本发明涉及异喹啉羧酸化合物、含有它们的药物组合物，以及用于由脯氨酰羟化酶活性介导的肾性贫血等病症的方法。
背景技术：
：贫血是一种血液代谢混乱包括血液循环中红细胞(rbc)或血红蛋白的减少。慢性肾脏疾病(ckd)、癌症、慢性炎症病变、营养和基因缺陷、不当药物治疗等导致贫血。慢性肾病、化疗方法治疗癌症、慢性炎症疾病导致红细胞生成素(epo)生成的减少和稳定状态铁的缺乏。治疗与慢性肾病(ckd)相关贫血使用红细胞生成素(epo)类似物或刺激红细胞生成的药物(esa)。慢性肾病(ckd)显示铁缺乏需要补充铁剂。功能性铁缺乏在大多数需要使用刺激红细胞生成的病人(esas)中是一个大的问题。稳态的缺氧诱导因子(hif)代表一种治疗慢性肾病(ckd)的新方法。在通常情况下，缺氧诱导因子(hif)能够通过脯氨酰羟化酶(phd)来减少氧化。缺氧是脯氨酰羟化酶(phd)的主要阻滞因子，能够稳定缺氧诱导因子(hif)和促进红细胞生成素(epo)的合成。脯氨酰羟化酶(phd)抑制剂能够稳定缺氧诱导因子(hif)。脯氨酰羟化酶(phd)抑制剂是一类新的慢性肾病贫血药物治疗。许多口服的脯氨酰羟化酶(phd)抑制剂，如罗沙司他(roxadustat)，伐度司他(vadadustat)等已经上市或进入后期临床。尽管现有技术如wo2004108681a1公开了用于调节hif和/或epo的异喹啉类化合物，但是其治疗效果依然不是十分令人满意，这大大限制了其在临床应用中的广泛使用。因此，目前仍然存在对于以hif为靶点的新有效治疗以下疾病的化合物：促红细胞生成素相关病况，例如贫血，包括与糖尿病、贫血、溃疡、肾衰竭、癌症、感染、透析、手术和化学疗法相关的贫血和涉及局部缺血和缺氧的病况，例如动脉闭塞性疾病、心绞痛、肠梗塞、肺梗塞、脑局部缺血和心肌梗塞。也需要有效预防由局部缺血引起的组织损坏的化合物，所述局部缺血由于例如动脉粥样硬化、糖尿病和例如肺栓塞及其类似病症的肺部病症而发生。总之，在此项技术中需要调节hif和/或内源性促红细胞生成素，且可用于治疗和预防hif相关和epo相关病症的方法和化合物，所述病症包括涉及贫血、局部缺血和缺氧的病况。技术实现要素：发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种异喹啉羧酸化合物，或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物或前药及其组合物。本发明进一步要解决的技术问题是提供上述异喹啉羧酸化合物，或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物或前药及其组合物的应用。本发明还要解决的技术问题是提供上述异喹啉羧酸化合物的制备方法。为了解决上述第一个技术问题，本发明公开了一种式(i)所示的异喹啉羧酸化合物，或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物或前药：其中，r1和r2各自独立选自由下列各基组成的群组：氢、芳基、经取代的芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、芳氧基、经取代的芳氧基、杂芳氧基、经取代的杂芳氧基；r1’和r2’各自独立选自氢、烷基、卤素；r8选自甲基或式(ii)所示的环丙烷基；其中，r3、r4、r5、r6、r7各自独立选自卤代基、氢、氘、氰基、环己基、-so2ch3、-c1-10烷基、任选不同位置被取代的苯基。优选地，所述r1和r2各自独立选自由下列各基组成的群组：氢、苯基、经取代苯基、杂芳基、经取代杂芳基、苯氧基、经取代苯氧基、吡啶氧基、嘧啶氧基、经取代吡啶氧基、经取代嘧啶氧基。其中，上述取代选自烷基取代、环烷基取代、烷氧基取代、氰基取代、卤代基取代、-so2ch取代。其中，所述烷基为c1-10，进一步优选为c1-4，更进一步优选为甲基、乙基、丙基、异丙基。其中，所述环烷基为环己基。其中，所述烷氧基为c1-10氧基，进一步优选为甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基。其中，所述卤代基为氟、氯、溴。其中，所述取代的数量为一取代、二取代、三取代、全部取代。进一步优选地，所述r1和r2各自独立选自由下列各基组成的群组：2,6-二甲基苯氧基、3,4-二氟苯氧基、3,5-二氟苯氧基、3-氯-4-氟苯氧基、3-甲氧基-4-氟苯氧基、3-甲氧基-5-氟苯氧基、4-氯苯氧基、4-氟苯氧基、4-甲氧基苯氧基、3-氯苯氧基、4-氯苯氧基、3,4-二氯苯氧基。更进一步优选地，式(i)所示的异喹啉羧酸化合物具有如下结构式：再更进一步优选地，式(i)所示的异喹啉羧酸化合物选自式2i、式2j、式3g、式3h所示的化合物。最优选地，式(i)所示的异喹啉羧酸化合物选自式式3g、式3h所示的化合物。一种含有有效用量的式(i)所示的异喹啉羧酸化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物或前药，及药学可接受的辅料的组合物，也在本发明的保护范围内。为了解决上述第二个技术问题，本发明公开了上述化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物，或所述药物组合物在制备用于治疗、预防或预先治疗至少部分由缺氧诱导因子和/或促红细胞生成素调介的疾病的药物中的应用。其中，所述疾病选自由以下病症组成的群组：贫血病症、神经学病症和/或损伤、周围血管病症、溃疡、烧伤和慢性伤口、肺栓塞、缺血-再灌注损伤；进一步地，所述疾病为肾性贫血。