如果测试电压足够小于氧化还原介体电势，则还原介体可以在第二电极 64处被氧化为限制电流。在这样的情况下，第二电极64执行工作电极的功能，而第一电极 66执行反电极/参考电极的功能。
[0045] 首先，分析可包括经由端口 70向样品接收室61中引入一定量的流体样品。在一 个方面，端口 70或样品接收室61能够被配置使得毛细管作用导致流体样品充满样品接收 室61。第一电极66或第二电极64可用亲水性试剂涂覆，以促进样品接收室61的毛细管作 用。例如，可将具有亲水性部分的硫醇衍生试剂如2-巯基乙磺酸涂覆到第一电极或第二电 极上。
[0046] 在上述测试条62的分析中，试剂层72可包括基于PQQ辅因子和铁氰化物的葡萄 糖脱氢酶（GDH)。在另一个实施例中，基于PQQ辅因子的酶GDH可用基于FAD辅因子的酶 GDH替代。当血液或对照溶液被剂量分配到样品反应室61中时，葡萄糖被GDH(M)氧化，并 在此过程中将OTH (M)转化成OTH (ral)，如以下化学转化T. 1所示。注意，⑶H(M)是指⑶H的 氧化态，而⑶H(Md)是指⑶H的还原态。
[0047] T. ID-匍萄糖+GDH(M)匍糖酸+GDH(red)
[0048] 接下来，⑶Hfred)通过铁氰化物（即氧化介体或Fe (CN)广）重新生成到其活性氧化 态，如以下化学转化T.2所示。在重新生成⑶!!^的过程中，亚铁氰化物（即还原介体或 Fe (CN)64O由如T. 2所示的反应生成：
[0049] T. 2⑶H(red) +2Fe (CN)广 GDH(M) +2Fe (CN)广
[0050] 图5提供了示出与第一接触垫67a、67b和第二接触垫63界面连接的测试仪100的 简化示意图。第二接触垫63可用于通过U形凹口 65建立与测试仪的电连接，如图2所示。 在一个实施例中，测试仪100可包括第二电极连接器101、和第一电极连接器（l〇2a、102b)、 测试电压单元106、电流测量单元107、处理器212、存储器单元210、以及可视显示器202,如 图5所示。第一接触垫67可包括两个指示为67a和67b的尖头。在一个示例性实施例中， 第一电极连接器l〇2a和102b分别独立地连接到尖头67a和67b。第二电极连接器101可 连接到第二接触垫63。测试仪100可测量尖头67a和67b之间的电阻或电连续性以确定测 试条62是否电连接到测试仪10。电极64和66在此可用于利用交变信号来监测样品的物 理特性。作为另外一种选择，单独的额外电极可提供于测试室中以允许利用交变信号来监 测样品的物理特性。
[0051] 测试仪10可包括电子电路，该电子电路可用于对测试条62施加多个电压并且测 量从测试条62的测试室中的电化学反应所得的电流瞬态输出。测试仪10还可包括具有一 组指令的信号处理器，该组指令用于确定本文所公开的流体样品中分析物浓度的方法。
[0052] 如已知，用户将测试条插入测试仪的条端口连接器中，以将测试条的至少两个电 极连接到条测量电路。这样接通测试仪100,并且测试仪100可在第一接触垫67和第二接 触垫63之间施加测试电压或电流。一旦测试仪100识别到测试条62已从步骤602被插入， 测试仪100就启动流体检测模式。流体检测模式导致测试仪100在第一电极66和第二电 极64之间施加约1微安的恒定电流。因为测试条62最初是干燥的，所以测试仪10测得相 对大的电压。当将流体样品沉积到测试室上时，样品桥接第一电极66和第二电极64之间 的间隙，并且测试仪100将测量所测量电压的降低，该所测量电压低于预定阈值，从而导致 测试仪10通过施加第一电压电势El自动地启动葡萄糖测试。
[0053] 在图6A中，样品中的分析物由于测试室中的电化学反应从一种形式（例如，葡萄 糖酸）被转化成不同形式（例如，葡萄糖酸），该电化学反应以通过测试序列定时器在T = 〇处启动测试序列而启动，该定时器通过检测条填充（图7A中）和将电势设定在El处tl 的第一持续时间设定。系统通过将第一电压电势从El切换至不同于第一电压（图6A)的 第二电压电势E2第二持续时间t2继续进行，然后该系统还将第二电压变更为不同于第二 电压E2 (图6A)的第三电压E3第三持续时间t3。
