专利名称：从黑大蒜提取物废液中提取大蒜多糖技术的制作方法
技术领域：
本发明是属于食品、医药领域，具体涉及一种从黑大蒜中提取蒜氨酸后的废液(以下简称蒜氨酸废液)中利用固定化酶技术提取大蒜多糖技术。
背景技术：
大蒜为百合科葱属植物蒜(Allium sativum L.)的地下鳞莖,为多年生草本植物，是历史悠久的药食两用植物。大蒜具有独特的药理活性，其可以降低心血管病和癌症的风险。蒜氨酸是大蒜中的原始功效成分，高蒜氨酸大蒜制品和高纯药用蒜氨酸具有极高的商业价值；大蒜多糖具有增强免疫系统活力的生理功能，在肿瘤的防治中起着至关重要的作用。目前，人们对于蒜氨酸的提取研究做了大量的工作。CN02152304.5描述了一种从大蒜中提取蒜氨酸的方法，在经过制蒜汁、发酵、离子交换树脂分离等一系列工艺后，提取了蒜氨酸。但是，大多数研究都只是单独提取蒜氨酸，而提取蒜氨酸后的废液往往被人们弃之不用，这样不仅造成了极大的浪费，而且还给环境带来了极大的污染。此外，在废液中含有大量的大蒜多糖，大蒜多糖具有增强免疫系统活力的生理功能，在肿瘤的防治中起着至关重要的作用。黑大蒜是用新鲜的生蒜，带皮放在高温高湿的发酵箱里保存6(Γ90天，让其自然发酵制成的食品。我们知道大蒜本身就是非常好的保健食品，而黑蒜的作用更是惊人。黑大蒜的发酵大体经历两个过程，一个是厌氧发酵过程，就是在缺氧的条件下，对陈蒜(经过一段时间的储存，以降低水分，积聚酶含量)进行15天左右高温高湿处理，在经过该阶段之后，进入下一阶段，有氧发酵阶段，该阶段需要用时20-25天左右，该阶段不需要特出的缺氧和高温高湿，在正常的加工间就能加工。经过两个阶段的发酵后，大蒜的品质发生了明显变化， 主要表现在三个方面外观变化蒜皮和蒜肉部分分离；蒜肉变成墨黑色；硬度变低，变得比较柔软。内在品质变化水分散失大半，质量变轻；组成成分变化口味变化没有了蒜的辛辣味，有酸甜味。经过发酵和熟成后的黑蒜具备了远远凌驾于普通大蒜之上的保健效果。特别是其强大的调整血液流通的效果及抗氧化力。虽然这些效果普通的大蒜也可以达到，但是黑蒜在进行发酵成熟的过程中，在强化了原来所固有的成分力量的基础上又产生了全新的成分，它的保健效果变得更加强大。本发明就是以黑大蒜为原料，从提取蒜氨酸后的废液(以下简称蒜氨酸废液)中利用固定化酶技术提取大蒜多糖一种技术。
发明内容
本发明的目的是为了克服蒜氨酸废液利用效率低的缺点而发明的一项新技术。本技术是通过在蒜氨酸废液中添加特定的用大孔树脂固定化的蛋白酶，蛋白酶可以切断与多糖共价结合的蛋白链，使得蛋白沉淀下来，脱除蛋白。经过过滤得到大蒜多糖的溶液。在本技术中，将酶用大孔树脂固定化，加大了酶与蛋白的接触面积，增加了酶解效率。此外，酶固定化以后，在分离大蒜多糖的时候，就无需再进行灭酶工艺，而且固定化的酶还可以重复利用，降低了生产成本。本技术的具体方法如下收集IL蒜氨酸废液，调节PH至3. 5、. 5，升温至15 9(TC，往废液中加入用大孔树脂固定化后的酶，控温在15 9(TC，反应f 12h，过滤除去大孔树脂固定化的酶和沉淀下来的蛋白，滤液经过真空浓缩、冷冻干燥即得到大蒜多糖粉末。在本技术中固定化酶的具体方法如下采用电子天平准确称取1. OOOOg左右的湿树脂，然后转移到IOOml锥形瓶中；采用刻度吸管准确吸取10. Oml配置好的5mg/ml的脂肪酶溶液并使转移到锥形瓶中，然后再用移液管吸取40. Oml pH=7. O的磷酸缓冲溶液，轻微摇动使体系混合均匀。用保鲜膜将锥形瓶盖好，然后放入恒温振荡器中，在37°C、200rpm的条件下搅拌12h，过滤即得到用大孔树脂固定化的酶。本技术中所用的大孔树脂为GMA-EGDMA大孔树脂，GMA-MBAA大孔树脂，GMA-DVB大孔树脂。本技术中所用的酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶。
具体实施例方式为了更好地理解本发明的技术方案，以下通过具体的实施例进一步作详细描述。实施例1 :
