芳族及杂环甲酰胺衍生物抗肿瘤剂的制备的制作方法

专利名称：芳族及杂环甲酰胺衍生物抗肿瘤剂的制备的制作方法
本专利申请是1988年5月24日提交的共同未决专利申请198，034号的接续。
作为人类的死因，癌症仅次于心血管疾病，所以在发展化疗方面已作了相当多的努力和研究，以期有效地治疗人的各种癌症。瘤，作为人体癌症的共同症状，它是新组织生长的异常肿块，它给身体带来不适并将体内的能量耗尽。
近来公开的很多抗肿瘤化合物是天然产物。这些产物包括来自海绵的杂环内酰胺(美国专利4，729，996号)，吲哚生物碱的琥珀酰亚胺衍生物(美国专利4，667，030号)和来自海绵的吲哚二酮衍生物(美国专利4，731，366号)。现已发现合成酰基脲衍生物也已有抗肿瘤活性(美国专利4，677，111号)。
美国专利4，563，527号保护了一系列萘基脒作为抗胰蛋白酶剂，抗血纤维蛋白溶酶剂，抗激肽释放酶剂和抗凝血酶剂。
现已发现下列式Ⅰ-Ⅳ的化合物或其药物上可接受的盐是抗肿瘤剂。所述式Ⅰ-Ⅳ如下
式中X是(C1-C5)烷基，氢，(C1-C5)烷氧基，(C1-C5)烷硫基，(C1-C5)烷基亚磺酰基，(C1-C5)烷基磺酰基，氟，氯，溴，硝基，三氟甲基，氨甲酰基，N，N-二(C1-C3)烷基氨甲酰基，苯基，氟苯基，甲氧苯基，羟苯基，氰基，环己基或羟基(C1-C5)烷基;Y是氢，(C1-C5)烷基，(C1-C5)烷氧基，氟或氯;W是氢，(C1-C5)烷氧基，氰基，氟，氯或溴;当x和y接到一起时形成苯并环或四氢苯并环;Z是氢，氟，氯，溴或(C1-C3)烷基;R是下式取代基
式中n是整数0至2;m是整数0至1;R3，R4和R5各是氢或(C1-C3)烷基;Q是CH2，O，NR4或S;P是整数2至3;R4和R5一起和与之连接的氮构成哌啶子基、吡啶烷酮基，吗啉基，硫代吗啉基、哌嗪子基或4-(C1-C5)烷基哌嗪子基;R1是氢或甲基;R2是氢，(C1-C4)烷基，硝基，氰基，三氟甲基，氟，氯或溴;R6是(C1-C3)烷基，(C1-C3)烷氧基羰基甲基，其前提是在式Ⅰ化合物中，R在羰基连接的间或对位，当Q是O、NR4或S时，P是2至3。
在这组化合物中，优选化合物是式中R是下式的式Ⅱ化合物 式中n是0，m是1，R3、R4各自为氢，W是氢，R1是氢，R2是氢、(C1-C4)烷基或溴。在这组化合物中特别优选的化合物是式中X为6-三氟甲基，Y和R2各自为氢;式中X为5-氟，Y为氢和R2为异丙基;式中X和Y一起形成4，5苯并，R2为氢;式中X为4-甲氧基，Y为氢，R2为乙基;式中X为5-氟，Y为氢，R2为甲基;式中X为5-氪，Y为氢，R2为甲基;式中X为5-氟，Y为7-氟，R2为乙基;式中X为4-氟，Y为7-甲基，R2为乙基;式中X为6-氰基，Y为氢，R2为甲基;式中X为5-氯，Y为6-甲基，R2为氢;式中X为7-三氟甲基，Y为6-氯，R2为氢;式中X为6-苯基，Y为4-甲氧基，R2为氢;式中X为5-氟，Y和R2各自为氢;式中X为5-氯，Y为氢，R2为甲基;式中X为5-氟，Y为氢，R2为乙基;式中X为苯基，Y和R2为乙基;式中X为苯基，Y和R2各自为氢;式中X为5-氟，Y为6-氟，R2为氢;式中X为4-甲基，Y为氯，R-为氢;式中X为5-氟，Y为6-溴，R2为氢;式中X为5-氟，Y为氢，R2为溴。
第二组优选化合物是式中R是下式的式Ⅱ化合物 式中n是0，m是1，R1、R3、R4和R5各自为氢，R2是(C1-C4)烷基。在这组化合物中特别优选的是式中X为7-氟，Y为6-氟，W为4-甲氧基，R为乙基。
第三组优选化合物是式中R是下式的式Ⅱ化合物-(Q)-(CH2)pNR4R5式中P是2，R4和R5各自为氢或(C1-C3)烷基，R1和R2各自为氢。在这组化合物中特别优选的是式中Q为S，R4和R5各自为氢，X为6-苯基，Y和W各自为氢;式中Q为NH，R4和R5各自为氢，Z为6-苯基，Y和W各自为氢;式中Q为S，R4和R5各自为氢，X为5-氟，Y和W各自为氢;式中Q为NH，R4和R5各自为甲基，X为6-氰基，Y和W各自为氢的一些化合物。
第四组优选化合物是式中Z为氢，R为下式的式Ⅰ化合物
式中n是0，m是1，R3、R4和R5各自为氢。在这组化合物中特别优选的是式中X为6-硝基，Y和W各自为氢;式中X为5-氟，Y为6-氟，W为氢的一些化合物。