本发明还公开了上述化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物或所述药物组合物在制备用于抑制脯氨酰羟化酶的活性的药物中的用途，包括使所述脯氨酰羟化酶酶与上述化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物接触。为了解决上述第三个技术问题，本发明公开了上述式(i)所示的异喹啉羧酸化合物的制备方法。其中，当r8选自环丙烷，r1和r2各自独立选自氢、苯氧基，r1和r2不同时为氢，所述化合物的制备方法包括如下步骤：步骤1：以式4a所示的4-硝基邻苯二甲腈衍生物为原料通过亲核取代反应制备式4c所示的二芳基醚；步骤2：式4c所示的二芳基醚通过氰基水解制备式4d所示的二羧酸；步骤3：式4d所示的二羧酸通过与氨环合得到式4f所示的环合羧酸；步骤4：式4f所示的环合羧酸通过酯水解得到式4g所示的酯；步骤5：式4g所示的酯通过dickman缩合反应得到式4h和4i所示的扩环产物；步骤6：式4h和4i所示的扩环产物通过溴代反应得到式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯；步骤7a：式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯通过suzuki偶联反应制备式4l和4m所示的含有三元环异喹啉衍生物；步骤8a：式4l和4m所示的含有三元环异喹啉衍生物通过酯水解得到式4n和4o所示的羧酸；步骤9a：式4n和4o所示的羧酸通过与甘氨酸甲酯或其盐酸盐的缩合得到式4p和4q所示的酰胺；步骤10a、10b：式4p和4q所示的酰胺分别通过酯水解得到式4r和4s所示的羧酸；其中，r1’和r2’各自独立选自氢、烷基、卤素。步骤(1)中，所述反应为式4a所示的4-硝基邻苯二甲腈衍生物与苯酚类化合物在溶剂中进行反应。其中，所述4-硝基邻苯二甲腈衍生物与苯酚类化合物的摩尔比为1：0.5-1.5，优选为1：1。其中，所述溶剂包括但不限于二甲亚砜。其中，所述4-硝基邻苯二甲腈衍生物的浓度为1-1.5mmol/ml，优选为1.325mmol/ml。其中，所述反应原料还包括碳酸钾。其中，所述4-硝基邻苯二甲腈衍生物与碳酸钾的摩尔比为1：0.5-1.5，优选为1：1。其中，所述反应的温度为室温-80℃；优选地，先在室温下搅拌，再加热至60℃反应。步骤(2)中，式4c所示的二芳基醚在水和甲醇组合的混合溶剂中，在氢氧化钠存在的条件下水解反应。其中，所述式4c所示的二芳基醚的浓度为0.1-0.2mmol/ml，优选为0.156mmol/ml。其中，所述水与甲醇的体积比为1-2：1，优选为1.5：1。其中，所述式4c所示的二芳基醚与氢氧化钠的摩尔比为1：15-25，优选为1：18-20。其中，所述反应温度为80-120℃，优选为100℃。步骤(3)中，所述式4d所示的二羧酸与氨的摩尔比为1：0.8-1.2，优选为1：1-1.1。其中，所述反应的溶剂为冰醋酸。其中，所述式4d所示的二羧酸的浓度为0.2-0.6mmol/ml，优选为0.3-0.4mmol/ml。其中，所述反应的温度为150-180℃，优选为160℃。步骤(4)中，所述式4f所示的环合羧酸于甲醇中，在浓硫酸的作用下水解。其中，所示式4f所示的环合羧酸与甲醇的用量比为0.08-0.2mmol/ml，优选为0.11mmol/ml。其中，所述浓硫酸为质量分数为98％的硫酸。其中，所示式4f所示的环合羧酸与浓硫酸的用量比为60-70mmol/ml，优选为66mmol/ml。其中，所述反应的温度为50-90℃，优选为70℃。步骤(5)中，所述dickman缩合反应为金属钠与正丁醇在惰性气体下进行第一反应，再向反应液中加入式4g所示的酯进行第二反应。其中，所述金属钠与正丁醇的用量比为0.15-0.2mmol/ml，优选为0.175mmol/ml。其中，所述第一反应的温度为40-80℃，优选为60℃。其中，所述第一反应的时间为5-40min，优选为5-20min，进一步优选为10min。其中，所述金属钠与式4g所示的酯的摩尔比为2-3：1，优选为7：3。其中，所述第二反应的温度为80-110℃，优选为95℃。步骤(6)中，式4h和4i所示的扩环产物在溶剂中与溴代试剂进行反应。其中，所述溶剂包括但不限于乙腈。其中，式4h和4i所示的扩环产物的浓度为0.03-1mmol/ml，优选为0.06mmol/ml。其中，所述溴代试剂包括但不限于三溴氧磷。其中，式4h和4i所示的扩环产物与溴代试剂的摩尔比为1：5-7，优选为9：52。其中，所述反应的温度为60-100℃，优选为80℃。步骤(7a)中，所述偶联反应是式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯和环丙烷的硼酸结合物在甲苯和水的混合溶剂通过偶联剂来实现的。其中，所述环丙烷的硼酸结合物为环丙基硼酸。其中，式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯和环丙烷的硼酸结合物的摩尔比为0.8-0.9：1，优选为0.88：1。其中，所用偶联剂为金属pd类化合物，优选为1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(ii)二氯甲烷复合物(pd(dppf)cl2·ch2cl2)。其中，所用偶联剂与式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯的摩尔比为0.01-1，优选0.01-0.2，进一步优选0.05-0.1。其中，所述甲苯与水的体积比为15-30：1，优选为20：1。