收集IL蒜氨酸废液，调节PH至6. 0，升温至30°C，往废液中加入用GMA-EGDMA大孔树脂固定化的木瓜蛋白酶，控 温在30°C，反应4h，过滤除去大孔树脂固定化的酶和沉淀下来的蛋白，滤液经过真空浓缩、冷冻干燥即得到大蒜多糖粉末。实施例2:
收集IL蒜氨酸废液，调节PH至6. 5，升温至30°C，往废液中加入用GMA-MBAA大孔树脂固定化后的菠萝蛋白酶，控温在40°C，反应4h，过滤除去大孔树脂固定化的酶和沉淀下来的蛋白，滤液经过真空浓缩、冷冻干燥即得到大蒜多糖粉末。实施例3:
收集IL蒜氨酸废液，调节PH至7. 0，升温至30°C，往废液中加入用GMA-MBAA大孔树脂固定化后的木瓜蛋白酶，控温在50°C，反应6h，过滤除去大孔树脂固定化的酶和沉淀下来的蛋白，滤液经过真空浓缩、冷冻干燥即得到大蒜多糖粉末。实施例4:
收集IL蒜氨酸废液，调节PH至7. 5，升温至35°C，往废液中加入用GMA-DVB大孔树脂固定化后的菠萝蛋白酶，控温在55°C，反应7h，过滤除去大孔树脂固定化的酶和沉淀下来的蛋白，滤液经过真空浓缩、冷冻干燥即得到大蒜多糖粉末。实施例5:
收集IL蒜氨酸废液，利用氨水调节PH至7. 3，升温至35°C，往废液中加入用GMA-DVB大孔树脂固定化的木瓜蛋白酶，控温在60°C反应10h，过滤除去大孔树脂固定化的酶，滤液经过真空浓缩、冷冻干燥即得到大蒜多糖粉末。实施例6 收集IL蒜氨酸废液，利用氨水调节PH至7. 5，升温至35°C，往废液中加入用GMA-MBAA大孔树脂固定化的菠萝蛋白酶，控温在55°C反应10h，过滤除去大孔树脂固定化的酶，滤液经过真空浓缩、冷冻干燥即得到大蒜多糖粉末。测试实施例
以各实施例所得的大蒜多糖粉末量为指标评价该技术从蒜氨酸废液中提取大蒜多糖数量。
权利要求
1.一种应用于从黑大蒜中提取蒜氨酸后的废液(以下简称蒜氨酸废液)中提取大蒜多糖的的技术，其特征在于收集IL蒜氨酸废液，调节PH至3. 5^9. 5，升至一定温度，往废液中加入用大孔树脂固定化后的酶，控制在一定的温度，反应一段时间，过滤除去大孔树脂固定化酶和蛋白，滤液经过真空浓缩、冷冻升华干燥即得到大蒜多糖粉末。
2.如权I所述的应用于从蒜氨酸废液中提取大蒜多糖的技术，其特征在于废液的pH值控制在3. 5 9. 5。
3.如权I所述的应用于从蒜氨酸废液中提取大蒜多糖的技术，其特征在于本技术中调节废液的PH值至3. 5^9. 5后，升温至15 90°C。
4.如权I所述的应用于从蒜氨酸废液中提取大蒜多糖的技术，其特征在于本技术中所用的大孔树脂为GMA-EGDMA大孔树脂，GMA-MBAA大孔树脂，GMA-DVB大孔树脂。
5.如权I所述的应用于从蒜氨酸废液中提取大蒜多糖的技术，其特征在于本技术中所用的酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶。
6.如权I所述的应用于从蒜氨酸废液中提取大蒜多糖的技术，其特征在于本技术中加入大孔树脂固定化的酶后，控温在15 90°C，反应f 12h。
全文摘要
本发明为从黑大提取物废液中提取大蒜多糖技术，涉及食品、医药领域，是一种从黑大蒜中提取蒜氨酸后的废液中利用固定化酶技术提取大蒜多糖技术，本技术是通过在蒜氨酸废液中添加特定的用大孔树脂固定化的蛋白酶，脱除蛋白。经过过滤得到大蒜多糖的溶液。在本技术中，将酶用大孔树脂固定化，加大了酶与蛋白的接触面积，增加了酶解效率。此外，酶固定化以后，在分离大蒜多糖的时候，就无需再进行灭酶工艺，而且固定化的酶还可以重复利用，降低了生产成本。
文档编号C08B37/00GK103059153SQ201210452030
公开日2013年4月24日 申请日期2012年11月13日 优先权日2012年11月13日
发明者秦大伟, 薛乃峰, 赵保翠, 于功明, 刘先华 申请人:山东省巨野晨农天然产物有限公司, 山东轻工业学院