一种鼠妇蛋白多肽的提取方法及其应用与流程

文档序号:15363143发布日期:2018-09-05 01:07阅读:375来源:国知局
本发明涉及一种蛋白多肽的提取方法,具体涉及一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法。
背景技术
::鼠妇为甲壳纲等足目卷甲虫科动物卷甲虫或潮虫科动物鼠妇的整虫,又名鼠负、鼠姑、潮虫、地鸡、湿生虫等,是甲壳纲中唯一完全适应陆地生活的动物。食用蛋白主要功能是在食品、饮料中补充添加水解后得到的蛋白质,能给人体补充易于吸收的复合蛋白质、氨基酸,能有效改善人体营养结构,尤其是使蛋白类物质的营养结构达到均衡的比例,从而间接的达到增强体质,促进发育,减少发病的作用。关于鼠妇蛋白多肽的提取,相关报道较少,而从仅有的专利中可以看到:中国专利cn201610920569.9一种鼠妇纤溶活性蛋白及其应用中并没有进行脱脂处理,而是采取后期进行离子交换、凝胶过滤等多次层析后再进行超滤浓缩制得活性蛋白,成本较高;同样的专利还有中国专利cn201510042710.5一种鼠妇提取物及其应用,其采用的是传统方法,通过使用硫酸铵对蛋白质沉淀后采用透析法除去硫酸铵。技术实现要素::本发明的目的在于,提供一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法,以解决上述技术问题。本发明工艺简单,提取得到的蛋白多肽具有较高的品质。为实现上述目的,本发明提供如下方案:本发明提供一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法,包括如下步骤:(1)将鼠妇饥饿处理5~10h后,然后洗净、干燥,粉碎过60~80目筛,得到鼠妇粉末;(2)取步骤(1)的鼠妇粉末,加入石油醚,超声提取20~30min,过滤后,置于35~45℃烘箱中干燥,得脱脂鼠妇粉末;(3)取步骤(2)的脱脂鼠妇粉末,加入ph=2的盐酸溶液,然后加入胃蛋白酶,35~38℃下搅拌保温3~5h,每隔1h调节一次ph值,过滤,收集滤液;(4)将步骤(3)的滤液在3000~3500r/min条件下离心15~20min,取上清液,经真空低温浓缩并真空冷冻干燥后得到鼠妇蛋白多肽。进一步的,所述步骤(2)中鼠妇粉末与石油醚的质量体积比(g/ml)为1:1~3。进一步的,所述步骤(3)中脱脂鼠妇粉末与盐酸溶液的质量体积比(g/ml)为1:8~12。进一步的,所述步骤(3)中ph值调节为1.8~2.2。进一步的,制得的鼠妇蛋白多肽能应用于饲料中。进一步的,所述饲料包括含蛋白多肽的液体饲料。进一步的,本发明还提供一种含蛋白多肽的液体饲料,包含如下重量份的成分:鼠妇蛋白多肽6~12份、枸杞多糖4~8份、维生素c1~2份、葡萄糖3~5份、苯甲酸钠0.5~1份、去离子水25~40份。与现有技术相比,本发明具有如下的有益效果:(1)本发明的鼠妇蛋白多肽在提取前经过石油醚脱脂处理,有效减少脂类物质对其他组分的保护作用,同时以特定的酶解工艺解离出所需蛋白多肽,有效提高鼠妇蛋白多肽的提取效率;(2)本发明使用真空低温浓缩与真空冷冻干燥对蛋白多肽进行脱水处理,能达到较好的脱水效果,且过程中对品质不造成太大损伤,能通过复水的操作重新恢复到原有样子;(3)本发明的鼠妇蛋白多肽,提取简单、条件温和,易于实现;(4)鼠妇蛋白多肽有镇痛消炎作用,能应用在饲料中,通过结合其它的成分,能起到有效提高免疫力,促进疾病康复等保健作用。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明。实施例1一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法,包括如下步骤:(1)将鼠妇饥饿处理7.5h后,然后洗净、干燥,粉碎过70目筛,得到鼠妇粉末;(2)取步骤(1)的鼠妇粉末,加入2质量体积比的石油醚,超声提取25min,过滤后,置于40℃烘箱中干燥,得脱脂鼠妇粉末;(3)取步骤(2)的脱脂鼠妇粉末,加入10质量体积比ph=2的盐酸溶液,然后加入胃蛋白酶,36.5℃下搅拌保温4h,每隔1h调节一次ph值至2,过滤,收集滤液;(4)将步骤(3)的滤液在3200r/min条件下离心18min,取上清液,经真空低温浓缩并真空冷冻干燥后得到鼠妇蛋白多肽。