专利名称：：一种由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法
技术领域：
：本发明涉及一种高耐油耐热环保热塑性弹性体的制备方法。
背景技术：
：目前市场上形形色色的补钙保健品可归为三类一类是无机钙，又称为第一代补钙产品，如碳酸钙、磷酸钙及氧化钙，或者来自于经过机械加工的动物贝壳骨骼;第二类是有机酸钙，即第二代钙剂，如葡萄酸钙、乳酸钙、柠檬酸钙、醋酸钙等；第三类是有机钙，为第三代钙剂，如氨基酸螯合钙、L-苏糖酸钙。第一、二类钙剂存在以下问题一般都难溶解，有些碱性较强对胃肠有强烈刺激；含重金属，如铅、砷等常常超标；离子型钙剂适合在酸性环境下吸收，因此十二指肠和空肠的一小段吸收较好，再往下肠道呈碱性，钙剂不能溶解，吸收就困难；离子型钙剂还易被膳食中成分如草酸等的干扰，影响钙的吸收。而第三类钙剂氨基酸螯合钙能以"氨基酸螯合物"的形式稳定溶解于PH值大于7.0的碱性小肠液中，并能参与小肠绒毛上皮细胞对氨基酸的主动转运过程而被完全吸收，使钙的吸收率有突破性的提高，临床研究表明以其对老人和绝经妇女的骨质疏松症状、孕妇和小孩的缺钙症状都有明显的改善作用，对身体无任何副作用，且生物利用度高于一般的补钙制剂。目前以氨基酸螯合钙为原料的补钙制剂在国内还未得到充分的开发,更没有由淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的报道。
发明内容本发明的目的是针对上述现状，旨在提供一种钙含量髙，骨钙的储留率大的由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法。本发明目的的实现方式为，一种由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法，制备步骤如下1)制备鱼骨粉，将鱼骨清洗、高压蒸煮、清洗后用浓度为10%-12%的氢氧化钠浸泡lh,用清水清洗至中性，再于85'C干燥，粉碎，过100目筛，2)酸解法提取鱼骨粉中的钙，酸浓度2.5-3mol/L，用量为lg鱼骨粉2.5-3ml酸，在108'C下提取50-60min,所用酸为盐酸、乳酸、乙酸或柠檬酸，33)制备复合氨基酸螯合钙用含氨基酸总量为89.9%的复合氨基酸螯合鱼骨粉中钙离子，螯合条件是复合氨基酸与钙离子的质量比为3-5:1，pH=7-8，在70-90。C水浴内反应70-90min，离心取清液，将清液浓縮，用无水乙醇洗涤二次，离心取沉淀，8(TC烘箱干燥后粉碎，得复合氨基酸螯合钙产品。本发明首次采用低值淡水鱼加工副产物鱼骨制备复合氨基酸螯合钙，使淡水鱼加工副产物得到充分利用，减少其对环境的污染，而且大大地提高了淡水鱼副产物的附加值。用本发明制备的复合氨基酸螯合钙经动物实验证实，大鼠的股骨钙含量为38.11±5.30，股骨钙的储留率11.00±5.30，如与VD3配伍，更可增加其生物利用率，提高补钙的效果。用本发明制备的复合氨基酸螯合钙的补钙作用与葡萄糖酸钙相当，高于碳酸转，但钙储留率显著高于葡萄糖酸药组和碳酸钙组。图1是盐酸浓度对钙提取的影响，图2是盐酸用量对该提取率的影响，图3是反应时间对钙的提取率的影响。具体实施例方式本发明的制备步骤为，鱼骨清洗、蒸煮、氢氧化钠浸泡，洗至中性，干燥，粉碎，酸解法提取鱼骨粉中的钙，用复合氨基酸螯合鱼骨粉中钙离子，离心取清液，用无水乙醇洗涤二次，离心取沉淀，干燥粉碎得复合氨基酸螯合钙产品。产品采用胶囊包装，每粒含复合氨基酸螯合钙1000毫克，VD3200IU或复合氨基酸螯合钙650毫克，酪蛋白磷酸肽(含量》21%)350毫克。