第五组优选化合物是式中R为下式的式Ⅰ化合物(Q)(CH2)pNR4R5式中R4和R5是氢或(C1-C3)烷基或与氮一起形成哌啶子基，R1是氢，W是氢，R2是氢或(C1-C4)烷基。在这组化合物中特别优选的是式中X为5-氯，Y为6-氯，R2为乙基，Q为NH，P为2，R4和R5各自为甲基;式中X为5-氯，Y为6-氯，R2为乙基，Q为NH，P为3，R4和R5各自为甲基;式中X为6-氰基，Y为氢，R2为乙基，Q为NH，P为3，R4和R5各自为甲基;式中X为6-氰基，Y为氢，R2为乙基，Q为NH，P为2，R4和R5与氮一起形成哌啶子基;式中X为6-正丁基，Y为氢，R2为氢，Q为CH2，P为0，R4和R5各自为氢的一些化合物。
本发明的第二方面是提供治疗哺乳动物肿瘤的方法，该方法包括对所述哺乳动物施以抗肿瘤有效量的选自式I-W的化合物或其药物上可接受的盐。
在选定的取代基中，(C1-C5)烷基意指含1至5个碳原子烷基等。
本发明的第三方面是提供下式化合物 式中W，X，Y，Z，R和R2的定义同上，R0是 式中T是-OCH2CH2-，-SCH2CH2-，-(CH2)p-或一个键，m，p，R3，R4和R5的定义同上。
通过用羧基活性苯甲酸或噻唑基酸将适宜的2-氨基苯并噻唑酰化，制备式Ⅰ和Ⅱ化合物。
该活性酸包括酰卤或活性酯或混合酸酐。最佳酰化剂是N-羟基-琥珀酰亚胺酯，或是酰氯。
通过下述方法可实现该偶合反应，即，使1mole适宜的苯甲酸或噻唑基羧酸N-羟基琥珀酰亚胺酯盐酸盐与1至2moles必要的2-氨基苯并噻唑和约0.01mole氢醌在惰性反应溶剂中进行反应。所述惰性溶剂如二甲基甲酰胺、二甲亚砜或N-甲基-2-吡咯烷酮。该反应在反应温度20-180℃下，避光加热约1至36小时。
反应完成后，根据需要，将该反应混合物用甲醇稀释，过滤，将滤液施加于质子型离子交换树脂(PH5-6)，例如GC50(AldrichChemicalCO.，Inc.)。然后，该树脂-产品复合物用甲醇、水、二甲亚砜、二甲基甲酰胺或乙腈或它们的混合液进行充分洗涤，以除去所有残余物，即未反应的2-氨基苯并噻唑。
在如水、甲醇或乙腈之类的溶剂中，用0.1-0.01摩尔酸溶液，例如盐酸、氢溴酸、甲磺酸、乳酸或乙酸处理该复合物，使产品从树脂复合物中分离出来。合并洗涤并浓缩。在浓缩该溶液的同时，该产品作为酸洗液盐分离，并沉淀，过滤收集，用如二甲基甲酰胺、四氢呋喃、乙酸乙酯、二甲亚砜、N-甲基-2-吡咯烷酮或甲醇或它们的混合物之类的溶剂进一步重结晶使之纯化。
这种方法的改进包括必要时，使1mole必要的酸N-羟基琥珀酰亚胺酯，或任意酸成盐与1.0-2.0moles相应的2-氨基苯并噻唑盐酸盐、0.01mole4-二甲基氨基吡啶在惰性反应无水溶剂中进行反应。所述惰性反应无水溶剂如二甲基甲酰胺、二甲亚砜、四氢呋喃、乙酸乙酯、苯、甲苯、乙腈或N-甲基-2-吡咯烷酮或它们的混合物。根据反应温度(约为20-180℃)该反应时间约为1-36小时。
反应完成后，可将反应混合物冷至室温，过滤沉淀的固体，通常是所要求产品的酸成盐。用碱将含残余产品的滤液的PH调至约7-9，所述碱如吡啶、碱性碳酸氢盐、碱性碳酸盐或碱性氢氧化物水溶液。该产品呈中性，由过滤分离或用水不混溶溶剂提取，如乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿或二乙醚。接着用1当量适宜的无机酸或有机酸处理该中性产品溶液，使分离过的产品转化为酸成盐。原先得到的酸成盐可用上述任一种结晶溶剂进行结晶，或者通过将该盐的水溶液调节至PH7-10，分离如上所述中性产品，使之转化为中性化合物。
制备式Ⅰ和Ⅱ化合物的第二种改进方法包括开始在升温下，使含1摩尔适宜的苯甲酸或噻唑羧酸与1摩尔N-，0-双三甲基甲硅烷基乙酰胺在四氢呋喃中反应，直至该混合物均匀为止，继之加入2摩尔亚磺酰氯。得到的酰基氯偶合剂可沉淀为酸成盐。
此外，酰基氯可如此制备，即，在适宜的溶剂如四氢呋喃中，用大大过量的亚磺酰氯加热适当的酸，继之真空浓缩，得到所要求中间体酰基氯盐酸盐。
在下一步偶合反应中，通常采用上述酰基氯，无需纯化。实际上，当采用活性酯代替酰基氯时，在如上所述那些惰性反应溶剂中，用1.0-4.0摩尔所要求的2-氨基苯并噻唑处理1摩尔酰基氯盐酸盐，该反应在室温下进行，反应时间为1-24小时。用氢氧化铵中和该完成的反应物使之PH达7-10，中性产品从该反应物中过滤，或用如上所述水不混溶溶剂提取。
式Ⅰ和Ⅱ化合物还可通过苯甲酸或噻唑羧酸酯和适宜的2-氨基苯并噻唑碱金属盐(如钠盐)缩合制得。
