样深度为 从IOcm至 500cm。
[0031]S03.根据勘探区和/或油藏区上方表层土壤和/或沉积物的特征，土壤和/或沉 积物中生物种群特征及人类活动情况，确定特定的采样量。本发明研究表明，采样量为从 20g至 2000g。
[0032] S04.在勘探区或油藏区上方，按照特定的网格度、采样深度和采样量系统采集表 层土壤和/或沉积物样品；用结实的灭菌袋包装样品并迅速将样品进行冷冻保存。本发明 研究表明，样品冷冻保存温度为从-5°C至-30°C。
[0033] S05.采用实时荧光定量PCR方法系统测定样品中丁烷氧化菌的死菌数量，或同时 测定丁烷氧化菌的死菌数量和活菌数量。
[0034] S06.将获得的丁烷氧化菌的死菌数据和活菌数据与采样点的经炜度数据一并标 绘于勘探区或油藏区的地图、地形图、地质图和/或地形-地质图上，并用数据处理软件将 这些数据绘制成等菌线，从而得到丁烷氧化菌的死菌异常，或同时得到其死菌异常和活菌 异常。
[0035] S07.结合丁烷氧化菌的死菌数量和活菌数量，全面分析丁烷氧化菌的死菌异常和 活菌异常的特征，并对两者之异同性进行如下方面的对比：
[0036] (1)异常中心的个数、位置及其变化；
[0037] (2)异常的形态及其变化；
[0038] (3)异常的大小及其变化；
[0039] (4)异常的强度及其变化；
[0040] (5)不同异常之间的关系及其变化；
[0041] (6)异常与现今采油井之间的关系及其变化。
[0042] S08.根据丁烷氧化菌死菌异常的特征，或同时根据其死菌异常和活菌异常的特 征，或根据其死菌异常与活菌异常之异同性，及与地质勘探、地球化学勘探和地球物理勘探 的对接结果，对勘探区进行石油资源评价和预测，为后续的石油开采提供决策依据。
[0043] S09.根据丁烷氧化菌的死菌异常与活菌异常之异同性，及与地质勘探、地球化学 勘探和地球物理勘探的对接结果，对油藏开采过程中地下石油资源的动态变化进行表征、 评价和预测，为后续的石油开采提供决策依据。
[0044] 优选地，步骤S05所述的采用实时荧光定量PCR方法系统测定样品中丁烷氧化菌 的死菌数量，或同时测定丁烷氧化菌的死菌数量和活菌数量的方法为：
[0045] (1)洗菌：将干燥、碾细的样品放入烧瓶中；加入缓冲液和0. 5~5%的电解质，振 摇后让其自然沉淀；移去上层溶液，去除颗粒杂质后，得到含丁烷氧化菌的菌液；
[0046] (2)收集活菌和死菌：用0. 2ym孔径的滤膜对上述菌液进行抽滤；在滤液中加入 无水乙醇和核酸助沉剂；离心并弃上清后，所得到的沉淀用于死菌的基因组提取。将滤膜所 截留的活菌取下放入离心管中，加入缓冲液对其进行清洗，弃滤膜；离心并弃上清，所得到 的沉淀用于活菌的基因组提取。
[0047] (3)余下的实验步骤：参照文献（邵明瑞等，2013,三种油气指示菌定量PCR方法 的建立及其在油气田土壤中的初步应用，生物技术通报，第4期，172-178)进行操作，即可 获得样品中丁烷氧化菌的死菌数量，或同时获得丁烷氧化菌的死菌数量和活菌数量。
[0048] 本发明提供的一种优选的方法，进行石油勘探和油藏表征和异常判识，包括以下 步骤：
[0049]SlL根据生油盆地、圈闭构造或油藏的空间大小，烃源岩的厚度，勘探区和/或油 藏区上方表层土壤和/或沉积物的特征，石油勘探、油藏表征和异常判识的精度要求等，在 勘探区和/或油藏区上方，按特定的网格度布设采样点。本发明研究表明，所述网格度为从 IOmXIOm至 2000mX2000m。优选的网格度为 150m~250mX150m~250m。
[0050]S12.根据勘探区和/或油藏区上方表层土壤和/或沉积物的特征，土壤和/或沉 积物中生物种群特征及人类活动情况，确定特定的采样深度。本发明研究表明，采样深度为 从IOcm至 500cm。
[0051] S13.根据勘探区和/或油藏区上方表层土壤和/或沉积物的特征，土壤和/或沉 积物中生物种群特征及人类活动情况，确定特定的采样量。本发明研究表明，采样量为从 20g至 2000g。
[0052] S14.在勘探区或油藏区上方，按照特定的网格度、采样深度和采样量系统采集表 层土壤和/或沉积物样品；用结实的灭菌袋包装样品并迅速将样品进行冷冻保存。本发明 研究表明，样品冷冻保存温度为从-5°C至-30°C。
[0053]S15.采用实时荧光定量PCR方法系统测定样品中丁烷氧化菌的死菌数量，或同时 测定丁烷氧化菌的死菌数量和活菌数量。
[0054] 参照本发明研究团队在专利号为ZL201110044564. 1和ZL201110048780. 3的中 国专利中提供的方法完成甲烷氧化菌的死菌数量和活菌数量的测定。
