一种梯度变温荧光原位杂交仪的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及分子生物学领域，尤其涉及一种梯度变温荧光原位杂交仪。
【背景技术】
[0002]焚光原位杂交(FluorescenceIn Situ Hybridizat1n, FISH)是在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种分子检测技术，具有安全、快速、灵敏度高、能同时显示多种颜色等优点。FISH主要应用于实体肿瘤诊断、血液肿瘤诊断和产前染色体筛查三个领域，是这几个领域内检测的金标准。其中肿瘤诊断的主要用途是个性化诊断，具体的是伴随诊断、用药指导和预后判断；产前筛查的主要用途是检测胎儿的遗传缺陷。
[0003]杂交温度对FISH检测结果影响很大，甚至可以决定杂交信号的有无。在研发设计临床使用的FISH试剂盒的过程中，杂交温度的摸索和优化是一个很繁琐且重要的工作。由于FISH实验的周期较长，完成一次实验需要两天时间，摸索出在各种杂交液条件下的最适杂交温度，往往需要花费几个月，因此有必要研发出一种能够同时进行多种温度杂交实验的仪器，从而缩短摸索最适杂交温度的时间，提升实验效率。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型所要解决的技术问题在于提供一种梯度变温荧光原位杂交仪，通过提供具有梯度变化的杂交温度，从而缩短摸索最适杂交温度的时间，提升实验效率。
[0005]本实用新型是这样实现的，一种梯度变温荧光原位杂交仪，包括杂交反应板、杂交控温装置和操作面板；
[0006]所述杂交反应板为杂交试剂进行荧光原位杂交的区域，所述杂交反应板包括反应面，所述反应面由大小相等的六个板块构成；第一板块和第六板块中的其中一个板块被设定为最高温度，相应的，另一个板块被设定为最低温度，中间四个板块自动与第一板块和第六板块形成等差的温度梯度；
[0007]所述板块的最高温度和最低温度通过所述操作面板进行设定，所述杂交控温装置根据所述最高温度和最低温度对所有板块进行加热，使得所有板块上形成等差的温度梯度。
[0008]优选的，当所述板块的最高温度与最低温度相等时，所有板块的温度相同。
[0009]优选的，还包括避光盖，所述避光盖覆盖所述反应面的一半面积。
[0010]优选的，所述避光盖的开启与关闭由所述操作面板进行设定。
[0011]一种获取最适反应温度的方法，使用上述的一种梯度变温荧光原位杂交仪，包括以下步骤:
[0012]S1、设定所述梯度变温荧光原位杂交仪的最高温度和最低温度；
[0013]S2、在所述梯度变温荧光原位杂交仪的所有板块对相同的杂交试剂同时进行杂交实验；
[0014]S3、观察所有板块杂交效果，并确定杂交效果最好的板块，所述板块对应的温度为本次杂交实验的最适反应温度。
[0015]优选的，根据所述最适反应温度重新确定最高温度和最低温度，从而重新进行杂交实验以进一步获取更加精确的最适反应温度值；所述最高温度和最低温度差小于获取所述最适反应温度的杂交实验的最高温度和最低温度差。
[0016]实施本实用新型，具有如下有益效果:
[0017]本实用新型提供了一种梯度变温荧光原位杂交仪，通过设定杂交反应的最高温度和最低温度，自动形成等差的温度梯度，可以方便地摸索杂交反应的条件。当杂交条件稳定之后，只需将最高温度和最低温度设置为同一温度，即可作为普通的杂交仪使用。
【附图说明】
[0018]图1是一种梯度变温荧光原位杂交仪的结构图。
[0019]其中:1-杂交反应板，2-操作面板。
【具体实施方式】
[0020]为使本实用新型的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本实用新型作进一步地详细描述。