其中，式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯的浓度为0.03-0.05mmol/ml，优选为0.04-0.042mmol/ml。其中，所述反应还包括碳酸铯，优选地，式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯与碳酸铯的摩尔比为0.4-0.6：1，优选为8.8：18。其中，所述偶联反应的温度在50-120的。步骤(8a)中，所述水解的溶剂为甲醇与水的混合溶液，优选地，甲醇与水的体积比为1.5-3：1，优选为2：1。其中，式4l和4m所示的含有三元环异喹啉衍生物的浓度为0.02-0.05mmol/ml，优选为0.03mmol/ml。其中，所述水解反应还包括氢氧化钠，优选地，式4l和4m所示的含有三元环异喹啉衍生物与氢氧化钠的摩尔比为1：8-13，优选为1：10-11。其中，所述反应的温度为50-90℃，优选为70℃。步骤(9a)中，所述缩合反应为式4n和4o所示的羧酸与二氯甲烷和草酰氯先进行第三反应至无气泡放出，去除溶剂后，再加入二氯甲烷、甘氨酸甲酯或其盐酸盐、二异丙基乙胺进行第四反应。其中，所述第三反应中，式4n和4o所示的羧酸的浓度为0.1-0.5mmol/ml，优选为0.325mmol/ml。其中，所述第三反应中，式4n和4o所示的羧酸与草酰氯的摩尔比为1：1.2-1.8，优选为1：1.51。其中，所述第三反应的温度为0-30℃，优选为室温。其中，所述第四反应中，式4n和4o所示的羧酸与甘氨酸甲酯或其盐酸盐的摩尔比为1：1.4-1.8，优选为1：1.59。其中，所述第四反应中，二氯甲烷、甘氨酸甲酯或其盐酸盐、二异丙基乙胺的用量比为1ml：0.4-0.7mmol：1-3mmol，优选为1ml：0.62mmol：2mmol。其中，所述第四反应的温度为室温。步骤(10a)中，所述水解为式4p所示的酰胺在水和甲醇的混合溶液中，以及无水氯化锂的存在下反应。其中，式4p所示的酰胺的浓度为0.01-0.03mmol/ml，优选为0.52/30mmol/ml。其中，水与甲醇的体积比为1：10-20，优选为1：15。其中，式4p所示的酰胺与无水氯化锂的用量比为0.004-0.006mmol/mg，优选为0.0052mmol/mg。其中，所述反应的温度为室温。步骤(10b)与步骤(10a)仅需将式4p所示的酰胺替换为式4q所示的酰胺。其中，当r8选自甲基，r1和r2各自独立选自氢、苯氧基，r1和r2不同时为氢，所述化合物制备方法包括如下步骤：步骤1：以式4a所示的4-硝基邻苯二甲腈衍生物为原料通过亲核取代反应制备式4c所示的二芳基醚；步骤2：式4c所示的二芳基醚通过氰基水解制备式4d所示的二羧酸；步骤3：式4d所示的二羧酸通过与氨环合得到式4f所示的环合羧酸；步骤4：式4f所示的环合羧酸通过酯水解得到式4g所示的酯；步骤5：式4g所示的酯通过dickman缩合反应得到式4h和4i所示的扩环产物；步骤6：式4h和4i所示的扩环产物通过溴代反应得到式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯；步骤7b：式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯通过suzuki偶联反应制备式5l和5m所示的含有三元环异喹啉衍生物；步骤8b、8c：式5l和5m所示的含有三元环异喹啉衍生物分别通过酯水解得到式5n和5o所示的羧酸；步骤9b、9c：式5n和5o所示的羧酸分别通过与甘氨酸甲酯或其盐酸盐的缩合得到式5p和5q所示的酰胺；步骤10c、10d：式5p和5q所示的酰胺分别通过酯水解得到式5r和5s所示的羧酸；其中，r1’和r2’各自独立选自氢、烷基、卤素。步骤(7b)中，所述偶联反应是式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯、碳酸钾、三甲基硼氧烷和四三苯基膦钯在二氧六环通过偶联剂来实现的。其中，式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯的浓度为0.03-0.06mmol/ml，优选为0.044mmol/ml。其中，式4j和4k所示的溴代异喹啉衍生物酯、碳酸钾、三甲基硼氧烷和四三苯基膦钯的摩尔比为1：5-7：2-3：0.07-0.09，优选为3.3：20.2：7：0.27。其中，所述偶联反应的温度在50-120联。步骤(8b)中，所述水解的溶剂为甲醇与水的混合溶液，优选地，甲醇与水的体积比为1.5-3：1，优选为2.5：1。其中，式5l所示的含有三元环异喹啉衍生物的浓度为0.01-0.04mmol/ml，优选为0.022mmol/ml。其中，所述水解反应还包括氢氧化钠，优选地，式5l所示的含有三元环异喹啉衍生物与氢氧化钠的摩尔比为1：3-7，优选为1：4.48。其中，所述反应的温度为50-90℃，优选为70℃。步骤(9b)中，所述缩合反应为式5n所示的羧酸与二氯甲烷和草酰氯先进行第五反应至无气泡放出，去除溶剂后，再加入二氯甲烷、甘氨酸甲酯或其盐酸盐、二异丙基乙胺进行第六反应。其中，所述第五反应中，式5n所示的羧酸的浓度为0.01-0.05mmol/ml，优选为0.45mmol/ml。其中，所述第五反应中，式5n所示的羧酸与草酰氯的摩尔比为1：3-4，优选为1：3.52。其中，所述第五反应的温度为0-30℃，优选为室温。其中，所述第六反应中，式5n所示的羧酸与甘氨酸甲酯或其盐酸盐的摩尔比为1：5-15，优选为1：10.22。