个除去两个氢原子得到三健，再经从单一碳原子除去一个氢原子得到该基。典型的炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基等。实例包括C2-8炔基或C2-4炔基。
术语＂烷氧基＂指经从前体烷烃、烯烃或炔烃上的氢氧化物氧取代基除去氢原子得到的饱和或部分不饱和支链或直链单价烃醇基。其中考虑到特定饱和水平，与烷基、链烯基和炔基的定义一致，采用命名法＂烷氧基＂、＂链烯基氧基＂和＂炔基氧基＂。实例包括C1-8烷氧基或C1-4烷氧基。
术语＂芳族＂指具有不饱和、共轭π电子系统的环烃环系统。
术语＂苯并稠合杂环基＂指双环稠合环系统基，其中的一个环是苯和另一环是杂环基环。典型的苯并稠合杂环基包括1，3-苯并间二氧杂环戊烯基(也称为1，3-亚甲基二氧苯基)、2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己烯基(也称为1，4-亚乙基二氧苯基)、苯并-二氢-呋喃基、苯并-四氢-吡喃基、苯并-二氢-噻吩基等。
术语＂环烷基＂指经从单环碳原子除去一个氢原子得到的饱和或部分不饱和单环或双环烃环基。典型的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。另外的实例包括C3-8环烷基、C5-8环烷基、C3-12环烷基、C3-20环烷基、十氢化萘基和2，3，4，5，6，7-六氢-1H-茚基。
术语＂稠合环系统＂指双环分子，其中两个相邻原子出现于两个环部分的每一个。可任选存在杂原子。实例包括苯并噻唑、1，3-苯并间二氧杂环戊烯和十氢化萘。
用作环系统的前缀的术语＂杂＂指用独立选自N、S、O或P的一个或多个原子替代至少一个环碳原子。实例包括其中的1、2、3或4个环原子是氮原子的环；或者，0、1、2或3个环原子是氮原子而1个环原子是氧或硫原子。
术语＂杂芳基＂指从杂芳环系统的环碳原子除去一个氢原子得到的基团。典型的杂芳基包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、异吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，8-二氮杂萘基、蝶啶基等。
术语＂杂环基＂指经从单碳或氮环原子除去一个氢原子得到的饱和或部分不饱和单环基团。典型的杂环基包括2H-吡咯、2-吡咯啉基或3-吡咯啉基)、吡咯烷基、1，3-二氧戊环基、2-咪唑啉基(也称为4，5-二氢-1H-咪唑基)、咪唑烷基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、四唑基、哌啶基、1，4-二氧杂环己烷基、吗啉基、1，4-二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、氮杂环庚烷基、六氢-1，4-二氮杂

基等。
术语＂取代的＂指核心分子上的一个或多个氢原子已经被一个或多个官能团置换。取代不限于中心分子，而且也可发生在取代基上，借此取代基成为连接基。
术语＂独立选择的＂指选自取代基的一个或多个取代基，其中取代基可相同或不同。
首先指明具有连接点的原子，接着指出从左至右朝向末端链原子的连接基原子，大体表示为 (C1-6)烷基C(O)NH(C1-6)烷基(Ph) 或者首先指出末端链原子，接着指出朝向具有连接点的原子的连接基原子，大体上表示为 Ph(C1-6)烷基酰氨基(C1-6)烷基 得到用于本发明的公开的取代基命名法，它们中的任一个指下式基团
从取代基画入环系统的线表示，该键可连到任何适用的环原子。
当任何变体(例如，R4)出现在式I的任何实施方案中不止一次时，各定义意欲独立。
术语＂包含＂、＂包括＂和＂含有＂以其开放的非限定含义用于本文。命名法 除非另有说明，经标准IUPAC命名法参考文献，例如，有机化学命名法，A、B、C、D、E、F和H章(Pergamon Press，Oxford，1979，Copyright 1979 IUPAC)和有机化合物IUPAC命名法指南(推荐1993)，(Blackwell Scientific Publications，1993，Copyright 1993 IUPAC)或可市售得到的软件包，例如，Autonom(CambridgeSoft.com以出售ChemDraw

办公套装提供的命名法软件品牌)和ACD/IndexNameTM(当代化学发展(Advanced Chemistry Development)，Inc.，Toronto，Ontario出售的商业命名法软件品牌)，采用本领域技术人员熟知的命名规则得到化合物名称。本领域熟知，某些杂环基形式，例如吡啶和喹啉，可根据不同的惯例命名，而不涉及不同的基团。例如吡啶基(pyridyl)或吡啶基(pyridinyl)都指吡啶的基，和喹啉基(quinolyl)或喹啉基(quinolyl)都指喹啉的基。
缩写词 用于本文的下列缩写词意欲具有下列意义(如整个说明书需要提供另外的缩写词) 1H NMR 质子核磁共振 AcOH 乙酸 aq 含水 CD3OD氘化甲醇 CDCl3氘化氯仿 CH2Cl2 二氯甲烷 CH3CN乙腈 Cs2CO3 碳酸铯 DAST (二甲基氨基)三氟化硫 DCM 二氯甲烷 DIEA 二异丙基乙胺 DMAP 4-二甲基氨基吡啶 DMSO 二甲亚砜 EDC N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基-碳二亚胺 ESI-MS 电喷雾电离质谱 Et2O 乙醚 Et3N 三乙胺 EtOAc乙酸乙酯 EtOAc乙酸乙酯 EtOH 乙醇 g克 h小时 H2O 水 HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐 HBTU O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓 HCl 氢氯酸 Hex 己烷六氟磷酸盐 HOBT 1-羟基苯并三唑水合物 HPLC 高压液相色谱 K2CO3碳酸钾 KOtBu叔丁醇钾 LCMS 液相色谱质谱 MeOH 甲醇 mg 毫克 MgSO4硫酸镁 min 分钟 mL 毫升 mmol 毫摩尔 mol 摩尔 MW 分子量 Na2CO3 碳酸钠 Na2SO3 亚硫酸钠 NaHCO3 碳酸氢钠 NaOH 氢氧化钠 NaOH 氢氧化钠 NaOH 氢氧化钠 NBS N-溴代琥珀酰亚胺 NH4Cl氯化铵 Pd(PPh3)4四(三苯基膦)化钯(0) Peppsi-iPr 吡啶-强化预催化剂制备稳定化和起始(Sigma-Aldrich的商标) ppt 沉淀 RP-HPLC 反相高压液相色谱 rt 室温 SiO2 二氧化硅 TFA 三氟乙酸 THF 四氢呋喃 TLC 薄层层析法 μL 微升 式I 本发明包含式I化合物及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体
式I 其中 R1是单或双环杂芳基(优选吡啶基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、吡咯基、吲哚基、异噻唑基、三唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹啉基、苯并呋喃基、喹唑啉基或喹喔啉基)或吡啶-2-酮-基(优选吡啶-2-酮-5-基)，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素(优选F、Cl或Br)、烷氧基(优选C1-6烷氧基)、烷基醚(优选-C(1-6)烷基-O-C(1-6)烷基)、烷硫基(优选C1-6烷硫基)、烷基磺酰基(优选C1-6烷基磺酰基)、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基(其中所述杂芳基磺酰基的杂芳基部分优选吡啶基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、吡咯基、吲哚基、异噻唑基、三唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹啉基、苯并呋喃基、喹唑啉基或喹喔啉基)、杂环基磺酰基(其中所述杂环基磺酰基的杂环基部分优选吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、硫代吗啉基、硫代吗啉基1，1-二氧化物、吗啉基或哌嗪基)、-SO2NH2、烷基氨磺酰(优选C1-6烷基氨磺酰)、烷基(优选C1-6烷基)、氨基烷基(优选甲胺)、烷基氨基(优选C1-6烷基氨基)、苯基、杂芳基(优选吡啶基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、吡咯基、吲哚基、异噻唑基、三唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹啉基、苯并呋喃基、喹唑啉基或喹喔啉基)、氰基、链烯基(优选C1-6链烯基)、炔基(优选C1-6炔基)、环烷基(优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基)、杂环基(优选吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、硫代吗啉基、硫代吗啉基1，1-二氧化物、吗啉基或哌嗪基)、-CO2-烷基(优选-CO2-CH2CH3)、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中Rb是杂环基(优选吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、硫代吗啉基、硫代吗啉基1，1-二氧化物、吗啉基或哌嗪基)、烷基磺酰基(优选C1-6烷基磺酰基)、-SO2NH2、烷基氨磺酰(优选C1-6烷基氨磺酰)、-OH、-O烷基(优选-OC1-6烷基)、-NH2、-NH烷基(优选-NHC1-6烷基)或-N(烷基)2(优选-N(C1-6烷基)2)； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基(优选C1-6烷基磺酰基)、-SO2NH2、烷基氨磺酰(优选C1-6烷基氨磺酰)、羟基和烷氧基； 或者Rc和Rd一起可形成5-7元杂环，杂环任选含有选自O、NH、N(烷基)、SO、SO2或S的第二个杂部分(所述的Rc-Rd杂环优选自


和
其中所述Rc-Rd杂环任选被烷基(优选-C(1-6)烷基)、-SO2烷基(优选-SO2C(1-6)烷基)或-C(O)烷基(优选-C(O)C(1-6)烷基)取代； A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基(优选吡啶基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹啉-6-基-N-氧化物、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基或[1，2，4]三唑并[1，5-α]吡啶基)、喹唑啉-4-酮-基(优选喹唑啉-4-酮-6-基或3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基)和苯并稠合杂环基(优选苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基或2，3-二氢-苯并呋喃基)；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的1、2或3个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-N(CH3)2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基； R5和R6独立选自H、F、C1-6烷基、-OH、-OC1-6烷基、-NHC1-6烷基或-N(C1-6烷基)2； 或者R5和R6可共同形成C3-5环烷基环、吖丙啶基环或环氧基环(epoxidyl ring)；和 R7和R8是H、卤素或C1-6烷基。
用于本文的术语＂式I化合物＂和＂多个式I化合物＂意欲还包括它们的药学上可接受的盐、N-氧化物、溶剂合物和立体化学异构体。
式I的实施方案 本发明的优选实施方案是式I化合物，其中存在一个或多个下列限制 R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Rd一起可形成5-7元杂环，杂环任选含有选自O、NH、N(烷基)、SO、SO2或S的第二个杂部分，其中所述Rc-Rd杂环任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基和苯并稠合杂环基；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的1-3个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-N(CH3)2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基； R5和R6独立选自H、F、C1-6烷基、-OH、-OC1-6烷基、-NHC1-6烷基或-N(C1-6烷基)2； 或者R5和R6可共同形成C3-5环烷基环，吖丙啶基环或环氧基环；和 R7和R8是H。
本发明的其它优选实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Ra一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基和苯并稠合杂环基；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的1-3个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-N(CH3)2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基； R5和R6独立选自H、F、C1-6烷基、-OH、-OC1-6烷基、-NHC1-6烷基或-N(C1-6烷基)2； 或者R5和R6可共同形成C3-5环烷基环、吖丙啶基环或环氧基环；和 R7和R8是H。
本发明的其它优选实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Rd一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基和苯并稠合杂环基；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的1-3个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-N(CH3)2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基； R5和R6独立选自H、F或-CH3； 或者R5和R6可共同形成环丙基环；和 R7和R8是H。
本发明的其它优选实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Rd一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基和苯并稠合杂环基；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的一个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-N(CH3)2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基； R5和R6独立选自H、F或-CH3； 或者R5和R6可共同形成环丙基环；和 R7和R8是H。
本发明的其它优选实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Ra一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环2，3二氢苯并呋喃-5-基、喹啉-6-基、喹啉-6-基-N-氧化物、2-氨基苯并噻唑-6-基、4-甲氧基苯基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基、2-二甲基-氨基苯并噻唑-6-基和4-羟基苯基； R5和R6独立选自H、F或-CH3； 或者R5和R6可共同形成环丙基环；和 R7和R8是H。
本发明的其它优选实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被一个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Ra独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Rd一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环2，3二氢苯并呋喃-5-基、喹啉-6-基、喹啉-6-基-N-氧化物，2-氨基苯并噻唑-6-基、4-甲氧基苯基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基、2-二甲基-氨基苯并噻唑-6-基和4-羟基苯基； R5和R6独立选自H、F或-CH3； 或者R5和R6可共同形成环丙基环；和 R7和R8是H。
本发明的其它优选实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是噻吩-2-基、噻唑-2-基、吡唑基、咪唑基、吡啶-2-酮-5-基或吡啶基，其中所述噻吩-2-基、噻唑-2-基、吡唑基、咪唑基和吡啶基可任选被一个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Ra独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Ra一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环2，3二氢苯并呋喃-5-基、喹啉-6-基、喹啉-6-基-N-氧化物、2-氨基苯并噻唑-6-基、4-甲氧基苯基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基、2-二甲基-氨基苯并噻唑-6-基和4-羟基苯基； R5和R6独立选自H、F或-CH3； 或者R5和R6可共同形成环丙基环；和 R7和R8是H。
本发明的其它优选实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是噻吩-2-基、噻唑-2-基、吡唑基、咪唑基、吡啶-2-酮-5-基或吡啶基，其中所述噻吩-2-基、噻唑-2-基、吡唑基、咪唑基和吡啶基可任选被一个Ra取代基取代； 其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基； 或者Rc和Rd一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代； A是选自下列的环2，3二氢苯并呋喃-5-基、喹啉-6-基、喹啉-6-基-N-氧化物、2-氨基苯并噻唑-6-基、4-甲氧基苯基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基、2-二甲基-氨基苯并噻唑-6-基和4-羟基苯基； R5和R6独立选自H或F；和 R7和R8是H。
本发明的其它实施方案是其中存在一个或多个下列限制的式I化合物 R1是单或双环杂芳基(优选吡啶基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、吡咯基、吲哚基、异噻唑基、三唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹啉基、苯并呋喃基、喹唑啉基或喹喔啉基)，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代； 其中的Ra是卤素(优选F、Cl或Br)、烷氧基(优选C1-6烷氧基)、烷基醚(优选-C(1-6)烷基-O-C(1-6)烷基)、烷硫基(优选C1-6烷硫基)、烷基磺酰基(优选C1-6烷基磺酰基)、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基(其中所述杂芳基磺酰基的杂芳基部分优选吡啶基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、吡咯基、吲哚基、异噻唑基、三唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹啉基、苯并呋喃基、喹唑啉基或喹喔啉基)、杂环基磺酰基(其中所述杂环基磺酰基的杂环基部分优选吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、硫代吗啉基、硫代吗啉基1，1-二氧化物、吗啉基或哌嗪基)、-SO2NH2、烷基氨磺酰(优选C1-6烷基氨磺酰)、烷基(优选C1-6烷基)、氨基烷基(优选甲胺)、烷基氨基(优选C1-6烷基氨基)、苯基、杂芳基(优选吡啶基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、吡咯基、吲哚基、异噻唑基、三唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹啉基、苯并呋喃基、喹唑啉基或喹喔啉基)、氰基、链烯基(优选C1-6链烯基)、炔基(优选C1-6炔基)、环烷基(优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基)、杂环基(优选吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、硫代吗啉基、硫代吗啉基1，1-二氧化物、吗啉基或哌嗪基)、-CO2-烷基(优选-CO2-CH2CH3)、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N′-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd； 其中的Rb是杂环基(优选吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、硫代吗啉基、硫代吗啉基1，1-二氧化物、吗啉基或哌嗪基)、烷基磺酰基(优选C1-6烷基磺酰基)、-SO2NH2、烷基氨磺酰(优选C1-6烷基氨磺酰)、-OH、-O烷基(优选-OC1-6烷基)、-NH2、-NH烷基(优选-NHC1-6烷基)或-N(烷基)2(优选-N(C1-6烷基)2)； Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基(优选C1-6烷基磺酰基)、-SO2NH2、烷基氨磺酰(优选C1-6烷基氨磺酰)、羟基和烷氧基； 或者Rc和Rd一起可形成5-7元杂环，杂环任选含有选自O、NH、N(烷基)、SO、SO2或S的第二个杂部分(所述的Rc-Rd杂环优选自


和
其中所述Rc-Rd杂环任选被烷基(优选-C(1-6)烷基)、-SO2烷基(优选-SO2C(1-6)烷基)或-C(O)烷基(优选-C(O)C(1-6)烷基)取代； A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基(优选吡啶基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基或[1，2，4]三唑并[1，5-α]吡啶基)和苯并稠合杂环基(优选苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基或2，3-二氢-苯并呋喃基)；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的1、2或3个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基； R5和R6独立选自H、F、C1-6烷基、-OH、-OC1-6烷基、-NHC1-6烷基或-N(C1-6烷基)2； 或者R5和R6可共同形成C3-5环烷基环、吖丙啶基环或环氧基环；和 R7和R8是H、卤素或C1-6烷基。
本发明的另一个实施方案包括
药学上可接受的盐 本发明化合物也可以药学上可接受的盐的形式出现。
对于药物方面的用途，本发明化合物的盐指无毒的＂药学上可接受的盐＂。FDA认可的药学上可接受的盐形式(参见.International J.Pharm.1986，33，201-217页；J.Pharm.Sci，1977年1月，66(1)，1页)包括药学上可接受的酸性/阴离子或碱性/阳离子盐。
药学上可接受的酸性/阴离子盐包括，但不限于，乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二胺四乙酸盐，乙二磺酸盐(edisylate)、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(glyceptate)、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰阿散酸盐、己基间苯二酸(hexylresorcinate)、海巴明、氢溴酸盐、氢氯酸盐、羟萘甲酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、氯茶碱盐(teoclate)、甲苯磺酸盐和三乙基碘化物。有机或无机酸还包括，并不限于，氢碘酸、高氯酸、硫酸、磷酸、丙酸、乙醇酸、甲磺酸、羟基乙磺酸、草酸、2-萘磺酸、对甲苯磺酸、环己烷氨基磺酸、糖精酸三氟乙酸。
药学上可接受的碱性/阳离子盐包括，但不限于，铝、2-氨基-2-羟基甲基-丙烷-1，3-二醇(也称为三(羟甲基)氨基甲烷、tromethane或＂TRIS＂)、苄星、叔丁胺、钙、葡糖酸钙、氢氧化钙、氯普鲁卡因、胆碱、胆碱碳酸氢盐、氯化胆碱、环己胺、二乙胺、乙二胺、锂、LiOMe、L-赖氨酸、镁、葡甲胺、NH3、NH4OH、N-甲基-D-葡糖胺、哌啶、钾、叔丁醇钾、氢氧化钾(含水)、普鲁卡因、奎宁、钠、碳酸钠、2-乙基己酸钠(SEH)、氢氧化钠、三乙胺(TEA)或锌。
前药 本发明在其范围内包括本发明化合物的前药。一般说来，这类前药会是易于体内转化为活性化合物的化合物的功能性衍生物。因此，在本发明的治疗方法中，术语＂给予＂将包括，用具体公开的化合物或虽然未具体公开某些本化合物但却显然包括在本发明所属范围内的化合物或其前药治疗、缓解或预防本文所述的综合征、障碍或疾病的意思。选择和制备适用的前药衍生物的常规程序描述于，例如，＂前药的设计＂，H.Bundgaard编辑，Elsevier，1985中。
立体化学异构体形式 本领域技术人员会认识到，式I化合物在其结构中可具有一个或多个不对称碳原子。本发明意欲在其范围内包括所述化合物的单一对映异构体形式、外消旋混合物和其中存在对映体过量的对映体混合物形式。
用于本文的术语＂单一对映异构体＂定义所有可能的纯手性形式，它是式I化合物及其N-氧化物、加成盐、季胺或可能具有的生理学上的功能性衍生物。
可通过采用本领域已知原理得到立体化学纯异构体形式。可经物理分离方法，例如，分级结晶和层析技术分离非对映异构体，和可用光学活性酸或碱经选择性结晶非对映异构的盐或经手性层析法使对映异构体相互分离。也可由适当立体化学纯原料或经采用立体选择反应合成制备纯立体异构体。
术语＂异构体＂指具有相同组成和分子量，但在物理和/或化学性质方面不同的化合物。这类物质具有相同数量和种类的原子，但结构不同。结构上的区别可在于结构(几何异构体)或在于旋转偏振光平面的能力(对映异构体)。
术语＂立体异构体＂指具有相同组成而在其原子的空间排列上不同的异构体。对映异构体和非对映异构体是其中的不对称取代的碳原子起手性中心的作用的立体异构体。
术语＂手性＂指分子的结构特征，这使其不可能重叠在其镜像上。
术语＂对映异构体＂指互为镜像却不可重叠的一对分子。
术语＂非对映异构体＂指不是镜像的立体异构体。
符号＂R＂和＂S＂表示手性碳原子周围的取代基的构型。
术语＂外消旋物＂或＂外消旋混合物＂指由等摩尔量的两种对映异构体组成的组合物，其中的组合物无光学活性。
术语＂纯手性＂指对映异构体纯的状态。
术语＂光学活性＂指纯手性分子或手性分子的非外消旋混合物旋转偏振光平面的程度。
术语＂几何异构体＂指涉及碳-碳双键、环烷基环或桥连双环系统的取代基原子的不同取向的异构体。碳-碳双键的每一侧上的取代基原子(不是H)可呈E或Z构型。在＂E＂(相对侧)构型中，取代基在碳-碳双键的相对侧；在＂Z＂(相同侧)构型中，取代基朝向碳-碳双键的相同侧。连到碳环的取代基原子(不是H)可呈顺式或反式构型。在＂顺式＂构型中，取代基在环平面的相同侧上；在＂反式＂构型中，取代基在环平面的相对侧上。具有＂顺式＂和＂反式＂类型的混合物的化合物被指定为＂顺式/反式＂。
要理解，用来制备本发明化合物的各种取代基立体异构体、几何异构体及其混合物或者可市售得到、可由市售得到的原料合成制备，或者，被制备成异构体混合物，再采用本领域那些普通技术人员熟知的技术得到作为经拆分的异构体。
本文所述的异构体描述符＂R＂、＂S＂、＂E＂、＂Z＂、＂顺式＂和＂反式＂用来指明相对于中心分子的原子构型并意欲如文献中所述的那样应用(IUPAC推荐的基础立体化学(E章)，Pure Appl.Chem.，1976，4513-30)。
可通过异构体有择合成或者自异构体混合物中拆分，将本发明化合物制备成单一的异构体。常规拆分技术包括，采用光学活性盐形成异构体对的各异构体的游离碱(随后分级结晶和游离碱再生)，形成异构体对的各异构体的酯或酰胺(随后层析分离和除去手性助剂)，或者采用制备型TLC(薄层层析法)或手性HPLC柱拆分原料或最终产物的异构体混合物。
多晶型物和溶剂合物 而且，本发明化合物可具有一个或多个多晶型物或无定形晶形，因此，意欲包括在本发明范围内。此外，化合物可与，例如水(即，水合物)或普通普通有机溶剂形成溶剂合物。用于本文的术语＂溶剂合物＂意指本发明化合物与一个或多个溶剂分子物理缔合。这种物理缔合涉及不同程度的离子健和共价键，包括氢键。在某些情况下，溶剂合物将能分离，例如，当一个或多个溶剂分子结合在结晶固体的晶格中时。术语＂溶剂合物＂意欲包括溶液-相和可分离溶剂合物。适用溶剂合物的非限定实例包括乙醇盐、甲醇盐等。
本发明意欲在其范围内包括本发明化合物的溶剂合物。因此，在本发明的治疗方法中，术语＂给予＂将包括，用虽然未专门公开却明显包括在本发明范围的本发明化合物或其溶剂合物治疗、缓解或预防本文所述的综合征、障碍或疾病。
互变异构形式 某些式I化合物也可以其互变异构形式存在。这类形式虽然在本申请中未明确指出，但也要包括在本发明范围内。
本发明化合物的制备 在本发明化合物的任何制备过程期间，必需和/或希望保护任何涉及到的分子上的敏感或反应性基团。这可通过常规保护基，例如描述于保护基，P.Kocienski，Thieme Medical Publishers，2000和T.W.Greene和P.G.M.Wuts，有机合成的保护基，3版.Wiley Interscience，1999中的那些实现。可在方便的后继步骤采用本领域已知的方法，除去保护基。
通用反应流程 可通过本领域那些技术人员已知的方法制备式I化合物。下列反应流程只用来表现本发明的实例，决不是对本发明的限制。
流程1
其中 X是Cl或I或Br； Y是锌酸盐、硼酸、硼酸酯或锡烷 流程1说明产生式I化合物的双重合成途径，其中的A、R1、R5、R6、R7和R8如式I中定义的那样。用二卤代哒嗪II作为起始原料，再循路线向右，可在Suzuki(Miyaura，N.，Suzuki，A.，Chem.Rev.952457(1995))，Negishi(Negishi，E.，等，J.Org.Chem.421821(1977))或Stille条件(Stille，J.K.，Agnew.Chem.，Int.Ed.Engl.，25508(1986)并引用于本文)下采用适当取代的硼酸、硼酸酯、锌酸盐或锡烷V，发生过渡金属催化的交叉-偶联反应。可经3-卤代哒嗪与多种酰基肼III在回流1-丁醇中的反应，使所生成的哒嗪VI转化为三唑并哒嗪I(Albright，J.D.，等，J.Med.Chem.，1981，24，592-600)。
作为选择，循向下路线，使3，6-二卤代哒嗪II与多种酰基肼III反应，随后与IV进行过渡金属交叉-偶联反应，生成三唑并哒嗪I。该途径经与卤化骨架的交叉偶联反应，由三唑并哒嗪核心骨架生成化合物库。
通常在惰性环境下，经催化剂例如四-三苯基膦化钯介导，进行芳基卤与芳基硼酸、芳基锌酸盐或芳基锡烷(arylstanne)的上述交叉偶联反应。这些反应可在介于60℃-150℃的温度下，在极性非质子溶剂或双相溶液中发生。在大部分情况下，其中的芳基硼酸、芳基锌酸盐或芳基锡烷不能从市售得到，它可由相应的芳基卤或直接金属化/过滤金属化程序合成。作为选择，Peppsi-iPr催化剂可用来代替Pd(PPh3)4，参见M.G.Organ等，化学-欧洲杂志(Chemistry-A European Journal)，12卷，18期，2006年，6月14日，4743-4748页并引用于本文中。
流程2
其中的Z是NH、O或S。
