专利名称：一种二氢异香豆素葡萄糖苷化合物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物化学，具体涉及一种从美洲大蠊(Periplaneta americana)药材 中提取分离的二氢异香豆素葡萄糖苷新化合物及其制备方法与应用。
背景技术：
美洲大蠊Periplaneta americana为昆虫纲有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫， 俗称“蟑螂”，其入药始载于《神农本草经》，并把它列为中品，谓“味咸、寒；治血瘀症坚寒 热、破积聚、喉咽闭、内寒无子”。“蟑螂”为其俗名首见于《本草纲目拾遗》，也称为石姜、滑 虫，各地方有其不同的称法，如偷油婆、灶蚂子等。蜚蠊科Blattidae作为一个庞大的昆虫 家族在地球上已存在了 3. 2亿年，与恐龙属同一时代出现的生物。它是世界上生命力最强、 最古老、至今繁衍最成功的昆虫类群之一。目前据统计全世界的蜚蠊已接近5000种，其中， 中国记载为253种，主要分布于热带、亚热带地区的室内或野外。美洲大蠊是少数几种家居 蜚蠊品种之一。它作为室内害虫，主要栖息于厨房、食堂、仓库等处损害食物，衣服，书籍等， 同时取食并污染食物，传播痢疾，伤寒，蛔虫，蛲虫等多种疾病。胡修元报道(中国媒介生物 学及控制杂志，1999，10 (3) :168.)室居蜚蠊可能携带的肠道和呼吸道致病细菌高达34种， 霉菌12种，以及包括骨髓灰质炎病毒等在内的多种病毒。然而，面对各种杀灭剂，这一昆 虫群体依然十分活跃，表明其体内应具有某些特殊的物质和特有的作用机制，这引起了国 内外一些学者的关注。从众多对美洲大蠊的研究报道文献来看，目前的报道主要集中在各 种蜚蠊的分布及杀灭情况报告；各种杀灭剂对其杀灭的效率比较与杀灭机理的研究；其基 因表达及致敏作用方面的研究。另一方面，开始将其作为药物进行研究，对其化学成分，包 括各种酶、肽及蛋白质的提取，分离，鉴定及其生理功能与作用机制方面的研究等。通过对 已有的产品及相关药理活性研究情况分析，美洲大蠊体内药效成分的生物活性主要具有抗 炎、消肿、促进细胞增殖和新生肉芽组织增长，加速病损组织修复，加快坏死组织脱落等作 用，对各种外伤创面及机体溃疡具有良好的组织修复活性(产品康复新液)；具有升压、改 善血液循环的活性(产品心脉龙)。具有抗菌抗病毒的活性(产品肝隆)；具有抗肿瘤、 增强免疫功能活性(产品消症益肝片)等。但上述产品因其所含成分复杂，真正的活性物 质尚不明确。目前报道美洲大蠊中的化学成分主要为信息素类及氨基酸和各种昆虫神经肽 类，此外还有蜚蠊酸、蜚蠊酮、蟑螂油、过敏原成分、酶、细胞色素A、B、C、甲壳素、烟酸及微量 元素等，但是，有明确药效活性化学成分的报道较少。目前公开的专利主要是提取物、组合 物，并未从分子水平上阐明其活性物质基础，不能以明确的成分作为质控指标。本发明人对美洲大蠊提取物进行了深入的化学成分研究，并通过活性跟踪筛选， 成功地分离到了具有显著的抗炎、促进肉芽组织增生、创伤愈合等活性作用的新化合物单 体成分，并确证了其化学结构。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于从美洲大蠊中研究开发具有抗炎、创伤愈合等方面药理活性的天然化合物成分，用于制备具有抗炎、促进肉芽组织增生、创伤愈合等作用的 药物组合物。本发明提供一种二氢异香豆素葡萄糖苷新化合物，该化合物具有式I所示的化学 结构式
权利要求
1. 一种二氢异香豆素葡萄糖苷化合物，其特征在于该化合物具有式I所示的化学结构式
2. 一种如权利要求1所述二氢异香豆素葡萄糖苷化合物I的制备方法，其特征在于该 方法包括下列步骤(1)提取用蜚蠊科昆虫美洲大蠊Periplaneta americana干燥或鲜成虫为原料，用溶剂提取 1-3 次；(2)萃取上述提取液减压浓缩回收溶剂后的浓缩液加水萃取1-3次，水的用量为浓缩 液的2-4倍w/w，加水后充分搅拌，静置分层，取水层；(3)吸附水层经大孔吸附树脂或活性炭吸附，吸附物用洗脱液洗脱；(4)分离洗脱液用硅胶柱层析法、LH-20柱层析法或反相柱层析法或制备型HPLC法的 一种或多种方式分离，用水、乙醇、甲醇、正丁醇、丙酮、乙腈、乙酸乙酯或石油醚或它们的至 少两种混合物作洗脱剂洗脱，采用薄层层析法或UV检测，合并含目标物的洗脱液，真空冷 冻干燥或真空加温干燥50-70°C后，得目标物(3R)-3-甲基-7-羟甲基-8-羟基-3，4-二氢异香豆素-6-0-β -D-吡喃葡萄糖苷。