其中，所述第六反应中，二氯甲烷、甘氨酸甲酯或其盐酸盐、二异丙基乙胺的用量比为1ml：0.6-0.9mmol：1-3mmol，优选为15ml：6.85mmol：10.8mmol。其中，所述第六反应的温度为室温。步骤(10c)中，所述水解为式5p所示的酰胺在水和甲醇的混合溶液中，以及无水氯化锂的存在下反应。其中，式5p所示的酰胺的浓度为0.01-0.03mmol/ml，优选为0.0225mmol/ml。其中，水与甲醇的体积比为1：0.5-3，优选为1：1。其中，式5p所示的酰胺与无水氯化锂的摩尔比为1：10-16，优选为0.45：5.9。其中，所述反应的温度为室温。步骤(8d)、(9d)和(10d)与步骤(8c)、(9c)、(10c)类似，仅需分别将式5l、5n和5p所示的化合物分别替换为式5m、5o、5q所示的化合物。上述过程中，所制备的溴代异喹啉衍生物通常具有异构体结构，由于异构体具有相似的结构和极性，中间体可不经过分离直接进入下一步反应，可通过制备分离得目标产物的不同异构体。本发明所称“药学上可接受的盐”，旨在表示式(i)表示的化合物的游离酸或碱的盐，其是无毒的、生物学耐受的，或换句话说是在生物学上适于施用给受试者。一般来讲，参见g.s.paulekuhn,etal.，“trendsinactivepharmaceuticalingredientsaltselectionbasedanalysisoftheorangebookdatabase”，j.med.chem.,2007,50：6665-72,s.m.berge,etal.，“pharmaceuticalsalts”，jpharmsci.，1977,66：1-19,andhandbookofpharmaceuticalsalts,properties,selection,anduse,stahlandwermuth,eds.,wiley-vchandvhca,zurich，2002(g.s.paulekuhn等人，“根据橙皮书数据库的分析选择活性药物成分盐的趋势”，《药物化学杂志》，2007年，第50卷，第6665-6672页；s.m.berge等人“，药用盐”,《药物科学杂志》，1977年，第66卷，第1-19页；以及《药用盐：特性、选择与应用》，stahl和wermuth编辑，wiley-vchandvhca,zurich，2002年)。可药用盐的例子是那些药理学有效且适于与患者组织接触而不会有不当毒性、刺激或变应性反应的盐。式(i)的化合物可以具有足够酸性的基团、足够碱性的基团或这两种类型的官能团，从而与多种无机碱或有机碱，以及无机酸和有机酸反应，形成可药用盐。可药用盐的例子包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、唬泊酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔一1,4一二酸盐、己炔一1,6一二酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、烃基苯甲酸盐、氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、檬酸盐、乳酸盐、y一轻丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、蔡-1-磺酸盐、茶-2-磺酸盐和扁桃酸盐。式(i)所示的化合物含有碱性氮，所需的可药用盐可通过本领域可用的任何合适方法制备，例如用无机酸处理该游离碱，所述无机酸例如是盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸、硼酸、磷酸等，或者用有机酸处理该游离碱，所述有机酸例如是乙酸、苯乙酸、丙酸、硬脂酸、乳酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、羟乙磺酸、琥珀酸、戊酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、油酸、棕桐酸、月桂酸、砒喃糖昔基酸(如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-烃酸(如扁桃酸、柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(如天冬氨酸、戊二酸或谷氨酸)、芳族酸(如苯甲酸、2-乙酸氧基苯甲酸、蔡甲酸或肉桂酸)、磺酸(如月桂基磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸)、诸如本发明作为例子给出的那些酸的任何相容混合物、和根据本
技术领域：
的普通技能水平被认为是等效物或可接受取代物的任何其他酸及其混合物。式(i)的化合物也含有羧酸，所需的可药用盐可通过任何合适的方法制备，例如通过用无机或有机碱处理该游离酸来制备，所述无机或有机碱例如胺(伯胺、仲胺或叔胺)、碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物、诸如本发明作为例子给出的那些碱的任何相容混合物、和根据本
技术领域：
