一种多酚双糖苷化合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物活性成分领域，尤其涉及一种多酚双糖苷化合物及其制备方法和 应用。
【背景技术】
[0002] 珠兰（拉丁学名：Chloranthusspicatus(Thunb. )Makino)。又名鱼子兰、茶兰，属 金粟兰科，金粟兰属，是多年生常绿草本或半灌木花卉。直立或稍伏地，高30~60厘米。叶对 生，倒卵状椭圆形，边缘有钝齿，齿尖有一腺体;叶面光滑、浓绿，稍呈泡状皱起。穗状花序顶 生，成圆锥花序式排列。花小，两性，无花被，黄绿色，有浓郁的兰花香味。花期8-10月份(陈 海山，程用谦，热带亚热带植物学报，1994,2(4):31-34.)。
[0003]目前研究表明，珠兰的化学成分主要有倍半砲、二聚倍半砲（Sang-YongKim,YoshikiKashiwada,KazuyoshiKawazoe,KotaroMurakami,Han-DongSun，Shun_LinLi， YoshihisaTakaishi,PhytochemistryLetters.Volume2,Issue3,24August2009， Pages110-113)。但是多酚糖苷类化合物研究很少，为此，研究珠兰全草中的天然多酚糖苷 活性成分，可以为珠兰全草的利用提供新思路。
【发明内容】
[0004]本发明提供了一种多酚双糖苷化合物，该化合物为珠兰的全草中提取获得的天然 活性物质，具有抗氧化活性。
[0005] -种多酚双糖苷化合物，结构如式(I)所示：
[0007]该多酚双糖苷化合物为首次从珠兰的全草中提取出来并确认了其结构的新化合 物，研究结果表明，该多酚双糖苷化合物对酪氨酸酶具有较好的抑制活性，可以有效地抑制 黑水素的合成，从而具有作为美白化妆品或美白保健食品的潜力。
[0008]本发明还提供了一种所述的多酚双糖苷化合物的制备方法，包括以下步骤：
[0009] (1)采用有机溶剂对粉碎后的珠兰(Chloranthusspicatus(Thunb. )Makino)全草 进行浸提得到浸提液；
[0010]所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇和丙酮中的一种或多种混合物；
[0011] (2)用萃取剂对步骤(1)得到的浸提液进行萃取，萃取液经浓缩后得到粗提物；
[0012] (3)对步骤(2)得到的粗提物进行层析分离和纯化处理，得到所述的多酚双糖苷化 合物。
[0013] 步骤(1)中，将所述的珠兰全草粉碎后置于有机溶剂中进行浸提，更有利于多酚双 糖苷化合物的浸出。作为优选，步骤（1)中，所述的珠兰全草与有机溶剂的重量比为1:1-1: 8。所述的浸提可以为冷浸或热回流提取。
[0014] 作为优选，步骤(2)中，所述的萃取剂为氯仿或正丁醇。
[0015] 作为优选，步骤(2)中，所述的提取液先进行浓缩，然后加水混悬得到水混悬液，再 加入所述萃取剂进行萃取。
[0016] 作为优选，步骤(2)中，所述的提取液先进行浓缩，然后加入硅藻土拌样，再加入所 述萃取剂进行萃取。
[0017]作为优选，步骤(3)中，所述的层析分离为正相硅胶柱层析分离，洗脱剂为氯仿和 甲醇的混合液。作为进一步的优选，所述的正相硅胶柱层析分离中：上样后，以氯仿/甲醇混 合液作为洗脱剂，按体积比9:1、5:1、3:1、1:1、1:3、1:9进行梯度洗脱，收集洗脱剂体积比3: 1时洗脱出的馏分。
[0018] 作为优选，步骤(3)中，所述的纯化处理包括:反相硅胶柱层析分离、高效液相色谱 分离和重结晶中的一种或者多种。通过纯化，能获得纯度较高的多酚双糖苷化合物。
[0019] 作为优选，所述反相硅胶柱层析分离的洗脱剂为甲醇和水的混合液。更优选地，所 述的反相硅胶柱层析分离中：上样后，以甲醇/水混合液作为洗脱剂，按体积比9:1、5:1、1: 1、1:3、1:9进行梯度洗脱。
[0020] 本发明还提供了所述的多酚双糖苷化合物在制备酪氨酸酶抑制药物或抗黑色素 瘤药物中的应用。该药物以本发明的多酚双糖苷化合物为主要活性成分，添加药剂学上可 接受的辅料制成，可按照药剂学上记载的制剂制备方法制成制剂。所述的制剂可以为注射 液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、 口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹剂、喷雾剂、滴丸剂、崩解剂、□崩片、微丸等。
[0021] 本发明还提供了所述的多酚双糖苷化合物在美白化妆品中的应用。该化妆品以本 发明的多酚双糖苷化合物为主要活性成分，添加可接受的化妆品辅料制成。
[0022] 本发明还提供了所述的多酚双糖苷化合物在制备美白保健食品中的应用。该保健 食品以本发明的多酚双糖苷化合物为主要活性成分，添加可接受的保健食品辅料制成。
[0023] 本发明从珠兰全草中提取、分离获得了一种具有新颖结构的多酚双糖苷化合物， 该方法操作简便、提取得率高、产物纯度高，适合规模化生产。
【附图说明】
[0024] 图1为实施例6中化合物的1Η咕C0SY、HMBC相关图谱。
【具体实施方式】
[0025]实施例1多酚双糖苷化合物的制备
[0026]取51^珠兰（〇11〇抑]11:11118 8。;^&1：118(1'11111113.)]\^1<:;[110)全草，干燥，粉碎，用甲醇 (40L)浸泡2周，浸泡液经浓缩（100mL)后用1L蒸馏水混悬，水混悬液用1L正丁醇萃取，正丁 醇萃取液经浓缩得到浸膏；用硅胶（100目，l00g)拌样，进行正相硅胶柱层析分离(200-300 目，lkg;硅胶柱尺寸L 500mm，0 120 mm)，依次以体积比9:1、5:1、3:1、1:1、1: 3、1:9的氯 仿/甲醇进行梯度洗脱，每次5L; TLC检测馏分，收集洗脱比例3:1的馏分合并，再用甲醇重结 晶。
[0027]实施例2多酚双糖苷化合物的制备
[0028]取5kg珠兰全草，干燥，粉碎，用5L乙醇回流提取，提取液浓缩，用1L蒸馏水混悬，水 混悬液用1L氯仿萃取，氯仿层弃去。水层用1L正丁醇萃取;正丁醇部分浓缩，用硅胶（100目， l〇〇g)拌样，进行正相硅胶柱层析分离(200-300目，lkg;硅胶柱尺寸L500mm，0 120mm)， 依次以体积比9:1、5:1、3:1、1 :1、1:3、1:9的氯仿/甲醇进行梯度洗脱，每次51^孔(：检测馏 分，收集洗脱比例3:1的馏分合并，再用甲醇重结晶。
[0029]实施例3多酚双糖苷化合物的制备
[0030] 取5kg珠兰全草，粉碎，用5L甲醇/乙醇混合液提取，提取物浓缩，用100g硅藻土拌 样，5L正丁醇热提取；进行正相硅胶柱层析分离（200-300目，