专利名称：一种脂肪组织中挥发性脂肪酸的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种，尤其涉及一种脂肪组织中挥发性脂肪酸的测定方法。
背景技术：
脂肪组织中挥发性脂肪酸对肉品在烹饪过程所产生的风味有重要作用，尤其对反 刍动物肉品的作用更为突出。由于动物脂肪组织中挥发性脂肪酸具有含量低、挥发性强及 操作难度大等特点，因此在国内对于动物脂肪组织中脂肪酸的研究，主要集中在长链脂肪 酸范围内，而对挥发性脂肪酸的研究很少，对挥发性支链脂肪酸的研究几乎没有报道。国外 的研究资料中针对挥发性脂肪酸的测定主要有两种方法第一种方法是将脂肪组织加热至 烹饪的温度，利用吹扫捕集装置对所有挥发性物质进行吸附，随之在较高温度下进行解吸 附，解吸附后的挥发性物质通过特定管道进入气相色谱质谱联用仪(GC-MQ进行定性定量 分析。第二种方法是将脂肪组织进行破碎，利用有机溶剂提取总脂肪酸，再对总脂肪酸进行 皂化处理，依靠蒸馏的方法从总脂肪酸中分离出挥发性脂肪酸，然后对提取物进行浓缩、衍 生化和气相色谱分离和质谱鉴定，从而进行定性定量分析。第一种方法，能够较好的模拟羊 肉烹饪过程，但所产生的挥发性物质种类较为复杂，挥发性脂肪酸的没有完全挥发，因此， 在定量方面只限于相对含量；第二种方法，可使挥发性脂肪酸的完全挥发，可以很好的进行 定量研究，但目前，操作过程较为复杂，挥发性脂肪酸损失较大。为了在我国开展对动物脂肪组织中挥发性脂肪酸的研究，需要结合自身的特点， 建立一套简单、快捷、经济的挥发性脂肪酸测定方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一套简单、快捷、经济的 脂肪组织中挥发性脂肪酸的测定方法。一种脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，包括以下步骤:A1 脂肪组织样品 的皂化；A2 分离挥发性脂肪酸，使用同时蒸馏萃取装置从步骤Al得到的皂化产物中分离 挥发性脂肪酸；A3 浓缩；A4 气相色谱分析。所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，所述步骤Al具体执行以下操作(1)称取脂肪组织样品置于广口瓶中，加入相应量的2mol/L的NaOH溶液，即每Ig 脂肪组织相应加入Iml所述浓度的NaOH溶液。(2)将脂肪组织样品与碱性溶液充分混勻，密封所述广口瓶的瓶口 ；(3)将广口瓶置于105°C的烘箱中，放置2h，每隔30min摇晃一次；(4)将广口瓶由烘箱取出，待温度降至室温后，用4mol/L的调节pH值，直至 溶液的呈酸性，备用。所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，所述步骤A2具体执行以下操作(1)将所述广口瓶中经酸化过的溶液完全转移至样品烧瓶中，加入沸石；(2)向150mL的萃取烧瓶中加入IOmL乙醚，将两瓶分别与同时蒸馏萃取装置连
3接；(3)向萃取室加入蒸馏水，直至有蒸馏水可回流至样品烧瓶，再向萃取室加入乙 醚，直至有乙醚可回流至萃取烧瓶中。(4)样品烧瓶和萃取烧瓶分别用控温电热套加热和恒温水浴锅加热，使之充分沸 腾；(5)使用冰水混合物对同时蒸馏萃取装置进行冷却。(6)同时蒸馏萃取的时间为60min ；(7)达到蒸馏时间后，停止加热，待装置降至室温，将分离室和萃取烧瓶中乙醚浸 提物收集于带有螺旋盖的离心管中；(8)向上述离心管中加入0.2g左右的无水硫酸钠，置于冰箱中冷冻过夜。所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，其特征在于，同时蒸馏萃取时间 为 60mino所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，所述步骤A3具体执行以下操作 (1)将所述装有乙醚浸提物的离心管置于通风橱中，利用水浴加热至使含有挥发 性脂肪酸的乙醚缓慢挥发，最终总体为0. 5mL，转移至ImL的离心管，密封，保存于的_20°C 冰箱中，待气相分析。