的普通技能水平被认为是等效物或可接受取代物的任何其他碱及其混合物。合适的盐的示例性例子包括衍生自下述物质的有机盐：氨基酸(例如n-甲基-d-葡糖胺、赖氨酸、胆碱、甘氨酸和精氨酸)、氨、碳酸盐、碳酸氢盐、伯胺、仲胺、叔胺和环胺(例如氨基丁三醇、苄胺、吡咯烷、哌啶、吗啉和哌嗪)，以及衍生自下列物质的无机盐：钠、钙、钾、镁、猛、铁、铜、锌、铝和锂。本发明所述的前药可以包括这样的化合物，其具有通过酰胺键或酯键共价连接到式(i)羧酸基团的氨基酸残基或者两个或更多个(例如两个、三个或四个)氨基酸残基的多肽链。氨基酸残基的例子包括通常用三个字母符号标识的二十种天然存在的氨基酸以及4-羟脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链素(demosine)、异锁链素(isodemosine)、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸高半胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和甲硫氨酸砜。其他类型的前药可以通过将式(i)结构的游离羧酸衍生为酰胺或烷基酯来制备。酰胺的例子包括衍生自氨、c1-6烷基伯胺和二(c1-6烷基)仲胺的那些。仲胺包括5-元或6-元杂环烷基或杂芳基环部分。酸胺的例子包括衍生自氨.c1-3烷基伯胺和二(cl-2烷基)胺的那些酰胺。本发明的脂的例子包括c1-7烷基酯,c5-7环烷基酯、苯酯和(c1-6烷基)苯酯。优选地，脂包括甲酯。还可以按照诸如fleisheretal.,adv.drugdeliveryrev.1996,19,115-130(fleisher等人，《药物递送进展综述》，1996年，第19卷，第115-130页)中所描述的那些方法，通过用包括半琥珀酸脂、磷酸脂、二甲基氨基乙酸脂、和磷酰氧基甲氧基羰基在内的基团使游离羟基衍生化来制备前药。羟基基和氨基的氨基甲酸酝衍生物也可产生前药。羟基的碳酸脂衍生物、磺酸脂和硫酸脂也可以提供前药。将经基衍生化为(酰氧基)甲脂和(酰氧基)乙脂，其中酰基可为任选被一个或多个醚、胺或浚酸官能团取代的烷基脂，或者其中酰基为如上所述的氨基酸脂，这也可用于产生前药。该类型的前药可如robinsoneta1.，jmedchem.1996,39(1)，10-18(robinson等人，《药物化学杂志》，1996年，第39卷第1期，第10-18页)中所述制备。游离胺也可衍生化为酞胺、磺酞胺或磷酞胺。所有这些前药部分都可掺入包括醚、胺和羧酸官能团在内的基团。有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：本发明提供了一种新的作为脯氨酰羟化酶抑制剂的化合物及其制备方法、用途，拓展促红细胞生成素相关疾病治疗的药物种类，并能实现很好的对脯氨酰羟化酶的抑制活性可用于制备抑制脯氨酰羟化酶的活性的药物。具体实施方式以下结合实施例用于进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。实施例1：[(1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(1r)的制备步骤一：4-(3-氯酚氧基)邻苯二甲腈(1c)的制备将4-硝基邻苯二甲腈(1a)(9.2g,53.0mmol)，3-氯苯酚(1b)(6.8g,53.0mmol)，二甲亚砜(40ml)，碳酸钾(7.3g,53.0mmol)依次加入三口瓶，室温下搅拌2小时，加热至60℃反应4h，tlc显示几乎无原料剩余，停止加热。反应液冷却至室温，缓慢倒入300ml水中，析出砖红色固体，过滤，滤饼烘干，得红色固体化合物12.6g，收率93.1％。步骤二：4-(3-氯酚氧基)邻苯二甲酸(1d)的制备将4-(3-氯酚氧基)邻苯二甲腈(1c)(10.0g,39.0mmol)，水(150ml)，甲醇(100ml)，氢氧化钠(30.0g,750mmol)依次加入500ml三口瓶，搅拌半小时，加热至100℃回流10h。tlc检测，原料消失，停止反应，冷却至室温。反应液减压浓缩除，用盐酸调至ph至3，析出大量淡黄色固体，过滤，滤饼烘干，得化合物白色固体11.6g，收率100％。步骤三：2-(5-间氯苯氧基-1,3-二氧-2,3-二氢-异吲哚基)乙酸(1f)的制备将化合物4-(3-氯酚氧基)邻苯二甲酸(1d)(11.0g,38.0mmol)，甘氨酸(1e)(2.96g,39.4mmol)，冰醋酸(110ml)依次加入250ml三口瓶，升温至160，反应5小时。tlc检测，原料消失，停止反应，冷却至室温。反应液减压浓缩，缓慢倒入400ml水中，析出大量白色固体，过滤，滤饼烘干，得到白色固体粉末11.3g，收率90.6％。步骤四：2-(5-间氯苯氧基-1,3-二氧-2,3-二氢-异吲哚基)乙酸甲酯(1g)的制备将化合物2-(5-间氯苯氧基-1,3-二氧-2,3-二氢-异吲哚基)乙酸(1f)(11.0g,33.0mmol)，甲醇(300ml)依次加入500ml单口瓶，接着加入0.5ml浓硫酸(质量分数为98％)，70℃下反应7h。tlc检测原料消失减压浓缩析出固体。用乙酸乙酯300ml溶解，倒入1n碳酸钠水溶液200ml中，调至ph至8-9，分液，有机相用饱和食盐水200ml洗涤，无水硫酸钠干燥，活性炭脱色，浓缩至干，用石油醚打浆，过滤烘干，得到白色粉末10.7g，收率93.3％。步骤五：1,4-二羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1,4-二羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯(1h和1i)的制备将金属钠(1.6g,70.0mmol)加入正丁醇(400ml)中，置换氮气三次，60℃下，反应10分钟后，将2-(5-间氯苯氧基-1,3-二氧-2,3-二氢-异吲哚基)乙酸甲酯(1g)(10.5g,30.0mmol)加入反应体系中，随后升温至95℃反应4小时。tlc检测，原料消失。