3.根据权利要求2的方法，其特征在于所述步骤(1)对原料进行提取时，在常温或加 热，常压或减压状态下，以20% -100%的乙醇、甲醇、丙酮或丙醇的水溶液为溶剂提取；每 次提取溶剂的用量为原料的4-10倍w/w ；提取方法为煎煮、加热回流、超声提取、冷浸、温 浸、渗漉或微波提取，优选50-95%乙醇加热提取1-3次；提取时间每次3-12小时。
4.根据权利要求2的方法，其特征在于所述步骤(3)大孔吸附树脂为聚苯乙烯型吸附 树脂，包括 D101、MN200、HPD100, HPD400、HPD450、AB-8、D4020、S_8，HZ806 或 HP-20，优选 D101、丽200或HPD100型大孔吸附树脂；洗脱溶剂为水、含水乙醇、含水甲醇、含水丙酮或含 水丙醇，含水溶剂的含水量在5% -95% ；洗脱方法为等度洗脱或梯度洗脱。
5.根据权利要求4的方法，其特征在于所述步骤(3)过大孔吸附树脂，先用1-8倍柱 体积的水洗；再用或不用5% -20%的乙醇、甲醇、丙酮或丙醇的水溶液清洗，进一步去除杂 质，用量为1-3倍柱体积；最后用20% -95%的乙醇、甲醇、丙酮或丙醇的水溶液洗脱，用量 为2-8倍柱体积，收集洗脱液，回收溶剂，即得含有(3R)-3-甲基-7-羟甲基-8-羟基-3， 4- 二氢异香豆素-6-0-β -D-吡喃葡萄糖苷的部分。
6.根据权利要求2的方法，其特征在于所述步骤C3)活性炭吸附法的活性炭为粉状活 性炭或颗粒状活性炭；洗脱溶剂为水、含水乙醇、含水甲醇、含水丙酮或含水丙醇，含水溶剂 的含水量在5% _95%，洗脱方法为等度洗脱或梯度洗脱。
7.根据权利要求6的方法，其特征在于所述步骤(3)活性炭吸附时，先用水洗1-8倍柱 体积；再用或不用5% -20%的乙醇、甲醇、丙酮或丙醇的水溶液清洗，进一步去除杂质，用 量为1-3倍柱体积ν/ν ；最后用20% -95%的乙醇、甲醇、丙酮或丙醇的水溶液洗脱，用量为 2-8倍柱体积ν/ν，收集洗脱液，回收溶剂，即得含有(310-3-甲基-7-羟甲基-8-羟基-3， 4- 二氢异香豆素-6-0-β -D-吡喃葡萄糖苷的部分。
8.根据权利要求2的方法，其特征在于所述步骤(4)柱层析所用的硅胶柱层析为常压 或加压柱层析，所用填料为100-400目硅胶，用乙酸乙酯、正丁醇、水、丙醇、乙醇、甲醇、丙 酮、石油醚或正己烷或它们的至少两种混合物为洗脱剂，洗脱方法为等度洗脱或梯度洗脱； 或所述s印hadex LH-20柱层析，采用常压或加压柱层析，所用填料为s印hadex LH-20葡 聚糖凝胶，采用乙醇、甲醇、丙酮或丙醇的含水溶液为洗脱剂，洗脱剂含水10% -90% ν/ν, 洗脱方法为等度洗脱或梯度洗脱；或所述反相柱层析法，采用常压或加压柱层析或制备型 HPLC法，所用填料为十八烷基键合相或八烷基键合相，采用含水乙醇、含水甲醇、含水丙酮 或含水丙醇中的一种或几种为洗脱剂，洗脱剂含水比例10% -90% ν/ν，洗脱方法为等度洗 脱或梯度洗脱。
9.一种如权利要求1所述二氢异香豆素葡萄糖苷化合物在制备预防与治疗炎症、溃 疡、外伤、金疮、瘘管、烧伤或烫伤，尤其是制备预防与治疗和抗炎、促进肉芽组织增生或创 伤愈合有关疾病的药物中的应用。
10.根据权利要求9的应用，其特征在于所述的药物为含权利要求1所述二氢异香豆素 葡萄糖苷化合物作为活性成分与药用辅料制成的药物组合物，包括合剂、口服液、凝胶剂、 软膏剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂和注射剂。
全文摘要
本发明公开了式I所示的一种二氢异香豆素葡萄糖苷类新化合物，它是从美洲大蠊(Periplaneta americana)药材中提取分离的。经小鼠耳肿胀和大鼠肉芽组织增生等试验，结果表明具有抗炎、促进创伤愈合等作用，本发明化合物可用于制备治疗炎症、溃疡、外伤、金疮、瘘管、烧伤、烫伤等的药物，尤其是制备预防与治疗与抗炎、促进肉芽组织增生、创伤愈合等有关疾病的药物，有较大的临床应用价值。本发明提供了化合物I的制备方法。
文档编号C07H17/06GK102108090SQ20091020055
公开日2011年6月29日 申请日期2009年12月23日 优先权日2009年12月23日
发明者余国珍, 吴元锋, 徐小军, 王光强, 金志平, 陈见阳 申请人:内蒙古京新药业有限公司, 浙江京新药业股份有限公司