所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，所述气象色谱分析参数为在参 数确定阶段所用色谱柱及气相条件为0V-225，50mX0. 32mmX 0. 5 μ m ；载气氮气；燃气氢 气；空气助燃；进样模式不分流；进样口温度240°C;检测器温度240°C;升温程序60°C， 维持5min，以4°C /min升至240°C，维持5min ；进样量1 μ L ；在样品测定阶段，所用色谱柱 及气相条件为DB-FFAP，30mX0. 32mmX 0. 5 μ m ；载气氮气；氢气燃气；空气助燃，进样模 式不分流，进样口温度240°C，检测器温度240°C ；升温程序60°C，维持5min，以4°C /min 升至240°C，维持5min ；采用手动进样，进样体积1 μ L。本发明在现有技术的基础上，结合同时蒸馏萃取和气相色谱技术，并且针对挥发 性脂肪酸的特点在操作步骤上做出适当改进，省去了脂肪酸的提取环节，并将分离的挥发 性脂肪酸直接进行气相色谱分析，没有衍生化，建立一套简单、快捷、经济的脂肪组织中挥 发性脂肪酸的测定方法，为深入研究脂肪组织中挥发性脂肪酸奠定基础。
图1各挥发性脂肪酸酸标准品的色谱峰；1.乙酸，2. 丁酸，3. 3-甲基丁酸，4.戊 酸，5.己酸，6.庚酸，7.辛酸，8. 4-甲基辛酸，9.壬酸，10. 4-甲基壬酸，11. 2-乙基壬酸(内 标)，12.癸酸，13.月桂酸；图2绵羊脂肪组织中挥发性脂肪酸气相色谱图；1. 丁酸，2. 3-甲基丁酸，3.戊酸， 4.己酸，5.庚酸，6.辛酸，7. 4-甲基辛酸，8.壬酸，9. 4-甲基壬酸，10. 2-乙基壬酸(内标)， 11.癸酸；图3同时蒸馏萃取装置；A萃取室，B冷凝管，C分离室，D样品烧瓶，E萃取剂烧瓶， F阀。
具体实施例方式以下结合附图和具体实施例，对本发明进行详细说明。1材料与方法1. 1 材料1. 1. 1 样品供试脂肪样品采自绵羊核心养殖区，选择10只周岁左右绵羊，每只绵羊采取腰部 皮下脂肪组织200g，所有脂肪样品经绞肉机绞碎，充分均质化，铝箔纸包裹，保存于-20°C 冰箱中，备用。1. 1. 2主要仪器配有氢火焰离子检测器(FID)的HP-6890气相色谱仪(美国惠普公司)；HP6890-5973N气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)，美国惠普公司101-2AB型电热鼓风干燥箱，天津市泰斯特仪器有限公司HH-4型数显恒温水浴锅，国花电器有限公司控温电热套，天津市泰斯特仪器有限公司同时蒸馏萃取装置(自制，见图3)JA500A电子天平，上海精天电子仪器有限公司色谱柱0V-225(50mX0. 32mmX0. 5 μ m膜厚)，中科院兰州化学物理研究所色谱 技术研究开发中心；DB-FFAP (30mX0. 32mmX 0. 5 μ m)，美国安捷伦公司。1.1. 3主要试剂乙醚，浓硫酸，氢氧化钠和无水硫酸钠均为分析纯级试剂，购自天津市富宇精细化 工有限公司。2mol/L 的 NaOH 溶液称取 80g NaOH,定容至 1L。4mol/L 的 H2S04 溶液217. 4mL 浓硫酸，稀释至 1L。脂肪酸标准品乙酸，丁酸，3-甲基丁酸，戊酸，己酸，更酸，辛酸，壬酸，癸酸，月桂 酸购自上海晶纯世纪有限公司。4-甲基辛酸、4-甲基壬酸，购自Sigma公司；2-乙基壬酸，购自Narchem Corporation(美国芝加哥)；1. 2 方法1. 2. 1样品用量、蒸馏萃取时间、色谱柱及升温程序的确定分别将50g，IOOg和150g脂肪组织样品进行60min蒸馏萃取，以确定最适脂肪组 织样品的用量。IOOg脂肪组织样品分别进行30min，60min和90min蒸馏萃取，以确定最佳 蒸馏时间。并对同一蒸馏样品用两种不同极性的色谱柱和两种升温程序进行分离比较，以 筛选合适的色谱柱类型及升温程序。1. 2. 2脂肪组织样品的皂化(1)分别按要求称取不同质量脂肪组织样品置于500mL广口瓶中，加入相应量的 2mol/L的NaOH溶液(50g组织样品加入50mL，IOOg组织样品加入lOOmL，150g组织样品加 Λ 150mL)。(2)将脂肪样品与碱性溶液充分混勻，密封广口瓶的瓶口。(3)将广口瓶置于105°C的烘箱中，放置2h，每隔30min摇晃一次。