可通过本领域已知的方法得到芳基和杂芳基乙酸(药物化学杂志(Journal of Medicinal Chemistry)，1986，29(11)，2326-2329；生物有机和药物化学信函(Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters)，2004，14(14)，3799-3802；EP 1229034 A1 20020807；四面体(Tetrahedron)Letters，2003，44(35)，6745-6747；合成通讯(Synthetic Communications)，1997，27(22)，3839-3846)。芳基乙酸合成的几个实例说明于流程2中。用N-溴代琥珀酰亚胺在四氯化碳中处理苯并稠合杂环化合物VII(药物化学杂志(Journal of Medicinal Chemistry)，1996，29(11)，2362-2369；药物化学杂志(Journal of Medicinal Chemistry)，1997，40(7)，1049-1062)，得到化合物VIII。在条件例如披钯活性碳存在下，在溶剂例如甲醇中氢化，还原硝基苯基乙酸IX(生物有机和药物化学信函(Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters))，1998，8(1)，17-22；Organic Letters，2002，4(16)，2675-2678；WO00/06566，HelviticaChemica Acta，1976，59(3)，855-866)，得到化合物X，再用原甲酸三乙酯在甲苯中处理，得到XI。可用适当的胺处理化合物XII，得到化合物XIII。
可经本领域已知的方法，合成下列化合物
其中的A选自


和
参见，例如，药物化学杂志(Journal of Medicinal Chemistry)，1997，40(7)，1049-1058，并结合于本文中；和WO 2002085888。流程3
也可通过本领域已知的方法实现芳基和杂芳基乙酰氯和芳基和杂芳基乙酸酰肼的合成(参见，Bulletin de la Societe Chimique de France，1964，2，245-247；和Helvitica Chemica Acta，1928，11，609-656)。用草酰氯在DCM中处理其中A如式I中所定义的化合物XIV，得到化合物XV，用无水肼在DCM中处理它，得到酰肼XVI。作为选择，可用乙酸酐处理化合物XIV，随后在水中用肼处理，得到化合物XVI。可用乙醇中的含水肼处理乙酸甲酯XVII，得到化合物XVI。
流程4a
其中 X是Br或I R′是CH3或C2H5。
流程4a说明得到式III化合物的途径，其中的R5和R6都是F或H，和A是式I中所定义些。生成酰肼的第一种途径涉及适当的芳基卤XVIII与有机金属如正丁基锂的金属-卤素交换，随后用草酸二烷基酯乙酰化。再于溶剂如二氯甲烷中，用DAST((二甲基氨基)三氟化硫)氟化所形成的乙酰基烷基酯XIX，生成二氟烷基酯XXI，随后用肼处理，生成二氟酰肼III。第二种途径涉及铜诱导的芳基卤XVIII与卤化二氟酯的交叉偶联，产生二氟烷基酯XXI中间体，随后用肼处理，生成二氟酰肼III。第三种途径涉及芳基-乙酸酯XX氧化为芳基酮酯XIX，随后用DAST氟化，生成二氟烷基酯XXI中间体，再用肼处理，生成二氟酰肼III。第四种途径涉及铜诱导的芳基卤XVIII与丙二酸二酯的交叉偶联，生成烷基二酯XXII。皂化，再用醇中的亚硫酰氯处理，或在酸存在下交替用醇回流，生成烷基酯XXI。用肼处理，产生酰肼III，其中R5和R6都是H。
流程4b
其中 R是烷基 R′是CH3或C2H5 X是Br或I 流程4b说明得到式III化合物的途径，其中的R5和R6是H、F、烷基、OH、O烷基、NH烷基或N(烷基)2，和A如在式I中所定义。该途径涉及芳基酯XX氧化为乙酰基烷基酯XIX，随后还原为醇XXIII，随后用DAST氟化，生成单氟代烷基酯XXI中间体，再用肼处理，生成III。作为选择，可在溶剂，例如甲醇中用肼处理，使化合物XXIII直接转化为III，或者在强碱，例如氢化钠存在下，使XXIII与烷基卤反应，随后在溶剂，例如甲醇中，用肼处理，得到III。可在碱，例如氢化钠的存在下，用烷基卤处理，随后在溶剂，例如甲醇中，用肼处理，使化合物XX转化为III。可经还原胺化，随后在溶剂，例如甲醇中用肼处理，使化合物XIX转化为III。 流程4c
其中 R′是甲基或乙基 n是1-5 可用本领域已知的方法(Chemische Berichte，119(12)，3694-703；1986，澳大利亚化学杂志(Australian Journal of Chemistry)，39(2)271-80；1986，生物有机和药物化学信函(Bioorganic and MedicinalChemistry Letters)13(14)，2291-2295；2003)完成式III化合物的合成，其中的R5和R6结合在一起形成环，和A如在式I中所定义。流程4c说明得到酰肼III的两种备选的途径。从可市售的丙烯酸酯XXIV开始，随后用三卤代甲烷处理，生成二卤代环XXV，它再经有机锡处理，随后用肼处理，生成III。第二种途径涉及直接二卤代烷基与市售得到的原料XXI的加成，随后肼形成，生成酰肼III。流程4d
其中 R′是甲基或乙基 J是N或O 也可用本领域已知的方法实现式III化合物的合成，其中R5和R6结合在一起形成吖丙啶或环氧化物，和A如在式I中定义。流程4d说明生成杂环酰肼III所经的途径，从市售得到的丙烯酸酯XXIV开始，随后用肼处理。
流程5a-5e说明使式I化合物上的杂芳基，例如噻吩、吡唑和呋喃官能化的途径。R1组成不限于下面包含的所述形式，还包括可市售得到的取代的单或双环杂芳基原料。也可用现在技术所述的方法得到这些原料，参见(Miyaura，N.，Suzuki，A.，Chem.Rev.952457(1995))，(Negishi，E.，等，J.Org.Chem.421821(1977))，(Stille，J.K.，Agnew.Chem.，Int.Ed.Engl.，25508(1986)。
流程5a
流程5a说明采用还原性胺化将胺引入三唑并哒嗪系统。该化学以式I化合物开始，其中的R1是2，5取代的-噻吩或2，5取代的-呋喃，和R5、R6、R7、R8和A是式I定义的那些。用酸性甲醇中的三乙酰氧基硼氢化钠和仲胺处理，得到相应的胺取代的呋喃或噻吩。
流程5b
流程5b说明用皂化，随后与仲胺偶联，将酰胺引入三唑并哒嗪系列。这两个步骤的反应以式I化合物开始，其中的R1是单或双环杂芳基，和R5、R6、R7、R8和A如式I中所定义。用甲醇和四氢呋喃中的氢氧化钠(NaOH)和2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)处理，随后用1-羟基苯并三唑(HOBT)、Hunig′s碱(DIEA)和所希望的仲胺处理，生成式I化合物，其中的R1是酰胺取代的噻吩。以类似方法制备其中的Ra是-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb的式I化合物。
流程5c
其中的Q1、Q2和Q3独立为CH或N 流程5c说明采用乙酰化将酰基引到R1，其中的R1是含氮杂芳基(例如，吡唑)，和R5、R6、R7、R8和A如式I中定义。该化学利用在溶剂如带清除剂碱如DIEA的DCM中，用离去基团(优选卤素)适当取代的酰基，导致R1乙酰化。 流程5d
其中的Q1、Q2和Q3独立为CH或N 流程5d说明采用磺酰化(sulfoxylation)将磺酰基(sulfoxyl group)引到R1，其中R1是含氮杂芳基(例如，吡唑)和Ra是磺酰基或氨磺酰，和R5、R6、R7、R8和A如式I中定义。该化学利用在溶剂如带清除剂碱如DIEA的DCM中的被离去基团(优选卤素)适当取代的磺酰基(sulfoxyl group)，导致R1磺酰化(sulfoxylation)。
流程5e
其中的Q1、Q2和Q3独立为CH或N 流程5e说明R1被Ra取代，其中R1是含氮杂芳基(例如，吡唑)，Ra是烷基、氨基烷基或C(1-4)烷基-Rb，和R5、R6、R7、R8和A如在式I中定义。该化学利用被在溶剂如乙醇和碱如碳酸钾中的离去基团，优选卤素适当取代的烷基，引起R1烷基化。
典型化合物 下面给出经上述方法合成的本发明的代表性化合物。其后给出特定化合物的合成的实施例。优选化合物是编号17、20、22、38、39、47、51、54、55、57、59、60、61、65、66、72、73、74、77、86、87、97、98、99、100、100b、101、102、103和104的化合物；更优选的化合物是编号39、47、55、60、61、65、72、73、74、77、97和98的化合物。更优选的化合物是编号60、61、97和98的化合物。



















单个化合物合成的实施例表示如下。
实施例1 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
实施例1步骤a 3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-哒嗪
将3，6-二氯哒嗪(Aldrich，297mg，2.0mmol)、1-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑(499mg，2.4mmol)、2MNa2CO3(4mL)和二氧杂环己烷(4mL)装入烧瓶。将氩气鼓泡通入反应物中60秒，随后加入四(三苯基膦)钯(0)(231mg，0.2mmol)。彻夜加热反应至80℃，随后用EtOAc和盐水含水整理。干燥有机层(MgSO4)并真空浓缩，随后柱层析法纯化(20％乙酸乙酯在己烷中)，生成呈白色固体的标题化合物(183mg，47％).1H-NMR(CD3OD)δ 8.23(1H，s)，8.08(1H，s)，7.84(IH，br s)，7.34(1H，br s)，4.00(3H，s). 实施例1步骤b 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
使喹啉-6-基-乙酸酰肼(188mg，0.93mmol)和3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-哒嗪(202mg，0.93mmol，实施例1步骤a)溶解于丁醇(120mL)。配备水冷却回流冷凝器和氩气管，彻夜加热反应混合物至120℃。真空浓缩反应，随后HPLC纯化(5-65％CH3CN经40min)，生成呈棕色固体的标题化合物(201.6mg，65％)。
1H-NMR(CD3OD)δ 9.08-9.04(2H，m)，8.30-8.29(2H，m)，8.21-8.06(4H，m)，7.99-7.95(1H，q，J＝53，3.0Hz)，7.68-7.65(1H，d，J＝9.8)，4.85(2H，s)，3.89(3H，s)，4.96(2H，s)-ESI-MS(m/z) C19H15N7的计算值341.37；实测值342.3(M+H). 实施2 6-[6-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ9.08-9.05(2H，m)，8.30(1H，s)，8.26(1H，m)，8.21-8.19(2H，m)，8.15-8.12(2H，m)，7.99-7.90(1H，m)，7.75-7.65(1H，m)，4.86(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H13N7的计算值327.12；实测值328.2(M+H). 实施例3 4-[6-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-苯酚
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ 9.33(1H，s)，8.67(1H，s)，8.38-8.35(1H，d，J＝9.6Hz)，8.26(1H，s)，7.79-7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，7.28-7.26(1H，d，J＝8.6Hz)，6.75-6.73(1H，d，J＝8.5Hz)，4.45(2H，s)，3.24-3.22(2H，d，J＝5.3).ESI-MS(m/z) C15H12N6O的计算值292.11；实测值293.2(M+H). 实施例4 4-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ 9.41(1H，s)，8.93-8.91(2H，d，J＝9.34Hz)，8.42-8.40(1H，d，J＝9.6Hz)，8.07-8.04(1H，d，J＝9.6Hz)，8.01-7.98(1H，t，J＝7.57Hz)，7.27-7.25(2H，d，J＝8.8Hz)，6.75-6.73(2H，d，J＝8.5Hz)，4.59(2H，s).ESI-MS(m/z) C17H13N5O的计算值303.11；实测值304.2(M+H). 实施例5 4-[6-(2H-吡唑-3-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-苯酚
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3)δ 8.56-8.53(1H，d，J＝2.2Hz)，8.32-8.29(1H，d，J＝10.1Hz)，8.17-8.19(1H，d，J＝10.1Hz)，7.87(1H，m)，7.26-7.24(2H，d，J＝8.5Hz)，6.75-6.72(2H，d，J＝8.5Hz)，6.67-6.65(1H，m)，4.49(2H，s).ESI-MS(m/z) C15H12N6O的计算值292.11；实测值293.2(M+H). 实施例6 6-(6-吡啶-4-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。1H-NMR(CD3OD)δ 9.20-9.18(1H，d，J＝5.3Hz)，9.15-9.13(1H，d，J＝8.3Hz)，9.00-8.99(2H，d，J＝6.5Hz)，8.58-8.56(2H，d，J＝6.5Hz)，8.52-8.49(1H，d，J＝9.8Hz)，8.42(1H，s)，8.32-8.26(2H，d，J＝8.8，10.3Hz)，8.16-8.14(1H，d，J＝8.9Hz)，8.09-8.06(1H，m)，5.07(2H，brs).ESI-MS(m/z) C20H14N6的计算值338.37；实测值339.3(M+H). 实施例7 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-吡啶-4-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ 8.91-8.88(2H，d，J＝6.5Hz)，8.48-8.47(2H，d，J＝6.8Hz)，8.34-8.31(1H，d，J＝9.6Hz)，8.00-7.89(1H，d，J＝9.8Hz)，7.15(1H，s)，7.07-7.04(1H，d，J＝8.0Hz)，6.55-6.53(1H，d，J＝8.3Hz)，4.49(2H，s)，4.38-4.34(2H，t，J＝8.8Hz)，3.04-3.00(2H，d，J＝8.5Hz).ESI-MS(m/z) C19H15N5O的计算值329.13；实测值330.2(M+H). 实施例8 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ8.52-8.51(1H，d，J＝2.5Hz)，8.26-8.23(1H，dd，J＝2.2，9.3Hz)，8.06-8.03(1H，d，J＝9.8Hz)，7.74-7.72(1H，d，J＝9.8Hz)，7.05-7.01(2H，m)，6.94-6.92(1H，d，J＝9.3Hz)，6.45-6.42(1H，d，J＝8.0Hz)，4.33(2H，s)，4.28-4.24(2H，t，J＝8.5Hz)，3.64-6.32(4H，m)，3.52-3.50(4H，m)，2.93-2.89(2H，t，J＝8.8Hz).ESI-MS(m/z) C23H22N6O2的计算值414.18；实测值415.3(M+H). 实施例9 6-[6-(1-丙基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4，]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ9.18-9.16(1H，dd，J＝1.5，5.5Hz)，9.14-9.12(1H，d，J＝7.5Hz)，8.46(1H，s)，8.39(IH，s)，8.30-8.19(4H，m)，8.07-8.04(1H，q，J＝3.0，5.3Hz)，7.78-7.76(1H，d，J＝9.6Hz)，4.96(2H，s)，4.24-4.20(2H，t，J＝6.8Hz)，1.99-1.90(2H，m)，0.91-0.93(3H，t，J＝7.3Hz).ESI-MS(m/z) C21H19N7的计算值369.17；实测值370.3(M+H). 实施例10 吗啉-4-基-[5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-吡啶-3-基]-甲酮
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ9.22-9.20(1H，d，J＝2.2Hz)，8.72-8.70(2H，m)，8.41-8.40(1H，t，J＝2.2Hz)，8.28-8.23(2H，m)，7.91-7.89(2H，m)，7.77-7.74(1H，dd，J＝2.0，8.8Hz)，7.44-7.41(1H，q，J＝4.2)，4.55(2H，s)，3.73(4H，br s)，3.51(2H，br s)，3.38(2H，br s).ESI-MS(m/z) C25H21N7O2的计算值451.18；实测值452.4(M+H). 实施例11 6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
实施例11步骤a 3-氯-6-吡啶-3-基-哒嗪
按照实施例1步骤a中所述制备标题化合物。1H-NMR(CDCl3)δ9.21(1H，dd，J＝1.0，2.5Hz)，8.77(1H，dd，J＝1.8，4.8Hz)，8.46(1H，ddd，J＝1.8，2.5，8.1Hz)，7.89(1H，d，J＝8.8Hz)，7.64(1H，d，J＝8.8Hz)，(1H，ddd，J＝1.0，4.8，8.1Hz)-ESI-MS(m/z) C9H6ClN3的计算值191.0/192.0 实测值192.2/194.4(M+H/M+2+H). 实施例11步骤b 6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪3-基甲基)-喹啉
按照实施例1步骤b中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ9.81(1H，m)，9.50(1H，m)，9.27(1H，m)，9.25(1H，dd，J＝1.5，5.3Hz)，9.16(1H，m)，8.86(1H，d，J＝9.9Hz)，8.71(1H，d，J＝9.6Hz)，8.58(1H，m)，8.42(1H，m)，8.40(1H，m)，8.36(1H，m)，8.14(1H，dd，J＝5.3，8.3Hz)，5.22(2H，s).ESI-MS(m/z) C20H16N6的计算值338.1；实测值339.3(M+H). 实施例12 6-吡啶-3-基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例12步骤a 2-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基-丙二酸二乙酯
将丙二酸二乙酯(400μL)加至THF(5mL)中的6-碘-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶(245mg，1mmol)、碘化铜(19mg，0.1mmoD、联苯基-2-醇(34mg，0.2mmol)和Cs2CO3混合物中。70℃下搅拌该不均匀溶液16h。冷却后，将混合物分配在氯仿(40mL)和NH4Cl水溶液(20mL)之间。用NH4Cl(3x15mL)、NaHCO3(20mL)和盐水(20mL)洗涤有机层，再经Na2SO4干燥。浓缩溶液，随后经SiO2快速层析法纯化，得到呈无色玻璃状的产物(170mg，61％)。
1H-NMR(CDCl3)δ 8.77(1H，m)，8.37(1H，s)，7.78(1H，dd，J＝0.9，9.1Hz)，7.69(1H，dd，J＝1.8，9.3Hz)，4.76(1H，s)，4.27(4H，m)，1.30(6H，t，J＝7.3Hz).ESI-MS(m/z) C13H15N3O4的计算值277.1；实测值278.2(M+H). 实施例12步骤b [1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基-乙酸酰肼
向按实施例12步骤a中制备的2-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基-丙二酸二乙酯(170mg，0.6mmol)的二氧杂环己烷(4mL)和MeOH(6mL)溶液加入2N NaOH(1.2ml，2.4mmol)。室温下搅拌反应4h，再用0.5NHCl将该溶液调节至pH约2。搅拌溶液1h(出现脱羧)和真空除去挥发物。使残余物溶解于无水MeOH(15mL)，经冰浴冷却，逐滴加入亚硫酰氯(500μl，6.8mmol)。室温下搅拌溶液4h，过滤，真空除去挥发性成分。1H-NMR(CD3OD/CDCl3)δ 9.23(1H，s)，9.15(1H，s)，8.26(1H，d，J＝8.6Hz)，8.15(1H，d，J＝8.6Hz)，4.02(2H，s)，3.77(3H，s).使残余物溶解于EtOH(10mL)，加入肼(50μL)。70℃下加热溶液14h，真空除去挥发物。使残余物三次再溶解于EtOH和真空浓缩除去过量肼。无须进一步纯化采用该原料。1H-NMR(DMSO-d6)δ 9.34(1H，brs)，8.81(1H，s)，8.46(1H，s)，7.79(1H，d，J＝9.0Hz)，7.56(1H，dd，J＝1.5，9.0Hz)，3.45(2H，s，被H2O峰掩盖). 实施例12步骤c 6-吡啶-3-基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-a)吡啶-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例1步骤b中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ9.48(1H，s)，9.09(1H，s)，8.96(1H，ddd，J＝1.5，2.0，8.1Hz)，8.94(1H，d，J＝5.0Hz)，8.57(1H，s)，8.46(1H，d，J＝9.6Hz)，8.06(1H，d，J＝9.6Hz)，8.03(1H，m，J＝5.3，8.1Hz)，7.85(1H，d，J＝9.4Hz)，4.89(2H，s).ESI-MS(m/z) C17H12N8的计算值328.1；实测值329.3(M+H). 实施例13 6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯并噻唑-2-基胺
按照实施例1中所述，从(2-氨基-苯并噻唑-6-基)-乙酸酰肼(0.65mmol)和3-氯-6-吡啶-3-基-哒嗪(0.34mmol)制备标题化合物，得到黄色固体。
1HNMR(DMSO-d6)δ 9.30(1H，d，J＝1.6Hz)，8.78(1H，dd，J＝4.8Hz，1.7Hz)，8.50(1H，m)，8.49(1H，d，J＝9.5Hz)，8.01(1H，d，J＝9.6Hz)，7.69(1H，s)，7.64(1H，ddd，J＝8.1Hz，4.8Hz，1.0Hz)，7.42(2H，s)，7.26(2H，s)，4.61(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H13N7S的计算值359.1；实测值 360.3(M+H). 实施例14 3-(2-氯-吡啶-4-基甲基)-6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例14步骤a 2-(2-氯-吡啶-4-基)-丙二酸二乙酯
用Hennessy和Buchwald方法(Org.Lett.2002，4，269)，从2-氯-4-碘吡啶(4.18mmol)制备呈无色油的标题化合物。 1HNMR(CDCl3)δ 8.37(1H，dd，J＝21Hz，5.2Hz)，7.35(1H，dd，J＝49Hz，1.4Hz)，7.24(1H，ddd，J＝55Hz，5.2Hz，1.5Hz)，4.23(4H，m)，3.61(1H，s)，1.28(6H，m).ESI-MS(m/z) C12H14NO4Cl的计算值；271.1；实测值 272.1(M+H). 实施例14步骤b (2-氯-吡啶-4-基)-乙酸
使前述步骤产物(2.43mmol)溶解于甲醇(20mL)，用2N含水NaOH(4.0mL)处理，环境温度下搅拌5h。用2N含水HCl(4.0mL)处理反应，真空浓缩至干，溶解于甲醇，并过滤。真空浓缩滤液，得到呈吸湿的黄色固体的标题化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.32(1H，d，J＝5.1Hz)，7.43(1H，s)，7.32(1H，dd，J＝5.1Hz，1.5Hz)，3.64(2H，s).ESI-MS(m/z) C7H6NO2Cl的计算值171.0；实测值 172.1(M+H). 实施例14步骤c (2-氯-吡啶-4-基)-乙酸酰肼
经实施例17步骤b的方法，由前述步骤的产物(2.43mmol)制备呈浅黄色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD)δ8.30(d，J＝5.0Hz，1H)，7.34(m，1H)，7.22(dd，J＝5.1Hz，1.5Hz，1H)，3.48(s，2H). 实施例14步骤d 3-(2-氯-吡啶-4-基甲基)-6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例1中所述，由(2-氯-吡啶-4-基)-乙酸酰肼(0.61mmol)和3-氯-6-吡啶-3-基-哒嗪(0.33mmol)制备浅橙色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 9.17(1H，d，J＝2.6Hz)，8.79(1H，dd，J＝4.9Hz，1.6Hz)，8.32(1H，d，J＝4.6Hz)，8.30(1H，d，J＝9.5Hz)，8.28(1H，ddd，J＝8.0Hz，2.4Hz，1.6Hz)，7.70(1H，d，J＝9.6 Hz)，7.58(1H，m)，7.47(1H，s)，7.34(1H，m)，4.67(2H，s).ESI-MS(m/z) C16H11N6Cl的计算值322.1；实测值 323.3(M+H). 实施例15 6-[6-(1-甲烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
向如实施例3中那样制备的6-[6-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉(10mg，0.03mmol)和DIEA(9μl，0.05mmol)的DCM(2mL)溶液中加入甲烷磺酰氯(4μl，0.05mmol)。室温下彻夜搅拌反应。真空浓缩反应，随后经HPLC纯化(5-65％ CH3CN经35min)，生成呈白色固体的标题化合物(3.1mg，31％)。 1H-NMR(CD3OD)δ 9.06-9.00(2H，q，J＝5.3，7.0Hz)，8.89(1H，s)，8.44(1H，s)，8.29-8.10(4H，m)，7.96-7.92(1H，q，J＝5.3，3.0)，7.75-7.73(1H，d，J＝9.8Hz)，4.87(2H，s)，3.42(3H，s).ESI-MS(m/z) C19H15N7O2S的计算值405.10；实测值406.1(M+H). 实施例16 6-{6-[1-(2-甲氧基-乙基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基}-喹啉
向如实施例3中那样制备的6-[6-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉(19mg，0.06mmol)和K2CO3(12mg，0.09mmol)的EtOH(2mL)溶液加入2-溴代乙基甲基醚(8μl，0.09mmol)。室温下彻夜搅拌反应。真空浓缩反应，随后经HPLC纯化(5-65％CH3CN经35min)，生成呈透明玻璃的标题化合物(2.8mg，15％)。 1H-NMR(CD3OD)δ 9.05-9.03(1H，dd，J＝3.7，5.3Hz)，9.02-8.99(1H，d，J＝7.8Hz)，8.32(1H，s)，8.27(1H，s)，8.18-8.08(4H，m)，7.95-7.91(1H，q，J＝3.0，5.5Hz)，7.66-7.63(1H，d，J＝9.8Hz)，4.84(2H，s)，4.30-4.28(2H，t，4.8Hz)，3.70-3.76(2H，t，J＝5.3Hz)，3.23(2H，br s).ESI-MS(m/z) C21H19N7O的计算值385.17；实测值386.2(M+H). 实施例17 4-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
实施例17步骤a 3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪
使3，6-二氯哒嗪(149.9mg，1mmol)和2-溴化锌-噻吩(Aldrich，0.5M，1ml，0.5mmol)与THF(2mL)合并，用氩气鼓泡60秒。向反应混合物加入四(三苯基膦)钯(0)(12mg，0.01mmol)。彻夜加热反应至65℃。真空浓缩反应，吸收到二氧化硅中，随后柱层析法纯化(20％乙酸乙酯在己烷中)，生成呈白色固体的标题化合物。1H-NMR(CD3OD)δ 7.75-7.73(1H，d，J＝9.0Hz)，7.67-7.66(1H，dd，J＝1.2，3.7Hz)，7.53-7.52(1H，d，J＝5.0Hz)，7.50-7.48(1H，d，J＝8.5Hz)，7.18-7.16(1H，t，J＝5.3Hz).ESI-MS(m/z) C8H5ClN2S的计算值195.98；实测值197.2(M+H). 实施例17步骤b (4-羟基-苯基)-乙酸酰肼
向(4-羟基-苯基)-乙酸甲酯(5g，30.08mmol)的MeOH(20ml，无水)溶液加入肼(3.77mL，120.35mmol)，再经1小时加热到55℃。加热期间形成白色沉淀。冷却反应至室温，再搅拌1小时，促使沉淀出固体。过滤反应，并用MeOH洗涤固体，干燥，生成呈白色固体的所希望的产物(4.3g，86％)。
1H-NMR(DMSO)δ9.20(1H，s)，9.10(1H，s)，7.04-7.02(2H，d，J＝8.6Hz)，6.67-6.65(2H，d，J＝8.6Hz)，4.174.16(2H，s)，4.11-4.09(1H，q，J＝5.0，5.5Hz). 实施例17步骤c 4-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
彻夜回流加热含实施例17步骤a的3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(58mg，0.29mmol)和(4-羟基-苯基)-乙酸酰肼(120mg，0.58mmol)的丁醇(5mL)溶液。冷却反应至室温，过滤固体，用MeOH洗涤。从MeOH中再结晶固体，得到呈褐色固体的标题化合物。1H-NMR(CD3OD/CDCl3)δ8.12-8.10(1H，d，J＝9.34Hz)，7.83-7.82(1H，d，J＝3.7Hz)，7.78-7.76(1H，d，J＝9.8Hz)，7.67-7.65(1H，d，J＝5.0Hz)，7.34-7.32(2H，d，J＝6.5Hz)，7.22-7.21(1H，m)，6.77-6.75(2H，d，J＝8.3Hz)，4.49(2H，s).ESI-MS(m/z) C16H12N4OS的计算值308.07；实测值309.2(M+H). 实施例18 4-(6-噻唑-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
实施例18步骤a 3-氯-6-噻唑-2-基-哒嗪
使3，6-二氯哒嗪(149.9mg，1mmol)和2-溴化锌-噻唑(0.5MAldrich，2.4ml，1.2mmol)溶入THF(2mL)并以氩气起泡60秒。向反应混合物加入四(三苯基膦)钯(0)(57mg，0.05mmol)。彻夜加热反应物至65℃。经LCMS分析表明60％转化为产物-ESI-MS(m/z)C7H4ClN3S的计算值196.98；实测值198.2。因此，加入另一部分2-溴化锌-噻唑(0.5M Aldrich，2.4ml，1.2mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(57mg，0.05mmol)并持续加热4小时，直到反应完成。真空浓缩反应物，吸收至二氧化硅，随后柱层析法纯化(20％乙酸乙酯在己烷中)，生成呈白色固体的标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ 8.32-8.30(1H，d，J＝9.0Hz)，7.95-7.94(1H，d，J＝3.0Hz)，7.84-7.81(1H，d，J＝9.09Hz)，7.73-7.72(1H，d，J＝3.2Hz). 实施例18步骤b 4-(6-噻唑-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
