库克隆或噬菌体展示/酵母展示的技术。重组抗体工程改造涉及使用病毒或酵母以 产生抗体，而不是小鼠。重组技术也可用于产生"人源化"抗体，其在本文称为包含源自非 人种系免疫球蛋白序列的序列（通常至少最小互补决定区（CDR序列））的人/非人嵌合抗 体。人源化抗体因此是人免疫球蛋白（受体抗体），其中来自受体的高变区的残基被具有所 需的特异性、亲和力和能力的来自非人物种（供体抗体）（例如来自小鼠、大鼠、兔或非人 灵长类动物）的高变区的残基替换。
[0067] 在一个实施方案中，C5aR拮抗剂是结合C5aR的第2个环的抗体。在一个实施方 案中，C5aR拮抗剂是结合人C5aR的第2个环（AA 175-206)的抗体。在一个实施方案中， C5aR拮抗剂是结合AA 179-186 (EEYFPPKV)的抗体。在一个实施方案中，C5aR拮抗剂是结 合小鼠 C5aR的相应的第2个环的抗体。
[0068] 在这样的实施方案中，抗体可以是单克隆抗体，例如具有描述于WO 03/062278、 TO/022390和W02012/168199的任一个中的抗体之一的CDR序列或可变区的抗体。C5aR拮 抗剂抗体可描述为分离的，以表不已自其天然环境的另一 /其它成分分离和/或回收的抗 体，和/或自其自然环境中的成分的混合物纯化的抗体。
[0069] 在一个实施方案中，C5aR拮抗剂抗体具有IgG同种型，例如IgGU IgG2或IgG4。
[0070] 抗体通过Fe结构域与各种Fe受体相互作用，因此相应地考虑这样的相互作用 是否有利，如W02012/168199中所述，例如具有一个或多个Fe突变的抗体，所述突变选自 E233P、L234A 或 V234A 或 F234L 或 F234V、L235E 或 L235A、G236R 或 G236A、G237A、S239D、 S254W、N297Q、L328R、A330S、P331S 和 I332E。在一个实施方案中，抗体 Fe 是包括 234A、 L235E、G237A、A330S和P331S突变的IgGl。抗体可另外包括D327Q突变。
[0071] 在一个实施方案中，根据本发明的抗体不显著体外诱导嗜中性粒细胞的吞噬作 用，这意味着吞噬作用的水平不显著高于在抗_C5aR抗体不存在的情况下所测量的背景。 在一个实施方案中，抗体不产生任何可检测的吞噬作用诱导。用于评价吞噬作用水平的测 定法可使用人嗜中性粒细胞进行，如描述于W02012/168199的实施例4。
[0072] 在备选的测定法中，可评价抗_hC5aR抗体介导细胞耗尽例如诱导ADCC (抗体依 赖性细胞毒性）和CDC (补体依赖性细胞毒性）的能力。测定法应用C5aR表达细胞作为 靶细胞和效应细胞（单核细胞耗尽的PMBC)或含补体血清，以引发反应。测定法进一步描 述于W02012/168199的实施例4。
[0073] 为本申请的目的，抗体和其片段被认为是非肽化合物，因为此处使用的该术语涉 及更小分子。在一个实施方案中，C5aR拮抗剂是非肽化合物。
[0074] 在一个实施方案中，C5aR拮抗剂是肽分子，例如源自C5a或C5aR的肽。在 一个实施方案中，C5aR拮抗剂是环肽，例如通过Orn的侧链和末端羧酸酯环化的3D53 (AcPHe-Orn-Pro-DCha-Trp-Arg) (Wong 等，IDrugs. 1999 Jul; 2 (7): 686-93)，其已显 示抑制C5a与完整PMN的结合和也抑制PMN脱粒（Finch等，J Med Chem. 1999 Jun 3;42(11):1965-74)。化合物3D53亦称为PMX53。此外，另一类似的化合物为PMX205 (WoodruffTM: FASEB J, Vol. 20 (9), 1407-1417, 2006)〇
[0075] 除了上述的PMX53和PMX205之外，根据本发明可使用的其它C5aR拮抗剂还可包 括以下的一个或多个：MP-435 (Mitsubishi Tanabe/J&J)、CCX-168 (ChemoCentryx/GSK)、 MEDI7814 (MedImmune)、ARC1905 (Ophtotech)、N0X-D19 (Noxxon Pharma)、ADC-1004 (Alligator Biosciences)和 NGD 2000-1 (Neurogen)〇
[0076] 治疗有效量的C5aR拮抗剂应当对各化合物测定，并将取决于多个原因，例如效 力、生物利用度和体内半寿期。给予的剂量因此视化合物而不同。在C5aR拮抗剂是抗体的 一个实施方案中，抗体可以从〇. 010 mg/kg直至6 mg/kg的剂量给予。
[0077] 药物制剂 本发明还包括药物组合物和/或制剂，其包含药学上可接受的载体和本发明的C5aR拮 抗剂。
