一种二丁酰环磷腺苷钙的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物合成技术领域，特别涉及一种二丁酰环磷腺苷钙的制备方法。
【背景技术】
[0002] 二丁酰环磷腺苷钙为环磷腺苷（cAMP)的衍生物。由于cAMP不易透过细胞膜，而 且进入细胞内的cAMP很快地被细胞内之磷酸二酯酶水解，故制成环磷酸腺苷的衍生物。环 磷酸腺苷双丁酰酯对细胞的渗透性比cAMP强，且能对抗机体内磷酸二酯酶的破坏作用，故 其作用时间和速度均比cAMP持久和迅速，是具有更佳体内药物浓度分布和代谢动力学特 性的新一代产品。二丁酰环磷腺苷钙可以在体内参与细胞能量代谢和蛋白质合成，从而保 护濒死的细胞，加速修复过程，使肾小管的完整性得以保护，进而改善肾内血流动力学和循 环，增加肾血流量，达到保护肾脏功能的作用。二丁酰环磷腺苷钙具有广泛的细胞活化功 能，可参与人体内糖、脂肪、蛋白质三大代谢的调节，对扩张血管，舒张平滑肌，改善心肌缺 血缺氧，特别对心肌细胞的损伤修复及减轻缺血区再灌注的损伤有着十分重要的作用。二 丁酰环磷腺苷钙作为一种治疗与营养兼顾的心血管制剂，应用在老年稳定型心绞痛人群 中，疗效肯定，能提高生活质量。近期药理学研究表明，G蛋白偶联受体信号通路中存在 cAMP调控作用，因此二丁酰环磷腺苷钙还可能适用于与细胞凋亡和遗传免疫性等相关的疾 病治疗。
[0003] 二磷酸腺苷钙作为蛋白酶致活剂，目前临床上主要用于治疗心血管疾病如心绞 痛、急性心肌梗死的辅助治疗，亦可用于心肌炎、心源性休克、手术后网膜下出血和银肩病， 并可辅助其他抗癌药治疗白血病。
[0004] 目前多采用化学合成方法制备二丁酰环磷腺苷钙，但是存在以下缺点：（1)酰化 反应时间很长，收率较低（60%左右），生产效率较低（8~10天）；（2)提取过程粗糙，导致 产品纯度较低（液相纯度85% )，影响产品疗效。
[0005] 因此，提供一种收率高、纯度好、生产周期短，利于工业化生产的二丁酰环磷腺苷 钙的制备方法具有现实意义。
【发明内容】
[0006] 有鉴于此，本发明提供一种二丁酰环磷腺苷钙的制备方法。该方法与传统工艺相 比较，生产周期由原来的9~10天缩短至3-4天，粗品收率提高至78~82%，纯化后收率 提高至90~94%，反应总收率提高至70~75%。本发明采用连续洗涤的方法，再经过反 相萃取，获得的二丁酰环磷腺苷其液相色谱纯度达到98~98. 5%。
[0007] 为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
[0008] 本发明提供了一种二丁酰环磷腺苷钙的制备方法，包括以下步骤：
[0009] 步骤1 :获得环磷腺苷三乙胺盐；
[0010] 步骤2 :在非质子溶剂中将所述环磷腺苷三乙胺盐与正丁酸酐混合，在有机碱催 化下发生酰化反应，水解，收集二丁酰环磷腺苷；
[0011] 所述酰化反应为30°C~80°C下避光反应20~36h ;
[0012] 步骤3 :取所述二丁酰环磷腺苷成盐，即得。
[0013] 在本发明的一些实施例中，步骤2优选在氮气保护的条件下发生酰化反应。
[0014] 在本发明的一些实施例中，以g/mL/mL计，步骤2所述酰化反应中所述环磷腺苷三 乙胺盐、所述正丁酸酐、所述非质子溶剂的质量体积比为1 :4~10 :50~60。
[0015] 在本发明的一些实施例中，步骤2中所述非质子溶剂为四氢呋喃、1，4_二氧六环、 N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、或吡啶中的一种或两者以上的混合物。所有适用于酰化反应的 非质子溶剂都在本发明的保护范围内，在此不作限定。
[0016] 本发明所述的技术方案中，所述的有机碱是4-二甲氨基吡啶、三乙胺、或二异丙 基乙基胺。
[0017] 作为优选，步骤1具体为：将三乙胺盐与水混合后，再与环磷腺苷混合，制得环磷 腺苷三乙胺盐。
[0018] 作为优选，步骤1中所述再与环磷腺苷混合之后还包括第一纯化的步骤。
[0019] 在本发明的一些实施例中，所述第一纯化具体为在50°C下真空干燥获得固体，将 非质子溶剂溶解所述固体，浓缩、干燥。凡是能够达到纯化效果的操作均在本发明的保护范 围内，本发明在此不作限定。