使3-氯-6-噻唑-2-基-哒嗪(20mg，0.10mmol)和(4-羟基-苯基)-乙酸酰肼(20mg，0.12mmol)合并于丁醇(5mL)，装备有注满水的冷凝器并彻夜加热至120℃。真空浓缩反应物，随后经HPLC纯化(10-80％CH3CN经25min)，生成呈白色固体的标题化合物(11.5mg，37％)。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3)δ 8.26-8.24(1H，d，J＝9.6Hz)，8.17-8.15(1H，d，J＝9.6Hz)，8.05-8.04(1H，d，J＝3.2Hz)，7.82-7.81(1H，d，J＝3.0Hz)，7.32-7.30(2H，t，J＝8.6Hz)，6.77-6.74(2H，d，J＝8.3Hz)，4.53(2H，s).ESI-MS(m/z) C15H11N5OS的计算值309.07；实测值310.2(M+H). 实施例19 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-吡啶-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3)δ 8.78-8.77(1H，d，J＝7.5Hz)，8.43-8.41(1H，d，J＝9.6Hz)，8.38-8.36(1H，d，J＝7.8Hz)，8.24-8.21(1H，d，J＝9.8Hz)，8.09-8.05(1H，t，J＝9.6Hz)，7.62-7.58(1H，m)，7.26(1H，s)，7.16-7.14(1H，d，J＝6.3Hz)，6.69-6.67(1H，d，J＝8.0Hz)，4.51(2H，s)，4.47-4.43(2H，t，J＝8.8Hz)，3.13-3.08(2H，t，J＝8.6Hz).ESI-MS(m/z) C19H15N5O的计算值329.13；实测值330.3(M+H). 实施例20 6-[6-(2-丙基-噻唑-5-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
实施例20步骤a 3-氯-6-(2-丙基-噻唑-5-基)-哒嗪
经2min将N-丁基锂(2.5M在己烷中，1.3mL，3.3mmol)逐滴加入-78℃的2-丙基噻唑(380mg，3mmol)的THF(8mL)溶液。-78℃下搅拌45min，加入氯化锌溶液(0.5M在THF中，7ml，3.5mmol)。搅拌溶液1h，期间加热至室温。加入四-三苯基膦(172mg，0.15mmol)和3，6-二氯哒嗪，加热反应至68℃ 16h。冷却至室温后，加入甲醇(3mL)和2N HCl(2mL)。用Na2CO3调节pH至约8，将混合物分配在EtOAc(50mL)和水(30mL)之间。用水(2x10mL)和盐水(20mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥。真空浓缩溶液，随后经SiO2快速层析，得到呈灰白色固体的产物(200mg，28％)。 1H-NMR(CDCl3)δ 8.16(1H，s)，7.77(1H，d，J＝8.8Hz)，7.53(1H，d，J＝8.8Hz)，3.04(2H，t，J＝7.6Hz)，1.89(2H，sextet，J＝7.6Hz)，1.06(2H，t，J＝7.6Hz).ESI-MS(m/z) C10H10ClN3S的计算值239.0/241.0；实测值240.2/242.2(M+H；M+2+H). 实施例20步骤b 6-[6-(2-丙基-噻唑-5-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例17步骤b中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ9.29(1H，d，J＝8.3)，9.26(1H，d，J＝4名Hz)，8.97(1H，s)，8.72(d，1H，J＝9.9Hz)，8.60(1H，d，J＝9.9Hz)，8.55(1H，s)，8.37(2H，s)，8.15(1H，dd，J＝5.6，8.3Hz)，5.11(2H，s)，7.98(d，1H，J＝9.9Hz)，3.26(1H，t，J＝7.6Hz)，1.94(2H，sextet，J＝7.3Hz)，1.06(2H，t，J＝7.3Hz).ESI-MS(m/z) C21H18N6S的计算值；386.1；实测值387.3(M+H). 实施例21 6-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯并噁唑-2-基胺
按照实施例17中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CDCl3)δ8.05-8.03(1H，d，J＝9.6Hz)，7.66-7.65(1H，dd J＝1.2，3.6Hz)，7.46-7.44(1H，d，J＝9.8Hz)，7.23-7.15(2H，m)，4.64(2H，s)，3.49(2H，s).ESI-MS(m/z) C17H12N6OS的计算值348.08；实测值349.3(M+H). 实施例22 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述制备标题化合物。1H-NMR(CDCl3)δ8.05-8.03(1H，d，J＝9.8Hz)，7.67-7.66(1H，dd，J＝1.0，3.7Hz)，7.56-7.55(1H，d，J＝1.0，5.0Hz)，7.47-7.44(1H，d，J＝9.8Hz)，7.35(1H，s)，7.29-7.27(1H，m)，7.19-7.16(1H，q，J＝3.7Hz)，6.72-6.70(1H，d，J＝8.0Hz)，4.53-4.49(4H，m)，3.18-3.13(2H，t，J＝8.8Hz).ESI-MS(m/z) C18H14N4OS的计算值334.09；实测值335.2(M+H). 实施例23 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-(3-甲基-噻吩-2-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.06-8.04(1H，d，J＝9.8Hz)，7.42-7.41(1H，d，J＝5.0Hz)，7.40-7.37(1H，d，J＝9.6Hz)，7.28(1H，s)，7.20-7.18(1H，d，J＝6.82Hz)，7.02-7.00(1H，d，J＝5.0Hz)，6.71-6.69(1H，d，J＝8.0Hz)，4.56-4.49(4H，m)，3.17-3.12(2H，d，J＝8.5Hz)，2.55(3H，s).ESI-MS(m/z) C19H16N4OS的计算值348.10；实测值349.2(M+H). 实施例24 3-苄基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述，从苯基乙酸酰肼(0.67mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.21mmol)制备标题化合物。 1HNMR(400MHz，CDCl3)δ 8.05(1H，d，J＝9.8Hz)，7.66(1H，dd，J＝3.8Hz，1.3Hz)，7.55(1H，dd，J＝5.0Hz，1.0Hz)，7.53(2H，m)，7.46(1H，d，J＝9.9Hz)，7.31(2H，m)，7.24(1H，t，J＝7.5Hz)，7.17(1H，dd，J＝5.0Hz，3.8Hz)，4.60(2H，s).ESI-MS(m/z) C16H12N4S的计算值292.1；实测值 293.2(M+H). 实施例25 3-(4-甲氧基-苄基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述，从4-甲氧基-苯基乙酸酰肼(1.39mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.32mmol)制备呈浅橙色固体的标题化合物。
1HNMR(CD3OD)δ 8.17(1H，d，J＝9.8Hz)，7.92(1H，dd，J＝3.8Hz，1.2Hz)，7.88(1H，d，J＝9.9Hz)，7.74(1H，dd，J＝5.0Hz，1.0Hz)，7.40(2H，d，J＝8.8Hz)，7.23(1H，dd，J＝5.0Hz，3.8Hz)，6.88(2H，d，J＝8.9 Hz，)，4.51(s，2H)，3.75(3H，s).ESI-MS(m/z) C17H14N4OS的计算值322.1；实测值 323.2(M+H). 实施例26 3-(4-氟-苄基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述，从4-氟苯基乙酸酰肼(1.04mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.52mmol)制备呈浅褐色固体的标题化合物。1H NMR(CD3OD)δ 8.19(1H，d，J＝9.9Hz)，7.93(1H，dd，J＝3.8Hz，0.9Hz)，7.90(1H，d，J＝9.9Hz)，7.75(1H，dd，J＝5.0Hz，1.0Hz)，7.50(2H，dd，J＝9.0Hz，5.3Hz)，7.24(1H，dd，J＝5.3Hz，3.8Hz)，7.06(2H，t，J＝8.8Hz)，4.59(2H，s).ESI-MS(m/z) C16H11FN4S的计算值310.1；实测值 311.2(M+H). 实施例27 3-(4-硝基-苄基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例27步骤a 4-硝基苯基乙酸酰肼
用注射器以2N草酰氯(3.0mL)和DMF(0.02mL)的溶液处理4-硝基苯基乙酸(2.81mmol)的无水二氯甲烷(10mL)溶液，环境温度下搅拌反应物1h。真空浓缩反应至干，使粗产物溶解于无水二氯甲烷(20mL)，用注射器以无水肼(11.1mmol)处理，环境温度下搅拌18h。过滤所生成的悬液，用二氯甲烷漂洗固体，溶解于MeOH/CH2Cl2，过滤，和真空浓缩滤液，得到呈橙色固体的标题化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ 8.17(2H，d，J＝8.8Hz，)，7.54(2H，d，J＝8.8Hz)，3.54(2H，s). 实施例27步骤b 3-(4-硝基-苄基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
用实施例16步骤b的方法，由前述步骤的产物(0.52mmol)和实施例17步骤a制备的3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.27mmol)，制备呈浅褐色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.18(2H，d，J＝8.8Hz，)，8.09(1H，d，J＝9.7Hz，)，7.67(3H，m)，7.58(1H，dd，J＝5.0Hz，1.0Hz)，7.51(1H，d，J＝9.8Hz)，7.19(1H，dd，J＝5.1Hz，3.7Hz)，4.70(2H，s).ESI-MS(m/z) C16H11N5O2S的计算值337.1；实测值 338.2(M+H). 实施例28 4-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯基胺
环境温度和压力下，在2:1 EtOH/THF(12mL)中，用10％重量披钯(0)碳(9mg)氢化前述实施例的产物(0.20mmol)2天，经硅藻土521过滤，浓缩，经制备型TLC(二氧化硅上的10％ MeOH/CH2Cl2)纯化两次，得到呈浅黄色固体的标题化合物。1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 8.08(1H，d，J＝10.0Hz)，7.78(1H，dd，J＝3.8Hz，1.0Hz)，7.67(1H，d，J＝9.9Hz)，7.63(1H，dd，J＝5.0Hz，1.0Hz)，7.29(2H，d，J＝8.6Hz)，7.21(1H，dd，J＝5.0Hz，3.8Hz)，6.69(2H，d，J＝8.6Hz)，4.03(2H，s).ESI-MS(m/z) C16H13N5S的计算值307.1；实测值 308.2(M+H). 实施例29 N-[4-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯基]-乙酰胺
环境温度下，用无水CH2Cl2(5mL)中的乙酰氯(0.14mmol)和三乙胺(1.43mmol)处理前述实施例的产物(0.09mmol)24h，浓缩，经制备型TLC(二氧化硅上10％ MeOH/CH2Cl2)纯化，得到呈浅黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CD3OD)δ 8.18(1H，d，J＝9.7Hz)，7.93(1H，m)，7.90(1H，d，J＝9.7Hz)，7.75(1H，dd，J＝5.1Hz，1.1Hz)，7.52(2H，m)，7.42(2H，m)，7.24(1H，dd，J＝5.1Hz，3.8Hz)，4.56(2H，s)，2.10(3H，s).ESI-MS(m/z) C18H15N5OS的计算值349.1；实测值 350.3(M+H). 实施例30 1-乙基-3-[4-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯基]-脲
环境温度下，用无水CH2Cl2(5mL)中的异氰酸乙酯(0.19mmol)和三乙胺(0.72mmol)处理实施例32的产物(0.12mmol)18h，浓缩，经制备型TLC(10％ MeOH/CH2Cl2，然后7.5％ MeOH/CH2Cl2在二氧化硅上)纯化两次，得到呈黄色固体的标题化合物。1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 8.05(1H，d，J＝9.9Hz)，7.70(1H，dd，J＝3.8Hz，1.2Hz)，7.59(1H，dd，J＝5.0Hz，1.0Hz)，7.55(1H，d，J＝9.7Hz)，7.40(2H，d，J＝8.5Hz)，7.28(2H，d，J＝8.7Hz)，7.18(1H dd，J＝5.0Hz，3.8Hz)，4.51(2Hs，)，3.21(2H，q，J＝7.3Hz)，1.11(3H，t，J＝7.3Hz).ESI-MS(m/z) C19H18N6OS的计算值378.1；实测值 379.2(M+H). 实施例31 3-(6-甲氧基-吡啶-3-基甲基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例31步骤a (6-甲氧基-吡啶-3-基)-甲醇
0℃下，用硼氢化钠(122mmol)处理6-甲氧基-烟酸甲酯(50mmol)的无水甲醇(60mL)溶液，经18h加热至环境温度，再回流加热6h。真空浓缩未完成反应产物至干燥，溶解于无水1，4-二氧杂环己烷(70mL)，用更多的硼氢化钠(122mmol)处理，回流加热18h。冷却至环境温度后，用甲醇猝灭反应，经粗玻璃料过滤，用甲醇洗涤固体，浓缩滤液。反复使残余物溶解于甲醇，过滤，真空浓缩，直到无固体残存，再用10％ MeOH/CH2Cl2研制，过滤，并浓缩。使不纯产物吸附于硅胶上，倾至9.5x5.5cm硅胶塞上，用0-15％梯度的MeOH/CHCl3洗脱，真空浓缩纯部份，得到呈浅黄色油的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.08(1H，d，J＝2.5Hz)，7.61(1H，dd，J＝8.5Hz，2.4Hz)，6.74(1H，d，J＝8.5Hz)，4.60(2H，s)，3.92(3H，s). 实施例31步骤b 硫酸6-甲氧基-吡啶-3-基甲基酯甲基酯
环境温度下，使前述步骤的产物(31.3mmol)溶解于无水二氯甲烷(30mL)和三乙胺(6.5mL)，用甲烷磺酰氯(38.7mmol)逐滴处理，搅拌反应2天。用水洗涤反应，用CH2Cl2萃取含水层3次，合并有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩滤液，得到呈黄色油的标题化合物。1HNMR(CDCl3)δ 8.09(1H，d，J＝2.3Hz)，7.65(1H，dd，J＝8.5Hz，2.4Hz)，6.77(1Hd，J＝8.5Hz)，4.57(2H，s)，3.93(3H，s)，3.41(3H，s). 实施例31步骤c (6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙腈
使前述步骤的产物(17.0mmol)溶解于无水乙腈(35mL)，用氰化钠(41.6mmol)处理，回流加热2天。真空浓缩反应物至干，经硅胶上的快速层析纯化粗产物(0-30％ EtOAc/CHCl3梯度洗脱)，真空浓缩纯柱部份，得到呈白色固体的标题化合物。1H NMR(CDCl3)δ 8.10(1H，d，J＝1.6Hz)，7.56(1H，dd，J＝8.5Hz，2.3Hz)，6.78(1H，d，J＝8.6Hz)，3.94(3H，s)，3.67(2H，s). 实施例31步骤d (6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙酸
使前述步骤的产物(14.2mmol)溶解于试剂乙醇(35mL)，用氢氧化钾(56.7mmol)的水(35mL)溶液处理，回流加热20h。真空浓缩反应物至干，使残余物溶解于水，用10％ v/v含水HCl酸化至pH 5，再真空浓缩至干。用10％ MeOH/CHCl3研制粗产物，过滤，浓缩滤液，彻夜真空干燥，得到呈极吸湿的浅黄色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 7.91(1H，s)，7.57(1H，dd，J＝8.5Hz，1.8Hz)，6.65(1H，d，J＝8.6Hz)，3.79(3H，s)，3.51(1H，bs)，3.13(2H，s).ESI-MS(m/z) C8H9NO3的计算值167.1；实测值 168.2(M+H). 实施例31步骤e (6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙酸甲酯
氩气下，使前述步骤的产物(7.88mmol)溶解于无水甲醇，冷却至-10℃，用注射器以亚硫酰氯(20.5mmol)处理。加热至环境温度后，彻夜搅拌，真空浓缩反应物，使残余物溶解于CH2Cl2。用饱和含水NaHCO3和盐水洗涤溶液，经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩滤液，得到呈浅黄色油的标题化合物。
1HNMR(CDCl3)δ 8.04(1H，d，J＝2.4Hz)，7.53(1H，dd，J＝8.5Hz，2.5Hz)，6.73(1H，d，J＝8.6Hz)，3.92(3H，s)，3.70(3H，s)，3.55(2H，s). 实施例31步骤f (6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙酸酰肼
用实施例17步骤b的方法，由前述步骤的产物(5.34mmol)，制备呈白色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.20(bs，1H)，8.00(d，J＝2.6Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.4Hz，2.5Hz，1H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，4.21(bs，2H)，3.81(s，3H)，3.29(s，2H).ESI-MS(m/z) C8H11N3O2的计算值181.1；实测值 182.1(M+H). 实施例31步骤g 3-(6-甲氧基-吡啶-3-基甲基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述，由前述步骤的产物(1.40mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.58mmol)，制备呈浅黄色固体的标题化合物。 1H NMR(CD3OD)δ 8.29(1H，d，J＝2.5Hz)，8.19(1H，d，J＝9.9Hz)，7.93(1H，dd，J＝3.8Hz，1.3Hz)，7.90(1H，d，J＝9.9Hz)，7.78(1H，dd，J＝8.6Hz，2.5Hz)，7.75(1H，dd，J＝5.1Hz，1.1Hz)，7.24(1H，dd，J＝5.1Hz，3.8Hz)，6.78(1H，d，J＝8.6Hz)，4.54(2H，s)，3.88(3H，s).ESI-MS(m/z) C16H13N5OS的计算值323.1；实测值 324.2(M+H). 实施例32 5-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-1H-吡啶-2-酮
使前述实施例的产物(0.23mmol)溶解于无水二氯甲烷(10mL)，用1N三溴化硼(4.0mL)的CH2Cl2溶液处理，回流加热2天。真空浓缩反应至干，溶于EtOAc，用含水NaHCO3和NaCl萃取。真空浓缩经合并的含水层至干，用10％ MeOH/CH2Cl2研制，过滤，经制备型TLC(二氧化硅上15％ MeOH/CH2Cl2)纯化蒸发出的滤液，得到呈浅黄色固体的标题化合物。 1HNMR(CD3OD)δ 8.21(1H，d，J＝9.9Hz)，7.96(1H，m)，7.93(1H，d，J＝9.8Hz)，7.76(1H，m)，7.73(1H，dd，J＝9.4Hz，2.5Hz)，7.62(1H，m)，7.26(1H，dd，J＝5.3Hz，3.8Hz)，6.54(1H，d，J＝9.6Hz)，4.42(2H，s).ESI-MS(m/z) C15H11N5OS的计算值309.1；实测值 310.3(M+H). 实施例33 3-吡啶-4-基甲基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述的，从4-吡啶乙酸酰肼(1.81mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.58mmol)制备呈浅黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CD3OD)δ 8.50(2H dd，J＝4.6Hz，1.4Hz)，8.22(1Hd，J＝9.6Hz)，7.94(1H，dd，J＝3.8Hz，1.2Hz)，7.93(1H，d，J＝9.8Hz)，7.74(1H，dd，J＝5.0Hz，1.0Hz)，7.52(2H，m)，7.23(1H，dd，J＝5.3Hz，3.8Hz)，4.69(2H，s).ESI-MS(m/z) C15H11N5S的计算值293.1；实测值 294.2(M+H). 实施例34 3-(1-氧基-吡啶-4-基甲基)-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
0℃下，用CHCl3中的3-氯代过苯甲酸(0.26mmol)处理前述实施例的产物(0.20mmol)，经5h加热至环境温度，用含水NaHCO3、水和盐水洗涤，用CH2Cl2萃取合并的含水层。经Na2SO4干燥经合并的有机层，过滤，经制备型TLC(二氧化硅上10％ MeOH/CH2Cl2)纯化蒸发出的滤液，得到呈浅黄色固体的标题化合物。
1HNMR(CD3OD)δ 8.32(2H，m)，8.24(1H，d，J＝9.9Hz)，7.95(1H，dd，J＝3.8Hz，1.1Hz)，7.94(1H，d，J＝9.8Hz)，7.75(1H，dd，J＝5.1Hz，1.1Hz)，7.65(2H，d，J＝7.1Hz)，7.24(1H，dd，J＝5.1Hz，3.8Hz)，4.72(2H，s).ESI-MS(m/z) C15H11N5OS的计算值309.1；实测值 310.3(M+H). 实施例35 3-苯并呋喃-5-基甲基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例35步骤a 5-溴代甲基-苯并呋喃
将N-溴代琥珀酰亚胺(5.0mmol)加至2，3-二氢苯并呋喃-5-基乙酸(5.0mmol)和过氧化苯甲酰(10mg)的四氯化碳(100mL)溶液中，回流3h。冷却混合物至室温，过滤并浓缩。从乙酸乙酯已烷(2:1)再结晶产物，得到呈白色固体的标题化合物。
1H NMR(CD3OD)δ 7.62(1H，d，J＝2.4Hz)，7.52(1H，d，J＝0.8Hz)，7.46(1H，d，J＝8.4Hz)，7.21(1H，dd，J＝1.6，8.4Hz)，6.74(1H，d，J＝3.2Hz)，3.74(2H，s). 实施例35步骤b 苯并呋喃-5-基-乙酸
将N-溴代琥珀酰亚胺(0.89g，5.0mmol)加至2，3-二氢苯并呋喃-5-基乙酸(0.89g，5.0mmol)和过氧化苯甲酰(10mg)的四氯化碳(100mL)溶液中，回流3小时。冷却混合物至室温，过滤并浓缩。从乙酸乙酯己烷(2:1)再结晶产物，得到0.39g(44％)白色固体。1H NMR(CD3OD)δ 7.62(1H，d，J＝2.4Hz)，7.52(1H，d，J＝0.8Hz)，7.46(1H，d，J＝8.4Hz)，7.21(1H，dd，J＝1.6，8.4Hz)，6.74(1H，d，J＝3.2Hz)，3.74(2H，s). 实施例35步骤c 苯并呋喃-5-基-乙酸酰肼
用实施例17步骤b的方法，由前述步骤的产物(1.15mmol)，制备呈黄色固体的标题化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.22(1H，bs)，7.96(1H，d，J＝2.2Hz)，7.53(1H，d，J＝1.5Hz)，7.50(1H d，J＝8.6Hz)，7.20(1H，dd，J＝8.4Hz，2.0Hz)，6.93(1H，dd，J＝2.2Hz，1.0Hz)，4.24(2H，bs)，3.43(2H，s). 实施例35步骤d 3-苯并呋喃-5-基甲基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述，由前述步骤的产物(0.63mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.34mmol)，制备呈浅黄色固体的标题化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.04(1H，d，J＝9.9Hz)，7.75(1H，d，J＝1.3Hz)，7.66(1H，dd，J＝3.8Hz，1.1Hz)，7.58(1H，d，J＝2.3Hz)，7.56(1H，dd，J＝5.2Hz，1.1Hz)，7.46(3H，m)，7.17(1H，dd，J＝5.0Hz，3.8Hz)，6.72(1H，m)，4.69(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H12N4OS的计算值332.1；实测值 333.3(M+H). 实施例36 3-苯并[b]噻吩-5-基甲基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例36步骤a 苯并[b]噻吩-5-基-乙酸
用四氯化碳中的NBS处理5-甲基苯并噻吩，制备标题化合物，随后用DMF中的氰化钠处理，再与乙醇中的含水氢氧化钠一起回流。 1H NMR(CD3OD)δ 8.02-8.00(1H，d，J＝8.2Hz)，7.84-7.83(1H，m)，7.82(1H，s)，7.51-7.50(1H，d，J＝5.0Hz)，7.35-7.33(1H，d，J＝9.7Hz)，3.76(2H，s). 实施例36步骤b 苯并[b]噻吩-5-基-乙酸酰肼
用实施例17步骤b方法，由前述步骤的产物(1.08mmol)，制备呈黄色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.24(1H，bs)，7.91(1H，d，J＝8.3Hz)，7.75(1H，d，J＝1.0Hz)，7.73(1H，d，J＝5.8Hz)，7.42(1H，d，J＝5.3Hz)，7.26(1H，dd，J＝8.3Hz，1.8Hz)，4.21(2H，bs)，3.46(2H，s).ESI-MS(m/z) C10H10N2OS的计算值206.1；实测值 207.1(M+H). 实施例36步骤c 3-苯并[b]噻吩-5-基甲基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述，由前述步骤的产物(0.53mmol)和3-氯-6-噻唑-2-基-哒嗪(0.26mmol)，制备呈浅黄色固体的标题化合物。 1H NMR(CD3OD)

8.17(1H，d，J＝9.9Hz)，7.98(1H，m)，7.90(1H，dd，J＝3.8Hz，1.0Hz)，7.86(1H，d，J＝9.8Hz)，7.85(1H，d，J＝8.4Hz)，7.74(1H，dd，J＝5.0Hz，1.3Hz)，7.55(1H，d，J＝5.5Hz)，7.46(1H，dd，J＝8.3Hz，1.7Hz)，7.34(1H，d，J＝5.6Hz)，7.22(1H，dd，J＝5.0Hz，3.8Hz)，4.71(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H12N4S2的计算值348.1；实测值 349.2(M+H). 实施例37 3-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基甲基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例37步骤a 苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基-乙酸酰肼
用实施例17步骤b的方法，从3，4-(亚甲基二氧基)-苯基乙酸(1.74mmol)，制备呈浅粉红色固体的标题化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ 9.13(1H，bs)，6.82(1H，d，J＝5.3Hz)，6.81(1H，d，J＝4.4Hz)，6.69(1H，dd，J＝7.9Hz，1.6Hz)，5.96(2H，s)，4.18(1H，d，J＝4.3Hz)，3.24(2H，s). 实施例37步骤b 3-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基甲基-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例17中所述，由前述步骤的产物(0.39mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.21mmol)制备呈白色固体的标题化合物。1H NMR(CDCl3)δ 8.05(1H，d，J＝9.8Hz)，7.67(1H，dd，J＝3.8Hz，1.2Hz)，7.56(1H，dd，J＝5.1Hz，1.1Hz)，7.46(1H，d，J＝9.8Hz)，7.18(1H，dd，J＝5.0Hz，3.8Hz)，7.00(m，2H)，6.75(1H，d，J＝7.8Hz)，5.90(2H，s)，4.51(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H12N4OS的计算值336.1；实测值 337.2(M+H). 实施例38 6-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3，b]哒嗪-3-基甲基)-苯并噻唑-2-基胺
实施例38步骤a (2-氨基-苯并噻唑-6-基)-乙酸乙酯
用3滴浓H2SO4和约1g干燥4A分子筛处理(2-氨基-苯并噻唑-6-基)-乙酸(0.61mmol，按照Meyer等在J.Med.Chem.1997，40，1060中的方法制备)的无水乙醇(10mL)溶液，并回流加热3天。真空浓缩反应至干，分配在CH2Cl2和饱和含水NaHCO3之间，过滤，和分离各相。用CH2Cl2萃取含水层，用水和盐水洗涤经合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩滤液，得到呈黄色固体的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.50(1H，m)，7.41(1H，d，J＝8.3Hz)，7.20(1H，dd，J＝8.2Hz，1.9Hz)，4.15(2H，q，J＝7.2Hz)，3.65(2H，s)，3.42(4H，s[NH2+H2O])，1.26(3H，t，J＝7.1Hz).ESI-MS(m/z) C11H12N2O2S的计算值236.1；实测值 237.1(M+H). 实施例38步骤b (2-氨基-苯并噻唑-6-基)-乙酸酰肼
用实施例17步骤b的方法，由前述步骤的产物(0.40mmol)，制备呈黄色固体的标题化合物。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.18(bs，1H)，7.51(d，J＝1.5Hz，1H)，7.40(bs，2H)，7.24(d，J＝8.1Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.1Hz，1.8Hz，1H)，4.25(bs，2H). 质谱(LCMS，ESI pos.)C9H10N4OS的计算值222.1；实测值 223.1(M+H). 实施例38步骤c 6-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯并噻唑-2-基胺
