一种独角莲多糖提取物的制备方法
【专利摘要】一种独角莲多糖提取物的制备方法，涉及一种多糖提取物的制备方法，具体包括以下制备步骤：向干燥的独角莲根茎粉末中加入1-10%重量比的复合酶和3-15重量比的水超声波条件下进行酶解；超声波条件下进行提取\抽滤；再通过离心机浓缩,采用70-95％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，醇沉6-18小时，在3000转/分转速下离心5-20分钟，收集离心杯底部多糖；干燥，得独角莲多糖提取物产品。本发明工艺操作简单实用，应用该工艺提取的独角莲多糖节省提取时间，提取率高，提取物具有显著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。
【专利说明】一种独角莲多糖提取物的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种多糖提取物的制备方法，特别是涉及一种独角莲多糖提取物的制备方法。
【背景技术】
[0002]独角莲(Typhoniumgiganteum Engl.)为天南星科(Araceae)犁头尖属(Typhonium Schott)植物，是中国特有的一种植物。独角莲主要产于河南、四川、陕西等地，现全国各地亦多栽培，东北地区产量极高，且价格较低廉。《民间草药》、《中药大辞典》记载，独角莲球茎供药用，逐寒湿、祛风痰、镇痉、治中风痰壅，口眼歪斜、破伤风、治跌打损伤、淋巴结核。迄今为止，对这种植物的研究仍较少，仅限于民间偏方使用，对其有效活性成分的研究及应用也处于开发阶段。
[0003]多糖是一种广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物细胞壁中的天然大分子物质，是一种重要的生物体能量资源和构成材料，同时还参与细胞的多种活动。研究表明，许多植物多糖具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗辐射和延缓衰老等生物活性。
[0004]根据资料查询和本专利 申请人:试验研究证明，从独角莲中提取的独角莲多糖具有显著提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化等功能。独角莲多糖是纯天然物质，可以通过食品添加剂、颗粒冲剂、口服液、胶囊、滴丸、软胶囊等形式制备成保健品或药品。本专利 申请人:发表的论文介绍了使用水提醇沉法提取独角莲多糖，Sevag法除蛋白的纯化方法，但该提取方法存在提取时间长，耗能高、活性成分提取物收率低等问题。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种独角莲多糖提取物的制备方法，该方法包括材料预处理、超声提取或微波提取、浓缩、醇沉、收集、干燥、包装保存等，应用该工艺提取的独角莲多糖节省提取时间，提取率高，提取物具有显著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。
[0006]本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
一种独角莲多糖提取物的制备方法，所述方法利用复合酶在超声条件下对药材进行酶解、再进行超声提取、浓缩、醇沉、收集、干燥制得，具体包括以下制备步骤:
O向干燥的独角莲根茎粉末中加入1-10%重量比的复合酶和3-15重量比的水，在30-90°C下，25ΚΗζ-100ΚΗζ的超声波条件下进行酶解0.5_5h，酶解结束后加热灭活复合酶；
2)25KHz-100KHz的超声波条件下进行1_4次提取，每次l_5h，合并提取液进行抽滤；再通过离心机在2000-4000转/分的条件下离心5-20分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；
3)上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/5即可合并提取液；
4)采用70-95%浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，醇沉6-18小时，在3000转/分转速下离心5-20分钟，收集离心杯底部多糖；5)干燥，得独角莲多糖提取物产品。
[0007]所述的一种独角莲多糖提取物的制备方法，所述复合酶是木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶、角质酶、多酞聚糖酶和淀粉酶的任意两种或多种混合物。
[0008]本发明的优点与效果是:
本发明提供了一种安全、环保、高效的独角莲多糖提取方法，该方法提取率高、纯度高，使用超声波复合酶法提取独角莲多糖，包括材料预处理、超声提取或微波提取、浓缩、醇沉、收集、干燥、包装保存等工艺步骤，该工艺操作简单实用，应用该工艺提取的独角莲多糖节省提取时间，提取率高，提取物具有显著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。
【具体实施方式】
[0009]下面结合实施例，对本发明作进一步详述。
[0010]下述实施例中所用试剂均为市售产品，下面结合实施例对发明进行详细说明。
[0011]实施例1:
将复合酶(0.5g木瓜蛋白酶、0.5g纤维素酶、和0.5g淀粉酶)加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水200ml，在25KHz的超声波发生器中，30°C下，超声酶解2h，酶解结束后，在100°C下灭酶lh。选用频率为10KHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次lh，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心10分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在601:对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/5即可；采用95%浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉12小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50°C真空干燥；收率3.1%，多糖含量38.9%。
[0012]实施例2:
将复合酶(1.0g纤维素酶、和0.5g果胶酶)加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水250ml，在25KHz的超声波发生器中，30°C下，超声酶解2h，酶解结束后，在100°C下灭酶lh。选用频率为SOKHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次lh，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心10分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在601:对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；采用80%浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉10小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50°C真空干燥；收率3.5%,多糖含量32.4%ο
[0013]实施例3:
将复合酶(1.0g纤维素酶、和0.5g淀粉酶)加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水500ml，在25KHz的超声波发生器中，30°C下，超声酶解4h，酶解结束后，在100°C下灭酶lh。选用频率为10KHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次lh，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心10分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在601:对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；采用90%浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉12小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50°C真空干燥；收率3.3%，多糖含量34.4%。
[0014]实施例4:
将复合酶(0.5g酸性蛋白酶和0.5g多酞聚糖酶)加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水300ml，在25KHz的超声波发生器中，30°C下，超声酶解lh_4h，酶解结束后，在100°C下灭酶0.5-lh。选用频率为10KHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次Ih，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心15分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在601:对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；采用，75%浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉12小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50°C真空干燥 ；收率3.1%，多糖含量33.8%。
【权利要求】
1.一种独角莲多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述方法利用复合酶在超声条件下对药材进行酶解、再进行超声提取、浓缩、醇沉、收集、干燥制得，具体包括以下制备步骤: 1)向干燥的独角莲根茎粉末中加入1-10%重量比的复合酶和3-15重量比的水，在30-90°C下，25ΚΗζ-100ΚΗζ的超声波条件下进行酶解0.5_5h，酶解结束后加热灭活复合酶； 2)25KHz-100KHz的超声波条件下进行1_4次提取，每次l_5h，合并提取液进行抽滤；再通过离心机在2000-4000转/分的条件下离心5-20分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩； 3)上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/5即可合并提取液； 4)采用70-95%浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，醇沉6-18小时，在3000转/分转速下离心5-20分钟，收集离心杯底部多糖； 5)干燥，得独角莲多糖提取物产品。
2.根据权利要求1所述的一种独角莲多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述复合酶是木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶、角质酶、多酞聚糖酶和淀粉酶的任意两种或多种混合物。
【文档编号】A61P39/06GK104072627SQ201410243448
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年6月4日 优先权日:2014年6月4日
【发明者】宋艳玲, 鲍微泽, 贾金龙, 孙欢, 刘晓娟 申请人:沈阳化工大学