实际上，将1摩尔必要的酯溶于如二甲基甲基甲酰胺、二甲亚砜或乙腈之类惰性反应溶剂的溶液加到约1摩尔要求的2-氨基噻唑钠盐的悬浮液中，还可在类似的惰性反应溶剂中，通过2-氨基苯并噻唑与当量无油氢化钠反应直接制得钠盐。
在室温下，该反应进行约24小时，然后用水稀释反应混合物，沉淀产品，加入足够的1N盐酸，使PH为7。该产品可用常规方法如色谱法或重结晶法进行纯化。
式Ⅱ和Ⅳ化合物分别由式Ⅱ和Ⅰ化合物经烷化制得。
实际上，在惰性反应溶剂如二甲亚砜、二甲基甲酰胺或N-甲基-2-吡咯烷酮中，使式Ⅰ和Ⅱ的中性化合物与约等摩尔量烷化剂(一般为卤化物)反应，在蒸汽浴温度下加热该反应混合物，直至反应物均匀为止。在室温下冷却该反应混合物，导致该产品沉淀为酸成盐，其阴离子为烷化剂的卤素部分。
如上所述，本发明包括药物上可接受的生物活性化合物的盐。此类盐是剂量给药无毒的盐。由于本发明化合物可包含碱性基和酸性基，因此有可能存在酸成盐和碱成盐。药物上可接受的酸成盐包括如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、乙酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酸性柠檬酸盐、酒石酸盐、酒石酸氢盐、琥珀酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐和蔗糖盐。药物上可接受的碱成盐包括如钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。可采用制备酸成盐和碱成盐的常规方法。
在含有酸性质子的氮上将式Ⅲ和Ⅳ化合物烷化，在生成碱盐时，除去了上述酸性质子，因此，只可能生成碱盐。
通过各种试验可测定用作抗肿瘤剂的本发明化合物的活性。据认为评价抗肿瘤剂的可靠试验的方法之一是用以评价癌治疗的ExperimentalMetastasis，Survival(EMS)Assay。这一试验用来检测和评价癌症治疗，它采用路易斯肺癌(3LL)，这是该领域最常使用的瘤，旨在寻求抗转移和抗肿瘤剂。已证实该肿瘤的病理组织和化疗应答与人体肺癌有关，这一系统的设计类似于NationalCaneerInstitute肿瘤筛选所采用的系统，但是所作的技术改进意在提高再现性和精确性。该筛选中化合物活性值可与公开的抗癌药值相比。为了提高临床疗效，选择高预示率的肿瘤。
该试验方法如下所述1.选择成熟雌性(C57BL/6×DBA/2)F1杂种鼠(重18-20g，数量＝7/组)，静脉(外侧尾静脉)注射4-6×10E5logphase3LL路易斯肺癌细胞，一注射就引起肺停止，外渗和肺转移瘤生长。
2.iv注射后，在不同时间用试验剂处理瘤激发鼠。标准操作方法包括对每个鼠在瘤激发后第二天开始连续腹膜内给药8天(即2-9天)。
3.试验期间每天监视鼠，观察化合物引起的死亡或瘤引起的死亡。采用半数生存时间(MST天)计算T/C值，如下所述T/C(%)＝MST(受试)/MST(对照)×100%
4.由上式计算化合物T/C＞124%，在Armitage-Cochran试验(P＜0.05)中，该化合物具有统计意义，故认为其有活性。基本活性值为T/C＞150%。本检测方法中突出的活性(T/C＞200%)可比得上临床最好的活性药物如阿霉素和环磷酰胺。
5.在初期赋形剂对照组MST范围是16-20天，而出现最频繁的是17天。
本发明化合物可作为抗肿瘤剂口服或非肠道给药。一般来说，这些抗肿瘤化合物通常口服给药的剂量范围为约6至400mg/kg体重、天，当非肠道给药时，剂量为1至约200mg/kg体重、天。必要时，根据受试对象的病情和给以具体化合物而改变。应当指出，这些化合物可按上述任一种途径与药物上可接受的载体合并施用，因此可用单次剂量或多次剂量给药。
本发明的新化合物可以各种不同剂量形式口服给药，即，它们可以与各种药物上可接受的惰性载体一起制成下述剂型片剂，胶囊，锭剂，糖锭，硬糖晶，粉剂，喷雾剂，混悬液，酏剂，糖浆等。这些载体包括固体稀释剂或充填物，无菌含水介质和各种无毒有机溶剂等。另外，此类口服药用制剂可用通常采用的各种试剂，使之适当变甜和/或变香。一般来说，本发明化合物以此类口服剂型存在，即其浓度水平约为总组合物的0.5%至90%(重量)，以此量足以提供所要求单位剂量。