按照实施例17中所述，由前述步骤的产物(0.36mmol)和3-氯-6-噻吩-2-基-哒嗪(0.22mmol)，制备呈黄色固体的标题化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ 8.36(1H，d，J＝9.8Hz)，8.08(1H，dd，J＝3.8Hz，1.2Hz)，7.94(1H，d，J＝9.6Hz)，7.87(1H dd，J＝5.1Hz，1.4Hz)，7.68(1H，s)，7.41(2H，m)，7.26(3H，m)，4.51(2H，s).ESI-MS(m/z) C17H12N6S2的计算值364.1；实测值 365.3(M+H). 实施例39 6-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
按照实施例17中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CDCl3)δ 8.13-8.11(1H，d，J＝8.5Hz)，8.08-8.05(2H，m)，7.96-7.95(1H，d，J＝1.7Hz)，7.90-7.87(1H，dd，J＝2.0，2.0Hz)，7.66-7.65(1H，dd，J＝1.0，1.0Hz)，7.57-7.56(1H，dd，J＝1.3，1.3Hz)，7.48-7.46(1H，d，J＝9.8Hz)，7.38-7.35(1H，q，J＝4.2Hz)，7.18-7.16(1H，dd，J＝3.7Hz)，4.79(2H，s).ESI-MS(m/z) C19H13N5S的计算值343.04；实测值344.3(M+H). 实施例40 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-(5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
实施例40步骤a 6-氯-3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
合并(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-乙酸酰肼(633mg，3.3mmol)和3，6-二氯哒嗪(Aldrich，447mg，3.0mmol)，并溶于丁醇(120mL)。彻夜加热反应混合物至120℃。反应混合物变成黄色而混浊。冷却到室温后，过滤反应，用MeOH洗涤，生成呈褐色固体的所需产物(816mg，95％)。1H-NMR(CD3OD)δ 8.06-8.03(1H，d，J＝9.6Hz)，7.27(1H，s)，7.08-7.06(1H，d，J＝9.6Hz)，6.72-6.70(1H，d，J＝8.6Hz)，4.55-4.50(2H，t，J＝8.8Hz)，4.46(2H，s)，3.18-3.14(2H，t，J＝8.58Hz). 实施例40步骤b 5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-呋喃-2-甲醛
采用2-甲醛-呋喃-5-硼酸(24mg，0.7mmol)和6-氯-3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪(41mg，0.14mmol)，按照实施例1中所述的Suzuki交叉偶联的通用程序。ESI-MS(m/z) C19H14N4O3的计算值347.2；实测值346.11(M+H). 实施例40步骤c 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-(5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
使5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-呋喃-2-甲醛(21.6mg，0.06mmol)、吗啉(6.5μL，0.07mmol)和AcOH(2滴)合并于DCM(1mL)。向其中加入三乙酰氧基硼氢化钠(19mg，0.09mmol)，室温下搅拌反应2小时。真空浓缩反应，随后经HPLC(5-65％CH3CN经35min)纯化，生成呈固体的标题化合物(5.9mg，27％)。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3)δ 8.23-8.21(1H，d，J＝9.6Hz)，7.81-7.78(1H，d，J＝9.8Hz)，7.42-7.41(1H，d，J＝3.5Hz)，7.22(1H，s)，7.17-7.15(1H，d，J＝9.6Hz)，6.99-6.98(1H，d，J＝3.5Hz)，6.67-6.65(1H，d，J＝8.3Hz)，4.57(2H，s)，4.45-4.38(4H，m)，3.94(4H，br s)，3.40-3.33(4H，m)，3.17-3.13(2H，t，J＝8.8Hz).ESI-MS(m/z) C23H23N5O3的计算值417.18；实测值418.3(M+H). 实施例41 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-(3-甲氧基-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例40中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ 8.63(1H，s)，8.44-8.43(1H，d，J＝5.3Hz)，8.20-8.17(1H，d，J＝9.8Hz)，7.88-7.87(IH，d，J＝5.3Hz)，7.80-7.77(1H，d，J＝9.6Hz)，7.12(1H，s)，7.02-7.00(1H，d，J＝8.0Hz)，6.56-6.54(1H，d，J＝8.3Hz)，4.44(2H，s)，4.41-4.37(2H，t，J＝8.3Hz)，4.00(3H，s)，3.06-3.01(2H，t，J＝8.3Hz).ESI-MS(m/z) C20H17N5O2的计算值359.14；实测值360.3(M+H). 实施例42 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-(5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例40中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ 8.14-8.12(1H，d，9.8Hz)，7.85-7.84(1H，d，J＝3.7Hz)，7.81-7.79(1H，d，J＝9.8Hz)，7.35-7.34(1H，d，J＝3.7Hz)，7.13(1H，s)，7.08-7.06(1H，d，J＝8.8Hz)，6.56-6.54(1H，d，J＝8.0Hz)，4.60(2H，s)，4.40-4.36(4H，m)，3.84(2H，br s)，3.29(2H，br s)，3.21(2H，m)，3.05-3.01(2H，t，J＝8.8Hz).ESI-MS(m/z) C23H23N5O2S的计算值433.16；实测值434.3(M+H). 实施例43 6-(6-咪唑-1-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
100℃下，搅拌DMF(3mL)中的6-(6-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉、咪唑和碳酸钾的混合物8h。加入含水HCl(0.5N)，真空除去挥发物，经HPLC(5-35％B经45min)纯化，得到作为TFA盐的产物。使残余物溶解于含水1N HCl(5mL)中，真空除去挥发物。重复两次后，高真空下干燥产物-二盐酸盐，生成玻璃状固体(53mg，44％得率)。
1H-NMR(CD3OD)δ 9.60(1H，s)，9.17(1H，dd，J＝1.5、5.3Hz)，9.10(1H，m)，8.58(1H，d，J＝9.9Hz)，8.38(1H，m)，8.36(1H，m)，8.27(1H，m)，8.23(1H，m)，8.05(1H，dd，J＝5.3，8.3Hz)，7.98(1H，d，J＝9.9Hz)，7.72(1H，s)，5.12(2H，s)，4.98(2H，m).ESI-MS(m/z) C18H13N7的计算值327.1；实测值328.3(M+H). 实施例44 6-[6-(4-溴-咪唑-1-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例43中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ 9.21(2H，m)，8.72(1H，d，J＝1.5Hz)，8.59(1H，d，J＝9.9Hz)，8.45(1H，m)，8.32(1H，dd，J＝1.8，8.8Hz)，8.27(1H，br d，J＝8.8)，8.17(1H，d，J＝1.5Hz)，8.11(1H，dd，J＝5.7，8.3Hz)，8.10(1H，d，J＝9.9Hz)，5.01(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H12BrN7的计算值405.0/406.0；实测值406.3/408.3(M+H/M+H+2). 实施例45 4-(6-咪唑-1-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
实施例45步骤a 4-(6-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
合并(4-羟基-苯基)-乙酸酰肼(10g，0.06mol)和3，6-二氯哒嗪(Aldrich，8.96g，0.06mol)，并溶于丁醇(120mL)。彻夜加热反应混合物至100℃。反应混合物变成黄色而混浊。冷却至室温后，过滤反应，用MeOH洗涤，生成呈黄棕色固体的所需产物(11.5g，36％)。1H-NMR(CD3OD)δ 9.3(1H，br s)，8.44-8.42(1H，d，J＝9.6Hz)，7.48-7.45(1H，d，J＝9.6Hz)，7.12-7.09(2H，d，J＝8.6Hz)，6.70-6.68(2H，d，J＝8.6Hz)，4.35(2H，s).ESI-MS(m/z) C12H9ClN4O的计算值260.05；实测值261.2(M+H). 实施例45步骤b 4-(6-咪唑-1-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
按照实施例43中所述，自4-(6-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚(实施例45步骤a)和咪唑，制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ 9.78(1H，t，J＝1.3Hz)，8.54(1H，d，J＝9.9Hz)，8.38(1H，t，J＝1.8Hz)，7.97(1H，d，J＝9.9Hz)，7.83(1H，dd，J＝1.3，1.8Hz)，7.23(2H，d，J＝8.6Hz)，6.72(2H，d，J＝8.6Hz)，4.53(s，2H).ESI-MS(m/z) C15H12N6O的计算值292.1；实测值293.2(M+H). 实施例46 4-(6-吡唑-1-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-苯酚
按照实施例43中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ8.48(1H，dd，J＝0.5，2.8Hz)，8.24(1H，d，J＝9.9Hz)，8.13(1H，d，J＝9.9Hz)，7.86(1H，dd，J＝1.3，1.8Hz)，7.26(2H，d，J＝8.6Hz)，6.78(2H，d，J＝8.6Hz)，6.65(1H，dd，J＝1.8，2.8Hz)，4.50(2H，s).ESI-MS(m/z) C15H12N6O的计算值292.1；实测值293.2(M+H). 实施例47 (4-甲基-哌嗪-1-基)-[5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)噻吩-基]-甲酮
实施例47步骤a 6-(6-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
按照实施例45中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CDCl3)δ9.17-9.16(1H，d，J＝6.5Hz)，8.91-8.88(1H，d，J＝9.0Hz)，8.50-8.48(1H，d，J＝9.6Hz)，8.28-8.25(1H，d，J＝8.5Hz)，8.14(1H，s)，8.06-8.03(1H，dd，J＝2.0，8.8Hz)，7.93-7.90(1H，d，J＝9.8Hz)，6.72-6.70(1H，d，J＝8.0Hz)，4.80(2H，s).ESI-MS(m/z) C15H10ClN5的计算值295.06；实测值296.3(M+H). 实施例47步骤b 5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-噻吩-2-羧酸乙酯
氩气下，向装有按实施例47步骤a中的制备的6-(6-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉(625mg，2.11mmol)和Pd(PPh3)4(120mg，0.10mmol)的烧瓶加入5-乙氧基羰基噻吩基-2-溴化锌(0.5M在THF中，12.7ml，6.35mmol)。经3h将该溶液加热至68℃，在此期间，经LC-MS监测原料被消耗。冷却反应物至室温，先后加入甲醇(5mL)、3N HCl(6mL)猝灭反应。边搅拌边加入额外的甲醇(5mL)和异丙醇(5mL)，随后加入2N NaOH调节pH约8。搅拌1h后，收集ppt，得到经锌盐污染的标题化合物(480mg，54％)。无须进一步纯化采用该原料。
1H-NMR(DMSO-d6)δ 8.84(1H，dd，J＝1.5，4.0Hz)，8.42(1H，d，J＝9.9Hz)，8.30(1H，m)，8.07(1H，d，J＝4.0Hz)，7.97(3H，m)，7.84(1H，d，J＝8.1Hz)，7.77(1H，dd，J＝2.0，8.8Hz)，7.49(1H，dd，J＝4.3，8.3Hz)，4.75(2H，s)，4.33(2H，q，J＝7.1Hz)，1.33(2H，t，J＝7.1Hz).ESI-MS(m/z) C22H17N5O2S的计算值415.1 实测值416.2(M+H). 实施例47步骤c (4-甲基-哌嗪-1-基)-[5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-噻吩-基]-甲酮
向按实施例47步骤a中那样制备的5-(3-喹啉-6-基甲基[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-噻吩-2-羧酸乙酯(100mg，0.24mmol)在THF(4mL)和MeOH(2mL)中的悬液中加入2N NaOH(0.25ml，0.5mmol)，使混合物变黑却更均匀。搅拌2h后，加入1N HCl使pH约2。真空除去溶剂，高真空干燥残余物。向残余物中加入HBTU(114mg，0.3mmol)和HOBt(70mg，0.5mmol)，随后加入DMF(3mL)。向经搅拌的悬液中加入DEEA(265μL，1.5mmol)，提高均匀性。搅拌30min后，加入1-甲基哌嗪(110μL，1mmol)，搅拌反应1h。加入水(1mL)，真空除去挥发成分。经RP-HPLC(5-35％B经45min)纯化残余物。使产物-TFA盐三次溶于1:1 MeOH/2N HCl(15mL)中并浓缩，生成呈浅黄色固体的产物-氢氯酸盐(41mg，36％)。 1H-NMR(CD3OD)δ 9.28(1H，dd，J＝1.3，8.3Hz)，9.25(1H，dd，J＝1.5，5.6Hz)，8.68(1H，d，J＝9.9Hz)，8.59(1H，d，J＝9.9Hz)，8.55(1H，m)，8.37(2H，m)，8.16(1H，dd，J＝5.3，8.3Hz)，8.12(1H，d，J＝4.0Hz)，7.60(1H，d，J＝4.0Hz)，5.10(2H，s)，4.57(2H，m)，3.62(4H，m)，3.30(2H，m)，2.99(3H，s).ESI-MS(m/z) C25H23N7OS的计算值469.2；实测值470.2(M+H). 实施例48 5-[3-(4-羟基-苄基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸乙酯
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ8.18(1H，d，J＝9.9Hz)，7.84(1H，d，J＝4.0Hz)，7.82(1H，d，J＝4.0Hz)，7.79(1H，d，J＝9.9Hz)，7.33(2H，d，J＝8.6Hz)，6.78(2H，d，J＝8.6Hz)，4.51(2H，s)，4.40(1H，q，J＝7.7Hz)，1.46(1H，t，J＝7.7Hz).ESI-MS(m/z) C19H16N4O3S的计算值380.1；实测值381.2(M+H). 实施例49 5-[3-(4-羟基-苄基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸(3-二甲基氨基-丙基)-酰胺
如实施例47中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ 8.59(1H，d，J＝9.9Hz)，8.52(1H，d，J＝9.9Hz)，8.12(1H，d，J＝4.0Hz)，7.90(1H，d，J＝4.0Hz)，7.36(2H，d，J＝8.6Hz)，6.80(2H，d，J＝8.6Hz)，4.63(2H，s)，3.54(2H t，J＝6.6Hz)，3.27(2H，m)，2.95(s，6H)，2.12(2H，m).ESI-MS(m/z) C22H24N6O2S的计算值436.2；实测值437.2(M+H). 实施例50 {5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
实施例50步骤a 5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸乙酯
如实施例47中所述制备标题化合物。1H-NMR(CDCl3)δ 8.12(1H，d，J＝9.6Hz)，7.81(1H，d，J＝4.0Hz)，7.62(1H，d，J＝4.0Hz)，7.46(1H，d，J＝9.6Hz)，7.37(1H，m)，7.25(1H，m)，6.72(1H，d，J＝8.0Hz)，4.52(m，4H)，4.43(2H，q，J＝7.1Hz)，3.17(2H，m)，1.44(3H，t，J＝7.1Hz).ESI-MS(m/z) C21H18N4O3S的计算值406.1；实测值407.2(M+H). 实施例50步骤b {5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
如实施例47中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CDCl3)δ 8.07(1H，d，J＝9.9Hz)，7.57(1H，d，J＝3.8Hz)，7.45(1H，d，J＝9.9Hz)，7.34(1H，m)，7.29(1H，d，J＝3.8Hz)，7.25(1H，dd，J＝1.8，8.1Hz)，6.71(1H，d，J＝8.1Hz)，4.51(2H，t，J＝8.6Hz)，4.50(2H，s)，3.80(4H，t，J＝4.9Hz)，3.17(2H，t，J＝8.6Hz)，2.50(4H，t，J＝4.9Hz)，2.36(3H，s).ESI-MS(m/z) C24H24N6O2S的计算值460.2；实测值461.2(M+H). 实施例51 5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸双-(2-甲氧基-乙基)-酰胺
如实施例47中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CHCl3/CD3OD)δ8.13(1H，d，J＝9.9Hz)，7.69(1H，d，J＝4.0Hz)，7.66(1H，d，J＝9.9Hz)，7.56(1H，d，J＝4.0Hz)，7.33(1H，m)，7.24(1H，dd，J＝1.8，8.1Hz)，6.71(1H，d，J＝8.3Hz)，4.53(2H，t，J＝8.8Hz)，4.51(2H，s)，3.83(4H，m)，3.68(4H，m)，3.41(6H，s)，3.19(2H，t，J＝8.8Hz).ESI-MS(m/z) C25H27N5O4S的计算值493.2；实测值494.3(M+H). 实施例52 5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸(2-吗啉-4-基-乙基)-酰胺
如实施例47中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ8.24(1H，d，J＝9.9Hz)，7.89(1H，d，J＝3.8Hz)，7.85(1H，d，J＝4.0Hz)，7.76(1H，d，J＝4.0Hz)，7.34(1H，m)，7.21(1H，dd，J＝1.8，8.1Hz)，6.70(1H，d，J＝8.4Hz)，4.52(2H，t，J＝8.6Hz)，4.51(2H，s)，4.12(2H，m)，3.91(2H m)，3.84(2H，t，J＝6.0Hz)，3.70(2H，m)，3.48(2H，t，J＝6.0Hz)，3.27(2H，m)，3.20(2H，t，J＝8.6Hz).ESI-MS(m/z) C25H26N6O3S的计算值490.2；实测值491.3(M+H). 实施例53 5-[3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸(3-甲基-丁基)-酰胺
如实施例47中所述制备标题化合物。1H-NMR(CDCl3/CD3OD)δ8.58(1H，d，J＝8.8Hz)，8.28(1H，d，J＝8.8Hz)，7.94(1H，d，J＝2.8Hz)，7.76(1H，d，J＝2.8Hz)，7.36(1H，m)，7.22(1H，br d，J＝8.1Hz)，6.70(1H，d，J＝8.1Hz)，4.59(2H，s)，4.54(2H，t，J＝8.8Hz)，4.55(2H，m)，3.22(2H，t，J＝8.6Hz)，1.71(1H，七重峰，J＝6.6Hz)，1.56(2H，m)，0.98(6H，d，J＝6.6Hz).ESI-MS(m/z)448.3(M+H). C24H25N5O2S的计算值447.2；实测值448.3(M+H). 实施例54 (1，1-二氧代-1λ6-硫代吗啉-4-基)-[5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-噻吩-2-基]-甲酮
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ 9.24(2H，m)，8.62(1H，d，J＝9.6Hz)，8.53(2H，m)，8.34(2H，m)，8.16(1H，dd，J＝5.3，8.3Hz)，8.09(1H，d，J＝4.0Hz)，7.58(1H，d，J＝4.0Hz)，5.08(2H，s)，4.19(4H，m)，3.29(4H，m).ESI-MS(m/z) C24H20N6O3S2的计算值504.1；实测值505.2(M+H). 实施例55 (4-异丙基-哌嗪-1-基)-[5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-噻吩-2-基]-甲酮
如实施例47中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CD3OD)δ 9.28(2H，m)，8.67(1H，d，J＝9.9Hz)，8.59(1H，d，J＝9.9Hz)，8.57(1H，m)，8.38(2H，m)，8.18(1H，dd，J＝5.4，8.4Hz)，8.11(1H，d，J＝4.0Hz)，7.58(1H，d，J＝4.0Hz)，5.12(2H，s)，4.64(2H，m)，3.65(5H，m)，3.33(2H，m)，1.47(6H，d，J＝6.3Hz).ESI-MS(m/z) C27H27N7OS的计算值497.2；实测值498.3(M+H). 实施例56 (4-甲烷磺酰基-哌嗪-1-基)-[5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-噻吩-2-基]-甲酮
如实施例47中所述制备标题化合物。1H-NMR(CD3OD)δ 9.26(2H，m)，8.53(2H，m)，8.37(1H，m)，8.32(2H，m)，8.13(1H，m)，8.05(2H，s)，7.53(1H，m)，5.05(2H，s)，3.91(4H，m)，3.37(4H，m)，2.92(2H，m).ESI-MS(m/z) C25H23N7O3S2的计算值533.1；实测值534.2(M+H). 实施例57 6-[二氟-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基)-甲基]-喹啉
实施例57步骤a 氧代-喹啉-6-基-乙酸甲酯
向6-喹啉乙酸甲酯(1.2g，6mmmol)的二氧杂环己烷(30mL)溶液加入二氧化硒(1.65g，15mmol)。回流加热混合物3天，冷却至室温，经硅藻土过滤，并浓缩。经层析(二氯甲烷-氯化物中5％乙酸乙酯)纯化残余物成白色固体(0.75g，58％). 1H-NMR(CDCl3)δ 9.07-9.06(1H，q，J＝1.7，2.5Hz)，8.62-8.61(1H，d，J＝1.7Hz)，8.32-8.31(2H，m)，8.22-8.20(1H，d，J＝8.8Hz)，7.54-7.51(1H，q，J＝8.8Hz)，4.05(3H，s). 实施例57步骤b 二氟-喹啉-6-基-乙酸甲酯
0℃下，向氧杂-喹啉-6-基-乙酸甲酯(0.72g，3.3mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入(二甲基氨基)三氟化硫(mL，41mmol)。室温下，搅拌混合物2天，倾入冰中，用二氯甲烷(50mLx3)萃取。用盐水洗涤二氯甲烷溶液，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。经层析(二氯甲烷中0-10％乙酸乙酯)纯化残余物，得到白色固体(0.68g，87％). 1H-NMR(CDCl3)δ 9.02-9.01(1H，dd，J＝1.7，2.5Hz)，8.26-8.23(1H，d，J＝8.0Hz)，8.21-8.19(1H，d，J＝8.8Hz)，8.13-8.12(1H，s)，7.91-7.89(1H，dd，J＝2.0，2.0Hz)，7.51-7.48(1H，q，J＝4.0Hz)，3.8(3H，s). 实施例57步骤c 二氟-喹啉-6-基-乙酸酰肼
向二氟-喹啉-6-乙酸甲基乙酸酯(670mg，2.83mmol)的甲醇(20mL)溶液中加入无水肼(2mL)。回流加热混合物2h，冷却至室温，浓缩并高真空干燥，得到浅橙色固体(680mg，100％)。1H-NMR(DMSO)δ 9.02-9.01(1H，dd，J＝1.7Hz)，8.56-8.54(1H，d，J＝9.3Hz)，8.28(1H，s)，8.17-8.15(1H，d，J＝8.8Hz)，7.91-7.88(1H，dd，J＝2.0，2.0Hz)，7.66-7.63(1H，q，J＝4.0Hz). 实施例57步骤d 6-[二氟-(6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基)-甲基]-喹啉
按照实施例1步骤b中所述制备标题化合物。 1H-NMR.(CDCl3)δ 9.00-8.98(1H，dd，J＝1.7，4.0Hz)，8.36(1H，s)，8.29-8.22(2H，m)，8.15-8.10(2H，m)，7.68-7.67(1H，dd，J＝3.7，1.2Hz)，7.59-7.57(2H，m)，7.50-7.46(1H，q，J＝4.2Hz)，7.18-7.16(1H，t，J＝3.7Hz).ESI-MS(m/z) C19H11F2N5S的计算值397.07；实测值380.3(M+H). 实施例58 3-[二氟-(4-甲氧基-苯基)-甲基]-6-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
如实施例57中所述制备标题化合物。 1H-NMR(CDCl3)δ8.14-8.12(1H，d，J＝9.8Hz)，7.75-7.73(2H，d，J＝9.0Hz)，7.69-7.86(1H，dd，J＝3.5，1.0Hz)，7.59-7.56(2H，t)，7.19-7.17(1H，d，J＝3.7Hz)，7.00-6.97(2H，d，J＝9.0Hz)，3.83(3H，s).ESI-MS(m/z) C17H12F2N4OS的计算值358.07；实测值359.2(M+H). 实施例59 6-[二氟-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基)-甲基]-喹啉
如实施例57中所述制备标题化合物。 1H-NMR(DMSO)δ9.17(1H，s)，8.97(1H，d，J＝4.3Hz)，8.77(1H，m)，8.32-8.39(4H，m)，8.23(1H，d，J＝8.9Hz)，8.08(1H，dd，8.9，2.0Hz)，7.85(1H，J＝9.8Hz)，7.58(1H，m).ESI-MS(m/z) C20H11F2N6的计算值374.11；实测值375.3(M+H). 实施例60 6-[二氟-(6-吡啶-4-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基)-甲基]-喹啉
如实施例57中所述的制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO)δ9.27(1H，d，J＝3.7Hz)，9.03(2H，d，J＝5.7Hz)，8.00(1H，d，J＝5.8Hz)，8.84(1H，d，J＝9.8Hz)，8.76(1H，s)，8.46(1H，d，J＝9.2Hz)，8.38(3H，m)，8.28(1H，d，J＝9.1Hz)，7.96(1H，dd，8.2，4.7Hz).ESI-MS(m/z) C20H11F2N6的计算值374.11；实测值375.3(M+H). 实施例61 6-{二氟-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉
实施例61步骤a 6-碘喹啉
将二氧杂环己烷(15mL)中的碘化钠(4.32g，28.8mmol)、碘化铜(I)(137mg，0.72mmol)和N，N′-二甲基-环己烷-1，2-二胺(0.227ml，1.44mmol)和6-溴代喹啉(3g，14.4mmol)装入25mL微波管。用氮吹洗该管再用聚四氟乙烯隔膜密封，使氮气在溶液中起泡10分钟，用针使气体逸出。拨出针后，110℃下搅拌反应混合物15小时。然后，使绿色悬液达到室温，倾入冰-水中，用二氯甲烷萃取。收集有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。经采用CH2Cl2100％和CH2Cl2/MeOH95/5的硅胶层析粗混合物，得到呈浅黄色固体的3.56g(97％)6-碘喹啉。
1H-NMR(DMSO)δ 8.93(1H，dd，J＝1.5，4.1Hz)，8.47(1H，d，J＝2.0Hz)，8.33(1H，d，J＝8.6Hz)，8.02(1H，dd，J＝2.0，8.6Hz)，7.80(1H，d，J＝8.6Hz)，7.56(1H，dd，J＝4.1，8.6Hz). 实施例61步骤b 二氟-喹啉-6-基-酸乙酯
向6-碘喹啉(10.2g，40mmol)和铜(0)(纳米粉末，5.59g，88mmol)的无水DMSO(97mL)悬液中加入8.93g(44mmol)一溴二氟代乙酸乙酯。55℃，氮气下，搅拌反应混合物15小时。使反应达到室温，将混合物倾入氯化铵溶液。加入乙酸乙酯，经硅藻土过滤所生成的混合物。收集有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。经采用CH2Cl2100％和CH2Cl2/MeOH95/5的硅胶层析粗混合物，得到呈浅黄色油的5.07g二氟-喹啉-6-基-乙酸乙酯(50％)。
1H-NMR(CDCl3)δ 9.1(1H，m)，8.27(1H，m)，8.20(2H，m)，8.15(1H，m)，7.91(1H，m)，7.52(1H，m)，4.33(2H，q，J＝7.1Hz)，1.31(3H，t，J＝7.1Hz). 实施例61步骤c 二氟-喹啉-6-基-乙酸酰肼
向二氟-喹啉-6-基-乙酸乙酯(5.5g，21.9mmol)的甲醇(85mL)溶液中加入水合肼(5.3ml，109.5mmol)。经10min加热混合物至45℃，冷却至室温，浓缩，和在二氯甲烷整理。经MgSO4干燥有机层，过滤并真空浓缩，得到浅橙色固体(4.4g，85％)。