将反应液倒入盐酸水溶液中，调节ph至6-7，析出大量白色固体，过滤，滤饼烘干，柱层析得白色固体7.8g，收率66.2％。该白色固体为1,4-二羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1,4-二羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯得的混合物。步骤六：1-溴-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1-溴-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯(1j和1k)的制备将三溴氧磷(30.0g,104mmol)，乙腈(300ml)，前一步得到的混合产物1,4-二羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1,4-二羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯(1h和1i)(7.0g，18.0mmol)依次加入1l三口瓶中，升温至80℃反应3小时。tlc检测，原料消失。停止反应，冷却至室温，反应液减压浓缩后，倒入2n碳酸钠水溶液中，调至ph至9-10，分液，水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得白色絮状物5.5g，收率67.6％。该白色絮状物为1-溴-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1-溴-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯的混合物。步骤七：1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯(1l和1m)的制备将甲苯(200ml)，前一步得到的混合产物1-溴-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1-溴-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯(1j和1k)(4.0g,8.8mmol)，水(10ml)，碳酸铯(2.9g,18mmol)，环丙基硼酸(0.90g,10.0mmol)依次加入500ml三口瓶中，随后将1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(ii)二氯甲烷复合物(pd(dppf)cl2·ch2cl2)(0.46g,0.88mmol)加入反应液中，置换氮气3次，升温至112℃反应12小时。tlc检测，原料消失，停止反应，冷却至室温。乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析分离，得到产物2.0g，收率54.8％。该产物为1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯的混合物。步骤八：1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸和1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸(1n和1o)的制备将前一步得到的混合产物1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯(1l和1m)(1.9g,4.6mmol)，氢氧化钠(1.3g,48.0mmol)，水(50ml)，甲醇(100ml)加入250ml三口瓶中，升温至70℃反应11小时。tlc检测，原料消失，停止反应，冷却至室温。减压浓缩，用浓盐酸调节ph至2，过滤，烘干，得到化合物淡黄色固体(1.5g,4.2mmol)，收率91.2％。该产物为1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸和1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸的混合物。步骤九：[(1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯和[(1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯(1p和1q)的制备室温下，将前一步得到的混合产物1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸和1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸(1l和1m)(1.4g,3.9mmol)，二氯甲烷(12ml)，草酰氯(0.75g,5.9mmol)，1滴dmf依次加入反应瓶中，并反应半小时。直至反应液不再放出气泡，减压浓缩除去溶剂后，加入二氯甲烷(10ml)，然后加入甘氨酸甲酯盐酸盐(0.78g,6.2mmol)，二异丙基乙胺(2.5g,20.0mmol)，室温搅拌1小时。tlc监测，原料消失，停止反应。反应液依次用水，盐酸，饱和碳酸钠水溶液，5％氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析分离，分别得到[(1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯0.42g，收率为25.0％；[(1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯0.61g，收率为36.3％。