(4)将广口瓶由烘箱取出，待温度降至室温后，用50mL 4mol/L的H2SO4调节pH值， 直至溶液的呈酸性，备用。1. 2. 3分离挥发性脂肪酸对挥发性脂肪酸的分离，本实验采用乙醚作为萃取剂的同时蒸馏萃取装置(图7)。(1)将上述广口瓶中经酸化过的溶液完全转移至500mL的样品瓶中，加入沸石。(2)向150mL的萃取瓶中加入IOmL乙醚，将两瓶分别与蒸馏萃取装置连接。(3)向萃取室加入蒸馏水，直至有蒸馏水可回流至样品烧瓶，再向萃取室加入乙 醚，直至有乙醚可回流至萃取烧瓶中。(4)样品瓶和萃取瓶分别用控温电热套加热和恒温水浴锅加热，使之充分沸腾。(5)使用冰水混合物对装置进行冷却。(6)同时蒸馏萃取的时间，依照要求而定。(7)达到蒸馏时间后，停止加热，待装置降至室温，将分离室和萃取瓶中乙醚浸提 物收集于带有螺旋盖的离心管中。(8)向上述离心管中加入0. 2g左右的无水硫酸钠，置于冰箱中冷冻过夜。1. 2. 4 浓缩(1)将上述装有乙醚浸提物的离心管置于通风橱中，利用水浴加热至30°C。(2)使含有挥发性脂肪酸的乙醚缓慢挥发，最终总体大致为0. 5mL,转移至ImL的 离心管，密封，保存于的_20°C冰箱中，待气相分析。1. 2. 5挥发性脂肪酸的气相色谱分析在参数确定阶段所用色谱柱及气相条件为0V-225(50mX0.32mmX0.5ym)；载 气氮气；燃气氢气；空气助燃；进样模式不分流；进样口温度240°C ；检测器温度 2400C ；升温程序60°C，维持5min，以4°C /min升至240°C，维持5min ；进样量1 μ L。在样品测定阶段，所用色谱柱及气相条件为DB-FFAP(30mX0.32mmX0.5ym)；载 气氮气；氢气燃气；空气助燃，进样模式不分流，进样口温度240°C，检测器温度240°C。 升温程序60°C，维持5min，以4°C /min升至240°C，维持5min。采用手动进样，进样体积 IyL01. 2. 6挥发性脂肪酸的定性在本实验中，对于挥发性脂肪酸的定性主要根据与各挥发性脂肪酸的标准品 在同一色谱条件下的保留时间相比较对进行定性。当两者在保留时间相差较大时，利 用HP6890-5973N气相色谱-质谱联用仪进行重新定性。质谱运行条件为色谱柱 DB-FFAP (30mX0. 32mmX0. 5ym)；载气氦气；流速36. lcm/s ；总流量 16. 8ml/min ；进样 口温度250°C，进样口压力30. 7kPa ；分流比10 1 ；升温程序60°C，维持lmin，4°C /min, 直至240°C，维持5min ；源温度200°C ；发射电流150μ A ；电子能量200eV ；扫描质量 35-500amu ；溶剂保留时间6min。将各物质碎片与NIST数据库中的化合物相比对，选择匹 配度最大的化合物。1. 2. 7不同蒸馏时间回收率的测定为了评价本方法的回收率，将各挥发性脂肪酸的标准品分别称量50mg与50mg 2-乙基壬酸混合溶解到IOOmL的乙醚溶液中。向四个广口瓶中分别加入IOOmL 2mol/LNa0H 和ImL上述乙醚，然后，依照以上测定挥发性脂肪酸的方法进行分析，除蒸馏时间分别为15，30，45和60min外，其他步骤相同。1. 2. 8挥发性脂肪酸校正系数的测定各挥发性脂肪酸相对于内标物的校正系数的测定方法根据Yang和ChoongQOOl) (YangM H，Choong YM. A rapid gas chromatographic method fpr direct determination of short-chain(C2-C 12)volatile organic acids in foods[J]. Food chemistry，2001， 75 :101-108)所提供的方法。各挥发性脂肪酸包括丁酸、3-甲基丁酸、戊酸、己酸、庚酸、辛 酸、4-甲基辛酸、壬酸、4-甲基壬酸、癸酸和月桂酸分别以三种比例与2-乙基壬酸(内标) 混合于乙醚之中，三种混合比例为2 1，1 1和1 2。按照不同比例的混合物分别ImL 乙醚按照上述脂肪酸分析的程序进行分离，并计算校正系数，其计算公式如下。MCRVFA= (WVFA^PAIS)/(WIS^PAVFA)