经检测，产品菌落总数(cfu/g)《3000、大肠杆菌(MPN/100g)《30、霉菌(cfu/g)《50。鱼骨清洗、高压蒸煮、清洗后，用氢氧化钠浸泡lh，本申请人对所用氢氧化钠浓度对出油率的影响作了试验，实验结果见表1表l<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>从表中可见，10%、12%浓度的去油率相等，因下一步要将其洗至中性，应尽量选择浓度低的，因此最佳氢氧化钠浓度选择为10%。酸解法提取鱼骨粉中的钙，本申请人作了酸的选择、酸浓度、酸用量和反应时间的选择实验。本申请人用盐酸、乳酸、乙酸酸解鱼骨粉作了酸的选择试验，结果见表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>由表2可知盐酸分解骨粉转化钙的能力最强，乳酸次之，乙酸又次，柠檬酸最差，故本发明的酸解法选择用盐酸。本申请人作了酸浓度选择实验，参照图l，盐酸浓度对鱼骨粉中钙的提取有直接影响，随着盐酸浓度增加，可溶性钙含量显著提高，至3mol/L时达到最高，再增加浓度可溶性含量基本趋于平衡。因此，本发明确定最佳盐酸浓度为3mol/L。本申请人作了盐酸用量的选择实验，参照图2，随着盐酸用量的增加，鱼骨中钙的溶出率不断增加，呈直线上升趋势，直至3ml时基本趋于平衡，由于考虑下一步螯合时要调节pH值所以尽量少的选择盐酸用量，因此，本发明选择3迈1为最佳盐酸用旦里。本申请人作了反应时间的选择实验，参照图3，随着时间的增加，钙的提取率先增加，到60min时达到最高，而后随着时间继续增加，钙的提取率反而有所下降。其原因是随着时间的延长，酸的分子运动加快，挥发性增强，反而不利于对钙的提取。因此，本发明选择最佳反应时间为60min。本申请人运用正交试验对固体复合氨基酸与鱼骨粉中钙离子的螯合条件进行了研究。正交试验结果见表3，<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>为了检验复合氨基酸螯合钙的生物利用率，本申请人以复合氨基酸螯合钙、上海黄海制药有限责任公司生产的葡萄糖酸钙片、钙尔奇D碳酸钙制剂喂饲缺钙动物模型Wister大鼠，采用原子吸收法测定大鼠的血钙、尿钙、粪钙和骨钙。结果见表5、表6:表5大鼠钙代谢结果(x±sd，n=8)HI粪中含钙量尿中含钙臺表观吸收率存留率(％)(nnnol.L-1)(mg/d.只)(mg/d.只)(%)低钙组1.65±0.839.7±3.802.07±0.5369.0±11.262.4±10.4活性转2.24±1.457.28±4.46*2.28±1.0685.1土5.080.5±9.9组葡萄糖1.95±0.498.66±4.0419.70±10.8583.4±7.445.3±23.7酸钙组**豕*药尔奇2.92±0.345.76±4.510.53±6.8988.4土9.267.7±17.1组****与低钙组比较，*P<0.05;**P〈0.01;与葡萄糖酸钙组比较AAP〈0.01;与碳酸钙组比较fP〈0.05表6大鼠股骨系数(x土sd,r^8)组别骨钙(mg)储留钙(mg)股骨钙的储留率(%)低钙组13.3±8.367J9±8.36<25.5±27.8活性钙组40.0±14.2**34.5±14.2**71.6±33.9*葡萄糖酸钙组40.1±12.9**34.6±12.9**67.3±25.7*转尔奇组30.1±11.8*24.5±11.8*48.7±23.1与低钙组比较，*P〈0.05;**P<0.01由表5、表6可知1)钙代谢:低钙对照组经4周低钙饲料喂养,体内缺钙较为严重，已难以继续维持血钙的稳定。