为了口服给药起见，可采用片剂，它含有各种赋形剂如构橼酸钠，碳酸钙和磷酸钙;各种崩解剂如淀粉，最好是马铃薯和木薯淀粉，藻酸和一些复合硅酸盐;以及粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖，凝胶和阿拉伯胶。此外，为制成片剂，使用润滑剂是极为有用的，所述润滑剂如硬脂酸镁，十二烷基硫酸钠和滑石粉。还可采用类似型的固体组合物作为充填物充填入软胶囊和硬胶囊。最佳粘合材料还包括乳糖及高分子聚乙二醇。当混悬水溶液和/或酏剂用于口服给药时，其中主要活性成份与下述各种成份可混合各种变甜或变香剂，着色剂或染剂，若如此要求，还可加入乳化剂和/或混悬剂，以及如水、乙醇、聚乙二醇、甘油和各种它们的混合液之类稀释剂。
除了作抗肿瘤剂之外，本发明化合物还可作蛋白酶抑制剂和用作抗血纤维蛋白溶酶剂。
血纤维蛋白溶酶，即一种存在于血液中的酶，是纤维蛋白溶酶原纤维蛋白激酶对前酶纤维蛋白溶酶原作用的结果。血纤维蛋白溶酶在毛细血流和纤维蛋白溶解中起重要作用。但是，当这种酶以异常量存在时，会引起出血病。在此情况下，使用抗血纤维蛋白溶酶剂是极其重要的，本发明化合物具有这种抗血纤维蛋白溶酶活性，用H.Zimmerman等人在Proc.Natl.Acad.Sci.，75，750(1978年)的鉴定法很容易给以证明。
本发明化合物可作为抗血纤维蛋白溶酶经口服或非肠道给药。一般来说，这些抗血纤维蛋白溶酶通常口服给药的剂量范围为约6至400mg/kg体重、天，当非肠道给药时，剂量为1至约200mg/kg体重、天。必要时，根据受试对象的病情和给以具体化合物而改变。应当指出，这些化合物可按上述任一种经与药物上可接受的载体合并施用，因此可用单次剂量或多次剂量给药。
本发明化合物作为抗血纤维蛋白溶酶时，可以按抗肿瘤剂给药的同样剂型口服给药，即，使用片剂，胶囊，锭剂，糖锭，粉剂，混悬水溶液等。
下述实施例说明本发明，但并不限制本发明。
实施例14-胍基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-苯甲酰胺盐酸盐(I，X＝6-NO2;W和Y＝H;Z＝H;m＝1;n＝0;R3，R4和R5＝H)在搅拌冷却(-5℃)下，一次将1.2g双环己基碳化二亚胺加到溶有1.07g4-胍基苯甲酸盐酸和740mg1-羟基苯并噻唑的8ml二甲基甲酰胺中，在0℃下2小时后，加入950mg6-硝基-2-氨基苯并噻唑，在室温下搅拌该反应混合物2小时，过滤，滤液加于35g离子交换树脂GC50(H+型)。用200ml水和足够的甲烷洗涤该柱，直至洗涤液变成无色。接着第二次用水/甲醇洗涤，用0.05M盐酸的甲醇溶液从柱中洗提出该产品，合并含该产品的组分，浓缩至干，用甲醇重结晶。得到60mg本题目化合物，m.p.311-329℃。
实施例24-胍基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-苯甲酰胺盐酸盐(I，X＝6-NO2;W和Y＝H;Z＝H;n＝0;m＝1;R3，R4和R5＝H)在175℃，惰性气氛中，将含有44.51g4-胍基苯甲酸N-羟基琥珀酰亚胺酯盐酸盐、31.3g6-硝基-2-氨基苯并噻唑和3.13g氢醌的200mlN-甲基-2-吡咯烷酮溶液避光搅拌90分钟。将反应混合物冷却至室温，用300ml甲醇稀释，过滤。滤液与500g GC50离子交换树脂(H+型)合并，加入10-20ml吡啶，将PH调至中性。该树脂用甲醇洗涤几次后注入玻璃柱，用甲醇洗涤，直至洗液变成无色。用0.01M盐酸的甲醇溶液洗提出碱性物质，合并含产品的组分，减压浓缩，直至产生沉淀。该产品经过滤、干燥，得到22.5g基本上与实施例1得到的等同产品。
实施例34-胍基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-苯甲酰胺盐酸盐(I，X＝6-NO2;W和Y＝H;Z＝H;n＝0;m＝1;R3、R4和R5＝H)将25g4-胍基苯甲酸N-羟基琥珀酰亚胺酯盐酸盐和31.2g6-硝基-2-氨基苯并噻唑的二甲基甲酰胺饱和溶液在120℃搅拌72小时，反应混合物冷却至室温，过滤，用少量二甲亚砜和甲醇洗涤固体，合并有机滤液和洗液，减压浓缩至100ml，施加于直径55mm装有甲醇的GC50交换树脂(H+型)柱，高22英寸。该柱用甲醇刺幔敝料匆罕涑晌奚幼庞 .01M盐酸盐的甲醇溶液洗提出碱性产品，收集PH为中性组分，减压浓缩，在Soxhlet提取装置中用甲醇重结晶，得到5.2g与实施例1得到的等同产品。
实施例4采用实施例2的方法，用适宜的2-氨基苯并噻唑和对-胍基苯甲酸酯制备下列化合物
XYWm.p.，℃6-ClHH315-318dec.
6-OCH3H H ＞300dec.