实施例61步骤d 3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-哒嗪
将3，6-二氯哒嗪(Aldrich，23.91g，160.5mmol)、1-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑(20g，96mmol)、2.0MNa2CO3(96mL)和二氧杂环己烷(65mL)装入烧瓶。使氮气起泡通过反应60秒，随后加入二氯双(三苯基膦)钯(0)(6.75g，96mmol)。彻夜加热反应至80℃，随后用AcOEt和K2CO3溶液带水整理。经硅藻土过滤后，干燥有机层(MgSO4)并真空浓缩。经在溶剂(二氯甲烷)中结晶得到第一流分的化合物(10.2g)。经柱层析(CH2Cl2100％和CH2Cl2/MeOH95/5)纯化滤液。收集两流分，用二异丙基醚洗涤，得到呈黄色固体的标题化合物(12.7g，68％)。
实施例61步骤e 6-(二氟-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基)-喹啉
彻夜加热正丁醇(125mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-哒嗪(步骤d)(4.57g，23.6mmol)和二氟-喹啉-6-基-乙酸酰肼(步骤c)(5.60g，23.6mmol)至130℃。冷却混合物至室温，随后采用AcOEt和K2CO3溶液带水整理，干燥有机层(MgSO4)并真空浓缩。经快速柱层析法(第一次层析CH2Cl2100％和CH2C12/MeOH88/12，随后另一次用甲苯/iPrOH/NH4OH85/15/2的柱)纯化残余物，得到标题化合物(5.5g，62％).M.p＝199.7℃ 实施例61氢氯酸盐的合成 向MeOH(5mL)中的1g(2.65mmol)6-(二氟-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基)-喹啉逐滴加入异丙醇(5-6N)中的2mL HCl。过滤沉淀，真空干燥，得到1.01g氢氯酸盐(C19H13F2N7，1.30 HCl，0.60H2O)。
1H NMR(DMSO)δ 9.26(1H，d，J＝4.5Hz)，9.16(1H，d，J＝8.0Hz)，8.70(1H，s)，8.58-8.48(2H，m)，8.27(1H，d，J＝9.1Hz)，8.09(1H，s)，7.97(1H，dd，J＝8.3Hz，4.8Hz)，7.85(1H，d，J＝10Hz)3.93(3H，s). 分析(C19H13F2N7，1.30 HCl，0.60H2O)计算值C，52.41；H，3.59；N，22.52.实测值C，52.19；H，3.72；N，22.53. 作为选择，可如实施例57中所述制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO)δ 9.30(1H，d，J＝4.1Hz)，9.16(1H，d，J＝8.4Hz)，8.80(1H，s)，8.51(3H，m)，8.33(1H，d，J＝8.6Hz)，8.09(1H，s)，8.04(1H，m)，7.86(1H，d，J＝9.7Hz)，3.93(3H，s).ESI-MS(m/z) C19H13F2N7的计算值377.36；实测值378.4(M+H). 实施例62 3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基甲基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO)δ8.78(1H，s)，8.33(1H，d，J＝8.6Hz)，8.09(1H，s)，7.86(1H，d，J＝9.7Hz)，7.08(1H，d，J＝9.6Hz)，6.87(1H，m)，6.64(1H，d，J＝8.3Hz)，5.11(2H，s)，4.53(2H，t，J＝8.8Hz)，3.92(3H，s)，3.20(2H，t，J＝8.6Hz)，ESI-MS(m/z) C18H16N6O的计算值332.14；实测值333.3(M+H). 实施例63 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉1-氧化物
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.71(1H，d，J＝8.8Hz)，8.48(1H，d，J＝6.0Hz)，8.06(1H，d，J＝9.5Hz)，7.98(1H，s)，7.90(3H，m)，7.66(1H，d，J＝8.5Hz)，7.30(2H，m)，4.78(2H，s)，4.01(3H，s).ESI-MS(m/z) C19H15N7O的计算值357.13；实测值358.20(M+H). 实施例64 6-(6-嘧啶-5-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
如实施例47中所述制备标题化合物。 1H-NMR(DMSO)δ9.50(1H，s)，9.38(1H，s)，8.86(1H，dd，J＝5.6，1.8Hz)，8.57(1H，d，J＝9.5Hz)，8.33(1H，d，J＝8.6Hz)，8.07(1H，d，J＝9.7Hz)，8.00(2H，m)，7.84(1H，dd，J＝8.9，2.0Hz)，7.71(1H，q，J＝4.4Hz)，4.86(2H，s).ESI-MS(m/z) C19H13N7的计算值339.12；实测值340.30(M+H). 实施例65 6-(6-喹啉-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
如实施例47中所述制备标题化合物。 1H-NMR(DMSO)δ9.60(1H，d，J＝2.2Hz)，9.13(1H，d，J＝2.3Hz)，8.86(1H，d，J＝4.1Hz)，8.56(1H，d，J＝9.6Hz)，8.35(1H，d，J＝8.6Hz)，8.12(3H，m)，8.04(2H，m)，7.91(2H，m)，7.74(1H，t，J＝8.1Hz)，7.51(1H，q，J＝4.2Hz)，4.89(2H，s).ESI-MS(m/z) C24H16N6的计算值388.14；实测值389.30(M+H). 实施例66 6-[二氟-(6-喹啉-3-基-[1，2，4]三唑[4，3-b]哒嗪-3-基)-甲基]-喹啉
如实施例57中所述的制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO)δ9.52(1H，d，J＝2.2Hz)，9.01(1H，d，J＝4.2Hz)，8.64(1H，d，J＝2.1Hz)，8.36(2H，d，J＝8.6Hz)，8.30(2H，m)，8.23(1H，m)，8.11(1H，m)，7.95(1H，d，J＝7.6Hz)，7.85(2H，m)，7.69(1H，m)，7.50(1H，q，J＝4.1Hz).ESI-MS(m/z) C24H14F2N6的计算值424.12；实测值425.30(M+H). 实施例67 2-氯-6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
实施例67步骤a (1-羟基-喹啉-6-基)-乙酸甲酯
室温下，将间-全氯代苯甲酸(6.85g，39.8

)加至可市售得到的喹啉-6-基-乙酸甲酯(5.00g，24.8mmol)的1，2-二甲氧基乙烷溶液，并搅拌2小时。加入水，用饱和碳酸钾碱化溶液至pH 9-10，用乙酸乙酯萃取产物，得到定量生成的(1-羟基-喹啉-6-基)-乙酸甲酯。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.99(d，1H，J＝8.4Hz)，7.93(d，1H，J＝8.4Hz)，7.65(m，1H)，7.60(m，1H)，7.32(d，1H，J＝8.8Hz)，7.19(s，1H)，3.74(s，2H)，3.65(s，3H). 实施例67步骤b (2-氯-喹啉-6-基)-乙酸甲酯
在磷酰氯(30mL)中回流(1-羟基-喹啉-6-基)-乙酸甲酯(1.0g，4.61mmol)25分钟。蒸发过量磷酰氯，加入饱和碳酸氢钠，用乙酸乙酯萃取粗混合物数次。产物经己烷:乙酸乙酯(1:1)中的硅胶柱层析纯化，得到0.219g(20％)(2-氯-喹啉-6-基)-乙酸甲酯。 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.99(d，1H，J＝8.4Hz)，7.93(d，1H，J＝8.8Hz)，7.63(m，1H)，7.60(dd，1H，J＝2.0，8.4Hz)，7.30(d，1H，J＝8.8Hz)，3.73(s，2H)，3.64(s，3H). 实施例67步骤c (2-氯-喹啉-6-基)-乙酸酰肼
室温下，搅拌(2-氯-喹啉-6-基)-乙酸甲酯(0.160g，0.679mmol)、肼(0.218g，6.79mmol)和甲醇(3mL)。蒸发反应，得到(2-氯-喹啉-6-基)-乙酸酰肼。该化合物未经纯化，直接用于下个步骤。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.39(m，1H)，8.43(d，1H，J＝9.2Hz)，7.91(m，2H)，7.75(m，1H)，7.58(m，1H)，4.30(bs，2H)，3.57(s，2H). 实施例67步骤d 2-氯-6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹唑
在丁醇(0.5mL)中回流加热(2-氯-喹啉-6-基)-乙酸酰肼(0.030g，0.127mmol)和3-氯-6-吡啶-3-基-哒嗪(0.024g，0.127mmol)几个小时。冷却反应至室温，过滤。经用水中乙腈(0.1％TFA)洗脱的C18柱的反相HPLC纯化滤液，得到0.017g(35％)2-氯-6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.38(m，1H)，8.88(d，1H，J＝5.2Hz)，8.85(m，1H)，8.42(d，1H，J＝9.6Hz)，8.31(d，1H，J＝8.8Hz)，8.06(s，1H)，8.03(m，1H)，7.92(m，3H)，7.50(d，1H，J＝8.8Hz)，4.93(s，2H). 质谱(LCMS，ESI pos.)C2OH13ClN6的计算值；实测值373.3，375.3(M+H). 实施例68 3-(4-甲氧基-苄基)-6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-3H喹唑啉-4-酮
实施例68步骤a 6-碘-3H-喹唑啉-4-酮
用4小时加热2-氨基-5-碘-苯甲酸(5.00g，19.0mmol)和甲酰胺(3.43g，76.0mmol)溶液至150℃，再冷却至室温。加水，过滤溶液，用水洗涤数次，得到3.6g(70％)6-碘-1H-喹唑啉-4-酮。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.39(s，1H)，8.37(s，1H)，8.11(s，1H)，8.09(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，7.45(d，1H，J＝8.8Hz). 实施例68步骤b 6-碘-3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮
将6-碘-1H-喹唑啉-4-酮(0.50g，1.84mmol)加至氢化钠(0.110g，2.76mmol)的THF(10mL)溶液，室温下搅拌1小时。加入1-氯代甲基-4-甲氧基-苯(0.345g，2.21mmol)，搅拌反应几个小时。加水，用乙酸乙酯萃取粗产物，真空蒸发。产物经用己烷:乙酸乙酯(4:1)的硅胶柱层析纯化，得到0.69g(96％)6-碘-3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.57(d，1H，J＝2.0Hz)，8.01(s，1H)，7.90(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，7.33(d，1H，J＝8.8Hz)，7.22(d，2H，J＝8.0Hz)，6.80(d，2H，J＝8.8Hz)，5.03(s，2H)，3.70(s，3H). 实施例68步骤c 2-[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-丙二酸二乙酯
在密封管中，用24小时将6-碘-3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮(0.69g，1.75mmol)、丙二酸二乙酯(0.56g，3.49mmol)、碘化铜(0.016g，0.090mmol)、联苯基-2-醇(0.029g，0.175mmol)和碳酸铯(0.86g，2.63mmol)的THF(10mL)溶液加热至70℃。再冷却溶液至室温，加入饱和碳酸氢钠，用乙酸乙酯萃取粗产物。产物经用己烷:乙酸乙酯(1:1)的硅胶柱层析纯化，得到0.51g(69％)2-[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-丙二酸二乙酯。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ 8.21(m，1H)，8.05(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0，8.4Hz)，7.62(d，1H，J＝8.4Hz)，7.22(d，2H，J＝8.8Hz)，6.78(d，2H，J＝8.8Hz)，5.05(s，2H)，4.69(s，1H)，4.15(m，4H)，3.70(s，3H)，1.19(m，6H). 实施例68步骤d [3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-乙酸甲酯
将氢氧化钠[2N](0.59mL)加至2-[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-丙二酸二乙酯(0.250g，0.590mmol)的甲醇(5mL)溶液，室温下搅拌数小时。再真空蒸发粗反应，加入1N HCl，用乙酸乙酯萃取粗产物，得到0.141g[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-乙酸甲酯。使之溶解于甲苯/甲醇[8/1](3mL)的混合物，室温下加入三甲基甲硅烷基重氮甲烷[2.0M](0.22mL)并搅拌，直到停止起泡。再真空蒸发反应，经用己烷:乙酸乙酯(1:1)的硅胶柱层析，得到0.119g(60％)[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-乙酸甲酯。质谱(LCMS，ESI pos.)C19H18N2O4的计算值；实测值339.1，340.1(M+H). 实施例68步骤e [3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-乙酸酰肼
50℃下，在甲醇(5mL)中搅拌[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-乙酸甲酯(0.050g，0.148mmol)和肼(0.047g，0.148mmol)数小时。再冷却反应至室温并过滤，得到0.030g(60％)[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-乙酸酰肼。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 10.09(s，1H)，9.33(s，1H)，8.85(m，1H)，8.53(d，1H，J＝2.0，8.4Hz)，8.42(d，1H，J＝8.4Hz)，8.14(d，2H，J＝8.4Hz)，7.70(d，2H，J＝8.4Hz)，5.93(s，2H)，5.04(bs，2H)，4.52(s，3H)，4.31(s，2H). 实施例68步骤f 3-(4-甲氧基-苄基)-6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-3H喹唑啉-4-酮
用数小时将丁醇(0.5mL)中的[3-(4-甲氧基-苄基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-6-基]-乙酸酰肼(0.024g，0.071mmol)和3-氯-6-吡啶-3-基-哒嗪(0.012g，0.063mmol)加热至130℃。化合物经用水中的乙腈(0.1％TFA)洗脱的C18柱上的反相HPLC纯化，得到0.016g(53％)3-(4-甲氧基-苄基)-6-(6-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-3H喹唑啉-4-酮。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.08(m，1H)，8.71(dd，1H，J＝4.8，1.6Hz)，8.39(m，1H)，8.25(m，1H，8.13(d，1H，J＝9.6Hz)，7.99(s，1H)，7.77(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz)，7.58(d，1H，J＝8.4Hz)，7.48(d，1H，J＝9.6Hz)，7.41(m，1H)，7.21(d，2H，J＝8.4Hz)，6.77(d，2H，J＝8.8Hz)，5.05(s，2H)，5.05(s，2H)，4.71(s，2H)，3.70(s，3H). 质谱(LCMS，ESI pos.)C27H21N7O2的计算值；实测值476.1，477.2(M+H). 实施例69 6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-3H-喹唑啉-4-酮
用三氟乙酸(1mL)和苯甲醚(0.1mL)处理3-(4-甲氧基-苄基)-6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-3H喹唑啉-4-酮(0.010mg，0.021mmol)，经18小时加热至90℃。化合物经用水中的乙腈(0.1％TFA)洗脱的C 18柱的反相HPLC纯化，得到0.0026g(35％)6-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-3H-喹唑啉-4-酮。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.32(m，1H)，8.79(m，1H)，8.53(m，2H)，8.20(m，1H)，8.10(s，1H)，8.03(d，1H，J＝10.0Hz)，7.89(d，1H，J＝8.4Hz)，7.66(m，2H)，4.80(s，2H). 质谱(LCMS，EST pos.)C19H13N7O的计算值；实测值356.3，357.3(M+H). 实施例70 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹唑啉
实施例70步骤a 2-喹唑啉-6-基-丙二酸二乙酯
经24小时将在密封管中的6-碘-喹唑啉(0.500g，1.95mmol)、丙二酸二乙酯(0.93g，5.81mmol)、碘化铜(0.019g，0.097mmol)、联苯基-2-醇(0.033g，0.195mmol)和碳酸铯(0.953g，2.93mmol)的THF(5mL)溶液加热至70℃。再冷却溶液至室温，加入饱和氯化铵，用乙酸乙酯萃取粗产物。产物经用己烷:乙酸乙酯(1:1)的硅胶柱层析纯化，得到0.39g(80％)2-喹唑啉-6-基-丙二酸二乙酯1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.37(bs，2H)，7.96(m，3H)，4.78(s，1H)，4.18(m，4H)，1.19(m，6H). 实施例70步骤b 喹唑啉-6-基-乙酸
将氢氧化钠[2M](0.77mL)加至2-喹唑啉-6-基-丙二酸二乙酯(0.20g，0.77mmol)的甲醇(10mL)溶液中并于室温下搅拌数小时。蒸发反应物，加入乙酸乙酯，再逐滴加入1N HCl直到化合物进入有机层。蒸发有机层，得到0.123g(85％)喹唑啉-6-基-乙酸。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.56(s，1H)，9.26(s，1H)，7.95(m，3H)，3.85(s，2H). 实施例70步骤c 喹唑啉-6-基-乙酸酰肼
经6小时将喹唑啉-6-基-乙酸(0.025g，0.133mmol)、亚硫酰氯(0.1mL)和甲醇(2mL)溶液加热至60℃。冷却反应至室温，并用二氯甲烷蒸发数次，得到喹唑啉-6-基-乙酸甲酯。使其溶解于甲醇(2mL)和肼(0.06ImL)溶液，室温下搅拌数小时。真空蒸发反应，得到喹唑啉-6-基-乙酸酰肼。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.56(s，1H)，9.33(bs，1H)，9.26(s，1H)，7.96(m，3H)，4.25(bs，2H)，3.84(s，2H). 实施例70步骤d 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹唑啉
经5小时将在丁醇(2mL)中的喹唑啉-6-基-乙酸酰肼(0.032g，0.158mmol)和3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-哒嗪(0.031g，0.158mmol)加热至165℃。冷却反应至室温，真空蒸发和经用5％二氯甲烷中的甲醇洗脱的硅胶柱层析纯化，得到0.0031g(7％)6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹唑啉。 1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.45(s，1H)，8.29(s，1H)，8.06(d，2H，J＝9.6Hz)，7.60(d，2H，J＝9.6Hz)，7.55(m，1H)，7.17(d，1H，J＝8.0Hz)，6.08(s，1H)，4.58(m，2H)，3.89(s，3H). 质谱(LCMS，ESI pos.)C18H14N8的计算值；实测值343.3(M+H). 实施例71 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹喔啉
实施例71步骤a 6-碘-喹喔啉
经数小时，将4-碘-苯-1，2-二胺(0.46g，1.96mmol)，乙二醛[40％在水中](2.25mL)、乙酸(1mL)和乙醇(20mL)溶液加热至100℃，再冷却至室温。加水，和用乙酸乙酯萃取粗产物。产物经用己烷乙酸乙酯(11)的硅胶柱层析纯化，得到0.323g(64％)6-碘-喹喔啉。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.77(dd，2H，J＝2.0，8.8Hz)，8.46(d，1H，2.0Hz)，7.96(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，7.75(d，1H，J＝8.8Hz). 实施例71步骤b 喹喔啉-6-基-乙酸
经24小时，将6-碘-喹喔啉(0.323g，1.26mmol)、丙二酸二乙酯(0.404g，2.52mmol)、碘化铜(0.012g，0.063mmol)、联苯基-2-醇(0.021g，0.126mmol)和碳酸铯(0.616g，1.89mmol)的THF(5mL)溶液在密封管中加热至70℃。再冷却溶液至室温，加水，用乙酸乙酯萃取粗产物。产物经用己烷:乙酸乙酯(1:1)的硅胶柱层析纯化，得到2-喹喔啉-6-基-丙二酸二乙酯。将2-喹喔啉-6-基-丙二酸二乙酯(0.066g，0.229mmol)加至氢氧化钠[2N](0.229mL)的甲醇(2mL)溶液并于室温下搅拌数小时。再真空蒸发反应，加入1N HCl，用乙酸乙酯萃取产物，得到0.030g(70％)喹喔啉-6-基-乙酸。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ 12.6(bs，1H)，8.93(dd，2H，J＝2.0，6.0Hz)，8.05(d，1H，8.8Hz)，7.99(m，1H)，7.79(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，3.89(s，2H). 实施例71步骤c 喹喔啉-6-基-乙酸酰肼
将三甲基甲硅烷基重氮基甲烷[2.0M在己烷中](0.08mL)逐滴加入喹喔啉-6-基-乙酸(0.030g，0.159mmol)的甲苯/甲醇[8/1](0.5mL)溶液中，搅拌直到停止起泡。再蒸发反应物和粗产物经用己烷乙酸乙酯(11)的硅胶柱层析纯化，得到0.013g喹喔啉-6-基-乙酸甲酯。将其加入肼(0.10mL)的甲醇溶液，并于室温下彻夜搅拌。真空蒸发反应混合物，得到0.019g喹喔啉-6-基-乙酸酰肼。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.77(bs，1H)，9.35(m，2H)，8.46(d，1H，J＝8.8Hz)，8.39(m，1H)，8.19(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，4.68(bs，2H)，4.07(s，2H). 实施例71步骤d 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹喔啉
经4小时，将丁醇(2mL)中的喹喔啉-6-基-乙酸酰肼(0.019g，0.094mmol)和3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-哒嗪(0.018g，0.094mmol)加热至125℃。冷却反应至室温，真空蒸发并经用在二氯甲烷中的5％甲醇洗脱的硅胶柱层析，得到0.0029g(15％)6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹喔啉。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.77(m，2H)，8.16(s，1H)，8.09(m，1H)，8.07(d，1H，J＝10.0Hz)，8.00(m，2H)，7.85(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz)，7.56(d，1H，J＝9.6Hz)，4.79(s，2H)，3.94(s，3H). 质谱(LCMS，ESI pos.)C18H14N8的计算值；实测值343.3，344.3(M+H). 实施例72 6-(6-苯并[b]噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
如实施例47中所述的制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ 9.20-9.13(1H，dd)，8.69-8.67(1H，d，J＝8.6Hz)，8.50-8.48(1H，d，J＝8.5Hz)，8.26-8.23(2H，m)，8.17-8.15(1H，d，J＝9.8Hz)，7.95-7.93(1H，d，J＝7.3Hz)，7.80-7.77(1H，q，J＝5.0Hz)，7.69-7.67(1H，d，J＝9.6Hz)，7.51-7.42(2H，m)，4.90(2H，s).ESI-MS(m/z) C23H15N5S的计算值393.47；实测值394.3. 实施例73 6-[6-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉-1-醇
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ 8.92-8.90(1H，dd)，8.54-8.53(1H，d，J＝7.4Hz)，8.16-8.14(1H，d，J＝8.8Hz)，8.06(1H，m)，8.02-7.97(2H，m)，7.66-7.60(2H，m)，7.53-7.48(2H，m)，7.08-7.05(1H，m)，7.51-7.42(2H，m)，4.72(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H13N7O的计算值343.34；实测值345.2. 实施例74 6-[6-(5-甲基-4，5-二氢-噻吩-2-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ9.07-8.98(2H，m)，8.27(1H，s)，8.16-7.98(3H，m)，7.75-7.73(1H，d，J＝8.8Hz)，7.60-7.59(1H，d，J＝3.8Hz)，6.79-6.77(1H，m)，4.06-4.02(1H，t，J＝6.5Hz)，3.91(1H，s)，3.21-3.20(3H，m)，2.45(3H，s).ESI-MS(m/z) C20H17N5S的计算值359.12；实测值358.2. 实施例75 3-[4-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-吡唑-1-基]-丙-1-醇
如实施例47中所述制备标题化合物。1H-NMR(CDCl3)δ 8.94-8.92(1H，d，J＝6.3Hz)，8.61-8.59(1H，d，J＝8.9Hz)，8.20-8.17(1H，d，J＝8.3Hz)，8.05-7.93(5H，m)，7.71-7.67(1H，m)，7.36-7.33(1H，d，J＝9.6Hz)，4.72(2H，s)，4.22-4.20(2H，m)，3.45-3.42(2H，m)，1.95-1.95(2H，m).ESI-MS(m/z) C21H19N7O的计算值385.17；实测值386.31. 实施例76 6-[6-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ 9.05-9.02(1H，d，J＝6.3Hz)，8.60-8.57(1H，d，J＝7.5Hz)，8.27-8.06(4H，m)，7.75-7.73(1H，d，J＝9.0Hz)，7.59-7.56(1H，d，J＝9.8Hz)，7.50-7.48(1H，d，J＝9.8Hz)，4.85(2H，s).ESI-MS(m/z) C18H13N7的计算值327.12；实测值328.32. 实施例77 6-[6-(5-氯-4，5-二氢-噻吩-2-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ 9.18-9.11(2H，m)，8.38(1H，s)，8.28-8.22(3H，m)，8.06-8.04(1H，q，J＝5.3Hz)，7.91-7.89(1H，d，J＝9.0Hz)，7.80-7.79(1H，d，J＝4.2Hz)，7.14-7.13(1H，d，J＝4.0Hz)，4.94(2H，s).ESI-MS(m/z) C19H14ClN5S的计算值377.05；实测值378.3. 实施例78 6-[6-(3H-苯并三唑-5-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ9.02(1H，s)，8.61-8.60(1H，d，J＝3.7Hz)，8.22-8.19(1H，d，J＝8.0Hz)，8.13-8.11(1H，d，J＝9.6Hz)，7.78(1H，s)，7.70-7.68(1H，d，J＝8.5Hz)，7.55-7.57(1H，d，J＝9.6Hz)，7.47-7.44(1H，q，J＝4.5Hz)，7.40-7.37(1H，d，J＝10.4Hz)，4.67(2H，s).ESI-MS(m/z) C21H14N8的计算值378.13；实测值379.3. 实施例79 6-[6-(2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