[0078] 在本发明的一个方面，本发明的C5aR拮抗剂可用于制备药物组合物。这样的药物 组合物可根据本领域例如药典（Pharmacopeia)或Remington中的一般知识制备。
[0079] 在一个实施方案中，本发明的药物组合物包含本文所述的抗体以及与药学上可接 受的载体。制剂可以呈液体制剂或干燥制剂的形式，干燥制剂在给予之前在水或含水缓冲 液组合物中复溶。制剂可以呈含水制剂的形式。在一个实施方案中，制剂可以是呈片剂或 胶囊形式的干燥制剂。在一个实施方案中，制剂是无菌的。
[0080] 本发明的抗体的药物组合物可包含盐和/或缓冲液，例如描述于W02011/104381 中的组合物。
[0081] 在进一步的实施方案中，本发明的抗体的药物组合物可适合于多种用途，例如描 述于W02011/147921中的组合物。
[0082] 在进一步的实施方案中，C5aR诘抗剂的药物组合物可用于静脉内给予。在进一步 的实施方案中，C5aR诘抗剂的药物组合物用于皮下给予。
[0083] 在进一步的实施方案中，C5aR拮抗剂的药物组合物用于口服给予。
[0084] 在进一步的实施方案中，C5aR拮抗剂的药物组合物用于每日给予。在进一步的实 施方案中，C5aR拮抗剂的药物组合物用于每周两次给予。在进一步的实施方案中，C5aR拮 抗剂的药物组合物用于每周一次给予。在进一步的实施方案中，C5aR拮抗剂的药物组合物 用于每隔一周给予。在进一步的实施方案中，C5aR拮抗剂的药物组合物以每第20-25天或 例如每月一次的频率给予。
[0085] 本发明可通过但不限于下文描述的实施方案进一步描述。发现结果还通过本文提 供的实施例来说明。
[0086] 实施方案 I. C5aR拮抗剂，其用于治疗或预防骨损伤。
[0087] 2. C5aR拮抗剂，其用于治疗或预防骨损伤，其中骨损伤包括骨质侵蚀和骨密度损 失中的一项或多项。
[0088] 3. C5aR拮抗剂，其用于治疗或预防骨损伤和软骨降解。
[0089] 4.实施方案1-3中任一项的C5aR拮抗剂，其中所述治疗用于减少骨损伤和/或 软骨降解的速率。
[0090] 5.实施方案1-3中任一项的C5aR拮抗剂，其中所述治疗用于抑制或停止骨质侵 蚀的进展。
[0091] 6.实施方案1-3中任一项的C5aR拮抗剂，其中所述治疗用于增加骨密度。
[0092] 7.实施方案1-3中任一项的C5aR拮抗剂，其中所述治疗用于预防骨质侵蚀。
[0093] 8.实施方案1-7中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂用于治疗哺乳动物， 例如人受试者。
[0094] 9.实施方案8的C5aR拮抗剂，其中所述受试者患有骨质侵蚀或骨密度降低。
[0095] 10.实施方案8的C5aR拮抗剂，其中所述受试者具有关节炎的一个或多个症状。
[0096] 11.实施方案8的C5aR拮抗剂，其中所述受试者具有关节炎。
[0097] 12.实施方案11的C5aR拮抗剂，其中所述受试者具有骨关节炎。
[0098] 13.实施方案11的C5aR拮抗剂，其中所述受试者具有类风湿性关节炎。
[0099] 14.实施方案11的C5aR拮抗剂，其中所述受试者具有银肩病性关节炎。
[0100] 15.实施方案11的C5aR拮抗剂，其中所述受试者具有脓毒性关节炎。
[0101] 16.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂抑制或减少C5a与 C5aR的结合。
[0102] 17.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中在SPA测定法中C5aR拮抗剂替 换 C5a，其 IC50 低于 50 nM。
[0103] 18.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂抑制C5aR介导的 C5a信号转导。
[0104] 19.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中在竞争配体结合测定法中对嗜 中性粒细胞测量的C5aR拮抗剂的亲和力为低于0. 80 nM。
[0105] 20.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂离体中和C5a诱导 的嗜中性粒细胞活化，其中在钙流测定法中测定的IC50为低于7. 0 Pg/m。
[0106] 21.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂抑制C5a诱导的细 胞迀移。
[0107] 22.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂显著体外抑制嗜中 性粒细胞迀移。