6-OC2H5H H 260-2635-CH36-CH3H 323-3256-CH3H H 299-302HHH250-2534-OCH3H H 295-300dec.
6-BrHH289-294dec.
6-CCNH2H H 316-3186-CF3H H 310-3126-NO24-CH3O H ＞350dec.
6-SCH3H H 270-2716-SO2NH2H H 225-2276-NH2H H 301-302dec.
6-SO2CH3H H 301-306dec.
6-CH(CH3)2H H 283-2846-CNHH322-326dec.
5-CON(CH3)2H H 203-2056-C6H5H H 287-293dec.
6-(CH2)3CH3H H 254-258dec.
6-SOCH3H H 210-2124-CF3H H 265-2674-CH3H H 1786-(CH2)2OH H H 300dec.
4-OCH37-Cl H 314
XYWm.p.，℃4-NO2H H 263-2645-FHH283-2845-F6-FH283-284实施例54-胍基-N-(3-苄氧基羰基甲基-6-硝基苯并噻唑-2-基)苯甲酰胺溴氢酸盐(IV，X＝6-NO2;R°＝φOCOCH2-)将3.0g4-胍基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)苯酰胺盐酸盐的5ml热二甲亚砜溶液用25ml浓氢氧化铵和25ml水进行处理，滤出黄色沉淀，依次用水(10ml)、甲醇(20ml)、乙醇(20ml)和醚(20ml)洗涤，干燥，得到2.5g产物。
将上述中性化合物(480mg)和4g苄基溴乙酸盐的10mlN-甲基-2-吡咯烷酮悬浮液于100℃加热，直至该反应混合物均化，冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，直至混浊，静置几小时。该固体过滤，用甲醇重结晶，得到400mg本题目化合物，m.p.242-247℃(分解)。
也可按类似方法，由溴乙酸叔丁基酯制得4-胍基-N-(3-叔丁氧基羰基甲基-6-硝基苯并噻唑-2-基)苯甲酰胺溴氢酸盐，m.p.269-275℃(分解)。
实施例64-胍基甲基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)苯甲酰胺甲磺酸盐(I，X＝6-NO2;W和Y＝H;m＝1;Z＝H;n＝1;R3、R4和R5＝H)在180℃，惰性气氛中，将7.0g4-胍基甲基苯甲酸N-羟基琥珀酰亚胺酯，5.5g6-硝基-2-氨基苯并噻唑和700mg氢醌的60ml N-甲基-2-吡咯烷酮溶液避光搅拌40分钟，该反应混合物冷却至室温，用400ml甲醇稀释，搅拌30分钟。该固体经过滤，滤波真空浓缩至100ml，施加于GC50(H+型)离子交换树脂柱，该树脂用甲醇洗涤，直至洗液变成无色。然后用0.01M甲磺酸的甲醇溶液洗提柱中物质，合并含产品组分，真空浓缩，在Soxhlet提取器中用甲醇重结晶该残余物，得到1.8g本题目化合物，m.p.300℃。
实施例7按实施例6的方法，用必要的试剂制备下列化合物 XYWm.p.，℃6-NO2H H 318-319dec.
6-NO24-CH3O H 283-289dec.
6-CF3H H 219-2216-CONH2H H 193-195
实施例83-胍基甲基-N-(6-苯基苯并噻唑-2-基)苯甲酰胺盐酸盐(I，X＝6-C6H5;W和Y＝H;Z＝H;n＝1;m＝1;R3、R4和R5＝H)在130℃，惰性气氛中，将5g3-胍基甲基苯甲酸N-羟基琥珀酰亚胺酯盐酸盐，8.8g2-氨基-6-苯基苯并噻唑和500mg氢醌的15mlN-甲基-2-吡咯烷酮悬浮液避光搅拌6小时，该反应混合物经冷却，用200ml甲醇稀释，施加于250gGC50离子交换树脂(H+型)，用吡啶将PH调节至5该树脂用甲醇洗涤，直至洗液变成无色，用0.01N盐酸的甲醇溶液洗提出碱性产品，合并含产品组分，真空浓缩，残余产品用甲醇重结晶，得到2.2g本题目化合物，m.p.180℃。
也可按类似方法制备3-胍基甲基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)苯酰胺盐酸盐，m.p.295-300℃(分解)。
实施例92-胍基-N-(5-氟苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝5-F;W和Y＝H;R1＝H;R2＝H;n＝0;m＝1;R3、R4和R5＝H)在125℃，惰性气氛中，将42.86g2-氨基-5-氟苯并噻唑盐酸盐，66.95g2-胍基噻唑-4-羧酸N-羟基琥珀酰亚胺酯盐酸盐和100mg氢醌的300mlN-甲基-2-吡咯烷酮悬浮液避光搅拌加热6小时。该反应混合物冷却至室温，用500ml5%碳酸氢钠水溶液稀释，得到的沉淀物过滤，用水(3×500ml)洗涤，干燥。粗产品用吡啶重结晶两次，得到22.5g本题目产品，m.p.290-291℃。
按类似方法可制备2-胍基-N-(5-氯-6-甲基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺，m.p.286-287℃(分解)。
实施例102-胍基-N-(5-氟苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺盐酸盐(Ⅱ，X＝5-F;W和Y＝H;R1＝H;R2＝H;n＝0;m＝1;R3、R4和R5＝H)采用4.08g2-氨基-5-氟苯并噻唑盐酸盐，6.37g2-胍基噻唑-4-羧酸N-羟基琥珀酰亚胺酯盐酸盐和10mg氢醌的30mlN-甲基-2-吡咯烷酮悬浮液，重复实施例9的方法，在该反应冷却后，用1.5l醚稀释该反应混合物，引起油性沉淀物分离，潷去醚，残素油溶于100ml二甲亚砜和50ml甲醇中。将得到的溶液在搅拌下缓慢加到2.5升醚中，得到沉淀物，过滤，干燥，得到6.7g本题目化合物。用甲醇研制纯化试样，m.p.279-280℃。
实施例112-胍基-N-(5-氟苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺钠盐(Ⅱ，X＝5-F;W和Y＝H;R1＝H;R2＝H;n＝0;m＝1;R3、R4和R5＝H)用540mg甲醇钠的5ml甲醇溶液处理3.36g实施例9产品的35ml二甲亚砜溶液，在搅拌10分钟后，该溶液用二乙醚稀释，直至沉淀开始形成。搅拌30分钟后，将固体过滤，先用少量水洗涤，再用乙醇和二乙醚洗涤，干燥，m.p.260-262℃。
用每摩尔盐酸盐2当量甲醇钠处理实施例10的产品，得到类似的钠盐制剂，实施例12按实施例10的方法，用适当试剂把下列化合物制成它们的所示酸成盐




实施例13按实施例11的方法，用适当的起始原料，制备下列化合物的钠盐 X Y W R2m.p.，℃6-CF3H H H6-FHHH290dec.