[0054] 图6A为施加到测试条62规定间隔的多个测试电压的示例性图表。多个测试电压 可包括第一时间间隔^的第一测试电压E1，该第一时间间隔起始于每当填充检测电路已表 明已施加样品时系统设定启动时间（T = O)。在tl之后，施加第二时间间隔t2的第二测试 电压E2,并施加第三时间间隔丨3的第三测试电压E3。相对于第二测试电压E2,第三电压E3 可具有不同的电动势大小、不同的极性，或两者的组合。在优选的实施例中，E3可与E2大小 相同，但极性相反。葡萄糖测试时间间隔t e表示执行葡萄糖测试（但不一定指与葡萄糖测 试相关的所有计算）的时间量。葡萄糖测试时间间隔te可在约1.1秒至约5秒的范围内。 此外，如图6A所示，第二测试电压E2可包括直流（DC)测试电压部分和叠加的交流（AC)测 试电压部分，或作为另外一种选择振荡测试电压部分。叠加的交流或振荡测试电压部分可 被施加由〖_所示的时间间隔。该叠加的交流电压用于确定测试条是否具有其中进行测试 的足够体积的流体样品。用于确定电化学测试的足够体积的这种技术的细节示出并描述于 美国专利 No. 7, 195, 704、Ν〇· 6, 872, 298、Νο· 6, 856, 125、Νο· 6, 797, 150 中，这些文件以引用 的方式并入，如同本文以提供于附件中的副本完全示出。
[0055] 在任何时间间隔内测量的多个测试电流值可以在约1次测量/微秒至约1次测量 /100微秒范围内的取样频率执行，并且优选的是约1次测量/约每10至50毫秒。虽然描 述了使用三个以连续方式的测试电压的实施例，但葡萄糖测试可包括不同数量的开路电压 和测试电压。例如，如可供选择的实施例，葡萄糖测试可包括第一时间间隔的开路电压、第 二时间间隔的第二测试电压，以及第三时间间隔的第三测试电压。应该指出的是，"第一"、 "第二"和"第三"的引用是为方便起见而选择，并不一定反映测试电压被施加的次序。例如， 实施例可具有电势波形，其中可在施加第一和第二测试电压之前施加第三测试电压。
[0056] 在该示例性系统中，该系统的过程可在第一电极66和第二电极64之间将第一测 试电压El (例如，图6Α中的大约20mV)施加第一时间间隔h (例如，图6Α中的1秒）。第 一时间间隔L可在约0. 1秒至约3秒的范围内，并且优选在约0. 2秒至约2秒的范围内， 并且最优选在约0. 3秒至约I. 1秒的范围内。
[0057] 第一时间间隔h可为足够长的，以使得样品接收或测试室61可被样品完全填充， 并且也使得试剂层72可至少部分地溶解或溶剂化。在一个方面，第一测试电压El可为与介 体的氧化还原电势相对接近的值，使得测得相对较小量的还原或氧化电流。图6B显示，与 第二时间间隔t2和第三时间间隔1 3相比，在第一时间间隔t 观察到相对较小量的电流。 例如，当使用铁氰化物或亚铁氰化物作为介体时，图6A中的第一测试电压El可在约ImV至 约IOOmV的范围内，优选地在约5mV至约50mV范围内，并且最优选在约IOmV至约30mV范 围内。虽然在优选的实施例中给出的施加电压为正值，但是也可利用负域的相同电压实现 受权利要求书保护的本发明的预期目的。
[0058] 重新参考图6A，在施加第一测试电压El之后，测试仪10在第一电极66和第二电 极64之间施加第二测试电压E2 (例如，在图6A中大约300mV)，持续第二时间间隔t2 (例如， 在图6A中约3秒）。第二测试电压E2可具有不同于第一测试电压El的值，并且可为介体 氧化还原电势足够负的值，使得在第二电极64处测量限制氧化电流。例如，当使用铁氰化 物或亚铁氰化物作为介体时，第二测试电压E2可在约OmV至约600mV范围内，优选地在约 IOOmV至约600mV范围内，更优选地为约300mV。
[0059] 第二时间间隔t2应为足够长的，以使得可根据限制氧化电流的大小监测还原介体 (如亚铁氰化物）的生成速率。通过与试剂层72的酶促反应生成还原介体。在第二时间 间隔〖2内，限制量的还原介体在第二电极64处被氧化，而