[0055] S16.将获得的丁烷氧化菌的死菌数据和活菌数据、甲烷氧化菌的死菌数据和活菌 数据与采样点的经炜度数据一并标绘于勘探区或油藏区的地图、地形图、地质图和/或地 形-地质图上，并用数据处理软件将这些数据绘制成等菌线，从而得到丁烷氧化菌的死菌 异常，或同时得到其死菌异常和活菌异常；也得到甲烷氧化菌的死菌异常，或同时得到其死 菌异常和活菌异常；
[0056] S17.结合丁烷氧化菌的死菌数量和活菌数量，全面分析丁烷氧化菌的死菌异常和 活菌异常的特征，并对两者之异同性进行如下方面的对比：
[0057] (1)异常中心的个数、位置及其变化；
[0058] (2)异常的形态及其变化；
[0059] (3)异常的大小及其变化；
[0060] (4)异常的强度及其变化；
[0061] (5)不同异常之间的关系及其变化；
[0062] (6)异常与现今采油井之间的关系及其变化。
[0063]S18.根据丁烷氧化菌死菌异常的特征，或同时根据其死菌异常和活菌异常的特 征，或根据其死菌异常与活菌异常之异同性，并结合甲烷氧化菌的死菌异常和活菌异常及 与地质勘探、地球化学勘探和地球物理勘探的对接结果，对勘探区进行石油资源评价和预 测，为后续的石油开采提供决策依据。
[0064] S19.根据丁烷氧化菌的死菌异常与活菌异常之异同性，并结合甲烷氧化菌的死菌 异常和活菌异常及与地质勘探、地球化学勘探和地球物理勘探的对接结果，对油藏开采过 程中地下石油资源的动态变化进行表征、评价和预测，为后续的石油开采提供决策依据。 [0065] S110.根据丁烷氧化菌的死菌异常与甲烷氧化菌的死菌异常之异同性，或同时根 据丁烷氧化菌的死菌异常和活菌异常与甲烷氧化菌的死菌异常和活菌异常之异同性，及与 地质勘探、地球化学勘探和地球物理勘探的对接结果，对勘探区和/或油藏区揭露出的甲 烷氧化菌异常的起因进行判识，进一步确定这些异常究竟是起源于地下油藏的排烃，还是 起源于天然气藏或天然气水合物藏的排烃，为后续的石油资源评价与开采提供决策依据。
[0066]与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0067]本发明提供了一种新的指标，成功建立了以丁烷氧化菌活菌异常和死菌异常为指 标进行石油勘探和油藏表征和异常判识的方法，该方法具有以下有益效果：
[0068] (1)针对丁烷氧化菌，综合考虑了生油盆地、圈闭构造和油藏的空间大小，烃源岩 的厚度，勘探区和/或油藏区上方表层土壤和/或沉积物的特征，石油勘探、油藏表征和异 常判识的精度要求等因素对采样点网格度的影响，提出本发明的特定网格度为从IOmXlOm 至2000mX2000m，为所述新的指标提供了精确的采样网格度。
[0069] (2)综合考虑了勘探区和/或油藏区上方表层土壤和/或沉积物的特征，土壤和 /或沉积物中生物种群特征及人类活动等因素对采样深度的影响，针对丁烷氧化菌，精确确 定采样深度为从IOcm至500cm，避免了现有技术在采样深度上的随意性，既确保了能有效 排除地表因素对微生物油气勘探、油藏表征和异常判识方法的干扰，又尽可能降低样品的 采集成本，并保证能成功采集到准确实现油气勘探、油藏表征和异常判识的样本。
[0070] (3)综合考虑了勘探区和/或油藏区上方表层土壤和/或沉积物的特征，土壤和/ 或沉积物中生物种群特征及人类活动等因素对采样量的影响，提出本发明的特定采样量为 自20g至2000g，避免了现有技术在采样量上的随意性，既确保了丁烷氧化菌数量的测定精 度，又能提高样品的测定效率、降低测试成本。
[0071] (4)综合考虑了样品包装和保存方法对后续进行丁烷氧化菌数量测定的影响，提 出将样品用结实的灭菌袋包装后并迅速将样品进行冷冻（_5°C至-30°C)保存，避免了现有 技术对样品包装和保存方法的随意性，不仅规避了外界环境对所采集样品可能造成的污染 和样品之间的交叉污染，而且确保了样品不因其外界条件的改变而影响丁烷氧化菌数量的 测定精度。
[0072] (5)根据土壤和/或沉积物中丁烷氧化菌的保存情况，提出对样品中丁烷氧化菌 的死菌数量，或同时对丁烷氧化菌的死菌数量和活菌数量进行系统测定；而现有技术仅对 样品中丁烷氧化菌的活菌数量进行测定，而未曾涉及对样品中丁烷氧化菌的死菌数量进行 测定。
[0073] (6)因微生物石油勘探的现有技术仅可获得丁烷氧化菌的活菌异常指标，故仅采 用该单一指标不仅难以发现勘探区内那些微裂隙处于挤压状态的地段（而实际上这些地 段也可能是石油的蕴藏区），而且也无法评估勘探区内泄漏出的丁烷总通量在哪些地段高， 哪些地段低；而本发明因能同时获得丁烷氧化菌的死菌异常和活菌异常，突