一种海洋放线菌基因组文库及其构建方法与流程

文档序号:11145190阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,包括:

步骤A、提取海洋放线菌S.arenicola CNS-205的DNA;

步骤B、采用注射器的针头随机剪切提取的DNA;

步骤C、采用末端修复酶修复经随机剪切后的DNA,然后与载体连接;

步骤D、采用包装蛋白包装成噬菌体后侵染宿主细胞,得到海洋放线菌S.arenicola CNS-205的基因组文库。

2.根据权利要求1所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,所述步骤B具体包括:采用注射器的针头随机剪切提取的DNA,直至剪切后的DNA片段集中到25~45kb之间。

3.根据权利要求2所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,剪切后的DNA片段集中到40kb。

4.根据权利要求1所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,所述步骤C中,所述末端修复酶为T 4 DNA聚合酶或T 4多聚核苷酸激酶。

5.根据权利要求1所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,所述步骤C中,所述载体为pWEBTM载体。

6.根据权利要求5所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,所述pWEBTM载体为去磷酸化的pWEBTM载体。

7.根据权利要求1所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,所述步骤D中,所述包装的条件为28℃水浴120min。

8.根据权利要求1所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,所述步骤D之后还包括:

步骤E、对基因组文库的质量进行鉴定。

9.根据权利要求8所述的海洋放线菌基因组文库的构建方法,其特征在于,步骤E中,鉴定内容包括:插入片段的大小、克隆数的多少及覆盖基因组 DNA 的程度。

10.一种海洋放线菌的基因组文库,其特征在于,所述基因组文库采用如权利要求1~9任一所述的方法构建而成。

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