大鼠经4周补钙，血钙略有上升，但比较补转前后的血清转含量，差异并无显著性(pX).05),而碳酸钙组血钙显著高于低钙组。葡萄糖酸钙组尿中钙非常显著高于低钙组，钙尔奇D组尿中钙显著高于低钙组。这两组钙的表观吸收值和表观吸收率非常显著高于低钙组。复合氨基酸螯合钙组粪中钙含量显著高于低钙组，钙的表观吸收值也显著高于低钙组，钙储留率与葡萄糖酸钙组和钙尔奇D组比较有显著差异.但其表观吸收率未见显著差异。2)骨钙各组大鼠的骨钙含量则显示出较大差异，各补钙组大鼠骨钙含量均高于低钙对照组,其中复合氨基酸螯合钙与葡萄糖酸钙组股骨钙和储留钙非常显著高于低钙组，钙尔奇D组股骨钙和储留钙也显著高于低钙组。复合氨基酸螯合钙与葡萄糖酸钙组股骨钙和储留钙显著高于低钙组。但是各组大鼠股骨密度未见明显改变。由以上结果可知复合氨基酸螯合钙有一定补钙作用，其作用与葡萄糖酸转相当，高于碳酸钙。钙储留率显著高于葡萄糖酸钙组和碳酸钙组，证明本复合氨基酸螯合钙生物利用率优于钙尔奇D制剂与葡萄糖酸钙相当。为了了解复合氨基酸螯合钙配伍化合物(CPP/VD3)前后的生物利用率,获得较好的临床补钙配方，本申请人以含钙量相等(30mg/d)的复合氨基酸螯合钙、复合氨基酸螯合钙+CPP、复合氨基酸螯合转+VD3、乐力喂词缺钙动物模型大鼠4周，结果见表7、表8:表7:大鼠钙代谢结果(x土sd，『10)组别血转(咖ol/U粪钙(mg/d.只)尿钙(mg/d.只)钙储留率(%)低钙组0.64±0.275.37±3.473.94±3.0185.28±11.48复合氨基酸螯合钙组0.510.36###7.103.28#26.54±9.95###47.21±18.77###复合氨基酸螯合钙+CPP组0.650.58##3.911.17△5.76±3.35△△△#89.39±5.44复合氨基酸螯合^5+VD3组'4.852.33**##7.681.45###1.16±'0.37△###97.84±0.65*△AA乐力组1.57Q.42**3.801.112.460.5395.790.95表注与A组(低钙组)比较，*P<0.05;**P<0.01;***P〈0.001;与B组(复合氨基酸螯合钙组)比较AP〈0.05;AAP〈0.01;AAAP〈0.001;与E组(乐力组)比较ffP〈0.05;##P<0.01###P〈0.001表8:大鼠股骨系数(x土sd，『10)组别骨钙骨密度储留钙股骨'眄的储留率(mg)(g/cm3)(1Dg)(90低钙组32.25±5.542.620.215.155.5415.5016.45复合氨基酸螯合钙38.11±5.302.790.2411.005.3016.708.14组*±±±复合氨基酸螯合钙38.23±5.482.900.2211.135.4818.219.74±±±复合氨基酸螯合钙43.15±5.083.200.1816.045.0826.428.93十VD3组±±*'*±△#△A乐力组37.23±4.103.050.329.013.0314.354.84±**±±8表注与A组(低钙组)比较，*P<0.05;**P〈0.01;***P<0.001;与B组(复合氨基酸螯合钙组)比较厶P〈0.05;AAP〈0.01;AAAP〈0.001;与E组(乐力组)比较并P<0.05;##P<0.01###P<0.001由表7、表8可知1)钙代谢:复合氨基酸螯合钙加上CPP后，尿、粪中钙的排出量减少，韩的吸收率显著改善，钙的储留率非常显著地上升，P〈0.001;复合氨基酸螯合钙加上VD3后，大鼠的血钙上升非常显著，尿钙、粪钙的排出量减少,钙的储留率非常显著上升，p〈0.001。