6-CH3O H H H 259-2614-ClHHH285dec.
6-CONH2H H H 265dec.
6-CH3CH2O H H H 259-2606-CH3H H H 260dec.
6-(CH3)2CH H H H 240-2425-CH3O 6-CH3O H H 230dec.
4-NO2H H H 234-2366-CH3s H H H 238-2405-ClHHH2487-CF3H H H 255-2585-FHHH275dec.
5-CF3H H H 205 2094CH3O 7-Cl H H 228-2305-CH3SO2H H H 258-2604-FHHH298-3006-CH3(CH2)4SO2H H H 265-2674-CH3CH27-F H H 179-1824-CH3O 7-F H H 272dec.
4-CH3CH27-Cl H H 273-2755-CH3O 7-CF3H H4-CH36-F H H 271-2734-F7-FHH340dec.
实施例14按实施例9的方法，用必要的试剂，合成下列化合物 X Y W R2m.p.，℃6-CF3H H H 265dec.
6-CH3O H H H 253-2545-FHHH290-2914-CH36-CF3H H 2494-CH3O 7-CF3H H 265-2666-CH3(CH2)5H H H 174-1756-NO2H H CH3320dec.
6-CF3H H CH3295-2966-CN H H CH3332dec.
6-(CH2)2OH H H CH3279-2806-CF3H H C2H5271-2726-NO2H H C2H5297-2985-F H H C2H52746-CF3H H n-C3H7232-2336-NO2H H n-C3H7272-2735-CH3O H H i-C3H72975-N(CH3)2H H i-C3H72726-C6H5H H i-C3H7266-2674-CH3O H H i-C3H7266-2676-C6H54-CH3O H C2H5264-265
实施例152-胍基-N-(3-甲基-6-硝基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅲ，X＝6-NO2;W和Y＝H;R1＝CH3;R2＝H;n＝0;m＝1;R3、R4和R5＝H)和2-胍基-N-甲基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝6-NO2;W和Y＝H;R1＝CH3;R2＝H;n＝0;m＝1;R3、R4和R5＝H)将739mg碘甲烷加到溶有2.0g2-胍基-N-(6-硝基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺的20mlN-甲基-2-吡咯酮溶液中，搅拌72小时后，将该混合物倒入100ml二乙醚中，过滤。用75ml二甲亚砜研制该固体，得到1.01g涉及Ⅲ的化合物，m.p.350(分解)。用甲醇稀释研制液，用二乙醚沉淀该产品，产生涉及Ⅱ的异构体215mg，m.p.272-274℃。
实施例162-(氨基乙硫基)-N-(6-苯基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺盐酸盐(Ⅱ，X＝6-苯基;Y，W，R1和R2＝H;Q＝5;P＝2和R4，R5＝H)A，2-(叔丁氧基羰基氨基乙硫基)-N-(6-苯基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺将3.8g(2-(叔丁氧基羰基氨基乙硫基)噻唑-4-羧酸N-羟基琥珀酰亚胺酯，2.36g2-氨基-6-苯基苯并噻唑和200mg4-二乙基氨基吡啶的60ml乙酸乙酯悬浮液搅拌回流加热15小时。将该反应混合物冷却，浓缩至10ml，产物沉淀过滤，用乙酸乙酯重结晶，得量2.04g，m.p.171-173℃。
用类似方法制备下述化合物2-(叔丁氧基羰基氨基乙硫基)-N-(5-氟苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺，m.p.198-199℃和2-(叔丁氧基羰基氨基乙硫基)-N-(3-甲基-5-氟苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺，m.p.204-205℃。
B，2-(氨基乙硫基)-N-(6-苯基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺盐酸盐将2.04g实施例16A产品的8ml三氟乙酸悬浮液在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，残余物悬浮于300ml乙酸乙酯中，依次用5%碳酸氢钠溶液(3×100ml)，水(2×100ml)和盐水溶液(100ml)洗涤。有机层用硫酸钠干燥，并浓缩至干。残余物溶于少量0.1N甲醇盐酸中，固体沉淀，过滤，干燥，得量840g，m.p.266-267℃。
