一种酿酒酵母菌和硅藻激活素及其制备方法与流程

本发明涉及微生物及微生物发酵应用领域，具体涉及一种酿酒酵母菌和硅藻激活素及其制备方法。

背景技术：

硅藻在水产养殖中有十份重要的作用，它的光合作用不仅能为养殖水体提供丰富的氧气和其它代谢产物，还能消耗养殖水体中导致富营养化的物质，减少水体富营养化的风险，净化水质，它还是多重水产养殖动物的天然饵料。

但是硅藻和绿藻属于竞争性藻类，很多时候硅藻的竞争力比绿藻弱，加上硅藻的生活习性喜欢较低的水温(15-22℃)，较高盐度的水体(盐度在15度以上的水体)，因此培养硅藻较绿藻困难，特别是在淡水养殖区，在水温相对较高时培养硅藻更为困难，此外，目前在有一定盐度海水中硅藻的生长产量也较低。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供一种酿酒酵母菌和硅藻激活素及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种酿酒酵母菌，所述酿酒酵母菌的保藏编号为gdmccno：61261。

发明人通过筛选，获得了一种酿酒酵母菌，发现酿酒酵母菌(xdn07)的代谢产物不仅能够促进有一定盐度海水中硅藻的生长，还能够促进硅藻在20～30℃的淡水中生长，并且能够促进硅藻在盐度低于15度的水中生长。发明人对酿酒酵母菌进行生化检测后确定是一种新的菌种。上述酿酒酵母菌的拉丁名称为saccharomycescerevisiae，上述酿酒酵母菌于2020年10月30日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmccno：61261，保藏中心地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

本发明还提供一种酿酒酵母菌代谢产物，所述代谢产物是该株酿酒酵母菌在含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基中于30～50℃下的有氧发酵产物。

发明人通过研究发现，保藏编号为gdmccno：61261的酿酒酵母菌在含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基中于30～50℃下的有氧发酵产物能够促进硅藻的生长。

优选地，所述含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基包括糖类、蛋白质和硅藻。

本发明还提供上述酿酒酵母菌代谢产物的制备方法，所述方法包括以下步骤：

将上述的酿酒酵母菌接种在含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基中于30～50℃下进行有氧发酵。

优选地，所述含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基包括：20～50g/l的硅藻、10～40g/l的大豆蛋白胨、和3～30g/l的葡萄糖。

优选地，上述所述的酿酒酵母菌接种量为0.01～0.10g/g培养基，所述有氧发酵过程中空气的通气量为0.060～0.30l空气/h/l培养基，所述有氧发酵的时间为8～80小时。

本发明还提供上述任一所述酿酒酵母菌代谢产物在促进硅藻生长中的应用。

发明人通过研究发现，保藏编号为gdmccno：61261的酿酒酵母菌在含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基中于30～50℃下的有氧发酵产物能够促进硅藻的生长，不仅能够促进有一定盐度海水中硅藻的生长，还能够促进内陆淡水池塘中硅藻的生长，还能促进硅藻在20～30℃的淡水中生长。

本发明还提供一种硅藻激活素，所述硅藻激活素的制备方法包括以下步骤：

(1)将上述所述的酿酒酵母菌接种在含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基中于30～50℃下进行有氧发酵；上述所述的酿酒酵母菌接种量为0.01～0.10g/g培养基，所述有氧发酵过程中空气的通气量为0.060～0.30l空气/h/l培养基，所述有氧发酵的时间为8～80小时；所述含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基包括：20～50g/l的硅藻、10～40g/l的大豆蛋白胨、和3～30g/l的葡萄糖；

