一种基于分子印迹技术的壳四糖单体分离提取方法与流程

文档序号:11107330阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于分子印迹技术的壳四糖单体分离提取方法,其特征在于,该分离提取方法步骤如下:

1)布袋式过滤:将壳聚糖酶解液用布袋式过滤机进行过滤,并静置澄清20min,除去壳聚糖酶解液中的颗粒杂质和不溶物;

2)纳滤膜过滤:将布袋式过滤机过滤后的液体用纳滤膜G5进行过滤,获得平均分子量小于1000DA的壳寡糖混合组分透过液;

3)壳四糖分子印迹树脂吸附:将壳寡糖混合组分透过液流过装有壳四糖分子印迹树脂的树脂柱,利用壳四糖分子印迹树脂选择性吸附透过液中的壳四糖,实现壳四糖单体与其它壳寡糖组分的分离;

4)壳四糖分子印迹树脂洗脱:壳四糖分子印迹树脂吸附饱和后,用洗脱剂进行洗脱;

5)脱除锌离子:将洗脱液用活性炭G-60处理后过滤,使得壳四糖和锌离子分离,壳四糖被活性炭吸附;收集活性炭,然后用乙醇与去离子水的混合液将壳四糖洗脱下来,并用盐酸溶液调节溶液pH值至2-4;

6)冷冻干燥:收集壳四糖洗脱液,经真空浓缩冻干后,得到壳四糖单体产品。

2.根据权利要求1所述的一种基于分子印迹技术的壳四糖单体分离提取方法,其特征在于,所述的步骤2)中壳四糖分子印迹树脂的合成方法如下:

壳四糖分子印迹树脂中各原料的重量配比为:主单体65-95份;配位单体5-15份;致孔剂5-9份;分散剂0.5-1.5份;引发剂0.05-0.3份;

将配位单体和引发剂按重量份配比溶于无水乙醇中,使得配位单体和引发剂在无水乙醇中的质量百分比浓度为10-20%,然后将混合液与主单体,致孔剂混合均匀;在强力搅拌下,将此混合体系缓慢加到含有分散剂的三口烧瓶中,通入氮除氧30 min;用恒温水浴加热至72-78℃,调控搅拌速度,聚合反应6h,然后升温至80-90℃再继续反应3h;冷至20-30℃后,将聚合物微球过滤、洗涤得到分子印迹树脂微球;将制备的分子印迹树脂微球装入萃取器中,用无水乙醇萃取处理6h,除去致孔剂、引发剂和未反应的少量残留单体,室温凉干后,用洗脱剂溶液搅拌浸泡处理,洗脱掉印迹模板分子和锌离子,再用去离子水洗至pH值至6-8,然后用0.01mol/L的锌离子溶液配位平衡后,并在50-70℃真空干燥,制得壳四糖分子印迹树脂微球。

3.根据权利要求2所述的一种基于分子印迹技术的壳四糖单体分离提取方法,其特征在于,所述的配位单体为N-[2-(二甲氨基)乙基]-N'-[(2-羟基-4-乙烯基苯基)]草酰胺双核锌-壳四糖,主单体为乙二醇二甲基丙烯酸酯,致孔剂为石油醚90-120,引发剂为偶氮二异丁腈,分散剂为聚乙烯醇。

4.根据权利要求1或2所述的一种基于分子印迹技术的壳四糖单体分离提取方法,其特征在于,所述的洗脱剂为0.1 mol/L的盐酸溶液。

5.根据权利要求1所述的一种基于分子印迹技术的壳四糖单体分离提取方法,其特征在于,所述的乙醇和去离子水的混合液中乙醇与去离子水的质量比为1:1。

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