一种带有气室的药物筛选生物芯片的使用方法与流程

文档序号:12410518阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种带有气室的药物筛选生物芯片的使用方法,使用的带有气室的药物筛选生物芯片分为3层,最上一层是上片(19),为进样装置及气体通道,包括、气体入口(3)、气室通道(4)、通气道(8)、气室(9)、气体出口(14),和贯通上片(19)和中片(20)的“V”型进样口一(1)、“V”型进样口二(17)、出口(12);中间一层是下片(20),主要为液体流通管道,包括“V”型通道(2)、涡轮结构(5)、直通道(18)、弧形通道一(6)、培养区(7)、弧形通道二(15)、废液池(10)、“U”型结构(16);底层为芯片基底(13);在芯片的上片(19)加工有从气体入口(3)开始的,连通气室通道(4)、气室(9)、到气体出口(14)结束的结构,这些结构呈一条连接直线排布;对应上片(19)这条连接直线的两侧,在下片(20)对称加工有两组“V”型进样通道、两个培养区(7),对应上片(19)这条连接直线上,在下片(20)加工有废液池(10)、排出通道(11)、出口(12);每组“V”型进样通道是由“V”型进样口一(1)、“V”型进样口二(17)2个进样口,和2条“V”型通道(2)连接汇流而成;两组“V”型进样通道的开口以上片(19)的连接直线为对称轴,开口向外呈“水”字对称排布;在每组2条“V”型通道(2)汇流处,加工有涡轮结构(5);每组对称的“V”型通道(2)汇流后,分别与2条平行于上片(19)连接直线的直通道(18)相连,直通道(18)与弧形通道一(6)连接;弧形通道一(6)的另一端与培养区(7)一端连接,培养区(7)另一端通过弧形通道二(15)连接到废液池(10);废液池(10)通过排出通道(11)与出口(12)连接;气室(9)通过两条通气道(8)分别与两个培养区(7)相连,即两个培养区(7)通过两条通气道(8)共用气室(9);一种带有气室的药物筛选生物芯片的使用方法,其特征在于:

第一步,清洗:先堵住气体出口(14),在气体入口(3)通入高纯氮气0.5h-1h,气体经气室通道(4)到达气室(9),再经通气道(8)到两个“V”型进样口一(1)和“V”型进样口二(17),以及出口(12)排出;随后打开气体出口(14),封堵两个“V”型进样口一(1)和“V”型进样口二(17),以及出口(12),继续通入高纯氮气0.5h-1h,气体由气体出口14排出;气体通入全部结束后,关闭气体,封堵气体入口(3)和气体出口(14);再用注射泵在芯片的两个“V”型进样口一(1)和“V”型进样口二(17)通入三级去离子水,去离子水在出口(12)用泵吸出;连续通入三级去离子水2h-3h;

第二步,实验进样:用注射泵在芯片内通入细胞培养液0.5h-2h,然后,依据药物筛选的药物和药物对象的病理癌症细胞,将生长状态良好的癌症细胞从培养皿中吹打均匀,通过注射泵,从“V”型进样口一(1)或“V”型进样口二(17)导入芯片的各个培养区(7),进行等量癌症细胞培养;或者,从“V”型进样口一(1)加入实验癌症细胞,从“V”型进样口二(17)加入实验药物,导入芯片的各个培养区(7),进行等量癌症细胞培养;打开气体入口(3)和气体出口(14),按细胞培养规定,实时连续通入所需气体;每24h通过注射泵和吸液泵更换一次细胞培养液;实验癌症细胞培养48h后,关闭芯片的细胞培养液供给;

第三步,给药及筛选检测:从“V”型进样口一(1)或“V”型进样口二(17),依次注入浓度呈梯度变化的抗癌药物培养液,用显微镜观察培养区(7)内的癌症细胞;开启高清摄像机或DVD,记录细胞形态变化和繁殖情况;

第四步,实验结束清洗:药物筛选检测实验结束后,重复第一步的清洗步骤,清洗生物芯片。

2.根据权利要求1所述的一种带有气室的药物筛选生物芯片的使用方法,所述培养区(7),两个培养区(7)尺寸一致,均为深1mm-2mm、直径2mm-5mm的圆桶形,气室(9)俯视为菱形,高度0.5mm,边长≥2mm,废液池(10)为长方体形,深为1mm-2mm、短边长≥5mm。

3.根据权利要求1所述的一种带有气室的药物筛选生物芯片的使用方法,所述的培养区(7),在两个培养区(7)与废液池(10)相连的弧形通道二(15)一侧,与圆柱形培养区(7)内壁相距5μm处,各加工有一个“U”型结构(16),“U”型结构(16)是宽为30μm-60μm,等高于培养区(7)的半圆弧形墙;所述弧形通道一(6)和弧形通道二(15)均为1/4圆弧形,并两两成对,对称分布在上片(19)连接直线的两侧。

4.根据权利要求1所述的一种带有气室的药物筛选生物芯片的使用方法,所述的涡轮结构(5)为两个半圆错位相对形成“S”形通道;涡轮结构位于2条“V”型通道(2)汇流相交为1条通道 的“V”字的底尖处,两个半圆间隔距离为“V”型通道(2)宽度的1/2。

5.根据权利要求1所述的一种带有气室的药物筛选生物芯片的使用方法,所述的下片(20)加工的通道,全部高为800μm -1000μm,宽为300μm-600μm。

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