一种核酸的双接头单链环状文库的构建方法和试剂与流程

文档序号:11633204阅读:297来源:国知局

pct国内申请,说明书已公开。



技术特征:

技术总结
一种核酸的双接头单链环状文库的构建方法和试剂,该方法包括:将核酸打断成核酸片段;连接第一接头序列;扩增得到两端具有第一接头序列的第一产物,其中引物序列上具有U碱基;用USER酶酶切第一产物,环化产生缺口;或引物序列上还具有切口酶识别序列,用USER酶酶切第一产物,环化并使用切口酶酶切产生切口;从切口或缺口处进行限制性切口/缺口平移反应;消化除去未发生限制性切口/缺口平移反应的部分;连接第二接头序列;扩增得到两端具有第二接头序列的第二产物;变性第二产物,并使用介导序列对单链核酸分子进行环化。该方法能够提高文库插入片段长度,并且无需切胶回收;单链核酸分子热变性后可以直接进行环化。

技术研发人员:江媛;赵霞;阿莱克谢耶夫·安德烈;徳马纳克·拉多杰;章文蔚;蒋慧
受保护的技术使用者:深圳华大基因研究院;深圳华大基因科技有限公司
技术研发日:2014.11.26
技术公布日:2017.08.01
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