用于检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的试剂的制作方法
【专利摘要】用于检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的试剂，所述检测试剂由试剂A和试剂B两个试剂组成，其特征在于，所述试剂A包括以下浓度的组分：PH=4.0~8.0的缓冲液50~200mmol/L；稳定剂0.5~10g/L；防腐剂0.5~2g/L；所述试剂B包括以下浓度的组分：PH=7.0~8.0的缓冲液50~200mmol/L；底物8~12g/L；稳定剂0.5~10g/L；防腐剂0.5~2g/L。本发明的检测试剂的稳定性好，各项检测指标符合标准，灵敏度高，使用方便。
【专利说明】用于检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的试剂
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种用于检测N-乙酰_β -D-氨基葡萄糖苷酶的试剂。
【背景技术】
[0002] Ν-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG)是细胞内溶酶体水解酶之一，分子量约为 140000。血液中的NAG不能通过肾小球滤膜，因此NAG在肾单位中含量较高，尤其是在近曲 小管上皮细胞中。研究表明，NAG在糖尿病、高血压肾小管早期损伤、药物肾毒性以及感染、 休克、肾移植排异反应等造成的急性肾小管损害中具有重要的检测价值，也是环境肾毒性 物质对人群影响的排查手段之一。
[0003] 目前，NAG测定是应用率最高的尿液酶学诊断项目，其对肾小管损伤的反应很灵 敏，此外，用尿液作为标本，是一种无创伤检查，适合于日常检验和连续动态分析，也便于人 群筛查的应用。NAG在临床应用中的测定方法主要包括放免分析法、荧光分析法和紫外-可 见分光光度法等，其中，分光光度法以合成色原底物为方法学主流。在NAG的作用下，底物 发生分解，通过测定底物的分解产物在特定波长下的吸光度来判断NAG的活性。但目前的 底物普遍存在着稳定性欠佳、灵敏度低等缺点。
【发明内容】
[0004] 针对现有技术中的不足，本发明提供了一种底物稳定、灵敏度高、方便检测的试 剂。
[0005] 本发明通过以下技术方案实现。
[0006] 用于检测N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的试剂，所述检测试剂由试剂A和试剂 B两个试剂组成，其特征在于，
[0007] 所述试剂A包括以下浓度的组分：
[0008] PH = 4. 0?8. 0的缓冲液50?200臟〇1凡
[0009] 稳定剂 0· 5 ?l〇g/L
[0010] 防腐剂 〇· 5 ?2g/L ;
[0011] 所述试剂B包括以下浓度的组分：
[0012] 刚,_'_麵.. .5.謂_腦乩 底物 稳詹 _ 0.5-l〇i/L
[0013] 所述底物具有以下的结构通式：
[0014] /1
【权利要求】
1. 用于检测N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的试剂，所述检测试剂由试剂A和试剂B 两个试剂组成，其特征在于， 所述试剂A包括以下浓度的组分： PH = 4. 0 ?8. 0 的缓冲液 50 ?200mmol/L 稳定剂 0. 5?10g/L 防腐剂 0. 5?2g/L ; 所述试剂B包括以下浓度的组分： PH=7.0?8.0 的缓冲液 50-200 ramol/L 底物 8~12 g/L 稳走剂 0.5-10 g/L 防腐剂 0.5?2g/L; 所述底物具有以下的结构通式中的一种：
2. 根据权利要求1所述的用于检测N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的试剂，其特征在 于，所述试剂Α与试剂Β混合后，混合液中的组分具有以下浓度： PH=4.0~7.0 的缓冲液 50-200 mmol/L 防)+縛剂 1 ~2 g/L 稳定剂 1?10 g/L 底物 2?3 g/L
3. 根据权利要求2所述的用于检测N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的试剂，其特征在 于，所述缓冲液选自PBS缓冲液、TRIS缓冲液、PIPES缓冲液、GOOD' S缓冲液、CAPS缓冲液、 HEPES缓冲液中的一种。
4. 根据权利要求3所述的用于检测N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的试剂，其特征在 于，所述稳定剂选自EDTA、EDTA-2Na、乙二醇、亚氨基二乙酸中的一种。
5. 根据权利要求4所述的用于检测N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶的试剂，其特征在 于，所述防腐剂选自NaN3、对羟基苯甲酸甲酯、4-氯-3, 5-二甲基苯酚中的一种。
【文档编号】G01N1/38GK104297180SQ201410529302
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月10日 优先权日:2014年10月10日
【发明者】许国和, 胡露群, 范翠翠 申请人:宁波普瑞柏生物技术有限公司