2)大鼠股骨系数的影响复合氨基酸螯合钙加上CPP后，各指标与单独使用复合氨基酸螯合钙无显著差异；复合氨基酸螯合钙加上VD3后，股骨重量、密度显著上升，p〈0.001,骨钙的储留钙显著上升，P〈0.05。各实验组大鼠经4周补钙，股骨重量、密度、股钙均有上升。与VD3合用后，股骨重量、密度显著增加，与单用复合氨基酸螯合钙相比，P<0.01，大鼠的股骨钙储留率、血钙、钙的储留率升高，P〈0.001,且与乐力相比，大鼠的股骨钙、股骨储留鈣和储留率均显著升高，P〈0.05和P〈0.01。结论合用CPP、VD3后钙的生物利用率增加，尤以VD3的协同作用更为显著，VD3是较好的与复合氨基酸螯合钙配伍的成分。权利要求1、一种由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法，其特征在于制备步骤如下1)制备鱼骨粉，将鱼骨清洗、高压蒸煮、清洗后用浓度为10％-12％的氢氧化钠浸泡1h，用清水清洗至中性，再于85℃干燥，粉碎，过100目筛，2)酸解法提取鱼骨粉中的钙，酸浓度2.5-3mol/L，用量为1g鱼骨粉2.5-3ml酸，在108℃下提取50-60min，所用酸为盐酸、乳酸、乙酸或柠檬酸，3)制备复合氨基酸螯合钙用含氨基酸总量为89.9％的复合氨基酸螯合鱼骨粉中钙离子，螯合条件是复合氨基酸与钙离子的质量比为3-5∶1，pH＝7-8，在70-90℃水浴内反应70-90min，离心取清液，将清液浓缩，用无水乙醇洗涤二次，离心取沉淀，80℃烘箱干燥后粉碎，得复合氨基酸螯合钙产品。2、根据权利要求1所述的一种由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法，其特征在于鱼骨清洗、高压蒸煮、清洗后用浓度为10%的氢氧化钠浸泡lh。<3、根据权利要求1所述的一种由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法，其特征在于酸解法提取鱼骨粉中的钙，用量为lg鱼骨粉用3ml酸，在108'C下提取60min，所用酸为浓度3mol/L的盐酸。4、根据权利要求1所述的一种由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法，其特征在于用复合氨基酸螯合鱼骨粉中钙离子的螯合条件是复合氨基酸与钙离子的质量比为3:1，pH=8，反应时间70min，反应温度80'C。全文摘要本发明涉及一种由低值淡水鱼骨制备复合氨基酸螯合钙的方法。制备步骤为，鱼骨清洗、蒸煮、氢氧化钠浸泡，洗至中性，干燥，粉碎，酸解法提取鱼骨粉中的钙，用复合氨基酸螯合鱼骨粉中钙离子，离心取清液，用无水乙醇洗涤二次，离心取沉淀，干燥粉碎得复合氨基酸螯合钙产品。本发明首次采用低值淡水鱼加工副产物鱼骨制备复合氨基酸螯合钙，大大地提高了淡水鱼副产物的附加值。用本发明制备的复合氨基酸螯合钙经动物实验证实，大鼠的股骨钙含量为38.11±5.30，股骨钙的储留率11.00±5.30，如与VD3配伍，更可增加其生物利用率，提高补钙的效果。用本发明制备的复合氨基酸螯合钙的补钙作用与葡萄糖酸钙相当，高于碳酸钙，但钙储留率显著高于葡萄糖酸钙组和碳酸钙组。文档编号C07C229/76GK101648884SQ20091006328公开日2010年2月17日申请日期2009年7月23日优先权日2009年7月23日发明者宇乔,曾汉庭,熊光权,俊王,薇程,薛淑静,陈学玲申请人:湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所