[0108] 23.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂减少迀移至少于50 % O
[0109] 24.前述权利要求中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂减少迀移，其IC50 为低于2. 5 Pg/ml。
[0110] 25.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂离体抑制C5a诱导 的嗜中性粒细胞成熟。
[0111] 26.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂离体抑制C5a诱导 的嗜中性粒细胞成熟，其中 a. 在⑶Ilb上调测定法中测定的IC50为低于3. 5 Pg/ml，例如低于2. 5 Pg/ml，例如 低于I. 5 Pg/ml或甚至低于I. 0 Pg/m，或 b. 在⑶62L下调测定法中测定的IC50为低于I. 8 Pg/ml，例如低于I. 5 Pg/ml，例如 低于I. 2 Pg/ml或甚至低于L 0 Pg/ml。
[0112] 27.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是小鼠 C5aR (mC5aR)或人 C5aR (hC5aR)拮抗剂。
[0113] 28.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是抗体。
[0114] 29.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是结合C5aR的第2 个环的抗体。
[0115] 30.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是不显著体外诱导 嗜中性粒细胞的吞噬作用的抗体。
[0116] 31.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是不显著体外诱导 ADCC的抗体。
[0117] 32.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是不显著体外诱导 CDC的抗体。
[0118] 33.实施方案1-27中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是肽，例如源自C5a 或C5aR的肽。
[0119] 34.实施方案1-27中任一项的C5aR拮抗剂，其中C5aR拮抗剂是肽分子，例如 PMX53 或 PMX205。
[0120] 35.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其获得快速反应。
[0121] 36.前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂，其用于治疗骨损伤或骨质侵蚀，以获 得反应。
[0122] 37.前述实施方案35和36中任一项的C5aR拮抗剂，其用于治疗骨损伤或骨质侵 蚀，其中在至多3个剂量后可检出快速反应。
[0123] 38.前述实施方案35和36中任一项的C5aR拮抗剂，其用于治疗骨损伤或骨质侵 蚀，其中在至多3个剂量后在血清样品中可检出快速反应。
[0124] 39.前述实施方案35和36中任一项的C5aR拮抗剂，其中在至多3个剂量后可检 出一个或多个生物标志物的相关变化。
[0125] 40.前述实施方案35-39中任一项的C5aR拮抗剂，其用于治疗骨损伤或骨质侵 蚀，其中在至多3个剂量后可检出一个或多个生物标志物的相关变化。
[0126] 41.前述实施方案35-40中任一项的C5aR拮抗剂，其用于治疗骨损伤或骨质侵 蚀，其中可检出选自组织重塑或化学引诱物标志物的一个或多个生物标志物的相关变化。
[0127] 42.药物组合物，其包含前述实施方案中任一项的C5aR拮抗剂。
[0128] 43.实施方案42的药物组合物，其进一步包含药学上可接受的载体。
[0129] 44.实施方案42的药物组合物，其中所述制剂是液体制剂。
[0130] 45.实施方案42的药物组合物，其中所述制剂是干燥制剂。
[0131] 46.实施方案42-45的药物组合物，其中所述制剂用于静脉内给予。
[0132] 47.实施方案42-45的药物组合物，其中所述制剂用于皮下给予。
[0133] 48.实施方案42-45的药物组合物，其中所述制剂用于口服给予。
[0134] 49.实施方案42-48中任一项的药物组合物，其中所述制剂用于每日给予。
[0135] 50.实施方案42-48中任一项的药物组合物，其中所述