如实施例47中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ9.15(1H，s)，8.76-75(1H，d，J＝3.7Hz)，8.45-8.42(1H，d，J＝8.0Hz)，8.30-8.27(1H，d，J＝9.6Hz)，7.84-7.81(1H，d，J＝9.6Hz)，7.69(1H，s)，7.54-7.52(1H，d，J＝9.6Hz)，7.43-7.40(1H，d，J＝8.3Hz)，4.78(2H，s)，2.66(3H，s).ESI-MS(m/z) C23H17N7的计算值391.15；实测值；392.3. 实施例80 6-[6-(1H-吲哚-2-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。1H-NMR(DMSO-d6)δ11.94(1H，s)，9.21(1H，m)，9.04(1H，d，J＝8.9Hz)，8，43(1H，s)，8.40(1H，d，J＝9.8Hz)，8.32(1H，d，J＝8.5Hz)，8.26(1H，m)，8.04(1H，d，J＝9.7Hz)，8.00(1H，dd，J＝8.4Hz，5.0Hz)，7.67(1H，d，J＝7.8Hz)，7.59(1H，d，J＝8.1Hz)，7.53(1H，d，J＝1.2Hz)，7.27(1H，t，J＝7.6Hz)，7.09(1H，t，J＝7.7Hz)，4.97(2H，s).ESI-MS(m/z) C23H16N6的计算值376.1；实测值；377.3(M+H). 实施例81 6-(6-苯并呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ9.07(1H，m)，8.75(1H，m)，8.49(1H，d，J＝9.9Hz)，8.17(2H，m)，8.06(2H，m)，8.00(1H，d，J＝9.9Hz)，7.80(3H，m)，7.51(1H，m)，7.38(1H，t，J＝7.1Hz)，4.88(2H，s).ESI-MS(m/z) C23H15N5O的计算值377.1；实测值378.3(M+H). 实施例82 3-(2-甲基-苯并噻唑-6-基甲基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例1中所述制备标题化合物。1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 8.07(1H，d，J＝9.8Hz)，8.03(2H，m)，7.90(1H，m)，7.86(1H，d，J＝8.3Hz)，7.55(1H，dd，J＝8.3Hz，1.8Hz)，7.39(1H，d，J＝9.7Hz)，4.70(2H，s)，4.02(3H，s)，2.81(3H，s).ESI-MS(m/z) C18H15N7S的计算值361.1；实测值；362.3(M+H). 实施例83 5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-烟腈
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 9.39(1H，d，J＝2.2Hz)，9.05(1H，d，J＝1.8Hz)，8.83(1H，dd，J＝4.3Hz，1.5Hz)，8.58(1H，t，J＝2.0Hz)，8.34(1H，d，J＝9.6Hz)，8.21(1H，m)，8.05(1H，d，J＝8.8Hz)，7.93(1H，d，J＝1.7Hz)，7.80(1H，dd，J＝8.9Hz，2.0Hz)，7.71(1H，d，J＝9.9Hz)，7.47(1H，dd，J＝8.3Hz，4.5Hz)，4.88(2H，s).ESI-MS(m/z) C21H13N7的计算值363.1；实测值364.3(M+H). 实施例84 6-[6-(1H-吲哚-5-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。1H-NMR(DMSO-d6)δ11.50(1H，s)，9.25(1H，d，J＝4.0Hz)，9.12(1H，d，J＝8，3Hz)，8.39(4H，m)，8.23(1H，dd，J＝8.8Hz，1.9Hz)，8.08(1H，d，J＝9.9Hz)，8.04(1H，dd，J＝8.3Hz，5.2Hz)，7.87(1H，dd，J＝8.6Hz，1.5Hz)，7.55(1H，d，J＝8.6Hz)，7.47(1H，t，J＝2.7Hz)，6.58(1H，s)，4.94(2H，s).ESI-MS(m/z) C23H16N6的计算值376.1；实测值377.3(M+H). 实施例85 6-[6-(1-甲基-1H-吲哚-5-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
氩气下，使前述实施例的产物(0.074g，0.197mmol)溶解于无水N，N-二甲基甲酰胺(10mL)，用矿物油(0.014g，0.350mmol)中的60％氢化钠处理，并在环境温度下搅拌20分钟。用碘代甲烷(0.020ml，0.320mmol)经注射器处理反应，再搅拌18h，用水稀释，用二氯甲烷萃取三次和用乙酸乙酯萃取两次。合并各有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，和真空蒸发滤液，得到琥珀色固体。使其溶解于热无水乙腈(10mL)，边摇晃边用0.53N HCl/MeCN(0.75ml，0.40mmol)逐滴处理，并冷却至0℃。用细玻璃料过滤悬液，用乙醚洗涤固体两次，高真空下干燥。得到呈橙色固体的标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ 9.24(1H，d，J＝4.1Hz)，9.10(1H，d，J＝8.3Hz)，8.38(4H，m)，8.22(1H，d，J＝8.6Hz)，8.09(1H，d，J＝10.1Hz)，8.04(1H，m)，7.93(1H，d，J＝8.5Hz)，7.61(1H，d，J＝8.8Hz)，7.45(1H，s)，6.58(1H，s)，4.94(2H，s)，3.85(3H，s).ESI-MS(m/z) C24H18N6的计算值390.1；实测值；391.3(M+H). 实施例86 6-{二氟-[6-(2-甲基-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ9.15(1H，bs)，8.86(2H，m)，8.80(1H，d，J＝10.6Hz)，8.67(1H，s)，8.33(1H，d，J＝7.9Hz)，8.28(1H，d，J＝10.1Hz)，8.20(3H，m)，7.83(1H，m)，2.75(3H，s).ESI-MS(m/z) C21H14N6F2的计算值388.4；实测值389.3(M+H).作为选择，可用的Peppsi-iPr催化剂以及KOtBu和异丙醇代替Pd(PPh3)4和二氧杂环己烷中的Na2CO3。
实施例87 6-[6-(2-甲基-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.88(1H，dd，J＝4.3Hz，1.8Hz)，8.70(1H，d，J＝4.6Hz)，8.21(1H，d，J＝9.5Hz)，8.11(1H，m)，8.08(1H，d，J＝8.5Hz).7.89(1H，d，J＝1.8Hz)，7.84(1H，dd，J＝8.6Hz，2.0Hz)，7.61(1H，s)，7.58(1H，m)，7.52(1H，d，J＝9.8Hz)，7.39(1H，dd，J＝8.3Hz，4.3Hz)，4.86(2H，s)，2.68(3H，s).ESI-MS(m/z) C21H16N6的计算值352.1；实测值353.3(M+H). 实施例88 5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-吡啶-2-基胺
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1H-NMR(DMSO-d6)δ8.85(1H，dd，J＝4.4Hz，1.8Hz)，8.68(1H，d，J＝2.0Hz)，8.32(1H，m)，8.30(1H，d，J＝9.9Hz)，8.09(1H，dd，J＝8.8Hz，2.6Hz)，7.97(2H，m)，7.86(1H，d，J＝9.9Hz)，7.80(1H，dd，J＝8.6Hz，2.1Hz)，7.50(1H，dd，J＝8.3Hz，4.1Hz)，6.64(2H，bs)，6.57(1H，d，J＝8.6Hz)，4.77(2H，s).ESI-MS(m/z) C20H15N7的计算值353.1；实测值354.3(M+H). 实施例89 6-[6-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 8.87(1H，dd，J＝4.0Hz，1.8Hz)，8.74(1H，d，J＝2.0Hz)，8.15(1H，d，J＝9.9Hz)，8.14(1H，dd，J＝8.8Hz，2.5Hz)，8.10(1H，m)，8.06(1H，d，J＝8.9Hz)，7.87(1H，m)，7.84(1H，m)，7.49(1H，d，J＝9.8Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.2Hz，4.1Hz)，6.90(1H，d，J＝8.8Hz)，4.82(2H，s)，4.03(3H，s).ESI-MS(m/z) C21H16N6O的计算值368.1；实测值；369.3(M+H). 实施例90 5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-1H-吡啶-2-酮
氩气下，将前述实施例的产物(0.063g，0.171mmol)溶解于无水二氯甲烷(5mL)，用二氯甲烷(1.25ml，1.25mmol)中的1N三溴化硼处理并于环境温度下搅拌18h。经TLC表明该反应未完成，所以经20h在回流冷凝器中加热至50℃，冷却至环境温度，用饱和含水NaHCO3猝灭。用二氯甲烷和乙酸乙酯萃取含水层数次，合并各有机层，用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤。经蒸发滤液再经硅胶(20％MeOH/CH2Cl2)制备型TLC纯化，得到呈浅黄色固体的标题化合物。 1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 8.82(1H，dd，J＝4.3Hz，2.6Hz)，8.19(1H，d，J＝8.3Hz)，8.15(1H，d，J＝9.9Hz)，8.14(1H，dd，J＝9.6Hz，2.7Hz)，8.05(1H，d，J＝8.6Hz)，8.01(1H，d，J＝2.7Hz)，7.88(1H，s)，7.83(1H，dd，J＝8.6Hz，1.8Hz)，7.51(1H，d，J＝9.6Hz)，7.45(1H，dd，J＝8.3Hz，4.3Hz)，6.71(1H，d，J＝9.9Hz)，4.81(2H，s).ESI-MS(m/z) C20H14N6O的计算值354.1；实测值355.4(M+H). 实施例91 5-(6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基)-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1HNMR(CDCl3/CD3OD)δ 9.16(1H，d，J＝1.6Hz)，8.92(2H，m)，8.80(1H，dd，J＝4.8Hz，1.6Hz)，8.18(1H，d，J＝9.6Hz)，8.16(1H，m)，8.05(1H，d，J＝8.3Hz)，7.76(1H，m)，7.69(1H，dd，J＝8.3Hz，7.0Hz)，7.51(1H，d，J＝9.6Hz)，7.49(2H，m)，5.09(2H，s).ESI-MS(m/z) C20H14N6的计算值338.1；实测值339.3(M+H). 实施例92 3-(2-甲基-苯并噻唑-6-基甲基)-6-吡啶-3-基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 9.17(1H，d，J＝1.7Hz)，8.77(1H，dd，J＝4.9Hz，1.3Hz)，8.30(1H，dd，J＝6Hz，2Hz)，8.25(1H，d，J＝9.5Hz)，7，92(1H，d，J＝1.3Hz)，7.87(1H，d，J＝8.3Hz)，7.67(1H，d，J＝9.9Hz)，7.57(2H，m)，4.77(2H，s)，2.81(3H，s).ESI-MS(m/z) C19H14N6S的计算值358.1；实测值；359.2(M+H). 实施例93 6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-苯并噻唑-2-基胺
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.67(2H，bs)，8.54(1H，s)，8.31(1H，d，J＝9.9Hz)，8.18(1H，s)，7.82(1H，d，J＝1.1Hz)，7.67(1H，d，J＝9.9Hz)，7.37(2H，m)，4.55(2H，s)，3.94(3H，s).ESI-MS(m/z) C17H14N8S的计算值362.1；实测值363.2(M+H). 实施例94 二甲基-{6-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-苯并噻唑-2-基}-胺
氩气下，将前述实施例的产物(0.046g，0.127παmol)溶解于无水N，N-二甲基甲酰胺(5mL)，用矿物油(0.013g，0.325mmol)中60％氢化钠和碘代甲烷(0.040ml，0.642mmol)处理，并于环境温度下搅拌4h。真空浓缩反应至干，溶于10％MeOH/CH2Cl2，过滤，滤液经硅胶制备型TLC(先以10％，再以5％ MeOH/CH2Cl2)纯化两次，得到呈黄色固体的标题化合物。 1H NMR(CDCl3)δ 8.02(1H，d，J＝9.6Hz)，7.98(1H，m)，7.91(1H，s)，7.67(1H，d，J＝1.8Hz)，7.48(1H，d，J＝8.4Hz)，7.38(1H，m)，7.23(1H，d，J＝9.6Hz)，4.61(2H，s)，4.01(3H，s)，3.17(6H，s).ESI-MS(m/z)； C19H18N8S的计算值390.1；实测值；391.3(M+H). 实施例95 6-[6-(2-氯-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基甲基]-喹啉
按照实施例1中所述制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.44(1H，dd，J＝4.3Hz，1.5Hz)，8.59(1H，d，J＝4.6Hz)，8.30(1H，d，J＝9.8Hz)，8.20(1H，m)，8.06(1H，d，J＝8.5Hz)，7.93(1H，m)，7.88(1H，m)，7.82(1H，dd，J＝8.8Hz，2.0Hz)，7.77(1H，dd，J＝5.3Hz，1.5Hz)，7.63(1H，d，J＝9.5Hz)，7.45(1H，dd，J＝8.4Hz，4.3Hz)，4.87(2H，s).ESI-MS(m/z) C20H13N6Cl的计算值372.1；实测值；373.4(M+H). 实施例96 5-(3-喹啉-6-基甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基)-吡啶-2-腈
按照实施例1中所述制备标题化合物。 1H NMR(CDCl3/CD3OD)δ 9.31(1H，d，J＝2.3Hz)，8.83(1H，dd，J＝4.5Hz，1.6Hz)，8.42(1H，dd，J＝8.2Hz，4.2Hz)，8.33(1H，d，J＝9.6Hz)，8.19(1H，m)，8.05(1H，d，J＝8.7Hz)，7.94(1H，d，J＝8.1Hz)，7.89(1H，d，J＝1.6Hz)，7.81(1H，dd，J＝8.7Hz，1.9Hz)，7.69(1H，d，J＝9.7Hz)，7.45(1H，dd，J＝8.4Hz，4.3Hz)，4.87(s，2H).ESI-MS(m/z) C21H13N7的计算值363.1；实测值364.3(M+H). 实施例97 {5-[3-(二氟-喹啉-6-基-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]噻吩-2-基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
实施例97步骤a 5-(6-氯-哒嗪-3-基)-噻吩-2-羧酸乙酯
向装有100mL无水二氧杂环己烷中的3，6-二氯-哒嗪(2.8g，18.8mmol)和5-乙氧基羰基噻吩基-2-溴化锌(0.5M THF中，16ml，8mmol)的干燥烧瓶加入Pd(PPh3)4(450mg，0.39mmol)。N2下，彻夜加热所生成的溶液至60℃，冷却至20℃。先后加入15mL甲醇、3NHCl(10mL)猝灭反应。20℃下持续搅拌混合物又1小时。加入饱和NaHCO3中和混合物。用水整理后，用CH2Cl2萃取混合物，经Na2SO4干燥，真空浓缩。残余物经柱纯化，得到5-(6-氯-哒嗪-3-基)-噻吩-2-羧酸乙酯(1.4g，65％)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.81(d，J＝3.9Hz，1H)，7.77(d，J＝9.1Hz，1H)，7.63(d，J＝3.9Hz，1H)，7.55(d，J＝9.1Hz，1H)，4.38(q，2H)，1.40(t，3H)；MS(ES)m/z 269(M+H+). 实施例97步骤b 5-[3-(二氟-喹啉-6-基-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸
使步骤a制备的5-(6-氯-哒嗪-3-基)-噻吩-2-羧酸乙酯(54mg，0.20mmol)、二氟-喹啉-6-基-乙酸酰肼(实施例57步骤c)(71mg，0.30mmol)和正丁醇(3mL)的混合物合并于密封管，并于130℃油浴中加热4.5小时。冷却混合物至室温，用二氯甲烷(30mL)稀释，用饱和NaHCO3(1x)洗涤。用二氯甲烷(2x)萃取含水层。合并各有机层，经MgSO4干燥，过滤，真空蒸发和层析粗产物，得到中间体乙酯(62.4mg)68％得率。使乙酯溶于2:1四氢呋喃/甲醇(3mL)混合物，用2N NaOH(0.14mL)处理。20℃下，搅拌混合物3小时，真空蒸发，用水(10mL)稀释，用6N HCl酸化至pH 2。收集固体沉淀，干燥，得到产物97a(60mg，100％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.03(m，1H)；8.64(d，J＝9.8Hz，1H)，8.59(d，J＝9.0Hz，1H)，8.49(s，1H)，8.20-8.17(m，2H)，8.12(d，J＝4.0Hz，1H)，8.03(dd，J＝9.2，2.1Hz，1H)，7.79(d，J＝4.3Hz，1H)，7.65(dd，J＝8.3，4.2Hz，1H)；MS(m/z)424(MH+) 实施例97步骤c [5-[3-(二氟-喹啉-6-基-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
向步骤b中制备的化合物(50mg，0.12mmol)的无水DMF(5mL)溶液分别加入HATU(0.112g，0.29mmol)、HOBt(0.023g，0.17mmol)和DIEA(0.1ml，0.57mmol)。室温下，搅拌所生成的混合物30分钟，加入N-甲基哌嗪。再持续搅拌1小时，加入水(20mL)。加入二氯甲烷(20mL)，分离各层。用MgSO4干燥CH2Cl2层，真空蒸发并层析(CH2Cl2/MeOH与0.1％Et3N)，得到呈褐色固体的化合物。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 8.97(m，1H)，8.57(d，J＝7.9Hz，1H)，8.49(s，1H)，8.35(d，J＝9.8Hz，1H)，8.19(d，J＝9.2Hz，1H)，8.07(dd，J＝9.1，1.9Hz，1H)，8.01(d，J＝9.6Hz，1H)，7.88(d，J＝3.7Hz，1H)，7.66(dd，J＝4.4，4.3Hz，1H)，7.44(d，J＝3.8Hz，1H)，3.86(m，4H)，2.82(m，4H)，2.57(s，3H)；MS(m/z)506(MH+). 实施例98 {5-[3-(二氟-喹啉-6-基-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-基}-(4-甲烷磺酰基-哌嗪-1-基)-甲酮
向实施例97b中制备的化合物(1.0g，2.3mmol)的无水CH2Cl2(100ml)溶液分别加入1-甲烷磺酰基-哌嗪(460mg，2.8mmol)、EDC(560mg，2.8mmol)、DMAP(340mg，2.8mmol)。20℃下彻夜搅拌所生成的混合物。用水整理后，分离有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。真空除去溶液。残余物经柱纯化，得到呈白色固体的所需产物(680mg，51％)。1H NMR(CDCl3)δ 9.03(s，1H)，8.31(d，J＝11.2 Hz 1H)，8.11(m，4H)7.61(d，J＝3.8Hz，IH)，7.57(d，J＝9.8Hz，1H)7.49(m，1H)，7.31(d，J＝3.8Hz，1H)3.90(m，4H)，3.34(m，4H)，2.86(s，3H)；MS(ES)m/z 570.2(M+H+). 实施例99 6-{二氟-[6-(1-甲烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉
实施例99步骤a 4-(6-氯-哒嗪-3-基)-吡唑-1-羧酸叔丁酯
用真空室使在2.0M碳酸钾(10ml，20mmol)和1，4-二氧杂环己烷(40mL)中的3，6-二氯-哒嗪(1.06g，6.98mmol)和4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂戊环-2-基)-吡唑-1-羧酸叔丁酯(1.47g，5.0mmol)混合物脱气15min，随后用氩气起泡10min，再加入Peppsi-ipr(340mg，0.5mmol)。用氩气吹洗另外10min后，70℃下加热混合物4h，冷却至室温。经硅藻土过滤除去固体，分离出滤液。用CH2Cl2萃取含水溶液，用Na2SO4干燥经合并的有机相，浓缩，再经柱纯化，得到0.65g所需产物(46％)。1H NMR(DMSO)δ 9.08(s，1H)，8.47(s，1H)，8.31(d，J＝9.0Hz，1H)，8.01(d，J＝9.0Hz，1H)，1.59(s，3H)；MS(ES)m/z 280.8(M+H+). 实施例99步骤b 6-{二氟-[6-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉
彻夜加热装有40mL异丙醇中的3-氯-6-(吡唑-1-羧酸叔丁酯)-哒嗪(140mg，0.5mmol)、二氟-喹啉-6-基-乙酸酰肼(130mg，0.55mmol)和催化量的3N HCl的混合物的100ml烧瓶至80℃。用NaHCO3中和反应混合物，经CH2Cl2萃取。真空除去溶剂，残余物经快速层析纯化，得到110mg(61％)所需产物。
1H NMR(CDCl3)δ 10.2(bs，1H)，8.83(d，J＝9.23Hz，1H)，8.42(m，1H)，8.19-8.31(m，4H)，7.77(d，J＝9.0Hz，1H)，7.60(d，J＝9.0Hz，1H)，7.45-7.57(m，2H)；MS(ES)m/z 364.0(M+H+). 实施例99步骤c 6-{二氟-[6-(1-甲烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉
向装有CH2Cl2(6mL)中的6-{二氟-[6-(1H-吡唑-3-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉(110mg，0.303mmol)、三乙胺(120mg，1.2mmol)的50mL干燥烧瓶中加入甲烷磺酰氯(138mg，1.21mmol)。0℃下搅反应混合物90min，直到TLC表明反应完成。再用饱和NaHCO3中和混合物，经CH2Cl2萃取，经Na2SO4干燥，真空浓缩，再经柱纯化，得到113mg(85％)目标化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.02(dd，J＝4.3，1.3Hz，1H)8.44(d，J＝9.4Hz，1H)，8.23-8.30(m，5H)，8.03(d，J＝6.4Hz，1H)，7.51(dd，J＝9.7，4.0Hz，1H)，7.43(d，J＝9.8Hz，1H)，3.45(s，3H)；MS(ES)m/z 442.1(M+H+). 实施例100 6-{[6-(2-乙炔基-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-二氟-甲基}-喹啉
实施例100步骤a 3-氯-6-(2-氯-吡啶-4-基)-哒嗪
用氩气对2.0M碳酸钾(10ml，20mmol)和1，4-二氧杂环己烷(20mL)中的3，6-二氯-哒嗪(1.04g，6.98mmol)和2-氯吡啶硼酸(1.00g，6.37mmol)混合物起泡10min，再加入二(三苯基膦)二氯化钯(II)(236mg，0.336mmol)。在用氩气吹洗另外10min后，80℃下加热混合物18h，再冷却至室温。经硅藻土滤去固体，分离滤液。用CH2Cl2萃取含水溶液，干燥经合并的各有机相，浓缩，再经柱纯化，得到296mg(21％)呈固体的100a。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.58(d，J＝5.1Hz，1H)，8.00(m，1H)，7.90(dd，J＝5.5，1.6Hz，1H)，7.89(d，J＝9.0Hz，1H)，7.68(d，J＝9.0Hz，1H)；MS(ES)m/z226/228(M+H+). 实施例100步骤b 6-{[6-(2-氯-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-二氟-甲基}-喹啉
用氩所吹洗装有丁醇(7mL)中的3-氯-6-(2-氯-吡啶-4-基)-哒嗪(200mg，0.884mmol)和二氟-喹啉-6-基-乙酸酰肼(314mg，1.32mmol)的混合物的压力管，再密封。102℃下加热64h后，真空除去溶剂，残余物经快速层析纯化，得到134mg(37％)的100b。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.04(m，1H)，8.62(d，J＝5.1Hz，1H)，8.37-8.33(m，4H)，8.07(dd，J＝9.0，2.0Hz，1H)，7.83(m，1H)，7.75(dd，J＝5.1，1.6Hz，1H)，7.67(d，J＝9.8Hz，1H)，7.58(m，1H)；MS(ES)m/z409/411(M+H+). 实施例100步骤c 6-{[6-(2-乙炔基-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-二氟-甲基}-喹啉 用氩气对DMF(0.7mL)中的100b(60mg，0.15mmol)和Et2NH(0.45mL)的混合物脱气约5min，再加入三苯基膦(8mg，0.031mmol)、CuI(3mg，0.016mmol)和二(三苯基膦)二氯化钯(II)(10mg，0.014mmol)。持续脱气约5min，加入三甲基甲硅烷基乙炔。120℃下微波辐射混合物50min，真空浓缩。残余物经层析纯化，得到10mg(14％)6-{二氟-[6-(2-三甲基甲硅烷基乙炔基-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉。
用0.1M NaOH(0.2ml，0.02mmol)处理THF(1.2mL)中的以上产物(10mg，0.021mmol)1h并浓缩。将残余物分配在CH2Cl2和水之间。干燥有机层，浓缩并层析，得到8mg(94％)100。 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.96(d，J＝4.3Hz，1H)，8.74(d，J＝5.1Hz，1H)，8.29-8.19(m，4H)，8.00-7.98(m，1H)，7.92(s，1H)，7.72(dd，J＝5.1，1.6Hz，1H)，7.62(d，J＝9.8Hz，1H)，7.45(dd，J＝8.2，4.3Hz，1H)，3.26(s，1H)；MS(ES)m/z399(M+H+). 实施例101 4-[3-(二氟-喹啉-6-基-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-吡啶-2-腈
用真空室对DMF(4mL)中的6-{[6-(2-氯-吡啶-4-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-二氟-甲基}-喹啉(参见实施例100b)(50mg，0.122mmol)和Zn(CN)2(43mg，0.367mmol)的混合物脱气约5min，再加入四(三苯基膦)钯(13.4mg，0.012mmol)。190℃下，微波辐射混合物20min。用水处理后，真空除去溶剂。经柱纯化，得到标题化合物21mg(41％)。
1H NMR(CDCl3)δ 9.04(dd，J＝4.2，1.6Hz，1H)，8.95(d，J＝5.12Hz，1H)，8.41(d，J＝9.8Hz，1H)，8.22-8.35(m，4H)，8.00-8.05(m，2H)，7.70(d，J＝9.8Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.2，3.8Hz，1H)；MS(ES)m/z 400.3(M+H+). 实施例102 {5-[3-(苯并呋喃-5-基-二氟-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
实施例102步骤a (2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-氧代-乙酸乙酯
将固体AlCl3(5.55g，0.042M)分批加至(0℃)二氢苯并呋喃(5.0g，0.042M)和乙基草酰氯(4.5ml，0.042M)的无水二氯甲烷(80mL)溶液中。完成加入后，加热黑色溶液升至室温，并搅拌2hr。将所生成的反应混合物缓慢倾入浓HCl/冰水溶液(5mL/200mL)。搅拌含水混合物20分钟，加入二氯甲烷(1.50mL)。分离各层。用二氯甲烷(1x)萃取各层。用MgSO4干燥经合并的CH2Cl2萃取物，过滤，真空蒸发，粗油经层析(己烷/EtOAc)纯化，得到呈油状的所需产物(4.8g)54％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.88(s，1H)，7.86(d，J＝8.3Hz，1H)，6.85(d，J＝8.8Hz，1H)，4.72(t，J＝9Hz，2H)，4.45(q，J＝7.2Hz，2H)，3.28(t，J＝9.2Hz，2H)，1.42(t，J＝7.2Hz，3H).MS(m/z)221(MH+). 实施例102步骤b 苯并呋喃-5-基-氧代-乙酸乙酯
将N-溴代琥珀酰亚胺(3.88g，0.022M)缓慢加入步骤a中制备的化合物(4.8g，0.022M)和过氧化苯甲酰(0.030g，0.12mmol)的四氯化碳(80mL)溶液中。回流下搅拌混合物3小时，冷却至RT，蒸发至干，经层析(庚烷/EtOAc)，得到呈油状的产物(3.8g)100％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.32(s，1H)8.02(dd，J＝8.7，1.8Hz，1H)，7.73(d，J＝2.1Hz，1H)，7.61(d，J＝8.8Hz，1H)，6.88(s，1H)，4.48(q，J＝7.3Hz，2H)，1.46(t，J＝7.1Hz，3H).MS(m/z)219(MH+). 实施例102步骤c 苯并呋喃-5-基-二氟-乙酸乙酯
向步骤b中制备的化合物(0.895g，4.1mmol)的二氯甲烷(10mL)冷溶液(0℃)缓慢加入(二乙基氨基)三氟化硫(DAST)(5g，31.0mmol)。加热混合物至RT，持续搅拌24hr。再将反应混合物倾入冰水(100mL)，用CH2Cl2(2x100mL)萃取。合并的CH2Cl2萃取物经MgSO4干燥，过滤，真空蒸发再层析(己烷/CH2Cl2)，得到所需产物(0.8g，79％)。 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.88(s，1H)，7.70(d，J＝1.8Hz，1H)，7.56(m，2H)，6.83(d，J＝1.7Hz，1H)，4.32(q，J＝6.8Hz，2H)，1.31(t，J＝6.8Hz，3H)；MS(m/z)241(MH+). 实施例102步骤d 苯并呋喃-5-基-二氟-乙酸酰肼
回流下，搅拌无水甲醇(3mL)中的步骤c中制备的化合物(127mg，0.53mmol)和肼(0.28ml，8.9mmol)的混合物3hr，冷却至RT，真空蒸发，得到半固体产物(0.12g)99％。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.12(s，1H)，7.90(s，1H)，7.76(d，J＝9.1Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.5，1.5Hz，1H)，7.09(d，J＝1.3Hz，1H) 实施例102步骤e 5-[3-(苯并呋喃-5-基-二氟-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-羧酸乙酯
向正丁醇(3mL)中的步骤d中制备的化合物(0.115g，0.51mmol)和实施例97a中制备的化合物(165mg0.61mmol)的混合物加入1滴3N HCl。在130℃油浴中加热混合物3小时，冷却至RT，用二氯甲烷(20mL)稀释，用饱和NaHCO3(1x)洗涤。用MgSO4干燥CH2Cl2萃取物，过滤并真空蒸发。粗残余半固体经层析纯化，得到所需产物(35mg)16％。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.20(d，J＝9.8Hz，1H)，8.19(m，4H)，7.88(d，J＝3.8Hz，1H)，7.78(d，J＝9.0Hz，1H)，7.63(J＝9.1Hz，1H)，7.09(s，1H)，4.38(q，J＝7.6Hz，2H)，1.37(t，J＝6.9Hz，3H).MS(m/z)441(MH+). 实施例102步骤f {5-[3-(苯并呋喃-5-基-二氟-甲基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基]-噻吩-2-基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
