专利名称：无颌类脊椎动物可变淋巴细胞受体(vlr)在制药中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种物质的用途，即无颌类脊椎动物可变淋巴细胞受体(VLR)在制药中的用途，尤其是在制造抗致病性微生物、抗肿瘤治疗性药物及诊断中的用途。
背景技术：
抗菌药是临床上使用最多、最广的药物之一，在防治感染性疾病中发挥着重要作用。但随着抗菌药物的大量滥用，致病性微生物对抗菌药物的耐药在蔓延。抗菌药物对感染患者的治疗，时常有病例出现用药无效状况。能够有效的解决这一问题，一方面需要加大力度控制抗菌药物的滥用，另一方面急需新的抗菌药物来补充。 临床上一般将传统抗肿瘤药物分为植物碱类、抗代谢类、抗生素类、烷化剂类、激素类、抗体类等。目前，常用的抗肿瘤药物已超过80种。近年来，单抗类和小分子酪氨酸激酶抑制剂药物推动了抗肿瘤药物的发展，而且新型药物的增速远高于传统药物。但目前我国市场上新型药物占抗肿瘤药物的份额依旧较低，临床上广泛应用的依然是传统药物。
圆口纲动物又称无颌类脊椎动物，主要包括七鳃鳗和盲鳗2大类。可变淋巴细胞受体(VLR)是在无颌类脊椎动物中发现的一种新型受体。有颌类脊椎动物通过抗体实现自身的特异性免疫，而无颌类脊椎动物通过可变淋巴细胞受体(VLR)实现自身的特异性免疫。可变淋巴细胞受体(VLR)是指通过在可变淋巴细胞受体(VLR)基因中随机插入富含亮氨酸的重复单元形成多样性的抗原识别受体，特异性识别不同的抗原，实现无颌类脊椎动物的适应性免疫。可变淋巴细胞受体(VLR)既可在无颌类脊椎动物类淋巴细胞表面表达，也存在分泌型VLR，可分泌到血清中。分泌型VLR是由4 5个二聚体通过二硫键连接而成的四聚体或五聚体，它们分别具有8 IO个抗原结合位点。在形态学上，与高等哺乳动物IgM存在高度相似性。可变淋巴细胞受体(VLR)对特异性抗原的亲和力比IgG类抗体高十几倍。其独有的特性可望像抗体类药物、甚至优于抗体类药物在抗微生物感染及抗肿瘤诊断及治疗中得到应用。迄今为止，未见可变淋巴细胞受体(VLR)在制药领域中应用。
发明内容
本发明发现无颌类脊椎动物类淋巴细胞分泌产生的可变淋巴细胞受体(VLR)具有潜在的抗致病性微生物感染及抗肿瘤治疗及诊断等方面的应用价值。用外源抗原(如致病性微生物、肿瘤抗原等)免疫剌激无颌类脊椎动物，通过基因工程及蛋白质工程手段获得能够识别并结合特定微生物及肿瘤抗原的高亲和力、高特异性可变淋巴细胞受体(VLR)。该种受体比高等哺乳动物产生的IgG类抗体亲和力高十几倍。因此，可变淋巴细胞受体(VLR)在识别并中和微生物方面比抗体具更强的特异性及灵敏度，将在致病性微生物感染诊断及抗微生物治疗中发挥作用，同时，在特定肿瘤抗原免疫剌激下，这种受体对肿瘤抗原具有的超强亲和力，使其成为靶向肿瘤治疗及诊断的新型理想工具。
具体实施例方式
用外源抗原(如致病性微生物、肿瘤抗原等)免疫剌激无颌类脊椎动物，提取免 疫后动物类淋巴细胞cDNA，从cDNA中克隆可变淋巴细胞受体(VLR)基因，可通过酵母细胞 或噬菌体表面展示技术筛选能够识别并结合特定微生物或肿瘤抗原的高亲和力、高特异性 VLR基因，再利用DNA重组技术通过原核细胞或真核细胞蛋白表达系统实现VLR及其重组蛋 白的大量生产。以满足工业化制药原料的需要。 关于无颌类脊椎动物可变淋巴细胞受体(VLR)在制药中的应用主要包括以下几 方面 1、结合生物标记技术，此种VLR受体可用于装配体外诊断试剂盒，用于致病性微 生物感染诊断及针对肿瘤标志物的肿瘤发现、疗效及预后诊断，因其对抗原的亲和力比抗 体类分子高十几倍，所以它将比传统的基于抗体类诊断试剂盒具有更高的灵敏度和检测特 异性。 2、VLR及其重组蛋白能够与微生物高特异性、高亲和力结合，对微生物具有中和作 用，可防止微生物入侵并促进其降解及清除，从而达到治病作用。 3、 VLR及其重组蛋白对肿瘤细胞有高度特异结合力。将VLR与药物、酶或放射性 同位素配合在一起，借助VLR自动导向作用，在生物体内与特定肿瘤细胞或组织结合，并由 其携带的药物产生治疗作用。VLR比单克隆抗体具有更好的亲和力和专一性，能精确地瞄准 和捕获靶细胞，特异性地与靶目标发生反应，将起到生物导弹的作用，发挥其他药物无法达 到的独特和卓越效能。
权利要求
无颌类脊椎动物可变淋巴细胞受体(VLR)在制药中的应用，其特征在于，包括VLR及其重组蛋白在制药中的应用。
2. 根据权利要求l所述的可变淋巴细胞受体(VLR)在制药中的应用，其特征在于，可变 淋巴细胞受体(VLR)在致病性微生物感染诊断及制造抗致病性微生物药物中的应用。
3. 根据权利要求l所述的可变淋巴细胞受体(VLR)在制药中的应用，其特征在于，可变 淋巴细胞受体(VLR)在肿瘤疾病诊断及制造抗肿瘤药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种物质的用途，即无颌类脊椎动物可变淋巴细胞受体(VLR)在制药中的用途，尤其是在制造抗致病性微生物、抗肿瘤治疗性药物及诊断中的用途。可变淋巴细胞受体(VLR)是在无颌类脊椎动物中发现的一种新型可变受体。它能够特异性识别不同的抗原，对特异性抗原的亲和力比lgG类抗体高十几倍。其独有的特性可望像抗体类药物、甚至优于抗体类药物在抗微生物感染及抗肿瘤诊断及治疗中得到应用。迄今为止，未见可变淋巴细胞受体(VLR)在制药领域中应用。
文档编号G01N33/569GK101721680SQ200910219869
公开日2010年6月9日 申请日期2009年11月13日 优先权日2009年11月13日
发明者吴芬芳, 李庆伟 申请人:辽宁师范大学