步骤十：[(1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(1r)的制备将得到的[(1-环丙基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯(1p)(0.22g,0.52mmol)，水(2ml)，甲醇(30ml)，无水氯化锂(100mg)，加入100ml三口瓶中，室温搅拌过夜，tlc检测，原料消失，减压浓缩除去甲醇，用2n盐酸调节ph至2，过滤，水洗，烘干，得到白色固体0.16g，收率75.2％。核磁数据：1hnmr(500hz,cdcl3)δ13.17(s,1h),δ9.03(d,1h),δ9.03(d,1h),δ8.64(d,1h),δ7.63(m,1h),δ7.52(m,2h),δ7.21(m,2h),δ7.19(m,1h),δ4.02(s,2h),δ2.78(m,1h),δ1.21(m,2h),δ1.02(m,1h)；msm/z:411.2(m-1)。实施例2：[(1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(1s)的制备将前述方法制备得到的化合物[(1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯0.20g(1q，0.47mmol)，水2ml，甲醇30ml，无水氯化锂120mg，加入100ml单口瓶中，室温20-25℃搅拌过夜，固体消失。取样tlc检测原料消失，40℃减压浓缩除去甲醇，加入水30ml，出现白色絮状物，用2n盐酸调至ph＝2，超声分散，过滤，水洗，烘干，得到化合物1-环丙基-7-(3-氯酚氧基)-4-羟基异喹啉-3-羰酰氨基乙酸(1s)白色固体0.16g(0.39mmol)，收率82.7％。核磁数据：1hnmr(500hz,cdcl3)δ13.35(s,1h),δ9.00(s,1h),δ8.32(d,1h),δ8.07(d,1h),δ7.63(d,1h),δ7.58(d,1h),δ7.49(d,1h),δ7.31(d,1h),δ7.29(m,2h),δ7.15(dd,1h),δ4.02(s,2h),δ2.65(m,1h),δ1.18(m,2h),δ0.98(m,2h)；msm/z:411.2(m-1)。实施例3：[(1-环丙基-4-羟基-7-苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(2i)的制备参考实施例1中，步骤一的物料3-氯苯酚用苯酚替代，其余操作参考实施例1。最终得到白色固体0.16g。核磁数据：1hnmr(500hz,cdcl3)δ13.13(s,1h),δ9.01(s,1h),δ8.59(d,1h),δ7.61(m,1h),δ7.54(m,2h),δ7.52(m,2h),δ7.50(m,1h),δ7.43(m,1h),δ7.31(m,1h),δ7.22(m,2h),δ4.02(s,2h),δ2.50(m,1h),δ1.18(m,2h),δ1.01(m,2h)；msm/z:377.3(m+1)。实施例4：[(1-环丙基-4-羟基-6-苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(2j)的制备将实施例2中，[(1-环丙基-4-羟基-6-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯用实施例3中得到的中间产物[(1-环丙基-4-羟基-6-苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯替代，其余参考实施例2。最终得到白色固体0.16g。核磁数据：1hnmr(500hz,cdcl3)δ13.33(s,1h),δ8.98(s,1h),δ8.32(d,1h),δ7.97(m,1h),δ7.56(m,1h),δ7.54(m,2h),δ7.27(m,1h),δ7.21(m,1h),δ4.02(s,2h),δ2.50(m,1h),δ1.16(m,2h),δ0.96(m,2h)；msm/z:377.3(m+1)。实施例5：[(1-甲基-4-羟基-7-苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(3g)的制备步骤一：将实施例1，步骤六中得到的1-溴-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯和1-溴-4-羟基-6-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯混合物(1.5g,3.3mmol)，1,4-二氧六环(75ml)，碳酸钾(2.8g,20.2mmol)，三甲基硼氧烷(2.0ml,7.0mmol)，加入250ml三口瓶中，接着加入四三苯基膦钯(0.30g,0.27mmol)加入反应液中，置换氮气3次，升温至95℃反应4.5小时。tlc检测原料消失，停止反应，冷却至室温，乙酸乙酯萃取，相分离，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离，得到化合物[(1-甲基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸402mg，收率31.3％；[(1-甲基-4-羟基-6-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸220mg，收率17.2％。