专利名称：一种用高效液相色谱法测定瑞格列奈中间体有关物质的方法
技术领域：
本发明涉及一种高效液相方法，特别是一种瑞格列奈中间体3-甲基-l-(2-(l-哌 啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐有关物质的高效液相色谱法测定方法。
背景技术：
瑞格列奈为-
-种非磺酰脲类促胰岛素分泌剂，是第一个餐时调节体内血糖新药，
具有吸收快、代谢迅速、安全性好等特点。3-甲基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸 盐是合成瑞格列奈合成过程中的重要中间体，分子式为C22H36N2O4，其化学结构式如下
3-甲基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐的主要中间体杂质有2个，其在 其合成过程中生成，对于最终产品的质量生产过程的质量控制是非常重要的。本法采用氰基柱快速准确的实现了 3-甲基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二 酸盐有关物质的测定，从而实现其中间体杂质的控制，保证了瑞格列奈的质量可控，具有现
眉、ο
发明内容
本发明的目的在于提供一种用高效液相色谱法分离测定瑞格列奈中间体3-甲 基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的方法，可用于3-甲基-1- (2- (1-哌 啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐的制备过程和最终产品的质量控制。本发明提供一种用高效液相色谱测定瑞格列奈中间体3-甲基-1-(2-(1-哌啶基) 苯基)_ 丁胺己二酸盐有关物质的方法，选用氰基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇为 有机相与以0. 5%磷酸溶液为水相的混合溶剂作为流动相，本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己 二酸盐有关物质的方法，流动相中的有机相为甲醇，甲醇与水相的比例为20 50 80 50。本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己 二酸盐有关物质的方法，流动相中的有机相为甲醇，甲醇与水相的比例为35 65。本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己 二酸盐有关物质的方法，所述水相为磷酸水溶液，其浓度范围为0. 1 0. 8%本发明提供一种用高效液相色谱测定3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己 二酸盐有关物质的方法，所述水相为磷酸水溶液，其浓度为0. 5%。
本发明提供一种用高效液相色谱测定瑞格列奈中间体3-甲基-l-(2-(l-哌啶基) 苯基)_ 丁胺己二酸盐有关物质的方法，可按以下方法实现。取3-甲基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐适量，用流动相溶解，配制成 浓度为0. 5mg/ml的样品溶液，流速为lml/min，检测波长210nm，选用氰基柱。取样品溶液 20ul，注入高效液相色谱仪，完成3-甲基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物 质的测定。1)取3-甲基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐适量，用流动相溶解样品， 并配制成浓度为0. 5mg/ml的样品溶液。2)设置流动相流速为0. 5 1. 5ml/min,流动相的流速优选为lml/min ；检测波长 200 250nm，最佳检测波长为210nm ；选用氰基柱。3)取1)的样品溶液10 50ul，优选20ul，注入高效液相色谱仪，完成3_甲 基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐有关物质的测定。本发明能够有效测定瑞格列奈中间体3-甲基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁 胺己二酸盐的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高，结果准确可靠。可用于3-甲 基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐的质量控制。
图13-甲基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐及其中间体杂质的液相色 谱23-甲基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐原料的高效液相色谱图
具体实施例方式以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。实施例1仪器与条件日本岛津LC-1OATVP泵，岛津SPD-1OAVP紫外可见光多波长检测器，RHE0DYNE 7725i进样器及TL9900色谱数据工作站，色谱柱氰基柱250 X 4. 6mm，5 μ m，紫外检测波长 210nm，流动相0. 5%磷酸溶液-甲醇(65 35)。实验步骤取3-甲基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐及其中间体杂质各约20mg， 置于IOOml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇勻，作为供试品溶液。分别取试剂空白 溶液和供试品溶液，按上述条件进行高效液相分析，记录色谱图，结果见图1。图1中保留时间为9. 066分钟的色谱峰为3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)_ 丁 胺己二酸盐的色谱峰，其余的色谱峰为其中间体杂质的色谱峰。在上述条件下3-甲 基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐及其中间体杂质的色谱峰分离度良好，可以满 足中国药典的要求。实施例2仪器与条件日本岛津LC-10ATVP泵，岛津SPD-10AVP紫外可见光多波长检测器，RHE0DYNE
47725i进样器及TL9900色谱数据工作站，色谱柱氰基柱250 X 4. 6mm，5 μ m，紫外检测波长 210nm，流动相0. 5%磷酸溶液-甲醇(65 35)。
实验步骤 取3-甲基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐约5mg，置于IOml量瓶中，加 流动相溶解并稀释至刻度，摇勻，作为供试品溶液。取供试溶液，照上述条件进行高效液相分析，记录色谱图，结果见图2。图2中保留时间为8. 887分钟的色谱峰为3_甲基_1-(2-(1_哌啶基)苯基)-丁 胺己二酸盐的色谱峰，其有关物质单一杂质小于0.5%，总杂质小于1.0%，结果表明3-甲 基-1- (2- (1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐原料的有关物质达到原料药要求，本法可以用 于3-甲基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐的质量监测。
权利要求
一种用高效液相色谱测定瑞格列奈中间体3 甲基 1 (2 (1 哌啶基)苯基) 丁胺己二酸盐有关物质的方法，其特征在于选用氰基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇为有机相与0.5％磷酸溶液为水相的混合溶剂作为流动相。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是流动相中的有机相为甲醇，甲醇与水相的比 例为20 50 80 50。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是流动相中的有机相为甲醇，甲醇与水相的比 例为35 65。
4.根据权利要求1 3任一项所述的方法，其特征是所述水相为磷酸水溶液，其浓度范 围为0. 1 0. 8%。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征是流动相中的水相为磷酸水溶液，其浓度为 0. 5%。
6.根据权利要求1 6任一项所述的方法，其特征在于取3-甲基-1-(2-(1-哌啶基) 苯基)_ 丁胺己二酸盐适量，用流动相溶解，配制成浓度为0. 5mg/ml的样品溶液，流速为 lml/min,检测波长210hm，选用氰基柱，取样品溶液20ul，注入高效液相色谱仪，完成3-甲 基-l-(2-(l-哌啶基)苯基)_ 丁胺己二酸盐有关物质的测定。
全文摘要
本发明公开了一种瑞格列奈中间体3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐有关物质的高效液相色谱法测定方法，选用氰基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇为有机相与以0.5％磷酸溶液为水相的混合溶剂作为流动相，可用于3-甲基-1-(2-(1-哌啶基)苯基)-丁胺己二酸盐的质量控制。
文档编号G01N30/26GK101929987SQ20091008779
公开日2010年12月29日 申请日期2009年6月26日 优先权日2009年6月26日
发明者李圆圆 申请人:北京德众万全药物技术开发有限公司