[0021]本实用新型实施例提供了一种梯度变温荧光原位杂交仪，如图1所示，包括杂交反应板1、杂交控温装置和操作面板2 ;
[0022]所述杂交反应板I为杂交试剂进行荧光原位杂交的区域，所述杂交反应板包括反应面，所述反应面由大小相等的六个板块构成；第一板块和第六板块中的其中一个板块被设定为最高温度，相应的，另一个板块被设定为最低温度，中间四个板块自动与第一板块和第六板块形成等差的温度梯度；当所述板块的的最高温度与最低温度相等时，所有板块的温度相同。
[0023]所述板块的最高温度和最低温度通过所述操作面板2进行设定，所述杂交控温装置根据所述最高温度和最低温度对所有板块进行加热，使得所有板块上形成等差的温度梯度。
[0024]优选的，还包括避光盖，所述避光盖覆盖所述反应面的一半面积；所述避光盖的开启与关闭由所述操作面板进行设定。
[0025]以摸索HER-2探针检测乳腺癌标本的最佳反应温度为例，描述本实用新型实施例的使用方法:
[0026](I)去6张待检玻片，将HER-2探针与杂交液混合物滴于玻片杂交区域，立即加盖盖玻片，封片胶封住盖玻片边缘，避免盖玻片与玻片之间产生气泡。将6张玻片分别置于杂交仪的6个板块上；
[0027](2)调节杂交仪的温度，使最高温度和最低温度均为83°C，反应5分钟使探针变性；
[0028](3)调节杂交仪的温度，使最高温度为60°C，最低温度为40°C，则6个板块自动形成温度梯度为:40°C、44°C、48°C、52°C、56°C、60°C，在该温度下杂交16小时，洗片后在荧光显微镜下观察。
[0029]观察的结果显示，48°C杂交的结果明显优于其它温度，故最佳的杂交温度应该在48 0C附近，可以以此为基础，在48 °C附近做进一步的测试和优化。
[0030]以上所揭露的仅为本实用新型较佳实施例而已，当然不能以此来限定本实用新型之权利范围，因此依本实用新型权利要求所作的等同变化，仍属本实用新型所涵盖的范围。
【主权项】
1.一种梯度变温荧光原位杂交仪，其特征在于，包括杂交反应板、杂交控温装置和操作面板； 所述杂交反应板为杂交试剂进行荧光原位杂交的区域，所述杂交反应板包括反应面，所述反应面由大小相等的六个板块构成，第一板块和第六板块中的其中一个板块被设定为最高温度，相应的，另一个板块被设定为最低温度，中间四个板块自动与第一板块和第六板块形成等差的温度梯度； 所述板块的最高温度和最低温度通过所述操作面板进行设定，所述杂交控温装置根据所述最高温度和最低温度对所有板块进行加热，使得所有板块上形成等差的温度梯度。
2.根据权利要求1所述的一种梯度变温荧光原位杂交仪，其特征在于，当所述板块的最高温度与最低温度相等时，所有板块的温度相同。
3.根据权利要求1或2所述的一种梯度变温荧光原位杂交仪，其特征在于，还包括避光盖，所述避光盖覆盖所述反应面的一半面积。
4.根据权利要求3所述的一种梯度变温荧光原位杂交仪，其特征在于，所述避光盖的开启与关闭由所述操作面板进行设定。
【专利摘要】本实用新型提供了一种梯度变温荧光原位杂交仪，包括杂交反应板、杂交控温装置、避光盖和操作面板；杂交反应板为杂交试剂进行荧光原位杂交的区域，杂交反应板包括反应面，所述反应面由大小相等的板块构成；操作面板用于设定最高温度、最低温度和是否开启避光盖；杂交控温装置用于对板块进行加热，使得所有板块上形成等差的温度梯度；本实用新型通过提供具有梯度变化的杂交温度，从而缩短摸索最适杂交温度的时间，提升实验效率。
【IPC分类】C12M1-38, C12M1-00
【公开号】CN204509342
【申请号】CN201520108112
【发明人】刘振世, 易春, 方国伟, 洪冉
【申请人】苏州达麦迪生物医学科技有限公司
【公开日】2015年7月29日
【申请日】2015年2月13日