(2)将步骤(1)有氧发酵得到的产物用200～500目筛网滤去残留培养基得到滤液，将所述滤液用分子量为50～100纳米的纳滤设备浓缩2～8倍得到所述藻激活素。

上述硅藻激活素不仅能够促进有一定盐度海水中硅藻的生长，还能够促进内陆淡水池塘中硅藻的生长，还能促进水温较高的池塘中硅藻的生长。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种酿酒酵母菌和硅藻激活营养素及其制备方法，本发明的酿酒酵母菌是一种新的菌种，本发明的酿酒酵母菌的代谢产物不仅能够促进有一定盐度海水中硅藻的生长，还能够促进硅藻在水温20～30℃的淡水中生长，并且能够促进硅藻在盐度低于15度的水中生长。本发明的硅藻激活营养素不仅能够促进有一定盐度海水中硅藻的生长，还能够促进内陆淡水池塘中硅藻的生长。

说明书附图

图1为本发明的酿酒酵母菌的基因测序结果图。

具体实施方式

为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

作为本发明实施例的一种酿酒酵母菌(xdn07)，酿酒酵母菌的拉丁名称为saccharomycescerevisiae，酿酒酵母菌的保藏编号为gdmccno：61261。

本实施例的酿酒酵母菌的培养方法包括以下步骤：

发明人选择了13株酵母分别在含有硅藻的ph5.0～8.0的培养基中于30～50℃下进行传代培养，在第一代培养的培养基中含有高含量的硅藻细胞，经过20代的反复驯化传代，每代逐步降低硅藻细胞的添加量，最终驯化出一株在低硅藻浓度环境中同样能培养出丰富硅藻细胞的菌株，我们将其认定为硅藻激活素产量最高的菌株，将其命名为xdn07，将其送华南农业大学分子遗传实验室做dna测序，最后确定其为一株酿酒酵母菌株。

酿酒酵母菌xdn07基因测试结果：见附图1。将附图1的基因序列与安琪酵母厂所产的酿酒酵母的的基因序列进行比对，确定了附图1的xdn07菌株属于酿酒酵母。

对本实施例酿酒酵母菌进行基因测序结果的序列如seqidno：1所示。

实施例2

作为本发明实施例的一种酿酒酵母菌代谢产物，所述酿酒酵母菌代谢产物的制备方法包括以下步骤：

将实施例1的酿酒酵母菌接种在含有硅藻的ph6.0的培养基中于30～50℃下进行有氧发酵；所述含有硅藻的ph6.0的培养基包括：40g/l的硅藻、30g/l的大豆蛋白胨、和15g/l的葡萄糖。

实施例3

作为本实施例的一种硅藻激活素，所述硅藻激活素的制备方法包括以下步骤：

(1)将实施例1所述的酿酒酵母菌接种在含有硅藻的ph6.0的培养基中于40℃下进行有氧发酵；上述所述的酿酒酵母菌接种量为0.05g/g培养基，所述有氧发酵过程中空气的通气量为0.10l空气/h/l培养基，所述有氧发酵的时间为10小时；所述含有硅藻的ph6.0的培养基包括：40g/l的硅藻、30g/l的大豆蛋白胨、和15g/l的葡萄糖；

(2)将步骤(1)有氧发酵得到的产物用200目筛网滤去残留培养基得到滤液，将所述滤液用分子量为50纳米的纳滤设备浓缩2倍得到所述藻激活素。

效果例1

实验组1：在3立方米的水中培养硅藻，将水的温度控制为30℃，调节水的盐度为12ppm，添加实施例3的硅藻激活素26g，加入100升含有硅藻的海水作为藻种，平行三次，培养过程经目镜10倍×物镜50倍的显微镜镜检观察结果如下：

对照组：在3立方米的水中培养硅藻，将水的温度控制为30℃，调节水的盐度为12ppm，加入100升含有硅藻的海水作为藻种，添加鹤山市新的生物制品有限公司生产的“肥水33(粉剂，每包20kg)26g，培养过程经平行三次，培养过程经目镜10倍×物镜50倍的显微镜镜检观察结果如下：

由上表对比可知，实施例3的硅藻激活可以提高内陆淡水地区培养硅藻的成功率，能够提供在水温较高条件下培养硅藻的成功率。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

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<110>鹤山市新的生物制品有限公司

<120>一种酿酒酵母菌和硅藻激活素及其制备方法

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