步骤一、取皂刺原材料，在室温下阴干后粉碎，得到皂刺粉末，备用； 步骤二、将步骤一得到的皂刺粉末加入到体积百分比为50%的乙醇溶液中，室温下浸 泡3d，浸泡结束后分离得到提取液，再重复浸泡和分离操作2次，合并提取液，备用；然后将 提取液在〇°C条件下静置18h，静置结束后过滤，并将滤液减压浓缩，得到低醇浸膏，备用； 步骤三、向步骤二得到的低醇浸膏中加入其重量7倍的水，搅拌使低醇浸膏溶解完全， 得到混合溶液，备用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，得到剩余水相，再将剩余水相 减压浓缩，得到上料样品，备用；将上料样品采用大孔树脂柱色谱法进行分离，上样后依次 采用体积百分比为10%、20%、30%、40%、50%和60%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集洗脱剂为 体积百分比为50-60%乙醇溶液的馏分，并将该馏分浓缩，得到浓缩浸膏，备用； 步骤四、将步骤三得到的浓缩浸膏采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，上样后依次用体 积比为1:0、10:1、9:1、5:1、2:1、1:1、1 :2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及体积比为 7:3的甲醇水溶液进行洗脱，洗脱得到的馏分经TLC检测、合并，得到馏分段1-30，备用； 步骤五、将步骤四得到的馏分段2采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，其中拌样硅胶粒 径为100目，装柱硅胶粒径为200目，上样后依次用体积比为30:1、20 :1、10:1、5:1和1 :1 的乙酸乙酯-甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱剂的体积比为10:1的馏分段，浓缩得到黄色胶 状透明物，即为化合物I; 步骤六、步骤四得到的馏分段13-15,均有固体析出，合并、过滤，得到的固体进一步采 用凝胶色谱法进行等度洗脱纯化，纯化的流动相为体积比为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速为6-7滴/min，得到的馏分经减压浓缩，得到淡黄色粉末，即化合物II; 步骤七、步骤四得到的馏分段9有固体析出，过滤后采用氯仿和甲醇溶剂进行重结晶， 得到浅黄色固体，即化合物III。
[0016] 实施例2: 一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法，包括以下步骤： 步骤一、取皂刺原材料，在室温下阴干后粉碎，得到皂刺粉末，备用； 步骤二、将步骤一得到的皂刺粉末加入到体积百分比为65%的乙醇溶液中，室温下浸 泡5d，浸泡结束后分离得到提取液，再重复浸泡和分离操作3次，合并提取液，备用；然后将 提取液在4°C条件下静置26h，静置结束后过滤，并将滤液减压浓缩，得到低醇浸膏，备用； 步骤三、向步骤二得到的低醇浸膏中加入其重量10倍的水，搅拌使低醇浸膏溶解完 全，得到混合溶液，备用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，得到剩余水相，再将剩余 水相减压浓缩，得到上料样品，备用；将上料样品采用大孔树脂柱色谱法进行分离，上样后 依次采用体积百分比为10%、20%、30%、40%、50%和60%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集洗脱 剂为体积百分比为50-60%乙醇溶液的馏分，并将该馏分浓缩，得到浓缩浸膏，备用； 步骤四、将步骤三得到的浓缩浸膏采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，上样后依次用体 积比为1:0、10:1、9:1、5:1、2:1、1:1、1 :2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及体积比为 7:3的甲醇水溶液进行洗脱，洗脱得到的馏分经TLC检测、合并，得到馏分段1-30，备用； 步骤五、将步骤四得到的馏分段2采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，其中拌样硅胶粒 径为200目，装柱硅胶粒径为300目，上样后依次用体积比为30:1、20:1、10 :1、5:1和1 :1 的乙酸乙酯-甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱剂的体积比为10:1的馏分段，浓缩得到黄色胶 状透明物，即为化合物I; 步骤六、步骤四得到的馏分段13-15,均有固体析出，合并、过滤，得到的固体进一步采 用凝胶色谱法进行等度洗脱纯化，纯化的流动相为体积比为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速为6-7滴/min，得到的馏分经减压浓缩，得到淡黄色粉末，即化合物II; 步骤七、步骤四得到的馏分段9有固体析出，过滤后采用氯仿和甲醇溶剂进行重结晶， 得到浅黄色固体，即化合物III。
[0017] 实施例3: 一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法，包括以下步骤： 步骤一、取皂刺原材料，在室温下阴干后粉碎，得到皂刺粉末，备用； 步骤二、将步骤一得到的皂刺粉末加入到体积百分比为60%的乙醇溶液中，室温下浸 泡4d，浸泡结束后分离得到提取液，再重复浸泡和分离操作3次，合并提取液，备用；然后 将提取液在0-4°C条件下静置22h，静置结束后过滤，并将滤液减压浓缩，得到低醇浸膏，备 用； 步骤三、向步骤二得到的低醇浸膏中加入其重量9倍的水，搅拌使低醇浸膏溶解完全， 得到混合溶液，备用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，得到剩余水相，再将剩余水相 减压浓缩，得到上料样品，备用；将上料样品采用大孔树脂柱色谱法进行分离，上样后依次 采用体积百分比为10%、20%、30%、40%、50%和60%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集洗脱剂为 体积百分比为50-60%乙醇溶液的馏分，并将该馏分浓缩，得到浓缩浸膏，备用； 