[0020] 在本发明的一些实施例中，步骤3中所述成盐具体为将钙盐与醇-水混合溶液混 合后，与所述二丁酰环磷腺苷的醇混合发生成盐反应。
[0021] 作为优选，步骤3所述成盐之后还包括第二纯化的步骤。
[0022] 在本发明的一些实施例中，所述第二纯化具体为取所述成盐反应的溶液过滤，收 集滤渣与醇混合后，于0°C与醚混合、过滤，收集滤渣，干燥。凡是能够达到纯化效果的操作 均在本发明的保护范围内，本发明在此不作限定。
[0023] 在本发明的一些实施例中，步骤2中所述收集二丁酰环磷腺苷具体为于25°C~ 45°C减压浓缩除去溶剂后，加30-50倍体积的水，用醚洗涤水相2次，40°C~60°C减压蒸馏， 再用二氯甲烷萃取剩余水相，合并有机相，减压蒸馏除去二氯甲烷，得二丁酰环磷腺苷。
[0024] 本发明所述的技术方案中，所述的醇为乙醇、丙醇、丁醇、或异丁醇。
[0025] 本发明所述的技术方案中，所述的醚为乙醚、异丙醚、或甲基叔丁基醚。
[0026] 具体的，本发明提供的二丁酰环磷腺苷钙的制备方法可以为：
[0027] 第一步，环磷腺苷三乙胺盐的制备：
[0028] 将三乙胺盐与纯化水搅拌均匀，投入环磷腺苷，搅拌完全溶解，混合液在50°C下真 空干燥，得固体。用非质子溶剂溶解上述固体，再此浓缩旋干，得环磷腺苷三乙胺盐。
[0029] 第二步，二丁酰环磷腺苷的制备：
[0030] 取一定量的环磷腺苷与正丁酸酐，以非质子溶剂为溶剂，一定温度下避光反应一 段时间，加水水解1~3h，25°C~45°C减压浓缩除去溶剂，加水到一定体积，有机溶剂洗涤 水相，水相50°C减压蒸馏，再以二氯甲烷萃取剩余水相，合并有机相，减压除去二氯甲烧，得 到微粘的淡黄色二丁酰环磷腺苷固体；
[0031] 第三步，二丁酰环磷腺苷钙的制备：
[0032] 取一定量的二丁酰环磷腺苷溶于一定体积的醇类溶剂中；取一定量的氯化钙溶于 醇类溶剂与水的混合液中；将两溶液混合，室温15~35°C反应lOmin过滤，减压除去醇类 溶剂和水，再以相同醇类溶剂溶解，低温加入醚类溶剂，过滤，即得高纯度二丁酰环磷腺苷 钙白色粉末或类白色粉末；
[0033] 本发明具有如下特点：
[0034] 1.生产周期短，收率高。
[0035] 2.采用多步洗涤和反相萃取工艺，大大提高了二丁酰环磷腺苷及其钙盐的纯度。
[0036] 本发明提供的一种二丁酰环磷腺苷钙的制备方法，包括以下步骤：获得环磷腺苷 三乙胺盐；在非质子溶剂中将所述环磷腺苷三乙胺盐与正丁酸酐混合，在有机碱催化下发 生酰化反应，水解，收集二丁酰环磷腺苷；所述酰化反应为30°C~80°C下避光反应20~ 36h ;取所述二丁酰环磷腺苷成盐，即得。本发明以环磷腺苷为原料，与三乙胺在非质子溶 剂下制备环磷腺苷三乙胺盐，然后以丁酸酐为酰化剂，在有机非质子性溶剂中合成二丁酰 环磷腺苷，该方法与传统工艺相比较，生产周期由原来的9~10天缩短至3-4天，粗品收率 提高至78~82%，纯化后收率提高至90~94%，反应总收率提高至70~75%。本发明 采用连续洗涤的方法，再经过反相萃取，获得的二丁酰环磷腺苷其液相色谱纯度达到98~ 98. 5%。以高纯度的二丁酰环磷腺苷为原料，经与无机盐氯化钙反应，一步获得了高纯度的 二丁酰环磷腺苷钙，各项指标均符合药典标准，同时简化了制备工艺，适于工业化生产。
【附图说明】
[0037] 图1示本发明提供的二丁酰环磷腺苷钙的制备工艺；
[0038] 图2示实施例1制备的二丁酰环磷腺苷钙质谱图；
[0039] 图3示二丁酰环磷腺苷钙标准品的HPLC谱图；
[0040] 图4示实施例1制备的二丁酰环磷腺苷钙的HPLC谱图。
【具体实施方式】
[0041] 本发明公开了一种二丁酰环磷腺苷钙的制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文 内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人 员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实 施例进行了描述，相关人员明显