使步骤e中制备的化合物溶解于2:1的THF/甲醇(3mL)混合物，再经2N NaOH(0.15mL)处理。室温下，搅拌混合物3小时，真空蒸发，用水(10mL)稀释，用6N HCl酸化成pH 2。收集白色固体沉淀，降压干燥，溶于DMF(2mL)，分别用HATU(0.0.62g，0.16mmol)、HOBt(0.013g，0.09mmol)和DIEA(0.06ml，0.32mmol)处理。室温下，搅拌所生成的混合物30分钟，加入N-甲基哌嗪(0.014ml，0.14mmol)。持续搅拌额外1小时，加水(20mL)。加二氯甲烷(20mL)，分离各层。CH2Cl2层经MgSO4干燥，真空蒸发和层析(CH2Cl2/0-10％MeOH)，得到固体产物。以EtOAc再结晶，得到呈灰白色固体的标题化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.60(d，J＝9.8，1H)，8.17-8.07(m，4H)，7.79(d，J＝9.1Hz，1H)，7.65(dd，J＝8.5，2.1Hz，1H)，7.50(d，J＝3.9Hz，1H)，7.08(s，1H)，3.67(m，4H)，3.34(m，4H)，2.32(s，3H)；MS(m/z)495(MH+). 实施例103 (5-{3-[(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-二氟-甲基]-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基}-噻吩-2-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
实施例103步骤a (2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-二氟-乙酸乙酯
向实施例102步骤a制备的化合物(1.0g，4.54mmol)的二氯甲烷(20mL)冷溶液(0℃)缓慢加入(二乙基氨基)三氟化硫(DAST)(5g，31.0mmol)。加热混合物至RT，持续搅拌24hr。再将反应混合物倾入冰水(80mL)中，用CH2Cl2(2x100mL)萃取。用MgSO4干燥合并的CH2Cl2萃取物，过滤，真空蒸发和层析(己烷/EtOAc)，得到所需产物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.42(s，1H)，7.36(dd，J＝8.5，1.9Hz，1H)，6.81(d，J＝8.9Hz，1H)，4.62(t，J＝8.3Hz，2H)，4.30(t，J＝7.4Hz，2H)，3.24(t，J＝8.9Hz，1H)，1.31(t，J＝7.1Hz，1H). 实施例103步骤b 5-{3-[(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-二氟-甲基]-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基}-噻吩-2-羧酸乙酯
用肼(0.58ml，18.6mmol)处理步骤a制备的化合物(0.30g，1.24mmol)的CH3OH(10mL)溶液。回流下搅拌得到的混合物2.5hr，冷却至RT，蒸发至干。使残余物(0.28g，1.22mmol)与实施例97步骤a制备的化合物(0.66g，2.4mmol)于正丁醇(5mL)中合并，130℃油浴中加热3小时，冷却至RT，用二氯甲烷(20mL)稀释，用饱和NaHCO3(1x)洗涤。CH2Cl2萃取物经MgSO4干燥，过滤，真空蒸发和层析(CH2Cl2/0-10％ MeOH)，得到所需产物(78mg)14％。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.62(d，J＝9.74Hz，1H)，8.19(dd，J＝9.8，3.7Hz，2H)，7.90(d，J＝3.8Hz，1H)，7.64(s，1H)，7.37(d，J＝9.9Hz，1H)，6.88(d，J＝8.5Hz，1H)，4.61(t，J＝8.7Hz，2H)，4.36(q，J＝7.2Hz，2H)，3.28(t，J＝8.3Hz，2H)，1.34(t，J＝7.2Hz).MS(m/z)443(MH+) 实施例103步骤c (5-{3-[(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-二氟-甲基]-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-6-基}-噻吩-2-基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮
使步骤b中制备的化合物溶解于2:1的THF/甲醇(3mL)混合物中，用2N NaOH(0.15mL)处理。室温下，搅拌混合物3小时，真空蒸发，用水(10mL)稀释，用6N HCl酸化至pH 2。收集白色固体沉淀，降压干燥，溶于DMF(3mL)，分别用HATU(0.12g，0.31mmol)、HOBt(24mg，0.18mmol)和DIEA(0.1ml，1.04mmol)处理。室温下搅拌得到的混合物30分钟，加入N-甲基哌嗪(0.027ml，0.24mmol)。持续搅拌另外1小时，加水(20mL)。加二氯甲烷(20mL)，分离各层。用MgSO4干燥CH2Cl2层，真空蒸发。残余物经反相HPLC(Varian Prostar HPLC，Pursuit prep column，含0.1％ TFA的CH3CN/H2O)纯化。最终化合物经HCO3柱过滤，降压干燥，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 8.58(d，J＝9.7Hz，1H)，8.16(d，J＝9.6Hz，1H)，8.08(d，J＝3.7Hz，1H)7.58(s，1H)，7.49(d，J＝3.9Hz，1H)，7.41(d，J＝8.6Hz，1H)，6.88(d，J＝7.8Hz，1H)，4.59(t，J＝8.5Hz，2H)3.65(m，4H)，3.25(t，J＝8.9Hz，2H)，2.36(m，4H)，2.22(s，3H)；MS(m/z)497(MH+) 实施例104 6-{二氟-[6-(2-丙基-噻唑-5-基)-[1，2，4]三唑并[4，3-b]哒嗪-3-基]-甲基}-喹啉
用氩气吹洗装有丁醇(2mL)中的3-氯-6-(2-丙基-噻唑-5-基)-哒嗪(实施例20，步骤a)(36mg，0.15mmol)和二氟-喹啉-6-基-乙酸酰肼(71mg，0.30mmol)的混合物的加压管，然后再密封。95℃下加热64h，真空除去溶剂，残余物经快速层析纯化，得到60mg(95％)呈浅棕色固体的8。 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.03(dd，J＝4.3，1.6Hz，1H)，8.36(m，3H)，8.18(d，J＝9.4Hz，2H)，8.16-8.14(m，1H)，7.58(d，J＝9.4Hz，2H)，3.06(t，J＝7.6Hz，2H)，1.93-1.88(m，2H)，1.08(t，J＝7.4Hz，3H)；MS(ES)m/z423(M+H+). 生物学活性 为确定本发明范围内的化合物的生物学活性，进行下列代表性试验。以非限止的方式给出它们，以说明本发明。
实施例A 重组c-Met蛋白的克隆、表达和纯化 该实施例描述具有c-Met受体酪氨酸激酶活性的c-Met的胞浆域的克隆、表达和纯化。胞浆域具有435个氨基酸并表现出与酪氨酸激酶SRC家族的高度同源性(Park等，1987，Proc Natl Acad Sci USA.84(18)6379-83)。
含酪氨酸激酶结构域的Met受体的胞浆域的cDNA被PCR扩增。寡核苷酸被Gibco-BRL定制化合成(Carlsbad，CA)。前面的寡核苷酸metkinF2等同于列于NM_000245的核苷酸序列的核苷酸3068-3097，除了介于3073-3078间的核苷酸已经被改变，产生克隆用途的BamHI位点。反义寡核苷酸metkinR2a等同于列于NM_000245的补充序列的核苷酸4378-4348，除了介于4372-4367的核苷酸已经被改变，产生克隆用途的XhoI位点(下划线的)。寡核苷酸被用作PCR引物，以扩增来自快速克隆胎盘的cDNA的Met受体胞浆域cDNA(Clontech；PaloAlto，CA)。用Taq DNA聚合酶(Gibco-BRL；Carlsbad，CA)、1.25mM各dNTP、200nM各低聚物、在50μl体积中进行扩增。在Perkin Elmer9600热循环仪上热循环图是30个循环，各含有94℃ 30秒、60℃ 30秒和72℃ 1分钟。
Met受体的胞浆域的经扩增的cDNA被克隆到表达载体。PCR产物被BamHI(New England Biolabs；Beverly，MA)和XhoI(New EnglandBiolabs)消化。采用Gene Clean(Qbiogene；Irvine，CA)，经消化的1.3kb产物从1％琼脂糖凝胶中被分离和纯化。载体pFastBacHTa(Gibco-BRL)被BamHI和XhoI(New England Biolabs)消化，采用Gene Clean(Bio101)，自1％琼脂糖凝胶纯化4.7kb线性片段。4℃下，经16小时T4DNA连接酶(New England Biolabs)使1.3kb Met cDNA片段连接到pFastBacHTa载体呈10μl最终体积。用载体的His-6标记，使Met胞浆域cDNA克隆克隆入位于cDNA框内的pFastBacHTa的BamHI位点，实现N-末端His-标记的蛋白的表达。一半的连接混合物(5μL)被用来转化50μl DH5α感受态大肠杆菌(E.coli)细胞(Gibco-BRL)。将转化混合物平铺在含有100μg/ml氨苄西林的LB琼脂糖平板上并于37℃培养16小时。克隆被选自这些平板，并生长于含100μg/ml氨苄西林的LB肉汤16小时。用Qiagen质粒DNA纯化试剂(Qiagen；Valencia，CA)分离质粒DNA，通过用BamHI/XhoI消化筛选的克隆。具有适当大小的释放自消化的片段的三种克隆提供给ACGT，Inc作DNA序列分析。
一种克隆，pFastBacHTmetkin-15，在经克隆的c-Met胞浆域不含突变，并用来产生表达的重组杆状病毒。按照制造商特定的方案，采用Gibco BRL Bac-To-Bac系统产生重组杆状病毒。简言之，对于MetcDNA插入，DH10Bac细胞被pFastBacHTmetkin-15转化，克隆被选择，病毒DNA被PCR分离和筛选。Sf9昆虫细胞被重组杆状病毒DNA转染。含PO病毒原液的介质被收集，并用于2个后继病毒扩增循环。
多个浓度的经扩增病毒原液被用来感染Sf9细胞。转染后24、48和72小时收获细胞。感染的Sf9细胞被溶解于50mM Tris-HCl pH 8.0、150mM NaCl、150mM咪唑、1.0mM PMSF、0.5％ NP40、3.5μg/ml亮抑酶肽、3.5μg/ml抑肽酶，用BCA试验(Pierce；Rockford，IL)确定总蛋白浓度。细胞裂解产物经4-15％ SDS-PAGE分离，再转移至硝基纤维素膜，进行免疫印迹法分析。用抗-His6抗体探查硝化纤维素印迹，确认His标记met激酶蛋白的表达。通过检测收集自不同感染条件的细胞裂解产物确定针对Sf9细胞比率的最佳病毒浓度。最大蛋白回收出现在感染后48小时。
进行Met受体的His标记胞浆域的小范围表达/纯化。经表达Met受体的His标记胞浆域的重组杆状病毒转染的Sf9昆虫细胞被溶解于含有50mM Tris-HCl pH 8.0、150mM NaCl、150mM咪唑、1.0mMPMSF、0.5％ NP40、3.5μg/ml亮抑酶肽、3.5μg/ml抑肽酶的缓冲液中。4℃下旋转，用5ml Ni-琼脂糖珠(Qiagen)的PBS 50％溶液培养细胞裂解产物2小时，俘获His标记蛋白。将含有结合至Ni-琼脂糖珠的His标记蛋白的细胞裂解产物装载入10ml柱。压紧Ni-琼脂糖珠，使上清液流出。再用60ml洗涤缓冲液(等同于裂解缓冲液)洗涤经压紧的柱。将5ml洗脱缓冲液(50mM Tris-HCl pH 8，150mMNaCl，150mM咪唑，1.0mM PMSF)加至柱中和收集10流份(各0.5ml体积)。小等分部分的各部份被4-15％ SDS-PAGE分离，或者被转移至针对免疫印迹分析的硝基纤维素或为Coomassie染色法而加工(Bio-Safe SafeCoomassie，Bio-Rad)。相对于免疫印迹法检测的His标记蛋白而言，Coomassie染色凝胶上的主要蛋白带具有对于His6-MetKin(52kD)的适当的大小，用Coomassie染色凝胶估算出的蛋白浓度约为2mg/ml。
重组病毒原液被转移至合同实验室Pan Vera(Madison，WI)以足以高通量筛选的量进行His6-MetKin的大规模表达和纯化。60L放大和4步骤纯化流程生成98.4mg大于95％纯度的蛋白。
实施例B c-Met的Delfia自身磷酸化激酶测定 开发DELFIA时间分辨荧光测定法，筛选减少c-Met自身磷酸化进而激酶活性的化合物。DELFIA测定法是非放射性的。c-Met的自身磷酸化通过被偶合到铕标记的抗磷酸化酪氨酸的抗体测定。
这种形式的主要优点是，采用将6-his标记结合在重组Met激酶上的Ni-螯合平板，促使自身磷酸化测定的发展。自身磷酸化测定允许人们采用已知的用于磷酸化的底物，Met激酶自身。DELFIA Met自身磷酸化测定对50:1的过量噪声比信号极为敏感。
筛选的试验程序如下。经纯化的c-Met的His6标记胞浆域被酶稀释缓冲液(50mM Tris-HCl，pH 8.0，0.1％ BSA)稀释至500ng/ml，并以每孔50μl的体积被分配至测定板上。选择采用涂覆黑色不透明HisGrab镍的96孔板(Pierce，Rockford，I1)。接着，将2.5μl在40％DMSO中的化合物加至试验孔，只有40％ DMSO的2.5μl加至阴性对照孔。一加入50μl反应缓冲液(50mM Tris-HCl，pH 8.0，10mM MgCl2，0.1mM Na3 VO4，1mM DTT，1μM ATP)，就启动自身磷酸化反应。室温下，培养板1小时，随后以200μl/孔的PBS洗涤2次。用Delfia AB缓冲液(Perkin Elmer，Boston，MA)稀释结合铕的抗磷酸化酪氨酸抗体(来自Perkin Elmer的Eu-PY20)至50ng/ml，以100μl/孔的体积加至96孔测定板中，室温下，培养2小时。然后各用200μl/孔的Delfia洗涤缓冲液(Perkin Elmer)洗涤实验板4次。最后洗涤后，将150μlDelfia强化液(Perkin Elmer)加至实验板的各个孔并于室温下培养1小时。用带360激发、620发射和410二色性的过滤器装置的LJL Analyst仪(Molecular Devices；Sunnyvale，CA)读取各板。用Graphpad Prism软件(Graphpad Software；San Diego，CA)计算IC50值。
实施例C c-Met磷酸化的基于细胞的ELISA实验 开发基于细胞的ELISA实验，评估细胞中化合物抑制HGF刺激的c-Met磷酸的能力。
将S114细胞以每孔5X104的浓度接种于96孔组织培养处理过的皿中。16-20小时培养后，除去培养基，并用无血清的培养基(补充有0.5％ BSA)替换。再加入测试化合物，用细胞培养60分钟，随后用15分钟加入1μl 2.5μg/μl的HGF。然后加入25μl冰冷的3xRIPA缓冲液(50mMTris HCl，pH 7.5，1％Triton，1％ IGEPAL，0.25％脱氧胆酸，150mM NaCl，1mM原矾酸钠，1mM氟化钠)和1片蛋白酶合剂抑制剂(Boheringer Mannheim，目录编号1697498)溶解细胞。再将细胞裂解产物移至涂布有抗-c-Met受体抗体AF276(R&D Systems)的NUNCMaxisorp板中。室温下，用涂布有抗体的板培养细胞溶解产物1小时。用Delfia洗涤缓冲液(Perkin Elmer，Boston，MA)和100μl 0.25ug/ml铕结合的PT66抗磷酸化酪氨酸抗体(Perkin Elmer，Boston，MA)洗涤各板。在室温下培养另1小时后，用Delfia洗涤缓冲液(Perkin Elmer)洗涤板3次。最终洗涤后，加入150ml Delfia强化溶液(Perkin Elmer)，培养60分钟。用带有360激发、620发射和410二色性的过滤器装置的LJL Analyst仪(Molecular Devices；Sunnyvale，CA)读取各板。用Graphpad Prism软件(Graphpad Software；San Diego，CA)计算IC50值。
实施例D HepG2细胞分散试验(Cellular Scatter Assay) 导言 人生长因子(HGF)及其受体(c-Met)涉及细胞移动。事实上，根据其对某些细胞类型的有力的运动作用，HGF也被称为分散因子(SF)。细胞运动对肿瘤病变的病理过程，最重要的是，对远离最初肿瘤转移灶的建立和新血管的形成(血管生成)是危险的。一种治疗假设是，各细胞类型的这种运动可通过采用c-Met激酶抑制剂而被钝化或被消除(参见Jiang，W.C，Martin，T.A.，Parr，C，Davies，G.，Matsumoto，K.和Nakamura，T.肿瘤学/血液学的重要综述53(2005)35-69.并引用于本文)。还应该注意到，在其它疾病状态中，细胞运动尤其是针对血管生成的细胞运动是重要的。
方法 用ACEA Biosciences Inc.(San Diego，CA)的实时细胞电子感应系统(RT-CES)测量细胞分散。RT-CES系统采用专门的RT-ACE微量滴定板(分类号RCD96，ACEA Biosciences Inc.)非侵入地实时定量细胞状态。细胞与板表面的相互作用经微电子传感器阵列而积分，导致细胞-电极阻抗响应的产生。较高的阻抗值表明更多的细胞依附，因而细胞分散更少。
将50μl实验介质(补充有10％ FBS的MEM，2mML-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，1mM丙酮酸钠和0.1mM非必需氨基酸)加入96-孔RT-ACE板中，并在RT-CES纪录30min。将50μl HepG2细胞(分类号HB-8065，ATCC)加入各孔(50μl@104个细胞/ml＝5000个细胞/孔)。用RT-CES读取板并培养20-24小时。20-24小时培养后，将50μl含不同浓度的测试化合物的实验介质加入各孔并培养1小时。最后，将含有160ng/ml HGF的50μl实验介质加入各孔(40ng/ml，以200μl)。培养该板，用RT-CES读取20-24小时，每15分钟纪录一次。阳性对照是无化合物的HGF而阴性对照是无化合物的非HGF。用成双的重复孔进行所有测定，用GraphPad Prism软件(GraphPad Software；SanDiego，CA)计算IC50值。
实施例E U87MG胶质母细胞瘤异种移植模型 导言 U87MG胶质母细胞瘤细胞系(Piedmont Research Center LLC)表达c-Met受体并响应于人生长因子(HGF)。该研究关注用e-Me抑制剂处理U87MG胶质母细胞瘤异种移植模型是否有效。该研究利用肿瘤生长抑制(TGI)试验，以测试口服(p.o.)化合物单一治疗各组的15只裸鼠。用溶媒，20％羟基丙基β-环糊精(HPBCD)处理对照组。全部处理于小鼠携带建立的皮下(s.c.)U87MG肿瘤的第一天(D1)开始。
方法和材料 小鼠 10-11周龄的雌性无胸腺裸鼠(Harlan)在研究的第一天的体重范围为18.1-25.0g。动物随意饮水(反渗透，1ppm Cl)和由18.0％粗蛋白、5.0％粗脂肪和5.0％粗纤维组成的NIH 31 Modified and Irradiated Lab

。21-22℃(70-72℉)，40-60％湿度下，12-小时灯光循环，将鼠安置于静态微型隔音体中的经辐照的

实验室动物寝具上。全部动物安置于美国实验动物护理评估和鉴定协会(AAALAC)充分认可的实验动物医学设施中。涉及动物的所有程序按照NIH实验室动物护理和使用指南进行，所有方案被国内动物护理和使用委员会(IACUC)认可。
肿瘤种植 从通过在无胸腺裸鼠中连续移植所维持的U87MG-人胶质母细胞瘤片段启动异种移植。各测试小鼠接受移植于右侧腹的皮下U87MG瘤片段(1mm3)，肿瘤生长平均大小被监控于接近200mm3。12天后，研究的第1天，将动物分为4组(n＝12-15鼠/组)，各肿瘤体积介于172-352mm3范围内，全组肿瘤平均体积为216mm3。用下式计算肿瘤体积
其中w＝肿瘤的宽度(mm)和l＝肿瘤的长度(mm)。假定1mg等于1mm3肿瘤体积，估算肿瘤重量。
药物治疗 用由水中的20％羟基丙基β-环糊精(HPBCD)组成的溶媒每周新鲜制备本发明化合物的给药溶液。在全部组中，针对各动物的体重，按比例0.2mL/20g确定给药体积。提供化合物的盐酸盐形式作为给出药剂。
肿瘤生长抑制(TGI)分析 通过下列关系，由溶媒处理的和药物治疗的小鼠的肿瘤体积中位数之间的差计算TGI，表示为溶媒处理的对照组的肿瘤体积中位数的百分比
MTV(n)被定义为n只动物的肿瘤体积中位数(MTV)，保留于当天的研究中。
毒性 研究的前5天，每天称动物体重，之后每周称两次。
频繁地检查鼠的任何不利的、与药物有关的副作用的明显迹象，观察到时，记录毒性的临床体征。可接受的毒性被定义为，研究期间少于20％的组平均体重(BW)损失，且在10只动物中不超过一只与治疗(TR)有关的死亡。如果它归因于如临床体征和/或尸检证实的治疗副作用，或者由于给药期间或最后一次给药的10天内的未知原因，死亡被归为TR。如果无证据表明死亡与药物副作用有关，则死亡被归为与治疗无关(NTR)。如果死亡原因未知，则死亡被归为未知的非治疗相关(NTRu)。
统计和图像分析 为分析中位数，采用Mann-Whitney U-试验确定各MTV间之差的统计意义。用Windows的Prism 3.03(GraphPad)进行统计分析和图像表述。对于研究的各组，以肿瘤体积中位数对时间作图表示肿瘤生长。此外，最终的肿瘤体积和最终的肿瘤生长抑制百分比(％TGI)也表示在图上或单独的直方图上(*＝p≤0.05，**＝P≤0.01，***＝p≤0.001)。U87MG肿瘤生长研究的结果表示于图1、图2和图3。
图1以30和50mg/kg的剂量，每日两次(b.i.d)，连续21天口服(p.o.)给予实施例1。两种剂量都产生皮下生长于无胸腺裸鼠的U87MG肿瘤生长的统计学意义的、剂量依赖抑制。在治疗的最后一天(第21天)，与溶媒处理组的平均肿瘤体积比较，30和50mg/kg剂量分别使平均肿瘤体积下降66％(p<0.001)和97％(p<0.001)。在50mg/kg剂量下，观察到肿瘤退缩。
图2以25、50和75mg/kg的剂量p.o给予实施例61。全部剂量产生皮下生长于无胸腺裸鼠U87MG肿瘤生长的统计学意义的、剂量依赖抑制(p<0.01)。用全部三种剂量，也可观察到肿瘤退缩。第1天，每天给予一次(q.d.)25mg/kg剂量，再b.i.d.到第12天。连续7天b.i.d.给予50mg/kg剂量，中止24小时，再q.d.到第12天。类似于50mg/kg剂量，连续7天b.i.d.给予75mg/kg剂量，中止24小时，再q.d.到第12天。
图3以25、50和75mg/kg的剂量p.o.给予实施例61。在治疗的最后一天(第12天)，以25、50和75mg/kg的剂量分别使平均肿瘤体积下降94％(p<0.01)、96％(p<0.01)和97％(p<0.01)。
第一天，一天一次(q.d.)给予25mg/kg剂量，再b.i.d.到第12天。连续7天b.i.d.给予50mg/kg剂量，中止24小时，再q.d.到第12天。如50mg/kg剂量一样，连续7天b.i.d.给予75mg/kg剂量，中止24小时，再q.d.到第12天。
实施例F S114肿瘤模型 方法 小鼠 雌性无胸腺裸鼠(CD-1，nu/nu，9-10周龄)得自Charles River实验室(Wilmington，MA)并按照NIH标准饲养。在无尘室条件下，将全部小鼠圈养(5只小鼠/笼)在保持21-22℃和40-50％湿度的室内的无菌微型隔音笼中，维持12小时光/暗循环。小鼠自由进食经辐照的标准啮齿动物饲料和水。所有动物安置于经美国实验动物护理评估和鉴定协会(AAALAC)充分认可的实验动物医学装置中。涉及动物的所有程序按照NIH实验室动物护理和使用指南进行，所有方案被国内动物护理和使用委员会(IACUC)认可。
S114肿瘤 将已经被工程改造来过表达人生长因子(HGF)和人c-Met受体的鼠科动物NIH 3T3衍生的细胞系S114繁殖于DMEM介质(LifeTechnologies(生命技术)，Bethesda，MD)。在注入前，即时洗涤细胞、并计数和悬浮于PBS中。用0.1mL传递体积中的5x106细胞在大腿的左腹股沟区对体重不小于20-21克的雌性无胸腺裸鼠皮下接种。使肿瘤生长5天。
药物治疗 小鼠口服给予20％ HPBCD中的100mg/kg化合物或溶媒(20％HPBCD，对照组)。连续4天给药。
每日新鲜制备成本发明化合物的20％HPBCD透明溶液，并如上述的那样给予。研究结束时测量体重，体重损失>10％被用作化合物耐受性缺乏的指征。不可接受的毒性被定义为研究期间的体重损失>20％。每日密切检测各个剂量下小鼠的不利的、与药物有关的副作用的明显临床体征。研究中未发现体重或行为的显著变化。
分析 研究终止的那天，得到各动物的最终肿瘤体积和最终体重。采用100％CO2使鼠无痛至死，立即完整切下肿瘤，并称重，以最终的肿瘤湿重(克)用作最初的功效端点。用Windows的Prism 3.03(GraphPad)进行统计分析和图像表现。S114肿瘤研究结果表示于图4。
图4以100mg/kg q.d.剂量p.o给予实施例61连续4天。经实施例61处理的全部5只小鼠的S114肿瘤消退。此外，在研究最后，5只鼠中的3只的肿瘤消退成不明显的、不能检测的肿瘤。
生物学数据 典型的本发明化合物的活性表示于下表。所有活性以μM表示，如果经Graphpad prism计算出的95％置信区间在2倍IC50之内，则数据被公认为有效。
治疗/预防方法 在本发明的另一方面，本发明化合物可用来抑制细胞或患者的酪氨酸激酶活性或表达，包括c-Met活性，降低激酶活性或表达，包括c-Met活性，和调节c-Met表达，或治疗患者与c-Met激酶活性或表达有关的疾病。认为c-Met活性的抑制间接调节c-Met表达。
在该方面的一个实施方案中，本发明提供降低或抑制细胞的c-Met的激酶活性和调节细胞的c-Met的表达的方法，其包括使细胞与式I化合物接触的步骤。本发明还提供降低或抑制患者c-Met的激酶活性和调节患者c-Met的表达的方法，其包括给予患者式I化合物的步骤。本发明还提供抑制细胞中的细胞增殖的方法，其包括使细胞与式I化合物接触的步骤。
可通过本领域熟知的程序，例如本文所述的c-Met激酶测定，确定细胞或患者的激酶活性或c-Met的表达。也可通过采用ELISA测定格式板，例如，本文所述的那种确定c-Met磷酸化水平，或通过蛋白质印迹法，测量细胞中的c-Met激酶活性的抑制。
用于本文的术语＂患者＂指已经成为治疗、观察或实验的对象的动物，优选哺乳动物，最优选人。
用于本文的术语＂接触＂指向细胞加入化合物，使该化合物被细胞吸收。
在该方面的其它实施方案中，本发明提供对面临(或易患)发展为细胞增殖病症或与c-Met有关的病症的风险的患者的预防和治疗方法。这类病症包括预先存在的与c-Met表达(或过表达)和/或c-Met突变有关的病症。
在一个实施例中，本发明为患者提供预防细胞增殖病症或与c-Met有关的病症的方法，其包括给予患者预防有效量的包含式I化合物和药学上可接受的载体的药用组合物。所述预防药物的给予可发生在细胞增殖病症或与c-Met有关的病症的疾病特征出现之前，以便预防疾病或病症，或者，作为选择，延缓其发展。
在另一个实施例中，本发明涉及治疗患者的细胞增殖病症或与c-Met有关的病症的方法，其包括给予患者治疗有效量的包含式I化合物和药学上可接受的载体的药用组合物。所述治疗剂的给予可发生在病症的病症特征出现的同时，以便所述治疗剂用作治疗，以抵抗细胞增殖病症或与c-Met有关的疾病。
在另一个实施例中，本发明涉及调节患者的细胞增殖病症或与c-Met有关的病症的方法，其包括给予患者治疗有效量的包含式I化合物和药学上可接受的载体的药用组合物，c-Met表达或c-Met活性的调节可起到缓解细胞增殖病症或与c-Met有关的病症的作用。
术语＂预防有效量＂指能抑制或延缓患者的病症发生的活性化合物或药物的量，它是研究者、兽医、内科医生或其它临床医生所寻求的。
用于本文的术语＂治疗有效量＂指引起患者生物学或医学响应，包括缓解要治疗的疾病或病症的病症的活性化合物或药物的量，它是研究者、兽医、内科医生或其它临床医生所寻求的。
确定本药用组合物的治疗和预防有效量的方法为本领域所知。
用于本文的术语＂组合物＂意欲包括包含特定量的特定成分的产物，及直接或间接得自特定量的特定成分组合的任何产物。
用于本文的术语＂与c-Met有关的病症＂或＂与c-Met受体酪氨酸激酶有关的病症＂将包括，涉及或与c-Met活性，例如，c-Met的过度活动相关的疾病，和伴随这些疾病的病症。术语＂c-Met过度活动＂指或者1)c-Met表达于通常不表达c-Met的细胞；2)通过通常不具有活性c-Met的细胞出现c-Met活性；3)增加的c-Met表达导致不需要的细胞增殖；或4)突变导致c-Met的组成性激活。＂与c-Met有关的病症＂的实例包括得自由于异常高的量的c-Met的c-Met的过量刺激或c-Me中的突变的病症，或得自由于c-Met中异常高的量的异常高的量的c-Met活性或c-Met突变的病症。
已知c-Met的过度活动已经涉及大量疾病，例如，细胞增殖病症、肿瘤病症和癌症的发病机制。
术语＂细胞增殖病症＂指多细胞有机体中的一种或多种细胞亚群的不需要的细胞增殖，导致有害(即，不适的或减少生命预期)于多细胞有机体。细胞增殖病症可出现于不同类型的动物和人。细胞增殖病症包括肿瘤病症(用于本文的＂肿瘤病症＂指得到异常或不受控制的细胞生长的肿瘤)和其它细胞增殖病症。
与c-Met有关的细胞增殖病症的实例包括，肿瘤和癌症-例如，遗传和散发的人乳头状肾癌、乳腺癌、直肠结肠癌、胃癌、神经胶质瘤、卵巢癌、肝细胞癌、头和颈鳞状细胞癌、睾丸癌、基底细胞癌、肝癌、肉瘤、恶性胸膜间皮瘤、黑瘤、多发性骨髓瘤、骨肉瘤、胰腺癌、前列腺癌、滑囊肉瘤、甲状腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌、尿道膀胱移行细胞癌、睾丸癌、基底细胞癌、肝癌-包括白血病、淋巴瘤、和骨髓瘤-例如，急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)、急性早幼粒细胞白血病(APL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓性白血病(CML)、慢性嗜中性细胞白血病(CNL)、急性未分化细胞白血病(AUL)、退行发育的大细胞淋巴瘤(ALCL)、幼淋巴细胞白血病(PML)、幼年粒-单核细胞白血病(JMML)、成人T细胞ALL、带三个谱系骨髓发育不良的AML(AML/TMDS)、混合谱系白血病(MLL)、骨髓增生异常综合征(MDSs)、骨髓增生性疾病(MPD)、多发性骨髓瘤、(MM)、骨髓肉瘤、非霍奇金淋巴瘤和霍奇金病(也称为霍奇金淋巴瘤)-和与新血管形成有关的疾病，例如类风湿性关节炎和视网膜病。
其中c-Met过度活动已经涉及到其发病机制的其它细胞增殖病症包括其中的c-Met活性有助于侵入/转移表型的癌症，包括其中的c-Met未过表达或另外被转变的癌症。
在本方面的又一个实施方案中，本发明包括治疗或抑制患者细胞增殖病症或与c-Met有关的病症的发生的联合疗法。联合疗法包括给予患者治疗或预防有效量的式I化合物和一种或多种其它抗细胞增殖治疗，包括化学疗法、放射疗法、基因疗法和免疫疗法。
在本发明的实施方案中，可联合化学疗法给予本发明化合物。用于本文的化学疗法指涉及化学治疗剂的治疗。大量的化学治疗剂可应用于本文所述的联合疗法中。预期作为举例的化学治疗剂包括，但不限于铂化合物(例如，顺铂、卡铂、奥沙利铂)；紫杉烷类化合物(例如，紫杉醇、多西他赛)；喜树碱化合物(伊立替康、托泊替康)；长春花属生物碱(例如，长春新碱、长春碱、长春瑞滨)；抗肿瘤核苷衍生物(例如，5-氟尿嘧啶、叶酸、吉西他滨、卡培他滨)；烷基化剂(例如，环磷酰胺、卡莫司汀、洛莫司汀、塞替派)；表鬼臼毒素/鬼臼毒素(例如，依托泊苷、替尼泊苷)；芳香酶抑制剂(例如，阿那曲唑、来曲唑、依西美坦)；抗雌激素化合物(例如，他莫昔芬、氟维司群)、抗叶酸剂(例如，培美曲塞二钠(premetrexed disodium))；去甲基化剂(hypomethylating agents)(例如，阿扎胞苷)；生物制剂(例如，吉姆单抗、西妥昔单抗、利妥昔单抗、帕妥珠单抗(pertuzumab)、曲妥单抗、贝伐单抗、埃洛替尼)；抗生素/蒽环霉素(例如，伊达比星、放线菌素D、博来菌素、柔红菌素、多柔比星、丝裂霉素C、放线菌素D、去甲柔红菌素、道诺菌素)；抗代谢药(例如，氯法拉滨、氨蝶呤、阿糖胞苷、甲氨蝶呤)；微管蛋白-结合剂(例如，考布他汀、秋水仙碱、诺考达唑)；拓朴异构酶抑制剂(例如，喜树碱)；分化剂(例如，类视色素、维生素D和维生素A酸)；维生素A酸代谢阻断剂(RAMBA)(例如，accutane(异维A酸))；激酶抑制剂(例如，黄酮类抗肿瘤药、甲磺酸伊马替尼、吉非替尼)；法呢酰基转移酶抑制剂(例如，替吡法尼(tipifarnib))；组蛋白脱乙酰化酶抑制剂；泛素-蛋白酶体途径抑制剂(例如，硼替佐米、Yondelis(从海鞘中提取的软组织肉瘤治疗药))。