用类似方法制备下述化合物2-(氨基乙硫基)-N-(5-氟苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺盐酸盐，mp.261-263℃(分解)和2-(氨基乙硫基)-N-(3-甲基-5-氟苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺盐酸盐，m.p.276-277℃(分解)。
实施例172-(二甲基氨基乙硫基)-N-(6-氰基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝6-CN;Y和W＝H;R1和R2＝H;Q＝NH;P＝2;R4和R5＝CH3)将2.19g2-氨基-6-氰基苯并噻唑加到288mg无油氢化钠的20ml无水二甲基甲酰胺的悬浮液中，搅拌40分钟后，将1.52g2-(二甲基氨基乙氨基)噻唑-4-羧酸乙酯加到3ml无水二甲基甲酰胺中，将该反应混合物搅拌24小时，用水(200ml)稀释，用二乙醚提取(3×250ml)，水层用IN盐酸调至PH7，过滤沉淀产品，将固体溶于30%甲醇-氯仿中，用碳酸钾干燥，浓缩至干，得2.56g粗产品，在300g硅胶上层析，用5%甲醇-氯仿洗脱，装成240管，合并第148-240管，浓缩，得到510mg所要求产品，m.p.201-203℃。
实施例182-(二甲基氨基乙氨基)-N-(6-苯基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝6-φ;Y和W＝H;R1和R2＝H;Q＝NH;p＝2;R4和R5＝CH3)按照实施例17的一般方法，由5.58g2-氨基-6-苯基苯并噻唑，3.0g2-(二甲基氨基乙氨基)噻唑-4-羧酸乙酯和592mg无油氢化钠反应，经层析后得到2.89g产品。该产品用乙腈重结晶进一步纯化，得到2.22g产品，m.p.172-174℃。
实施例192-(二甲基氨基乙氨基)-5-乙基-N-(5，6-二氯苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝6-Cl;Y-5-Cl;W＝H;R1＝H;R2＝C2H5;Q＝NH;p＝2;R4和R5＝CH3)按照实施例17的一般方法，将894mg2-氨基-5，6-二氯苯并噻唑，1.07g2-(二甲基氨基乙氨基)-5-乙基噻唑-4-羧酸乙酯和108mg无油氢化钠溶于25ml无水四氢呋喃中，将该溶液回流16小时，在硅胶上层析后，得到460mg所要求的产品，m.p.199-201℃。
实施例202-(二甲基氨基丙氨基)-5-乙基-N-(5，6-二氯苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝6-Cl;Y-5-Cl;W＝H;R1＝H;R2＝C2H5;Q＝NH;P＝3;R4和R5＝CH3)按类似于实施例19的方法，将1.10g2-氨基-5，6-二氯苯并噻唑，1.43g2-(二甲基丙氨基)-5-乙基噻唑-4-羧酸酯和144mg无油氢化钠在30ml无水四氢呋喃中反应，得到1.05g产品，m.p.189-191℃。
实施例212-(二甲基氨基丙氨基)-5-乙基-N-(6-氰基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝6-CN;Y-H;W＝H，R1＝H;R2＝C2H5;Q＝NH;P＝3;R4和R5＝CH3)按类似于17的方法，将673mg无油氢化钠，4.91g2-氨基-6-氰基苯并噻唑和4.0g2-(二甲基氨基丙基)-5-乙基噻唑-4-羧酸乙酯置于65ml无水二甲基甲酰胺中，在室温下反应48小时后，得到1.10g产品，m.p.159-161℃。
实施例222-(哌啶子基乙氨基)-N-(6-氰基苯并噻唑-2-基噻唑-4-甲酰胺(Ⅱ，X＝6-CN;Y-H;W＝H;R1＝H;R2＝H;Q＝NH;P＝2;R4和R5＝-(CH2)5-)采用实施例17的方法，将678mg无油氢化钠，4.95g2-氨基-6-氰基苯并噻唑和4.0g2-(哌啶子基乙氨基)噻唑-4-羧酸乙酯在65ml无水二甲基甲酰胺中反应，得到2.0g产品，m.p.230-232℃。
实施例232-氨甲基-N-(6-n-丁基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺氢溴酸盐(Ⅱ，X＝n-C4H9;Y＝H;W＝H;R1＝H;R2＝H;Q＝CH2;P＝0;R4和R5＝H)A.N-(4-乙氧基羰基噻唑-2-基)苯甲酰胺将19.02g苯甲酰硫脲和19.12g溴丙酮酸乙酯的300ml乙醇溶液回流2小时，真空除去溶剂，残余物分布于乙酸乙酯(1l)和20%碳酸钠水溶液(400ml)中。分离有机层，依次用20%碳酸钠水溶液(3×400ml)，水(2×400ml)和盐水溶液(2×400ml)洗涤，用硫酸钠干燥。将该溶液浓缩至约50ml，沉淀的固体经过滤，干燥，得到20.16g，m.p.146-147℃。