MCRVFA =VFA脂肪酸的校正系数PAVFA =VFA峰面积
PAis 内标物峰面积WVFA =VFA 质量
Wis 内标物重量
1. 3数据处理与统计
各挥发性脂肪酸的峰面积利用气象色谱工作站平台自动积分处理所得。脂肪酸泊勺浓度根据以下公式计算
CVFA(mg/kg) = [ (PAvfa) X (Wis)]/^(PAis)X(Ws)] XMCRVFA
Cvfa =VFA的浓度PAVFA =VFA的峰面积
Wis 内标物的重量Pais 内标物的峰面积
Ws 样品重量MCRVFA =VFA的校正系数所有数据用EXCEL初步整理，利用SPSS16. 0软件进行统计分析。2结果与分析2. 1脂肪组织样品用量的选择在对最佳脂肪组织样品的用量进行筛选时，对50g、100g和150g三种个样品用量 进行蒸馏分离，其衡量指标主要有相对溶质峰面积、操作难易程度、色谱峰个数及分布情 况。表5-1不同质量样品的色谱峰总面积
样品用量 Sample weight总峰面^R Total peak area溶质峰总面积 Total Solute peak area相对溶质峰总面积 Relative solute peak area50g7.30X10"4. 64 XIO16. 35100g5. 99X10"4.81X10'8. 04150g7. 06X10"6. 48 X IO49. 18注相对溶质峰总面积=溶质峰总面积/总峰面积*1000在同一蒸馏萃取时间下，随着脂肪组织样品用量的增加，乙醚浸提物中挥发性物 质的总含量也增大，具体体现在相对应的色谱峰的高度和峰面积都在增大。由于本实验的气相色谱仪器的进样方式为手动进样，因此很难确保每次进样量的体积大小完全一致，这 会对单个峰面积产生影响，因此本试验采用相对溶质峰面积对乙醚浸提物中挥发性物质的 总含量进行评估，以避免由于进样量体积的不同导致峰面积出现差异。不同样品用量的相 对溶质峰面积如表5-1所示，150g样品质量的相对溶质峰面积大于IOOg样品，IOOg样品的 相对溶质峰面积大于50g样品。但是，相对溶质峰面积的增幅有很大差异，样品质量由50g 增加到100g，其相对溶质峰的面积增加幅度大于由IOOg到150g的增加幅度，说明在IOOg 样品用量以上乙醚浸提物中挥发性物质含量增幅降低。在色谱峰的个数和分布方面，不同 样品用量基本一致；在操作难易程度方面，150g脂肪组织的样品用量对于本试验装置操作 难度大增，主要体现在易出现过度沸腾，致使试验分析失败。考虑总体因素，因此在以后的 实验中脂肪组织样品用量确定为100g。2. 2同时蒸馏萃取时间的选择在对最佳蒸馏萃取时间筛选方面，对IOOg脂肪样品，分别进行30min、60min和 90min三个梯度的蒸馏萃取时间，其衡量指标主要有相对溶质峰面积、操作难易程度、色谱 峰个数及分布情况。表5-2不同蒸馏萃取时间的色谱峰总面积
蒸馏萃取时间总峰面积溶质峰总面积相对溶质峰总面积相对增加量30m in7. 56X10"4. 99 X IO46.6060m in7. IlXlOe5. 12X10"7.20 .9. 09%90m in6. 32 X IO64. 76 X IO47. 534. 58%相同脂肪组织样品用量分别在三个不同蒸馏萃取时间下存在一定区别，具体表现 为在30min蒸馏萃取时间下，获得挥发性物质种类较少，且多为一些含量大的物质，而在 60min和90min蒸馏萃取时间下，获得挥发性物质种类较为丰富。造成这种现象主要是由 于蒸馏萃取时间过短，一些含量较少的物质没有被完全被蒸馏萃取出所致。随着蒸馏萃取 时间的延长，物质峰的数量开始增加，60min和90min物质峰的数量大于30min的蒸馏萃 取。并且在大小方面随着蒸馏时间的延长，挥发性物质浓度的浓度也随着增加。但60min与 90min之间差别不明显。