专利名称：一种高纯度二酮哌嗪环肽的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种具有生物活性的高纯度二酮哌嗪环肽的制备方法，属于药物化学 合成领域。
背景技术：
二酮哌嗪环肽是通过内酰胺桥连方式形成的首尾成环的环二肽，其核心骨架具有 稳定的哌嗪二酮(Diketopipcrazine)六元环结构(式I)，而且不再有游离的氨基与羧基， 因此可以较好地耐受蛋白水解酶的降解作用。此外，二酮哌嗪结构具有较密集的氢键供体 及氢键受体，而氢键正是药物分子与蛋白靶点相互作用的重要形式之一，因此二酮哌嗪结 构是一种非常重要的药效基团。已经发现的天然产物中，不少具有二酮哌嗪环肽结构。在 新药发现与研究中，二酮哌嗪环肽可作为先导化合物组合化学合成的模板。已报道的二酮哌嗪环肽的合成以固相合成法为主。但固相合成成本较高，只适用 于少量制备。本发明提出了一种简单高效地制备二酮哌嗪环肽(式I)的方法，中间产物不需要 柱层析纯化，操作简单；环合反应用HPLC检测，反应进程清晰可见；后处理方便易行，产品 纯度达99 %。，可用于大量制备二酮哌嗪环肽产物。
权利要求
1.一种高纯度二酮哌嗪环肽的制备方法，步骤如下1)N端用叔丁氧羰基保护的氨基酸与C端用甲酯保护的氨基酸反应，生成线性二肽。2)线性二肽只需经过萃取处理，便直接在酸性条件下脱去N端保护基。3)脱保护的线性二肽粗产品直接在碱性条件下进行环化反应，通过研磨得到高纯度的 二酮哌嗪环肽。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于保护氨基酸生成线性二肽的反应是在 1-羟基苯并三氮唑、N, N- 二异丙基乙胺、0-苯并三氮唑-N，N, N, N-四甲脲六氟磷酸酯的 作用下完成的，所用溶剂是二甲基甲酰胺。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于生成线性二肽的反应完成后，反应液用乙 酸乙酯萃取，有机相依次用lmol/L盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和氯化钠水溶液洗涤，用 无水硫酸钠干燥，浓缩，不需要柱层析纯化，直接在酸性条件下脱去N端叔丁氧羰保护基。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于脱保护线性二肽的环合反应是在三乙胺 作用下完成的，反应温度为25°C -70°C，所用溶剂是甲醇。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于环合反应用反相HPLC来监测。使用色谱 柱型号SinoChrom，0DS_BP，4. 6mm*200mm, 5 μ，ΙΟΟΑ，流动相为甲醇-水体系。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于环合反应浓缩后得到的粗产物是用甲醇 或者乙醚研磨的方法来得到高纯产品，无需硅胶柱层析。
7.根据权利要求1-7任一所述的方法，其特征在于所述二酮哌嗪环肽包括环 (L-酪-L-缬)，环(L-亮-L-缬)，环(L-异亮-L-缬)，(L-苯丙-L-缬)，环(L-苯 丙-L-脯)，环(L-亮-L-脯)。
全文摘要
本发明涉及一种在液相体系中大量制备高纯度二酮哌嗪环肽分子的方法，核心技术方案包括以下步骤1)N-叔丁氧羰基保护的氨基酸与C端用甲酯保护的氨基酸反应，生成线性二肽；2)线性二肽只需经过萃取，便直接在酸性条件下脱去N端保护基；3)脱保护的线性二肽直接在碱性条件下进行环化反应，粗产物经乙醚研磨，得到高纯度的二酮哌嗪环肽；4)反应进程及终产物的纯度用HPLC分析检测。本发明用便宜易得的保护氨基酸为原料，操作简单易行，后处理方便，产物纯度可达99％。该工艺适合工业化生产，具有可观的经济实用价值，在药物合成上有广泛的应用前景。
文档编号C07D487/04GK102146065SQ201110025008
公开日2011年8月10日 申请日期2011年1月24日 优先权日2011年1月24日
发明者朱佳, 聂菲璘, 苏贤斌 申请人:南京工业大学