专利名称：用于生物大分子标记的带色生物素及其在制备生物大分子标记试剂中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物素指示剂，尤其是一种用于生物大分子标记的带色生物素及其在制备生物大分子标记试剂中的应用，本指示剂可用于微量抗原、抗体定性、酶免疫测定、荧光免疫测定、定量检测及定位观察研究的新技术，如进行肿瘤显像诊断和靶向治疗等。
背景技术：
生物素是动、植物体内广泛分布的一种小分子生长因子，生物素_亲和素系统 (Biotin-Avidin System,BAS)是迄今为止最强的非共价结合系统，在生物医学技术中得到了广泛的应用，几乎可与目前研究成功的各种标记物体系结合。该系统既可用于偶联抗体等一系列大分子活性物质，又可用于酶等多种材料的标记，具有高灵敏度、高特异性、高稳定性的特点。生物素_亲合素与标记试剂高亲合力的牢固结合及多级放大效应，使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。它已成为目前广泛用于活性蛋白质提取、抗原抗体定性、 酶联免疫测定、荧光免疫测定、定量检测及定位观察研究的新技术，如进行肿瘤显像诊断和靶向治疗，但由于生物素分子本身无特征吸收峰因此不利于示踪检测和观察。传统的对羟苯基偶氮苯甲酸(4 ‘ -hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid, HABA)方法是先将HABA与亲和素混合，HABA与亲和素形成一个弱结合，结合后的络合物在 500nm处有一最大吸收峰，然后将需要定量的生物素标记物加入到HABA与亲和素的混合液中，生物素与HABA同亲和素竞争结合，HABA被生物素所取代从而降低了 500nm处的吸光度。 因为生物素与HABA的竞争效应对吸光度的影响差异比较小，因此该方法灵敏度很低，测定准确度不够而且会消耗底物。HABA法目前只适合用于浓度较大的蛋白质分子，现有报道的SureLINK生物素法突破了传统的HABA方法的限制，可在354nm波长下检测吸收度，但仍需紫外分光光度计辅助而且灵敏度相对较低。目前国际上尚无可通过肉眼进行示踪分析大分子标记过程的指示剂。国内使用的大多是进口同类产品，但进口产品只能在紫外下测定标记过程，而且价格昂贵。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种效率高、灵敏度及重现性好的用于生物大分子标记的带色生物素及其在制备生物大分子标记试剂中的应用。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种用于生物大分子标记的带色生物素，结构式如下
权利要求
1 一种用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于结构式如下
2.根据权利要求1所述的用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于所述A为
3.根据权利要求1所述的用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于所述Y为
4.根据权利要求1所述的用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于所述B包其中R为卤素、烷烃、NO2, SO3H, CN, CHO或COOHc
5.根据权利要求4所述的用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于所述B包括R为CH3。
6.根据权利要求4所述的用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于所述B包括R为Br或Cl。
7.根据权利要求4所述的用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于所述B为
8.根据权利要求1所述的用于生物大分子标记的带色生物素，其特征在于所述带色生物素的结构式为
9.权利要求1至8任一所述的用于生物大分子标记的带色生物素在制备生物大分子标记试剂中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种用于生物大分子标记的带色生物素及其制备方法，本指示剂可用于微量抗原、抗体定性、酶免疫测定、荧光免疫测定、定量检测及定位观察研究的新技术，如进行肿瘤显像诊断和靶向治疗等。本带色生物素在同大分子活性物质偶联后，偶联物在生理条件下不显色，因而不会对在正常条件下生物素与亲和素的应用有干扰。当调节pH到一定数值后可显紫红色，其吸光度与生物素的含量有关，因而可从其吸光度计算出每分子活性物质所含生物素的摩尔数。本带色生物素偶联物在与亲和素特异结合后也有类似功能，因此实现了在肉眼下进行示踪分析过程，大大提高了效率、灵敏度和重现性，填补了国际技术空白。
文档编号G01N21/80GK102219791SQ20111008765
公开日2011年10月19日 申请日期2011年4月8日 优先权日2011年4月8日
发明者何华瑞 申请人:天津希恩思生化科技有限公司