其它有用的药物包括维拉帕米、钙拮抗剂，发现它们可用于与抗肿瘤药联合，建立对抗已接纳化学治疗剂的肿瘤细胞的化学敏感性和加强这类化合物对药物敏感的恶性肿瘤的功效。参见Simpson WG，钙通道阻断剂维拉帕米和癌症化学治疗.Cell Calcium.1985年12月；6(6)449-67。此外，还要考虑用于与本发明化合物联合的化学治疗剂的出现。
在本发明的另一个实施方案中，本发明化合物可与放射疗法联合给予。用于本文的＂放射疗法＂指包括使有需要的患者暴露于辐射的治疗。这类疗法为本领域的那些技术人员所知。放射疗法的适当的流程会类似于已经用于临床疗法的那些，其中的放射疗法单独或与其它化学治疗剂联合使用。
在本发明的另一个实施方案中，本发明化合物可与基因疗法联合给予。用于本文的＂基因疗法＂指靶向涉及肿瘤发展的特定基因的疗法。可能的基因治疗方案包括有缺陷的癌症-抑制基因的恢复、用对应于生长因子及其受体的基因编码的反义DNA细胞转导或转染、基于RNA的对策例如核酶、RNA诱饵、反义信使RNAs和小干扰RNA(siRNA)分子和所谓的′自杀基因′。
在本发明的其它实施方案中，本发明化合物可与免疫疗法联合给予。用于本文的＂免疫疗法＂指经这类蛋白的特异性抗体靶向涉及肿瘤发展的特殊蛋白的疗法。例如，已经将抗血管内皮生长因子的单克隆抗体用于治疗癌症。
在除了本发明化合物外还采用第二种药物时，两种药物可同时(例如，单独或归一组合物)以任一次序相继、以大约相同的时间或用分开的剂量方案给药。在后一种情况下，两种化合物将以足以确保实现有利或协同效果的一定的量和方式在一定时段内给予。应理解，组合物中各组分的优选的给药方法和顺序和各自的剂量和给予方案，将取决于与本发明化合物一起被给予的具体化学治疗剂、它们的给药途径、要治疗的特定肿瘤和要治疗的特定宿主。
本领域那些普通技术人员会理解，化学治疗试剂的适当剂量一般类似于或少于已经在临床治疗中采用的哪些，其中的化学治疗剂单独或与其它化学治疗剂联合给予。
采用常规方法并考虑本文提出的信息，本领域那些技术人员易于确定适宜的给药方法和顺序、剂量和方案。
仅作为示例，铂化合物，有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积1-500mg剂量，例如，50-400mg/m2，特别对于顺铂，以约75mg/m2的剂量和对于卡铂，以约300mg/m2给予。顺铂不经口吸收，因此必须经静脉内、皮下、瘤内或腹腔注射传递。
仅作为示例，紫杉烷类化合物有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积50-400mg，例如，75-250mg/m2的剂量，特别对于紫杉醇以约175-250mg/m2和对于多西他赛以约75-150mg/m2的剂量给予。
仅作为示例，喜树碱化合物有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积0.1-400mg，例如，1-300mg/m2的剂量，特别对于伊立替康以约100-350mg/m2和对于托泊替康以约1-2mg/m2的剂量给予。
仅作为示例，长春花属生物碱可有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积2-30mg的剂量，特别对于长春碱，以约3-12mg/m2的剂量，对于长春新碱以约1-2mg/m2的剂量和对于长春瑞滨以约10-30mg/m2的剂量给予。
仅作为示例，抗肿瘤核苷衍生物可有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积200-2500mg，例如，700-1500mg/m2的剂量给予。通常经静脉注射以介于200-500mg/m2(优选3-15mg/kg/日)的剂量采用5-氟尿嘧啶(5-FU)。有利地以约800-1200mg/m2的剂量给予吉西他滨，有利地以约1000-2500mg/m2的剂量给予卡培他滨。
仅作为示例，烷基化试剂可有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积100-500mg，例如，120-200mg/m2的剂量，特别对于环磷酰胺以约100-500mg/m2的剂量，对于苯丁酸氮芥以约0.1-0.2mg/kg体重的剂量，对于卡莫司汀以约150-200mg/m2的剂量，对于洛莫司汀以约100-150mg/m2的剂量给予。
仅作为示例，鬼臼毒素衍生物可有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积30-300mg，例如，50-250mg/m2的剂量，特别对于依托泊苷以约35-100mg/m2的剂量和对于替尼泊苷以约50-250mg/m2的剂量给予。
仅作为示例，蒽环类衍生物可有利地以每个疗程每平方米(mg/m2)身体表面积10-75mg，例如，15-60mg/m2的剂量，特别对于多柔比星以约40-75mg/m2的剂量，对于柔红菌素以约25-45mg/m2的剂量，和对于伊达比星以约10-15mg/m2的剂量给予。
仅作为示例，根据特定药物和要治疗的病况，抗雌激素化合物可有利地以每日约1-100mg的剂量给予。有利地以每日两次的5-50mg，优选10-20mg的剂量口服他莫昔芬，持续治疗足够的时间，以达到并维持疗效。有利地以每日一次约60mg的剂量口服托瑞米芬，持续治疗足够长的时间，以实现并保持疗效。有利地以每日一次约1mg的剂量口服阿那曲唑。有利地以每日一次约20-100mg剂量口服屈洛昔芬。有利地以每日一次约60mg的剂量口服雷洛昔芬。有利地以每日一次约25mg的剂量口服依西美坦。
仅作为示例，可有利地以每平方米(mg/m2)身体表面积约1-5mg的剂量或如果不同就如本领域已知的那样给予生物生物制剂。例如，有利地以每个疗程1-5mg/m2，特别是2-4mg/m2的剂量给予曲妥单抗。
例如，每个疗程可例如一次、两次或更多次地给予各种剂量，疗程可例如每7、14、21或28天重复进行。
可全身，例如，静脉内、经口、皮下、肌内、皮内或胃肠外给予患者本发明化合物。也可局部地给予患者本发明化合物。局部递药系统的非限定性实例包括采用腔内医疗装置，它们包括血管内递药插管、导线、药用支架(stents)和腔内涂膜术(endoluminal paving)。
本发明化合物可进一步与靶向药物联合给予患者，以实现在靶位点的化合物的局部高浓度。此外，可根据保持药物或试剂与靶组织接触几小时到几周的目的，将本发明化合物配制为快速释放或缓慢释放制剂。
本发明还提供包含与药学上可接受的载体在一起的式I化合物的药用组合物。药用组合物可包含介于约0.1mg-1000mg，优选约100-500mg的化合物，并可组成适于所选择的给药方式的任何形式。
短语＂药学上可接受的＂指当适宜地给予动物或人时不产生不利的、过敏的或其它不需要的反应的分子实体和组合物。兽医用途同样包括在本发明内，＂药学上可接受的＂制剂包括临床和/或兽医应用的制剂。
载体包括必须的和惰性的药用溶媒，包括，但不限于，粘合剂、悬浮剂、润滑剂、香料、甜味剂、防腐剂、染料和包衣。适于口服的组合物包括固体形式，例如丸剂、片剂、囊片剂、胶囊剂(分别包括即刻释放、定时释放和持续释放制剂)、颗粒剂和散剂，和液体形式，例如溶液剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和混悬剂。用于胃肠外给药的形式包括灭菌溶液剂、乳剂和混悬剂。
本发明药用组合物还包括缓慢释放本发明化合物的药用组合物。该组合物包括缓释载体(典型地，聚合物载体)和本发明化合物。
可生物降解的缓释载体为本领域所知。这些材料可形成俘获活性化合物于其中并在适宜环境(例如，含水、酸性、碱性等)下缓慢降解/溶解，从而降解/溶解于体液并于其中释放活性化合物的颗粒。
颗粒优选纳米颗粒(即，介于约1-500nm直径，优选约50-200nm直径，最优选约100nm直径)。
本发明还提供制备本发明药用组合物的方法。根据常规药用混合技术，作为活性成分的式I化合物与药用载体紧密混合，该载体可根据例如，经口或胃肠外，例如肌内给药所希望的制剂形式而呈多种形式。在制备口服剂型的组合物中，可采用任何有用的药用介质。因此，例如，对于液体口服制剂，例如，混悬剂、酏剂和溶液剂，适用的载体和添加剂包括水、二醇、油、醇、矫味剂、防腐剂、着色剂等；例如，对于固体口服制剂，例如，散剂、胶囊剂、囊片剂、软胶囊剂和片剂，适用的载体和添加剂包括淀粉、糖、稀释剂、粒化剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。由于它们给药方便，片剂和胶囊剂代表最有利的口服剂量单位形式，在这种情况下，显然采用固体药物载体。如需要，片剂可经标准技术包糖衣或包肠溶衣。对于胃肠外给药，载体通常会包括灭菌水，尽管例如，针对例如帮助溶解或防腐目的的其它成分也可被包括。也可制备注射混悬剂，这种情况下，可采用适当的液体载体、助悬剂等。在缓释制剂中，缓释载体，典型地聚合物载体和本发明化合物首先溶解或分散于有机溶剂中。再将所得到的有机溶液加入含水溶液中，得到水包油型乳剂。含水溶液优选包括表面活性剂。随后，将有机溶剂从水包油型乳剂中蒸发出，得到含有缓释载体和本发明化合物的颗粒的胶状悬液。
本文的药用组合物的每剂量单位，例如，片剂、胶囊剂、散剂、注射剂、茶匙剂等，将含有必需传递上述有效剂量的量的活性成分。本文的药用组合物的每剂量单位，例如，片剂、胶囊剂、散剂、注射剂、栓剂、茶匙剂等，将含有介于约0.01mg-200mg/kg体重/每日。该范围优选介于约0.03-约100mg/kg体重/每日，最优选介于约0.05-约10mg/kg体重/每日。可以每日1-5次的方案给予化合物。然而，可根据患者的需要、要治疗的病况的严重性和所用的化合物，改变剂量。可采用每日给予或周期后给药的用法。
对于经口、胃肠外、鼻内、舌下或者直肠给药或对于经吸入或吹入给药，这些组合物优选呈单位剂型，例如片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、灭菌胃肠外溶液剂或混悬剂、计量气雾剂或液体喷雾剂、滴剂、安瓿、自注射剂装置或栓剂。作为选择，组合物可呈适于每周一次或每月一次给药的形式；例如，活性化合物的不溶盐，例如癸酸盐可适于提供肌内注射的贮库制剂。为制备固体组合物，例如片剂，使主要活性成分与药用载体，例如，常规制片成分，例如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸氢钙或树胶和其它药用稀释剂，例如，水混合，形成含有本发明化合物或其药学上可接受的盐的均匀混合物的固体前制剂组合物。当指这些前制剂组合物均匀时，意味着活性成分被均匀分散至整个组合物中，以至组合物可易于再分入同样有效的剂型，例如片剂、丸剂和胶囊剂。再将这种固体前制剂组合物再分入含有介于0.1-约500mg的本发明活性成分的上述类型的单位剂型。新的组合物的片剂或丸剂可被包衣或以其它方式混合，以提供产生延长作用的优点的剂型。例如，片剂或丸剂可包括内剂量和外剂量组分，后者呈包封在前者之上的形式。这两种组分可用肠溶层分开，肠溶衣用来帮助在胃中抵抗崩解，使内组分完整通过十二指肠或被延缓释放。多种材料可用于这类肠溶层或包衣，这类材料包括大量与诸如虫胶、乙酰基醇和醋酸纤维素的原料聚合的酸。
其中式I化合物可为口服或注射而混合的液体形式包括，含水溶液、适当增香的酏剂、含水或含油混悬剂和用食用油例如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油及酏剂和类似的药用溶媒增香的乳剂。适于含水混悬剂的分散和悬浮剂包括合成和天然树胶，例如，黄蓍胶、阿拉伯胶、藻酸盐、右旋糖酐、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮或明胶。呈适当地矫味的悬浮或分散剂的液体形式还可包括合成和天然树胶，例如，黄蓍胶、阿拉伯胶、甲基-纤维素等。对于胃肠外给药，需要灭菌混悬液和溶液。当需要静脉给药时，希望是通常含有适当防腐剂的等渗制剂。
有利地，式I化合物可以单一的日剂量给予，或者整个日剂量被分为每天2、3或4次的分开的剂量给予。此外，可通过局部采用适当的鼻内溶媒的鼻内形式或经本领域那些普通技术人员熟知的透皮贴剂给予本发明化合物。对于以经皮递药系统给药，当然，整个剂量方案的给药会是连续的而不是间歇的。
例如，对于呈片剂或胶囊形式的口服给药，可使活性药物组分与经口的无毒的药学上可接受的惰性载体，例如醇、甘油、水等合并。此外，当希望或必需时，也可将适当的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。适当的粘合剂包括，不限于，淀粉、明胶、天然糖例如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶例如阿拉伯胶、黄蓍胶或油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、醋酸钠、氯化钠等。崩解剂包括，不限于，淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。
每位成人每日的本发明产物的日剂量可在1-5000mg的广泛的范围变化。对于要治疗的患者的病症调节的口服给药，优选以含有0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、200、250和500毫克的活性成分的片剂形式提供组合物。通常以介于约0.01mg/kg-约200mg/kg体重/每日的剂量水平提供有效量的药物。尤其是，介于约0.03-约15mg/kg体重/每日，和更特别地，介于约0.05-约10mg/kg体重/每日的范围。本发明化合物以每天至多4次或多次，优选每天1-2次的剂量方案给药。
给药的最佳剂量易于为本领域技术人员确定，并随所用的特定化合物、给药方式、制剂浓度和病况的发展而变化。此外，包括患者年龄、体重、膳食和给药时间在内的与要治疗的特定患者有关的因素会导致调节剂量的需要。
也可以脂质体递药系统，例如小单层脂质体、大单层脂质体和多层脂质体的形式给予本发明化合物。脂质体可形成自大量指质，包括，但不限于两亲脂质，例如磷脂酰胆碱、鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、心磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸类、磷脂酰肌醇、二酰基三甲铵丙烷、二酰基二甲铵丙烷和硬脂胺、中性脂例如甘油三酸酯和它们的组合物。它们可含或不含胆固醇。
也可局部给予本发明化合物。可利用任何递药装置，例如血管内递药插管、导线、药用支架和腔内涂膜术。这类装置的递药系统可包括以给予者控制的速度传递化合物的局部灌注插管。
本发明提供包括管腔内医疗装置，优选支架和本发明化合物的治疗剂的递药装置。
术语＂支架＂指可经插管传递的任何装置。支架通常用来预防由于物理异常，例如手术损伤引起的血管组织有害的向内生长造成的血管闭合。它通常具有适于放置在管腔内部以减轻阻塞的管状的、展开的点阵类型结构。支架具有与内腔壁接触的表面和暴露于内腔的表面。接触内腔壁的表面是管的外表面，暴露于内腔的表面是管的内表面。支架可为聚合物、金属或聚合物和金属，它任选可生物降解。
通常，以非膨胀形式将支架插入内腔，然后自行或在第二种装置的帮助下原位膨胀。经采用固定插管的成形术球囊，球囊在变窄的血管或身体通道中膨胀，以剪切和破坏与血管的壁组分有关的阻塞，从而得到加大的内腔，出现典型的膨胀方法。可采用如同在美国6,776,796(Falotico等)中所述的那样的自我膨胀支架。预防发炎和增殖的支架与药物、试剂或化合物的组合可提供针对成形术后再狭窄的最有效的治疗。
可以多种方式和利用任何生物相容性材料，将本发明化合物结合进入或粘附于支架。在一个示例性实施方案中，将化合物直接结合进聚合物基体，例如聚合物聚吡咯中，随后涂布在支架的外表面上。经通过聚合物的扩散，从基体洗脱化合物。支架和在支架上涂布药物的方法在本领域中有详细讨论。在另一个示例性实施方案中，首先用作为基层(包含化合物溶液、乙烯共乙烯基醋酸酯和聚丁基甲基丙烯酸酯)涂布支架。然后，进一步用外层(只包含聚丁基甲基丙烯酸酯)涂布支架。外层起到扩散屏障的作用，以防止化合物被太快地洗脱并进入周围组织。外层或顶层的厚度决定化合物从基体的洗脱速度。支架和涂布方法详细讨论于WIPO出版物WO9632907、美国公布号2002/0016625中，并引用于本文。
本发明化合物的溶液和生物相容性材料/聚合物可以多种方式结合进支架或结合于其上。例如，可将溶液喷至支架上，或者可将支架浸入溶液。在一个优选实施方案中，将溶液喷到支架上，再使之干燥。在另一个示例性实施方案中，可使溶液带一种极性的电荷，而支架带相反极性的电荷。用这种方式，溶液和支架将相互吸收。在采用这类喷雾方法中，可减少浪费并可实现对涂层厚度的更多的控制。化合物优选仅依附于支架的与一种组织接触的外表面。然而，对于某些化合物，整个支架可被涂布。施加于支架的化合物的剂量和控制药物释放的聚合物涂层的组合在药物的效力方面是重要的。化合物优选在支架上保留至少3天至不超过约6个月或更久，优选介于7-30天。
任何不可腐蚀的生物相容性聚合物都可用于与本发明化合物的组合。重要的是注意到，不同的聚合物可用于不同的支架。例如，上述乙烯-共-乙烯基醋酸酯和聚丁基甲基丙烯酸酯基质与不锈钢支架配合很好。可更加有效地利用与形成自其它材料，包括表现出超级弹性的材料，例如镍和钛的合金的支架在一起的其它聚合物。
冠状动脉成形术后的再狭窄引起显著的发病率和死亡率。再狭窄经包括弹性回缩、血栓形成、内膜增生和细胞外基质重塑的4个过程的组合发生。最近已经鉴定几种生长因子在这些导致再狭窄的过程中起作用。参见Schiele TM等，2004，＂血管再狭窄-努力治疗.＂ExpertOpin Pharmacother.5(11)2221-32。血管平滑肌细胞(VSMC)表达c-Met受体。暴露于肝细胞生长因子的c-Met配体刺激这些细胞表现出迁移表型。参见Taher等，肝细胞生长因子引发信号传导级联介导的血管平滑肌细胞迁移.Biochem Biophys Res Commun.(2002)298(1)80-6；Morishita R，Aoki M，Yo Y，Ogihara T.作为心血管激素的肝细胞生长因子心血管疾病发病机制中的HGF的作用.Endocr J.(2002)6月；49(3)273-84。既然VSMC从介质迁移到动脉内膜在动脉粥样硬化和再狭窄的发展中起作用，就认为c-Met激酶活性拮抗剂在这些疾病的治疗中呈现出可行的治疗方案。
因此，本发明提供治疗与c-Met有关的疾病，包括在血管壁内的再狭窄、内膜增生或炎症的方法，其包括控制递药、通过从管腔内医疗装置，例如支架释放治疗有效量的本发明化合物。
将支架导入体内腔的方法是熟知的，优选采用插管将涂布有本发明化合物的支架导入。
本领域普通技术人员明白，根据支架植入的位置，各方法会稍有不同。对于冠状动脉支架植入，带支架的球囊插管被插入冠状动脉，支架被定位于所希望的位置。对球囊充气，胀开支架。随着支架膨胀，支架接触内腔壁。一旦定位支架，球囊放气并除去。支架保持在与内腔接触的表面的位置，使化合物直接接触内腔壁表面。如需要，支架植入可伴随抗凝治疗。
用于支架的本发明化合物的最适宜传递条件随所用的不同的局部递药系统，以及所用化合物的性质和浓度而可有变化。可被优化的条件包括，例如，化合物浓度、传递体积、传递速度、血管壁的渗透深度、最接近的鼓胀压力、穿孔的数量和大小以及递药插管球囊的适合性。对于在创伤部位的平滑肌细胞增殖的抑制，可例如，通过平滑肌细胞的增殖能力，或通过改变血管阻力或内腔直径优化条件，如所测量的那样使再狭窄引起的显著的动脉阻塞不会发生。可根据来自动物模型研究的数据，用常规计算方法，确定最佳条件。
提供本发明化合物的另一个供选择的方法是可通过使化合物结合到靶向药物，靶向试剂指引结合到化合物意欲的作用部位，即，结合到血管内皮细胞或结合到肿瘤细胞。可采用抗体和非抗体靶向药物。由于靶向试剂及其相应的结合配体间的特定作用，可以在或邻近靶位以高的局部浓度给予本发明化合物，从而更加有效地治疗靶位的病症。
抗体靶向试剂包括抗体或它的抗原-结合片段，它们结合到肿瘤细胞、肿瘤血管或肿瘤间质的可靶向的或可到达的组分。肿瘤细胞、肿瘤血管或肿瘤间质的＂可靶向的或可到达的组分＂，优选为表面表达的、可及表面的或表面定位的组分。抗体靶向试剂还包括抗体或其抗原-结合片段，它们与释放自坏死肿瘤细胞的细胞内组分结合。这类抗体优选单克隆抗体或其抗原-结合片段，它们结合于不溶细胞内抗原，而所述抗原出现在可被介导为可渗透的细胞中或几乎所有肿瘤和正常细胞的血影细胞(cell ghosts)中，但不出现和可及于哺乳动物的正常活细胞的外部。在本发明中，可靶向的或可及的组分可为c-Met受体，因为它是可及的并表达在靶组织上或附近。
用于本文的术语＂抗体＂意欲泛指任何免疫学结合剂，例如IgG、IgM、IgA、IgE、F(ab′)2、单价片段例如Fab′、Fab、Dab以及工程抗体，例如重组抗体、人抗体、双特异性抗体等。抗体可为多克隆或单克隆的，尽管优选单克隆的。存在本领域已知的抗体的多种排列，它们对事实上的任何固体肿瘤类型的细胞表面具有免疫学特异性(参见Thorpe等的美国专利号5,855,866中对固体肿瘤的单克隆抗体的概述表)。产生和分离抗肿瘤抗体的方法为本领域技术人员所知(Thorpe等的美国专利号5,855,866和Thorpe等的美国专利号6,34,2219)。
将治疗剂部分结合到抗体的技术是熟知的，参见，例如，Reisfeld等(编辑)的单克隆抗体和癌症治疗中的Amon等的＂癌症治疗中的药物的免疫靶向的单克隆抗体＂，243-56页(Alan R.Liss，Inc.1985)；Robinson等(编辑)的控制递药(2版)中的Hellstrom等的＂递药抗体＂，623-53页(Marcel Dekker，Inc.1987)；Pinchera等(编辑)的单克隆抗体′84生物学和临床应用中的Thorpe，＂癌症治疗中的细胞毒试剂的抗体载体综述＂，475-506页(1985)。类似技术也可用来将本发明化合物结合到非抗体靶向剂。
本领域的那些技术人员应知道，或能确定与非抗体靶向剂，例如小分子、寡肽、多糖或其它聚阴离子化合物形成缀合物的方法。
尽管在血液中相当稳定的连接部分可用来使本发明化合物连接于靶向剂，但优选可生物学释放的键和/或可选择性裂解的间隔区或接头。＂可生物学释放的键＂和＂可选择性裂解间隔区或接头＂仍在循环中具有相当的稳定性，却仅仅或优先在某些条件下，即，在某些环境内或与特定试剂接触中，是可释放的、可裂解的或可水解的。这类键包括，例如，如美国专利号5,474,765和5,762,918中所描述的二硫键和三硫化物键和酸不稳定键，和酶敏感键，包括如美国专利号5,474,765和5,762,918中所描述的肽键、酯、酰胺、磷酸二酯和葡糖苷键。这类选择性释放设计性质促进化合物从预计靶位上的缀合物上持续释放。
本发明提供包含缀合到靶向剂和药学上可接受的载体的有效量的本发明化合物的药用组合物。
本发明还提供还提供治疗与c-Met有关的病症，尤其是肿瘤方法，其包括给予患者结合到靶向剂上的治疗有效量的式I化合物。
当采用蛋白例如抗体或生长因子或多糖作为靶向剂时，优选以可注射组合物形式给予它们。可注射抗体溶液将经2分钟-约45分钟，优选10-20分钟注入静脉、动脉或注入脊髓液。在某些情况下，对限定在靠近皮肤的特定区域和/或靠近特定体腔的肿瘤，皮内和腔内给药是有利的。此外，鞘内给药可用于位于脑中的肿瘤。
结合到靶向剂的治疗有效剂量的本发明化合物取决于个体、疾病类型、疾病状态、给药方法和其它临床因素。采用来自动物模型的数据易于确定有效剂量。患有实体瘤的实验动物经常在转变为临床环境前用来优化适当的治疗剂量。已知这类模型在预测有效的抗癌方案中是非常可靠的。例如，患有实体瘤的小鼠广泛用于临床前试验，以确定给予有益的抗肿瘤作用，同时毒性最小的治疗剂的作用范围。
尽管前述说明书用为了说明而提供的实施例论述本发明的原则，但应明白，本发明的实现包括来自下列权利要求及其等价物范围的全部的通常变化、修改和/或修饰。
权利要求
1.一种式I化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体，其中
R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-基，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代；
其中的Ra是-NH2、卤素、烷氧基、烷基醚、烷硫基、烷基磺酰基、苯基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂环基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、烷基、氨基烷基、烷基氨基、苯基、杂芳基、氰基、链烯基、炔基、环烷基、杂环基、-CO2-烷基、-C(O)-Rb、-C(1-4)烷基-吗啉基、-C(1-4)烷基-哌啶基、-C(1-4)烷基-哌嗪基、-C(1-4)烷基-N＇-甲基哌嗪基、-C(1-4)烷基-Rb、-C(O)NH-C(1-4)烷基-Rb或-C(O)NRcRd；
其中的Rb是杂环基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、-OH、-O烷基、-NH2、-NH烷基或-N(烷基)2；
Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基；
或者Rc和Rd可一起形成5-7元杂环，其任选含有选自O、NH、N(烷基)、SO、SO2或S的第二个杂部分；其中所述Rc-Rd杂环任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代；
A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基和苯并稠合的杂环基；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的1-3个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-N(CH3)2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基；
R5和R6独立选自H、F、C1-6烷基、-OH、-OC1-6烷基、-NHC1-6烷基或-N(C1-6烷基)2；
或者R5和R6可共同形成C3-5环烷基环、吖丙啶基环，或者，环氧基环；和
R7和R8是H、卤素或C1-6烷基。
2.权利要求1的化合物，其中的R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被1、2或3个Ra取代基取代；
R7和R8是H。
3.权利要求2的化合物，其中
Rc和Rd独立选自H、苯基、杂芳基或C1-6烷基，其中所述C1-6烷基可任选被选自下列的一个取代基取代-N(CH3)2、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、烷基磺酰基、-SO2NH2、烷基氨磺酰、羟基和烷氧基；或者Rc和Rd一起可形成选自下列的5-7元杂环哌啶基、吗啉基和哌嗪基，其中所述哌嗪基任选被烷基、-SO2烷基或-C(O)烷基取代。
4.权利要求3的化合物，其中
R5和R6独立选自H、F或-CH3；或者R5和R6可共同形成环丙基环。
5.权利要求4的化合物，其中
A是选自下列的环苯基、单或双环杂芳基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基和苯并稠合杂环基；其中所述苯基、杂芳基或苯并稠合杂环基任选被独立选自下列的一个取代基取代-OH、烷基、苯基、杂芳基、烷氧基、-CN、卤素、硝基、-NH2、-N(CH3)2、-NHC(O)NHC1-6烷基和-NHC(O)C1-6烷基。
6.权利要求5的化合物，其中
A是选自下列的环2，3二氢苯并呋喃-5-基、喹啉-6-基、喹啉-6-基-N-氧化物、2-氨基苯并噻唑-6-基、4-甲氧基苯基、3-(4-甲氧基-苄基)-3H-喹唑啉-4-酮-6-基、喹唑啉-4-酮-6-基和4-羟基苯基。
7.权利要求6的化合物，其中
R1是单或双环杂芳基或吡啶-2-酮-5-基，其中所述杂芳基任选被一个Ra取代基取代。
8.权利要求7的化合物，其中
R1是噻吩-2-基、噻唑-2-基、吡唑基、咪唑基、吡啶-2-酮-5-基或吡啶基，其中所述噻吩-2-基、噻唑-2-基、吡唑基、咪唑基和吡啶基可任选被一个Ra取代基取代。
9.权利要求8的化合物，其中
R5和R6独立选自H或F。
10.一种选自下列的化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体。
11.一种选自下列的化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体。
12.一种下列化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体。
13.一种下列化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体。
14.一种下列化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体。
15.一种下列化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体。
16.一种下列化合物
及其N-氧化物、前药、药学上可接受的盐、溶剂合物和立体化学异构体。
17.一种药用组合物，其包含权利要求1-16中任一项的化合物和药学上可接受的载体。
18.权利要求1-16中任一项要求的化合物，其用作药物。
19.权利要求1-16中任一项要求的化合物在制备治疗细胞增殖性疾病的药物中的用途。
20.一种降低患者c-Met激酶活性的方法，其包括给予患者权利要求1-16的化合物的步骤。
21.一种抑制患者c-Met激酶活性的方法，其包括给予患者权利要求1-16的化合物的步骤。
22.一种调节患者c-Met表达的方法，其包括给予患者权利要求1-16的化合物的步骤。
23.一种预防患者的与c-Met有关的疾病的方法，其包括给予患者包含权利要求1-16的化合物和药学上可接受的载体的预防有效量的药用组合物。
24.一种预防患者的与c-Met有关的疾病的方法，其包括给予患者包含权利要求1-16的化合物和药学上可接受的载体的治疗有效量的药用组合物。
25.一种调节患者的与c-Met有关的疾病的方法，其包括给予患者包含权利要求1-16的化合物和药学上可接受的载体的预防有效量的药用组合物。
26.权利要求23的方法，其还包括给予化学治疗药。
27.权利要求23的方法，其还包括给予基因疗法。
28.权利要求23的方法，其还包括给予免疫疗法。
29.权利要求23的方法，其还包括给予放射疗法。
30.权利要求24的方法，其还包括给予化学治疗剂。
31.权利要求24的方法，其还包括给予基因疗法。
32.权利要求24的方法，其还包括给予免疫疗法。
33.权利要求24的方法，其还包括给予放射疗法。
34.权利要求25的方法，其还包括给予化学治疗剂。
35.权利要求25的方法，其还包括给予基因疗法。
36.权利要求25的方法，其还包括给予免疫疗法。
37.权利要求25的方法，其还包括给予放射疗法。
38.一种治疗与c-Met有关的疾病的方法，其包括通过从管腔内医疗装置中释放，控制传递治疗有效量的权利要求1-16的化合物。
39.一种治疗细胞增殖性疾病的方法，其包括通过从管腔内医疗装置中释放，控制传递治疗有效量的权利要求1-16的化合物的控制传递。
40.权利要求38的方法，其中所述管腔内医疗装置包括支架。
41.权利要求39的方法，其中所述管腔内医疗装置包括支架。
42.一种药用组合物，其包含与靶向药物缀合的有效量的权利要求1-16的化合物和药学上可接受的载体。
43.一种治疗与c-Met有关的疾病的方法，其包括给予患者与靶向药物缀合的治疗有效量的权利要求1-16的化合物。
44.一种化学治疗剂与权利要求1-16中任一项要求的化合物的组合。
45.一种制备权利要求1的化合物的方法，所述方法包括使式IV化合物
与式V化合物反应
其中X是Cl或I或Br，和Y是锌酸盐、硼酸、硼酸酯或锡烷。
46.一种制备权利要求1的化合物的方法，所述方法包括使式III化合物
与式VI化合物反应
47.一种药用组合物，其包含经权利要求46的方法制备的产物。
48.一种药用组合物，其包含经权利要求47的方法制备的产物。
全文摘要
本发明涉及式(I)的三唑并哒嗪化合物其中的R1、R5、R6、R7、R8和A如本文中所定义，这类化合物作为蛋白酪氨酸激酶调节剂，尤其是c-Met的抑制剂的用途和降低或抑制细胞或患者的c-Met激酶活性和调节c-Met在细胞或患者中的表达的这类化合物的用途，和预防或治疗患者细胞增殖性疾病和/或与c-Met有关的疾病的这类化合物的用途。本发明进一步涉及包含本发明化合物的药用组合物，并涉及病症例如癌症和其它细胞增殖性疾病的治疗方法。
文档编号C07D519/00GK101374843SQ200680052966
公开日2009年2月25日 申请日期2006年12月18日 优先权日2005年12月21日
发明者T·卢, R·亚历山大, R·W·康诺尔斯, M·D·卡明斯, R·A·加尔莫, H·R·胡夫纳格尔, D·L·约翰逊, E·哈利尔, K·A·莱奥纳德, T·P·马科坦, A·C·马罗尼, J·L·塞赫勒, J·M·特拉文斯, R·W·图曼 申请人:詹森药业有限公司