在相对溶质峰面积方面，随着蒸馏时间的延长，其也在逐渐增大，但 由30min到60min的增加幅度大于由60min到90min的增加幅度。这可能是对IOOg脂肪 组织样品用量，60min的蒸馏萃取时间已经是大多数挥发性物质得到蒸馏萃取，再延长蒸馏 萃取时间只能提高各物质的色谱峰的幅度，而不会出现新的物质峰。另外过长蒸馏萃取时 间会导致萃取效率低下，有时还会产生副产物。所以从以上的数据来看，60min是一个较为合理的蒸馏萃取时间。这既满足了试验 精度上的要求，又保证了实验的效率。2. 3色谱柱选择为了对气相色谱所用的色谱柱进行选择，本试验将弱极性性色谱柱 Carbowax (25mX0. 32mmX0. 5 μ m)和中极性色谱柱0V-225对相同处理样品的分离。
结果表明，Carbowax色谱柱对化合物的分离效果差，而0V-225色谱柱对化合物的 分离效果好，各挥发性物质基本能分离完全，出峰集中，峰形对称，并且大多数物质峰实现 了基线分离。由此可以得到随着色谱柱极性的增强，对挥发性脂肪酸的分离能力也在随之 增强。2. 4升温程序的选择色谱定量的准确性和可靠性主要取决于色谱峰的有效分离，而化合物组分分离的 程度与色谱柱的温度有密切关系。因为本实验所测得挥发性脂肪酸为多种酸的混合物，具 有较宽的沸点范围，因此本实验比较了不同升温程序对分离效果的影响。结果表明在所考察的温度范围内，采用4°C /min的升温程序，蒸馏所得到的挥发 性脂肪酸可实现较好分离；而采用10°c /min的升温程序，由于升温速度较快，挥发性脂肪 酸无法完全分离。因此在以后实验中采用4°C /min的升温速率。2. 5挥发性脂肪酸回收率的测定Ha和Lindsay (1990)研究指出对于挥发性脂肪酸的测定利用同时蒸馏萃取技术 将其与含量丰富的非挥发性脂肪酸进行分离是必要的步骤，否则，溶剂溶解能力和色谱柱 的过载问题会使试验分析失败。在蒸馏萃取过程中，最适的蒸馏萃取时间对于提高分析工 作效率是非常重要的，因此，本实验对15min，30min，45min和60min分钟的蒸馏时间的回收 率进行了评估。表3数据表明，在操作过程中挥发能力较强脂肪酸的损失量大于挥发能力 较弱的脂肪酸，因此，挥发能力弱的脂肪酸的回收率大于挥发能力强的脂肪酸。随着蒸馏时 间的延长，各脂肪酸的回收率都有所增加，但挥发性较弱脂肪酸增加的幅度大于挥发性较 强脂肪酸。数据结果表明，蒸馏时间60min时，对于大部分挥发性脂肪酸的回收率大于其他 蒸馏时间。表3不同蒸馏萃取时间的挥发性脂肪酸的回收率
9挥发性脂肪酸 Volatile fatty acids
蒸馏萃取时间 Distillation and extraction time
15 min30 min45min60 min
■ym
Butanoic acid 3-甲基厂酸
3-Methylbutanoicacid
戊酸
Pentanoic acid
己酸
Hexanoic acid
庚酸
Heptanoic acid
辛酸
Octanoic acid
4-甲基辛酸 4-Methyloctanoic acid
壬酸
Nonanoic acid 4-甲基壬酸 4-Methylnonanoic acid 2-乙基壬酸 2-Ethylnonanoic acid 癸酸
Decanoic acid
3.5235.6517.5564.213
8.15011.74112.75211.247
6.8959.90010.74412.010
10.77915.8817.79521.130
12.83421.97224.72231.294
14.22526.60531.71944.873
16.17325.15035.43239.003
16.46936.35240.58158.957
18.51633.43747.13757.013
19.43935.18860.12477.873
16.95227.65342.29063.742
10
权利要求
