本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种富硒酵母的制备方法。
背景技术：
硒是人体所必需的微量元素，有很重要的生理功能，而且能够预防和抑制肿瘤、抗衰老、预防动脉硬化和冠心病。缺硒会导致克山病和大骨结病，还会诱发白内障、肝病和胰腺病等。酵母是人类利用最广的微生物，其蛋白质含量高达50％，还含有丰富的b族维生素和多种矿物质，被称为优质营养之源。
富硒酵母就是在培养酵母的过程中加入硒元素，酵母生长时吸收利用了硒，使硒与酵母体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，从而消除了化学硒对人体的毒副反应和肠胃刺激，使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。富硒酵母也是迄今为止国内最高效、最安全、营养最均衡的补硒制剂。
酵母菌的富硒培养，一般是在酿酒酵母培养过程中添加亚硒酸钠，使亚硒酸钠中的硒掺入到酵母中的蛋白和多糖上，细胞含硒量在300～1200ug/g之间。为了增加细胞的含硒量以及有机硒的转化率，可以从菌株的筛选及富硒培养等方面进行优化。
对于富硒酵母菌株的筛选，一般是采用含高浓度无机硒的培养基直接对自然来源的菌株进行驯化分离，以获得目标菌株，所分离出的菌株常常表现在高浓度无机硒下生长良好，但有机硒积累水平不高的现象。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种富硒酵母的制备方法，解决酵母含硒量低及有机硒转化率不高等问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种富硒酵母的制备方法，包括以下制备步骤：
步骤1、菌种的活化和培养：从菌种斜面上挑一环菌，接种至培养基中，在30℃下培养，然后将培养的菌种按10％的接种量，30℃摇床培养；
步骤2、菌株的诱变和筛选：活化的菌株经摇床培养6h后，加入叠氮化钠，诱变处理，洗涤离心，转入新的液体培养基中，28℃摇瓶培养6h,加入双氧水，继续培养24h，分离洗涤，得到双氧水耐受的菌株；
步骤3、菌株的富硒培养：将双氧水耐受的菌株摇床培养，接入发酵培养基中，在发酵时加入亚硒酸钠发酵液，摇床转数为200r/min，发酵培养时间为35h，得到富硒酵母。
进一步地，所述步骤2叠氮化钠的含量为10mol/l。
进一步地，所述步骤2诱变处理时间为40min。
进一步地，所述步骤2双氧水的含量为0.2～0.5％。
进一步地，所述步骤3菌种的接种量为5～10％。
进一步地，所述菌株的富硒培养亚硒酸钠分两次加入，6h时加入亚硒酸钠7.5ug/ml，9h后再次加入亚硒酸钠17.5ug/ml。
本发明的有益效果在于，采用叠氮化钠对酵母菌进行诱变处理，并用低浓度的双氧水进行筛选，得到具有高富硒能力的酵母菌株。在发酵培养过程中，为了让酵母菌充分利用发酵液中的无机硒，亚硒酸钠发酵液分两次加入，得到的富硒酵母总硒含量可以达到2304ug/g，产率达到7945ug/l,有机硒占总硒的百分比超过97％。
具体实施方式
为了更好的理解本发明，下面将结合具体实施方案对本发明的技术方案进行进一步描述。
实施例1
步骤1、菌种的活化和培养：从菌种斜面上挑一环菌，接种至培养基中，在30℃下培养，然后将培养的菌种按10％的接种量，30℃摇床培养；
步骤2、菌株的诱变和筛选：活化的菌株经摇床培养6h后，加入叠氮化钠10mol/l，诱变处理40min，洗涤离心，转入新的液体培养基中，28℃摇床培养6h,加入双氧水0.2％，继续培养24h，分离洗涤，得到双氧水耐受的菌株；
步骤3、菌株的富硒培养：诱变后的菌株摇床培养，接入发酵培养基中，6h时加入亚硒酸钠7.5ug/ml，9h后再次加入亚硒酸钠17.5ug/ml,摇床转数为200r/min，发酵培养时间为35h，得到富硒酵母。
实施例2
步骤1、菌种的活化和培养：从菌种斜面上挑一环菌，接种至培养基中，在30℃下培养，然后将培养的菌种按10％的接种量，30℃摇床培养；
步骤2、菌株的诱变和筛选：活化的菌株经摇床培养6h后，加入叠氮化钠10mol/l，诱变处理40min，洗涤离心，转入新的液体培养基中，28℃摇床培养6h,加入双氧水0.5％，继续培养24h，分离洗涤，得到双氧水耐受的菌株；
步骤3、菌株的富硒培养：诱变后的菌株摇床培养，接入发酵培养基中，6h时加入亚硒酸钠7.5ug/ml，9h后再次加入亚硒酸钠17.5ug/ml,摇床转数为200r/min，发酵培养时间为35h，得到富硒酵母。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例。凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应该指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下的改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
1.一种富硒酵母的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：
步骤1、菌种的活化和培养：从菌种斜面上挑一环菌，接种至培养基中，在30℃下培养，然后将培养的菌种按10％的接种量，30℃摇床培养；
步骤2、菌株的诱变和筛选：活化的菌株经摇床培养6h后，加入叠氮化钠，诱变处理，洗涤离心，转入新的液体培养基中，28℃摇瓶培养6h,加入双氧水，继续培养24h，分离洗涤，得到双氧水耐受的菌株；
步骤3、菌株的富硒培养：对双氧水耐受菌株摇床培养，然后接入发酵培养基中，在发酵时加入亚硒酸钠发酵液，摇床转数为200r/min，培养时间为35h，得到富硒酵母。
2.根据权利要求1所述的富硒酵母的制备方法，其特征在于，步骤2叠氮化钠的含量为10mol/l。
3.根据权利要求1所述的富硒酵母的制备方法，其特征在于，步骤2诱变处理时间为40min。
4.根据权利要求1所述的富硒酵母的制备方法，其特征在于，步骤2双氧水的含量为0.2～0.5％。
5.根据权利要求1所述的富硒酵母的制备方法，其特征在于，步骤3菌种的接种量为5～10％。
6.根据权利要求1所述的富硒酵母的制备方法，其特征在于，步骤3亚硒酸钠发酵液分两次加入，6h时加入亚硒酸钠7.5ug/ml，9h后再次加入亚硒酸钠17.5ug/ml。