B.2-氨基乙基噻唑-4-羧酸盐酸盐将实施例23A产品(19.16g)加到25ml浓盐酸中，并回流2小时。冷却该反应混合物，产品经过滤和干燥，得到11.8g产物，m.p.281-282℃。
C.2-(叔丁氧基羰基氨甲基)噻唑-4-羧酸将10ml3N氢氧化钠水溶液加到2.5g实施例23B产品的25ml二噁烷冷却(10℃)溶液中，该溶液在10℃搅拌30分钟，加入叔丁氧基碳酸酐(3.27g)，再搅拌6小时。该混合物可升温至室温，真空除去溶剂，将残余物溶于200ml水中，然后用乙酸乙酯提取(4×400ml)，废弃有机层，用柠檬酸酸化水层至PH2，再用乙酸乙酯提取(4×300ml)，合并提取液，用水(2×100ml)和盐水溶液(1×150ml)提取。用硫酸钠干燥乙酸乙酯提取液，浓缩至25ml，该产品经过滤，干燥，得到2.9g产物，m.p.185℃。
D.琥珀酰亚胺基2-(叔丁氧基羰基氨甲基)噻唑-4-羧酸盐将940mgN-羟基琥珀酰亚胺加到1.75g实施例23C产品的10ml四氢呋喃溶液中，该溶液在冰浴中冷却至＜10℃，加入二环己基碳化二亚胺(1.67g)，然后充氮下搅拌16小时。将该固体过滤，真空除去溶剂，残余物吸收在800ml乙酸乙酯中，依次用10%柠檬酸水溶液(3×150ml)，饱和碳酸氢钠水溶液(3×150ml)，水(1×100ml)和盐水溶液(1×100ml)洗涤。有机相用硫酸钠干燥，浓缩至25ml。将该产品过滤，用乙酸乙酯重结晶，得到2.12g产物，m.p.171℃。
E.2-叔丁氧基羰基氨甲基)-N-(6-正丁基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺将置于75ml乙酸乙酯溶液中的4.82g2-氨基-6-亚丁基苯并噻唑，7.1g实施例23D产品和250mg4-二甲基氨基吡啶的混合物回流15小时，该混合物冷却至室温，用1升乙酸乙酯稀释，该有机溶液依次用10%柠檬酸水溶液(3×200ml)，水(1×200ml)，饱和碳酸氢钠水溶液(3×200ml)，水(1×200ml)和盐水溶液(1×200ml)洗涤，有机相用硫酸钠干燥，浓缩至30ml，冷却形成的固体经过滤，干燥，得到6.1g产品，m.p.143-144℃。
F.2-氨甲基-N-(6-正丁基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺氢溴酸盐将3.5g实施例23E产品的50ml33%氢溴酸盐混合物置于乙酸中，回流加热10分钟，在室温搅拌过夜后，该反应混合物用25ml乙酸稀释，过滤。该固体用乙醇重结晶，得到723mg产物，m.p.255-257℃(分解)。
权利要求
1.一种下式化合物的制备方法 其中M是 式中X是(C1-C5)烷基，氢，(C1-C5)烷氧基，(C1-C5)烷硫基，(C1-C5)烷基亚磺酰基，(C1-C5)烷基磺酰基，氟，氯，溴，硝基，三氟甲基，氨甲酰基，N，N-二(C1-C3)烷基氨甲酰基，苯基，氟苯基，甲氧苯基，羟基苯基，氰基，环已基或羟基(C1-C5)烷基；Y是氢，(C1-C5)烷基，(C1-C5)烷氧基，氟或氯；W是氢，(C1-C5)烷氧基，(C1-C5)烷基，氰基，氟，氯或溴；当X和Y一起形成苯并环或四氢苯并环时，Z是氢，氟，氯，溴或(C1-C3)烷基；R是下式取代基 式中m是整数0至1；n是整数0至2；R3，R4和R5各是氢或(C1-C3)烷基；Q是CH2，O，NR4或S；P是整数0至3，R4和R5一起和与之联接的氮一道构成哌啶子基，吡咯烷酮基，吗啉代，硫代吗啉代，哌嗪子基或4-(C1-C5)烷基哌嗪酮；R1是氢或甲基；R2是氢，(C1-C4)烷基，硝基，氰基，三氟甲基，氟，氯或溴，其前提是在M是苯基的化合物中，R在m或p位与羰基连接，当Q是O、NR4或S时，p是2至3，该方法的特征在于式M-CO2H酸衍生物与下式2-氨基苯并噻唑 或其碱金属盐在惰性反应溶剂中反应，直至反应基本完成，而且任意烷化其中R1是氢的产品。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于酸衍生物是N-羟基琥珀亚胺酯，惰性反应溶剂是二甲基甲酰胺，二甲亚砜或N-甲基-2-吡咯烷酮。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于酸衍生物是酰基氯，惰性反应溶剂是二甲基甲酰胺，二甲亚砜或乙腈。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于酸衍生物是烷基酯，2-氨基苯并噻唑是其钠盐，惰性反应溶剂是二甲基甲酰胺，二甲亚砜或乙腈。
全文摘要
本文介绍作为抗瘤剂的2-氨基苯并噻唑的酰基衍生物和其烷化同系物的制备方法。
文档编号C07C29/36GK1038088SQ89103430
公开日1989年12月20日 申请日期1989年5月25日 优先权日1988年5月25日
发明者安东·弗朗兹·约瑟夫·弗里利, 罗德尼·考伦·斯纽尔 申请人:美国辉瑞有限公司