步骤二：将前一步得到的[(1-甲基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(300mg,0.78mmol)，氢氧化钠(140mg,3.5mmol)，水(25ml)，甲醇(10ml)加入100ml单口瓶中，升温至70℃反应4小时。tlc检测，原料消失，停止反应，冷却至室温。减压浓缩，用浓盐酸调ph至2，过滤，烘干，得到淡黄色固体1-加基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯220mg，收率85.5％。步骤三：室温下，将1-甲基-4-羟基-7-间氯苯氧基异喹啉-3-羧酸丁酯(220mg,0.67mmol)，二氯甲烷(15ml)，1滴dmf，草酰氯(0.30g,2.36mmol)，依次加入反应瓶中，反应半小时直至不再放出气泡，减压浓缩除去溶剂。然后依次加入二氯甲烷(15ml)，甘氨酸甲酯盐酸盐(0.86g,6.85mmol)，二异丙基乙胺(1.4g,10.8mmol)，并室温搅拌半小时，tlc检测，原料消失，停止反应，冷却至室温。反应液用水，稀盐酸，饱和碳酸钠水溶液，5％氯化钠水溶液洗涤，相分离，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离，得到化合物[(1-甲基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯180mg，收率为67.0％。步骤四：将[(1-甲基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸甲酯(180mg,0.45mmol)，水(10ml)，甲醇(10ml)，无水氯化锂(140mg,5.9mmol)，加入50ml单口瓶中，室温搅拌半小时，tlc检测原料消失。减压浓缩除去甲醇，用2n盐酸调节ph至2，过滤，烘干，得到白色固体[(1-甲基-4-羟基-7-苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸150mg，收率86.3％。核磁数据：1hnmr(500hz,cdcl3)δ13.19(s,1h),δ9.16(d,j＝8.0hz,1h),δ8.29(d,j＝11.5hz,1h),δ7.60(dd,j＝11.5hz,1h),δ7.52(m,2h),δ7.35(m,2h),δ7.19(m,1h),δ4.04(s,2h),δ2.84(s,3h)；lc-ms：m/z487.2(m+1)。实施例6：[(1-甲基-4-羟基-6-苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸(3h)的制备将实施例5步骤二中的[(1-甲基-4-羟基-7-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸用[(1-甲基-4-羟基-6-间氯苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸替代，其余参照实施例5。最终得到白色固体[(1-甲基-4-羟基-6-苯氧基-异喹啉-3-羰基)-氨基]-乙酸114mg，收率67.0％。核磁数据：1hnmr(500hz,cdcl3)δ13.34(s,1h),δ9.13(d,j＝8.0hz,1h),δ8.33(d,j＝11.0hz,1h),δ7.75(d,j＝8.0hz,1h),δ7.60(dd,j＝8.5hz,1h),δ7.49(d,j＝10.0hz,2h),δ7.30(m,1h),δ7.13(m,1h),δ4.04(s,2h),δ2.75(s,3h)；lc-ms：m/z487.2(m+1)。实施例7：生物学测试：phd2酶活抑制检测试剂及耗材：phd2酶：从activemotif处购买；α-酮戊二酸钠盐：从sigma处购买；fitc-hif1α：从gl处购买；多孔板nunctm384：从thermoscientific处购买。试验方法：(1)配制1×assaybuffer检测溶液(10mmhepes，150mmnacl，0.05％tween20，ph7.4)；(2)化合物浓度梯度的配制：受试化合物测试浓度为10μm起始，3倍稀释，10个浓度，复孔测试；在384孔板中稀释成100倍终浓度的溶液，然后用echo550转移100nl到384反应板中备用；阴性对照孔和阳性对照孔中分别加100nl的100％dmso；(3)用1×assaybuffer配制2倍终浓度的酶溶液；(4)在化合物孔和阳性对照孔分别加5μl的2倍终浓度的酶溶液；(5)在阴性对照孔中加5μl的1×assaybuffer；(6)1000rpm离心30秒，振荡混匀后孵育15min；(7)用1×assaybuffer配制2倍终浓度的tracer溶液；加入5.0μl的2倍终浓度的tracer溶液，起始反应；(8)将384孔板1000rpm离心30秒，振荡混匀60min，从envision(multimodeplatereader，perkinelmer)上读数得到mp值，导出数据并进行处理，得到待测化合物的抑制率，结果如下表所示：表1.化合物编号ic50(nm)1r10801s37192i8392j7813g82.63h61.2由上表可知，本发明实施例化合物具有很好的hif-脯氨酰羟化酶抑制活性。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12