实施例2一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法,包括如下步骤:(1)将鼠妇饥饿处理10h后,然后洗净、干燥,粉碎过80目筛,得到鼠妇粉末;(2)取步骤(1)的鼠妇粉末,加入3质量体积比的石油醚,超声提取30min,过滤后,置于45℃烘箱中干燥,得脱脂鼠妇粉末;(3)取步骤(2)的脱脂鼠妇粉末,加入12质量体积比ph=2的盐酸溶液,然后加入胃蛋白酶,38℃下搅拌保温5h,每隔1h调节一次ph值至2.2,过滤,收集滤液;(4)将步骤(3)的滤液在3500r/min条件下离心20min,取上清液,经真空低温浓缩并真空冷冻干燥后得到鼠妇蛋白多肽。实施例3一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法,包括如下步骤:(1)将鼠妇饥饿处理5h后,然后洗净、干燥,粉碎过60目筛,得到鼠妇粉末;(2)取步骤(1)的鼠妇粉末,加入1质量体积比的石油醚,超声提取20min,过滤后,置于35℃烘箱中干燥,得脱脂鼠妇粉末;(3)取步骤(2)的脱脂鼠妇粉末,加入8质量体积比ph=2的盐酸溶液,然后加入胃蛋白酶,35℃下搅拌保温3h,每隔1h调节一次ph值至1.8,过滤,收集滤液;(4)将步骤(3)的滤液在3000r/min条件下离心15min,取上清液,经真空低温浓缩并真空冷冻干燥后得到鼠妇蛋白多肽。实施例4一种含蛋白多肽的液体饲料,具体如表1。表1:含蛋白多肽的液体饲料重量份鼠妇蛋白多肽9.0枸杞多糖6.0维生素c1.5葡萄糖4.0苯甲酸钠0.8去离子水33实施例5一种含蛋白多肽的液体饲料,具体如表2。表2:对比例1一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法,包括如下步骤:(1)将鼠妇饥饿处理7.5h后,然后洗净、干燥,粉碎过70目筛,得到鼠妇粉末;(2)取步骤(1)的鼠妇粉末,加入10质量体积比ph=2的盐酸溶液,然后加入胃蛋白酶,36.5℃下搅拌保温4h,每隔1h调节一次ph值至2,过滤,收集滤液;(3)将步骤(2)的滤液在3200r/min条件下离心18min,取上清液,经真空低温浓缩并真空冷冻干燥后得到鼠妇蛋白多肽。对比例2一种从鼠妇中提取蛋白多肽的方法,包括如下步骤:(1)将鼠妇饥饿处理7.5h后,然后洗净、干燥,粉碎过70目筛,得到鼠妇粉末;(2)取步骤(1)的鼠妇粉末,加入2质量体积比的石油醚,超声提取25min,过滤后,置于40℃烘箱中干燥,得脱脂鼠妇粉末;(3)取步骤(2)的脱脂鼠妇粉末,加入10质量体积比ph=2的蒸馏水,用1mol/lhcl调节ph=4,室温提取12h,重复提取2次后,以3000r/min离心15min;再加入1mol/lnaoh溶液调节ph=9,室温提取12h,重复提取2次后离心,使其充分沉淀;(4)将步骤(3)所得在3200r/min条件下离心18min,所得沉淀透析48h后冷冻干燥得到鼠妇蛋白多肽。鼠妇蛋白多肽提取收率评价为更好地证明本发明所提供的一种鼠妇蛋白多肽提取方法具有优异的效果,选取实施例1、2、3与对比例1、2的提取方法分别提取鼠妇蛋白多肽,对鼠妇蛋白多肽提取收率进行下表所述测定。表3:实施例1-3和对比例1-2的性能测试结果:结果表明:从表3中可以看出,由本发明的鼠妇蛋白多肽提取方法所提取出来的鼠妇蛋白多肽提取收率均较高,且优于对比例。未经过石油醚脱脂处理的对比例1与实施例1相比,鼠妇蛋白多肽提取收率较低,表明采用石油醚脱脂处理的方法,能获得高收率的鼠妇蛋白多肽;未经过酶解工艺的对比例2与实施例1相比,鼠妇蛋白多肽提取收率明显较低,表明以特定的酶解工艺能解离出所需蛋白多肽,有效提高鼠妇蛋白多肽的提取效率。上面以举例方式对本发明进行了说明,但本发明不限于上述具体实施例,凡基于本发明所做的任何改动或变型均属于本发明要求保护的范围。当前第1页12
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