1.一种脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，其特征在于，包括以下步骤:A1 脂肪组织 样品的皂化；A2 分离挥发性脂肪酸，使用同时蒸馏萃取装置从步骤Al得到的皂化产物中 分离挥发性脂肪酸；A3 浓缩；A4 气相色谱分析。
2.根据权利要求1所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，其特征在于，所述 步骤Al具体执行以下操作(1)称取脂肪组织样品置于广口瓶中，加入相应量的2mol/L的NaOH溶液，即每Ig脂肪 组织相应加入Iml所述浓度的NaOH溶液。(2)将脂肪组织样品与碱性溶液充分混勻，密封所述广口瓶的瓶口；(3)将广口瓶置于105°C的烘箱中，放置2h，每隔30min摇晃一次；(4)将广口瓶由烘箱取出，待温度降至室温后，用4mol/L的H2SO4调节pH值，直至溶液 的呈酸性，备用。
3.根据权利要求2所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，其特征在于，所述 步骤A2具体执行以下操作(1)将所述广口瓶中经酸化过的溶液完全转移至样品烧瓶中，加入沸石；(2)向150mL的萃取烧瓶中加入IOmL乙醚，将两瓶分别与同时蒸馏萃取装置连接；(3)向萃取室加入蒸馏水，直至有蒸馏水可回流至样品烧瓶，再向萃取室加入乙醚，直 至有乙醚可回流至萃取烧瓶中。(4)样品烧瓶和萃取烧瓶分别用控温电热套加热和恒温水浴锅加热，使之充分沸腾；(5)使用冰水混合物对同时蒸馏萃取装置进行冷却。(6)同时蒸馏萃取的时间为30-90min；(7)达到蒸馏时间后，停止加热，待装置降至室温，将分离室和萃取烧瓶中乙醚浸提物 收集于带有螺旋盖的离心管中；(8)向上述离心管中加入0.2g左右的无水硫酸钠，置于冰箱中冷冻过夜。
4.根据权利要求3所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，其特征在于，同时 蒸馏萃取时间为60min。
5.根据权利要求3所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，其特征在于，所述 步骤A3具体执行以下操作(1)将所述装有乙醚浸提物的离心管置于通风橱中，利用水浴 加热至30°C ； (2)使含有挥发性脂肪酸的乙醚缓慢挥发，最终总体为0. 5mL，转移至ImL的 离心管，密封，保存于的_20°C冰箱中，待气相分析。
6.根据权利要求5所述的脂肪脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，其特征在 于，所述气象色谱分析参数为在参数确定阶段所用色谱柱及气相条件为0V-225， 50mX0. 32mmX0.5ym;载气氮气；燃气氢气；空气助燃；进样模式不分流；进样口 温度240°C ；检测器温度240 °C升温程序60 V，维持5min，以4 V /min升至240 V， 维持5min;进样量lyL;在样品测定阶段，所用色谱柱及气相条件为DB-FFAP， 30mX0. 32mmX0. 5μπι ；载气氮气；氧气燃气；空气助燃，进样模式不分流，进样口温度 240°C，检测器温度240°C ；升温程序60°C，维持5min，以4°C /min升至240°C，维持5min ； 采用手动进样，进样体积1 μ L。
全文摘要
本发明公开了一种脂肪组织中挥发性脂肪酸测定方法，包括以下步骤A1脂肪组织样品的皂化；A2分离挥发性脂肪酸，使用同时蒸馏萃取装置从步骤A1得到的皂化产物中分离挥发性脂肪酸；A3浓缩；A4气相色谱分析。本发明在现有技术的基础上，结合同时蒸馏萃取和气相色谱技术，并且针对挥发性脂肪酸的特点在操作步骤上做出适当改进，省去了脂肪酸的提取环节，并将分离的挥发性脂肪酸直接进行气相色谱分析，没有衍生化，建立一套简单、快捷、经济的脂肪组织中挥发性脂肪酸的测定方法，为深入研究脂肪组织中挥发性脂肪酸奠定基础。
文档编号G01N1/34GK102062760SQ20101055450
公开日2011年5月18日 申请日期2010年11月23日 优先权日2010年11月23日
发明者杨朝霞, 陈玉林, 韩卫杰 申请人:西北农林科技大学