步骤四、将步骤三得到的浓缩浸膏采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，上样后依次用体 积比为1:0、10:1、9:1、5:1、2:1、1:1、1 :2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及体积比为 7:3的甲醇水溶液进行洗脱，洗脱得到的馏分经TLC检测、合并，得到馏分段1-30，备用； 步骤五、将步骤四得到的馏分段2采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，其中拌样硅胶粒 径为100目，装柱硅胶粒径为200目，上样后依次用体积比为30:1、20:1、10:1、5:1和1 :1 的乙酸乙酯-甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱剂的体积比为10:1的馏分段，浓缩得到黄色胶 状透明物，即为化合物I; 步骤六、步骤四得到的馏分段13-15,均有固体析出，合并、过滤，得到的固体进一步采 用凝胶色谱法进行等度洗脱纯化，纯化的流动相为体积比为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速为6-7滴/min，得到的馏分经减压浓缩，得到淡黄色粉末，即化合物II; 步骤七、步骤四得到的馏分段9有固体析出，过滤后采用氯仿和甲醇溶剂进行重结晶， 得到浅黄色固体，即化合物III。
【主权项】
1. 一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法，其特征在于：包括 以下步骤： 步骤一、取皂刺原材料，在室温下阴干后粉碎，得到皂刺粉末，备用； 步骤二、将步骤一得到的皂刺粉末加入到体积百分比为50-65%的乙醇溶液中，室温下 浸泡3-5d，浸泡结束后分离得到提取液，再重复浸泡和分离操作2-3次，合并提取液，备用； 然后将提取液在0-4°C条件下静置18-26h，静置结束后过滤，并将滤液减压浓缩，得到低醇 浸膏，备用； 步骤三、向步骤二得到的低醇浸膏中加入其重量7-10倍的水，搅拌使低醇浸膏溶解完 全，得到混合溶液，备用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，得到剩余水相，再将剩余 水相减压浓缩，得到上料样品，备用；将上料样品采用大孔树脂柱色谱法进行分离，上样后 采用不同浓度的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集洗脱剂为体积百分比为50-60%乙醇溶液的 馏分，并将该馏分浓缩，得到浓缩浸膏，备用； 步骤四、将步骤三得到的浓缩浸膏采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，上样、梯度洗脱， 洗脱得到的馏分经TLC检测、合并，得到馏分段1-30,备用； 步骤五、将步骤四得到的馏分段2采用硅胶柱色谱法进行分离纯化，上样后依次用体 积比为30:1、20:1、10:1、5:1和1 :1的乙酸乙酯-甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱剂的体积比 为10:1的馏分段，浓缩得到黄色胶状透明物，即为化合物I; 步骤六、步骤四得到的馏分段13-15,均有固体析出，合并、过滤，得到的固体进一步采 用凝胶色谱法进行等度洗脱纯化，纯化的流动相为体积比为1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速为6-7滴/min，得到的馏分经减压浓缩，得到淡黄色粉末，即化合物II; 步骤七、步骤四得到的馏分段9有固体析出，过滤后进行重结晶，得到浅黄色固体，即 化合物III; 所述化合I、II和III的结构式依次为：2. 如权利要求1所述的一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步骤三所述的大孔树脂柱色谱法依次采用体积百分比为10%、20%、30%、 40%、50%和60%的乙醇溶液进行梯度洗脱。3. 如权利要求1所述的一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步骤四所述的硅胶柱色谱法上样后依次用体积比为1 :〇、1〇:1、9:1、5:1、 2:1、1:1、1:2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及体积比为7:3的甲醇水溶液进行洗脱。4. 如权利要求1所述的一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步骤五的硅胶柱色谱法中，拌样硅胶粒径为100-200目，装柱硅胶粒径为 200-300 目。5. 如权利要求1所述的一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步骤七过滤得到的固体采用氯仿和甲醇溶剂进行重结晶。6. 如权利要求1所述的一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步骤二所述的皂刺粉末加入到体积百分比为60%的乙醇溶液中。
【专利摘要】本发明属于天然产物提取领域，具体公开一种从低醇皂刺中提取新环烯醚萜化合物和其他化合物的方法，包括以下步骤：皂刺粉末采用低醇冷浸提取浓缩，得到的低醇浸膏萃取，并将剩余水相浓缩，得上料样品；上料样品采用大孔树脂柱色谱法进行分离，并将馏分浓缩，得到的浓缩浸膏采用硅胶柱色谱法分离纯化得到馏分段1-30；将馏分段2采用硅胶柱色谱法分离纯化，得到化合物Ⅰ；馏分段13-15析出固体得到化合物Ⅱ；馏分段9析出固体经重结晶得到化合物Ⅲ。本发明采用低醇冷浸提取，结合色谱法以及特定比例的溶剂和参数，能够保证皂角刺中含氧化合物如醚类、酮类和内酯类等不稳定活性成分被有效的提取分离出来，不会造成化学键断裂或结构的变化。
【IPC分类】C07D493/04, C07D311/30, C07D311/94, C07D311/40
【公开号】CN105111180
【申请号】CN201510428080
【发明人】尹卫平, 李海迪, 刘军娜, 刘华清, 闫强卫
【申请人】河南科技大学
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年7月21日